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1、高中生物选修一生物技术实践高中生物选修一生物技术实践 知识点总结知识点总结一、果酒和果醋的制作一、果酒和果醋的制作1、发酵：通过微生物技术的培养来生产大量代谢产物的过程。2、有氧发酵：醋酸发酵醋酸发酵无氧发酵：酒精发酵酒精发酵 乳酸发酵乳酸发酵3、酵母菌是兼性厌氧菌型兼性厌氧菌型微生物真菌真菌 酵母菌的生殖方式：出芽生殖出芽生殖( (主要主要) ) 分裂生殖 孢子生殖4、在有氧有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖。有氧呼吸，大量繁殖。C C6 6H H1212O O6 66H6H2 2O O 6O 6O2 26CO6CO2 212H12H2 2O O5、在无氧无氧条件下，酵母菌能进行酒精发
2、酵。酒精发酵。C C6 6H H1212O O6 62C2C2 2H H5 5OHOH2CO2CO2 26、最适宜酵母菌繁殖是2020左右左右，酒精发酵时一般将温度控制在1818-25-257、在葡萄酒自然发酵的过程中,起主要作用的是附着在葡萄皮表面的野生型酵母菌附着在葡萄皮表面的野生型酵母菌.在发酵过程中,随着酒精浓度的提高,红葡萄皮的色素红葡萄皮的色素也进入发酵液,使葡萄酒呈现深红色.在缺氧、呈酸性缺氧、呈酸性的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到制约。8、醋酸菌是单细胞细菌单细胞细菌( (原核生物原核生物) ),代谢类型是异养需氧型异养需氧型,生殖
3、方式为二分裂9、当氧气、糖源氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸糖分解成醋酸；当缺少糖源糖源时，醋酸菌将乙醇乙醇变为乙醛乙醛，再将乙醛乙醛变为醋酸。醋酸。 C2H5OHO2CH3COOHH2O10、控制发酵条件的作用醋酸菌对氧气的含量特别敏感氧气的含量特别敏感，当进行深层发酵时，即使只是短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌死亡。醋酸菌最适生长温度为 30303535，控制好发酵温度，使发酵时间缩短，又减少杂菌污染的机会。11、实验流程：挑选葡萄冲洗榨汁酒精发酵果酒（醋酸发酵果醋）12、酒精检验：果汁发酵后是否有酒精产生，可以用重铬酸钾重铬酸钾来检验。在酸性酸性条件下，重铬酸钾与酒精
4、反应呈现灰绿色灰绿色。13、充气口是在醋酸发酵时连接充气泵进行充气用的；排气口是在酒精发酵时用来排出二氧化碳的；出料口是用来取样的。排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连接，其目的是防止空气中微生物的污染。目的是防止空气中微生物的污染。开口向下的目的是有利于二氧化碳的排出。使用该装置制酒时，应该关闭充气口制酒时，应该关闭充气口；制醋时，应该充气口连接气制醋时，应该充气口连接气泵，输入氧气。泵，输入氧气。二、腐乳的制作二、腐乳的制作1、多种微生物参与了豆腐的发酵，如青霉、酵母、曲霉、毛霉青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉毛霉。毛霉是一种丝状真菌丝状真菌。代谢类型是异养需氧型异养需
5、氧型。生殖方式是孢子生殖。营腐生生活。2、原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶脂肪酶可将脂肪水脂肪水 甘油和脂肪酸甘油和脂肪酸。3、实验流程：让豆腐上长出毛霉加盐腌制加卤汤装瓶密封腌制4、酿造腐乳的主要生产工序是将豆腐进行前期发酵前期发酵和后期发酵。后期发酵。前期发酵的主要作用：1.创造条件让毛霉生长。2.使毛酶形成菌膜菌膜包住豆腐使腐乳成型使腐乳成型。后期发酵主要是酶与微生物协同参与生化反应的过程通过各辅料与酶的缓解作用，生成腐乳香酶与微生物协同参与生化反应的过程通过各辅料与酶的缓解作用，生成腐乳香气气。5、所用
6、豆腐的含水量为7070左右，水分过多则腐乳不易成形水分过多则腐乳不易成形。6、毛霉的生长：条件：将豆腐块平放在笼屉内，将笼屉中的控制在15151818，并保持一定的温度。来源：1.来自空气中的毛霉孢子毛霉孢子，2. 直接接种优良毛霉菌种优良毛霉菌种7、加盐腌制：将长满毛霉的豆腐块分层整齐地摆放在瓶中，同时 逐层加盐逐层加盐，随着层数的加高而增加盐量，接近瓶口表面的盐要铺厚一些盐要铺厚一些，因为越接近瓶口，被杂菌污染的机会就越大。因为越接近瓶口，被杂菌污染的机会就越大。 加盐腌制的时间约为 8 天左右。8、用盐腌制时，注意控制盐的用量：盐的浓度过低，不足以抑制微生物的生长，可能导致豆腐腐盐的浓度
7、过低，不足以抑制微生物的生长，可能导致豆腐腐败变质；盐的浓度过高会影响腐乳的口味败变质；盐的浓度过高会影响腐乳的口味9、食盐的作用：1.抑制微生物的生长微生物的生长，避免腐败变质 2.析出水分，是豆腐变硬，析出水分，是豆腐变硬，在后期制作过程中不易酥烂 3.调味作用调味作用，给腐乳以必要的咸味4.浸提毛酶菌丝上的蛋白酶浸提毛酶菌丝上的蛋白酶。10、配制卤汤：卤汤直接关系到腐乳的色、香、味。卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的。卤汤中酒的含量一般控制在酒的含量一般控制在 12%12%左右。左右。11、酒的作用：1.防止杂菌污染以防腐 2.与有机酸结合形成酯酯，赋予腐乳风味 3.酒精含量的高低与腐乳后
8、期发酵时间的长短有很大关系，酒精含量越高，对蛋白酶的抑制作用也越大，使腐乳酒精含量越高，对蛋白酶的抑制作用也越大，使腐乳成熟期延长；酒精含量过低，蛋白酶的活性高，加快蛋白质的水解，杂菌繁殖快，豆腐易腐成熟期延长；酒精含量过低，蛋白酶的活性高，加快蛋白质的水解，杂菌繁殖快，豆腐易腐败，难以成块。败，难以成块。12、香辛料的作用：1.调味作用 2.杀菌防腐作用 3.参与并促进发酵过程三、泡菜的制作三、泡菜的制作1、制作泡菜所用微生物是 乳酸菌乳酸菌 ，其代谢类型是酸 。分裂方式是二分裂。反应式为：反应式为：C C6 6H H1212O O6 6 酶异养厌氧型异养厌氧型。在无氧条件下，降糖分解为乳2
9、C2C3 3H H6 6O O3 3+ +能量能量含抗生素牛奶不能生产酸奶的原因是抗生素杀死乳酸菌抗生素杀死乳酸菌。常见的乳酸菌有乳酸链球菌和乳酸杆菌。乳酸杆菌常用于生产酸奶。2、亚硝酸盐为白色粉末，易溶于水，在食品生产中用作食品添加剂。3、一般在腌制 10 天后亚硝酸盐含量开始降低，故在10 天之后食用最好4、测定亚硝酸盐含量的原理是在盐酸酸化盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与 N-1-N-1-萘基乙二胺盐酸盐萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料玫瑰红色染料，与已知浓度的标准显色液目测比较，估算泡菜中亚硝酸盐含量。四、微生物的实验室培养四、
10、微生物的实验室培养1、培养基：人们按照微生物对营养物质营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，营养基质，是进行微生物培养的物质基础。2、培养基按照物理物理性质可分为液体培养基液体培养基、半固体培养基半固体培养基和固体培养基固体培养基。在液体培养基中加入凝固剂琼脂琼脂后，制成琼脂固体培养基。微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。液体培养基应用于工业或生活生产，固体培养基应用于 微生物的分离和鉴定微生物的分离和鉴定，半固体培养基则常用于观察微生物的运动及菌种保藏等。3、按照成分成分培养基可分为合成培养基合成培养基和天然培养基天然培养基。4、按照培养基的用途培养基的用途，可将
11、培养基分为选择培养基选择培养基和鉴别培养基鉴别培养基。选择培养基是指在培养基中加入某种化学物质，以抑制抑制不需要的微生物生长，促进所需要的微生物的生长。鉴别培养基是根据微生物的特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品指示剂或化学药品配制而成的，用以鉴别不同类别的微生物。5、培养基的化学成分包括 水水 、 无机盐无机盐 、 碳源碳源 、 氮源氮源 、生长因子等。、生长因子等。碳源：能为微生物的代谢提供碳元素的物质。如 CO2、NaHCO3等无机碳源；糖类、石油、花生粉饼等有机碳源。异养微生物只能利用有机碳源。单质碳不能作为碳源。氮源：能为微生物的代谢提供氮元素的物质。如 N 、NHNO-+23、
12、3、NH4（无机氮源）蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有机氮源）等。只有固氮微生物才能利用N2。培养基还要满足微生物生长对 PH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素维生素，培养霉菌霉菌时须将培养基的 pHpH 调至酸性调至酸性，培养细菌细菌是需要将 pHpH 调至中调至中性或微碱性或微碱性，培养厌氧型微生物是则需要提供无氧的条件6、无菌技术：获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，要注意以下几个方面：对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒清洁和消毒。将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基
13、等器具进行灭菌灭菌。为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰酒精灯火焰附近进行。实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。7、消毒与灭菌的区别消毒指使用较为温和的物理或化学方法较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分表面或内部一部分对人体有害的微生物（不不包括芽孢和孢子包括芽孢和孢子）。消毒方法常用煮沸消毒法，巴氏消毒法（对于一些不耐高温的液体）还有化学药剂（如酒精、氯气、石炭酸等）消毒、紫外线消毒。灭菌则是指使用强烈的理化因素强烈的理化因素杀死物体内外所有所有的微生物，包括芽孢和孢子包括芽孢和孢子。灭菌方法有灼灼烧灭菌烧灭菌、干热灭菌干热灭菌、高压蒸汽灭
14、菌高压蒸汽灭菌。灭菌方法：接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法；玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法，所用器械是干热灭菌箱 ；培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法，所用器械是高压蒸汽灭菌锅 。表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法，所用器械是紫外灯 。8、培养基分装前要调节调节 PHPH，培养基灭菌后，需要冷却到 5050左右时（用手触摸刚刚不烫手时）左右时（用手触摸刚刚不烫手时），才能用来倒平板。9、平板冷凝后，要将平板倒置倒置，目的是可以使培养基表面的水分更好地挥发水分更好地挥发，又可以防止防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染水珠落入培养基，造成污染。10、微生物接种的方法最常用的是平板划线法
15、和稀释涂布平板法平板划线法和稀释涂布平板法。用平板划线法和稀释涂布平板法接种的目的是：使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落，以便于纯化菌种。11、灼烧接种环的目的是：操作的第一一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培避免接种环上可能存在的微生物污染培养物养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种 ，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端。划线结束后灼烧接种环， 能及时杀死接种能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。环上残留的菌种，避免细菌污染环境和
16、感染操作者。12、在灼烧接种环之后，要等其冷却冷却后再进行划线，以免接种环温度太高，杀死菌种。以免接种环温度太高，杀死菌种。13、菌种的保存对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏临时保藏的方法。将菌种接种到试管的固体斜面培固体斜面培养基养基上，在合适的温度下培养。当菌落长成后，将试管放入 4 4的冰箱中保藏。以后每 36 个月，都要重新将菌种从旧的培养基上转移到新鲜的培养基上。缺点：这种方法保存的时间不。缺点：这种方法保存的时间不长，菌种容易被污染或产生变异。长，菌种容易被污染或产生变异。对于需要长期保存的长期保存的菌种，可以采用甘油管藏甘油管藏的方法。放在2020的冷冻箱中保存。14、确定培养
17、基制作是否合格的方法将未接种的培养基未接种的培养基在恒温箱中保温 12 天，无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。五、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数五、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1、实验室中微生物的筛选应用的原理人为提供有利于目的菌株生长的条件有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH），同时抑制或阻止其他微生物生长。2、选择培养基在微生物学中，将 允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基基，称作选择培养基。4、统计菌落数目（1）测定微生物数量的常用方法有稀释涂布平板法稀释涂
18、布平板法和显微镜直接计数显微镜直接计数。（2）稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理一般设置 3 35 5 个平板，选择菌落数在 3030300300 的平板进行计数，并取平均值平均值。统计的菌落数往往比活菌的实际数目低低，因此，统计结果一般用菌落数菌落数而不是活菌数来表示。5、从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数统计某一稀释度下平板上的菌落数，最好能统计3 个平板，计算出平板菌落数的平均值每克样品中的菌落数每克样品中的菌落数= =（C/VC/V）*M*M 其中，C C 代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V V 代表代表涂布平板时所用的稀释液
19、的体积（涂布平板时所用的稀释液的体积（mlml），），M M 代表稀释倍数代表稀释倍数六、分解纤维素的微生物的分离六、分解纤维素的微生物的分离1、纤维素酶是一种复合酶复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即 C C1 1酶、酶、C CX X酶和葡萄糖苷酶，酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖纤维素分解成纤维二糖 ，第三种酶将纤 维二糖分解成葡萄糖维二糖分解成葡萄糖 。纤维素最终被水解成葡萄糖，为微生物的生长提供营养。2、纤维素分解菌的筛选（1）筛选方法：刚果红染色法刚果红染色法。能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选。（2）刚果红染色法筛选纤维素分解菌的原理刚果红是一种染料，它可以与像纤
20、维素这样的多糖物质形成红色复合物与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈透明圈。这样就可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。3、分离分解纤维素的微生物的实验流程土壤取样选择培养（此步是否需要，应根据样品中目的菌株数量的多少来确定）梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上挑选产生透明圈的菌落（1）土壤采集选择富含纤维素的环境，纤维素分解菌的含量相对提高。选择富含纤维素的环境，纤维素分解菌的含量相对提高。（2）刚果红染色法分离纤维素分解菌的步骤倒平板操作、制备菌悬液、涂布平板（3）刚果红染色法种类一种
21、是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，另一种是在倒平板时就加入刚果红。4、纤维素酶的测定方法，一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测葡萄糖进行定量的测定定。七、菊花的组织培养七、菊花的组织培养1、细胞分化：在生物个体发育过程中，细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程。细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程。离体的植物组织或细胞离体的植物组织或细胞，在培养了一段时间以后，会通过细胞分裂细胞分裂，形成愈伤组织愈伤组织，愈伤组织的细胞排列疏松而无规则排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞 。由高
22、度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的 脱分化，或者叫做去分化脱分化，或者叫做去分化。脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做 再分化再分化。再分化形成的试管苗，移栽到地里，可以发育成完整的植物体。2、植物细胞全能性：具有某种生物全套遗传信息某种生物全套遗传信息的任何一个活细胞，都具有发育成完整个体的能力，即每个生物细胞都具有全能性。但在生物体的生长发育过程中并不表现出来，这是因为在特定的时间和空间条件下，通过基因的选择性表达基因的选择性表达，构成不同组织和器官。3、植物组织培养技术的应用有：实现优良品种的快速繁殖；培育脱毒作物；制作人工种
23、子；培育作物新品种以及细胞产物的工厂化生产等。4、影响植物组织培养的条件材料：菊花组织培养一般选择未开花植物的茎上部新萌生的侧枝作材料。未开花植物的茎上部新萌生的侧枝作材料。 选取生长旺盛嫩枝进行组培的是嫩枝生理状态好，容易诱导脱分化和再分化。4、营养：离体的植物组织和细胞，对营养、环境等条件的要求相对特殊，需要配制适宜的培养基。常用的培养基是 MSMS 培养基，培养基，其中含有的大量元素是 N、P、S、K、Ca、Mg，微量元素是Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、I、Co，有机物有甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等。5、激素：植物激素中生长素生长素和细胞分裂素细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和
24、再分化的关键性激素。在 生生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强趋势。长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强趋势。 在培养基中需要添加生长素和细胞分裂素等植物激素，其浓度、使用的先后顺序、用量的比例等都影响结果。使用顺序实验结果生长素 细胞分裂素比值与结果先生长素，后细胞分裂素有利于分裂但不分化比值高时促根分化，抑芽形成先细胞分裂素，后生长素细胞既分裂也分化比值低时促芽分化，抑根形成同时使用分化频率提高比值适中促进愈伤组织生长6、环境条件：PH、温度、光等环境条件。 进行菊花的组织培养，一般将 pH 控制在 5.8 左右，温度控制在 18221822，并且每日用日光灯照射12h.12
25、h.7、外植体的消毒 外植体：用于离体培养的植物器官或组织片段。流水+少许洗衣粉+体积分数为 70%的酒精+0.1%的氯化汞溶液8、对外植体进行表面消毒时，就要考虑药剂的消毒效果消毒效果，又要考虑植物的耐受能力。耐受能力。9、接种过程中插入外植体时形态学上端朝上形态学上端朝上，每个锥形瓶接种7 78 8 个外植体个外植体，要求无菌操作。10、移栽：栽前应先打开培养瓶的封口膜，让其在培养间生长几日，然后用流水清洗根部培养基。然后将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中生活一段时间，进行壮苗。最后进行露天栽培。八、月季的花药培养八、月季的花药培养1、花药的结构：花药为囊状结构，内部含有许多花粉花粉
26、。花粉是由花粉母细胞花粉母细胞经过减数分裂减数分裂而形成的，因此，花粉是单倍体的生殖细胞。单倍体的生殖细胞。被子植物花粉的发育要经历小孢子四分体时期、单核期小孢子四分体时期、单核期和双核期和双核期等阶段。进入单核期时，形成 4 个具有单细胞核的花粉粒。这时的细胞含浓厚的原生质，核位于细胞的中央（单核居中期）。随着细胞不断长大，细胞核由中央移向细胞一侧（单核靠边期），并分裂成 1 1 个生殖细胞核个生殖细胞核和 1 1 个花粉管细胞核个花粉管细胞核，进而形成两个细胞，一个是生殖生殖细胞，一个是营养细胞细胞，一个是营养细胞。生殖细胞将在分裂一次，形成两个精子。2、产生花粉植株的两种途径通过花药培养
27、产生花粉植株（即单倍体植株）一般有两种途径，一种是花粉通过胚状体阶段发育为植物花粉通过胚状体阶段发育为植物，另一种是花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织，再将其诱另一种是花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织，再将其诱导分化成植株导分化成植株。这两种途径之间并没有绝对的界限，主要取决于 培养基中激素的种类及其浓度培养基中激素的种类及其浓度配比。配比。注意：无论哪种产生方式，都要先诱导生芽先诱导生芽，再诱导生根生根3、影响花药培养的因素亲本的生理状况：花粉早期是的花药比后期的更容易产生花粉植株，选择月季的初花期月季的初花期。合适的花粉发育时期：一般来说，在单核期在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花
28、药培养成功率最高花蕾：选择完全未开放的花蕾，花瓣松动会给消毒带来困难。完全未开放的花蕾，花瓣松动会给消毒带来困难。4、材料的选取：选择花药时，一般要通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。确定花粉发育时期的最常用的方法是醋酸洋红法醋酸洋红法。但是，某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用 焙焙花青花青- -铬矾法铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色蓝黑色5、接种和培养：在剥离花药时，要尽量不损伤花药（否则接种后容易从受伤部位长生愈伤组否则接种后容易从受伤部位长生愈伤组织织），同时还要彻底去除花丝彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成，与花丝相连的花药不利于愈伤组织
29、或胚状体的形成， 通常每瓶接种花药 710 个,培养温度控制在 2525左右,不需要光照不需要光照.幼小植株形成后才需要光照幼小植株形成后才需要光照. .一般经过 2030 天培养后,会发现花药开裂,长出愈伤组织或形成胚状体。将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便进一步分化出再生植株。如果花药开裂释放出胚状体，则一个花药内就会产生大量幼小植株，必须在花药开裂后尽快将幼小植株分开，分别移植到新的培养基上，否则这些植株将很难分开。还需要对培养出来的植株做进一步的鉴定和筛选。九、探讨加酶洗衣粉的洗剂效果九、探讨加酶洗衣粉的洗剂效果一、实验原理1加酶洗衣粉是指含有酶制剂酶制剂的洗衣粉，目前常用的酶制剂
30、有四类：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶，纤维素酶，其中，应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。2碱性蛋白酶能将血渍、奶渍等含有的大分子蛋白质大分子蛋白质水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽氨基酸或小分子的肽。脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶也能分别将大分子的脂肪、淀粉和纤维素水解为小分子物质。二、注意事项1变量的分析和控制影响加酶洗衣粉洗涤效果的因素有水温、水量、水质、洗衣粉的用量，衣物的质料、大小及浸水温、水量、水质、洗衣粉的用量，衣物的质料、大小及浸泡时间和洗涤的时间泡时间和洗涤的时间等。在这些因素中，水温是我们要研究的对象，而其他因素应在
31、实验中保持不变。选择什么样的水温进行实验需要实验者根据当地一年中的实际气温变化来确定水温，通常情况下，冬季、春季、秋季和夏季可分别选取 5 、15 、25 和 35 的水温，因为这 4 个水温是比较符合实际情况的，对现实也有指导意义。2洗涤方式和材料的选择。在洗涤方式中有机洗和手洗两种方式，应考虑其中哪一种比较科学？哪一种更有利于控制变量？再有，洗衣机又可以分为半自动和全自动两种，相比之下，采用全自动洗衣机比较好，并且应该尽量使用同一型号小容量的洗衣机，其机械搅拌作用相同。关于洗涤材料的选择也有一些讲究。用衣物作实验材料并不理想，这是因为作为实验材料的衣物，其大小、颜色、洁净程度等应该完全一致
32、，而这并不容易做到；此外，人为地在衣物上增加污物，如血渍、油渍等，也令人难以接受。因此，选用布料作为实验材料比较可行。在作对照实验时，可以控制布料的大小、颜色以及污物的量，使其相同；同时，也便于洗涤效果的比较。3水量、水质和洗衣粉用量的问题。水的用量和布料的大小是成正比的。做实验用的布料不易过大，水量不易过多，但应该让布料充分浸泡在水中。水量和洗衣粉的用量可以参考下表。实验时可根据表中的数据换算出实际用量。如果在实验中使用手洗的方法，如课本中图4-4 所示，使用 1 000 mL 的烧杯作为容器，可以用 500 mL 的水，洗衣粉的用量可以用1 g 或 1.5 g。洗涤方式机洗手洗水量0.5
33、L0.5 L洗衣粉量0.5 g1 g 或 1.5 g其他相关问题简述如下。实验中可以用滴管控制污物的量，待污物干燥后再进行实验；布料应放在洗衣粉溶液中浸泡相同的时间；采用玻璃棒或筷子搅拌的方式模拟洗衣过程；模拟搅拌的时间、次数和力量应基本相同。十、的粗提取与鉴定十、的粗提取与鉴定1、提取 DNA 的溶解性原理：DNA 在不同浓度 NaClNaCl 溶液中溶解度不同溶解度不同；DNADNA 不溶于酒精不溶于酒精。在 0.14mol/L0.14mol/L 时溶解度最小时溶解度最小；较高浓度可使 DNA 溶解；0.14mol/L0.14mol/L 可使可使 DNADNA 析出。析出。在溶解细胞中的
34、DNA 时，人们通常选用 2mol/LNaCl 溶液；将 DNA 分子析出的方法是向溶有DNA的 NaCl 溶液中缓慢注入蒸馏水，以稀释NaCl 溶液。酒精是一种常用有机溶剂，但酒精是一种常用有机溶剂，但 DNADNA 却不能却不能溶于酒精（特别是溶于酒精（特别是 9595冷却酒精），但细胞中蛋白质可溶于酒精。冷却酒精），但细胞中蛋白质可溶于酒精。从理论上分析，预冷的乙醇溶液具有以下优点。一是抑制核酸水解酶活性，防止DNA 降解；二是降低分子运动，易形成沉淀析出；三是低温有利于增加DNA 柔韧性，减少断裂。2、DNA 的鉴定是在沸水浴条件下，在沸水浴条件下，DNADNA 遇二苯胺呈现蓝色。遇二
35、苯胺呈现蓝色。3、在选取材料时，应本着DNADNA 含量高、材料易得、便于提取的原则含量高、材料易得、便于提取的原则。4、破碎细胞，获取含 DNA 的滤液动物：在鸡血细胞液中加入一定量蒸馏水蒸馏水并用玻棒搅拌，过滤后收集滤液；植物：切碎洋葱，加入一定量洗涤剂和食盐洗涤剂和食盐，搅拌研磨，搅拌研磨，过滤后收集滤液。5、加入蒸馏水的目的是使血细胞在蒸馏水中大量吸水而张裂；洗涤剂会洗涤剂瓦解细胞膜；食盐加入蒸馏水的目的是使血细胞在蒸馏水中大量吸水而张裂；洗涤剂会洗涤剂瓦解细胞膜；食盐溶解溶解 DNADNA 物质。物质。6、在处理植物组织时需要进行研磨，其目的是破碎细胞壁，使核物质容易溶解在破碎细胞壁
36、，使核物质容易溶解在NaClNaCl 溶液中溶液中；研磨不充分会使 DNA 提取量减少，影响实验结果，导致看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等。7、去除滤液中的杂质：用高盐浓度的高盐浓度的溶液溶解 DNA，能除去在高盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度使 DNA 析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此，通过反复溶解与析出DNA，就能够除去与 DNA 溶解度不同的多种杂质。最初获得的 DNADNA 滤液含有蛋白质、脂质等杂质，需要进一步提纯滤液含有蛋白质、脂质等杂质，需要进一步提纯DNADNA。方案一的原理是 DNA 在不同浓度 NaCl 溶液中溶解度不同；方案二的原理是蛋白酶分解蛋白质，不分
37、解 DNA；方案三的原理是蛋白质和DNA 的变性温度不同。8、析出与鉴定滤液与等体积的冷却酒精混合均匀，静置23 分钟，析出的白色丝状物就是DNA。DNA 呈白色。9、注意事项：在鸡血中加入柠檬酸钠柠檬酸钠防止凝固；鸡血静置或离心以提高细胞悬液浓度；玻棒沿同一方向搅拌；玻棒搅拌要缓慢（细胞破裂快速搅拌）；玻棒不要碰到烧杯壁；二苯胺试剂要现用现配等。十一、植物芳香油的提取十一、植物芳香油的提取1、芳香油的提取方法：蒸馏、压榨、萃取蒸馏、压榨、萃取等。2、芳香油的性质：挥发性强，成分复杂，以萜类化合物及其衍生物为主。3、水蒸气蒸馏法：原理：水蒸汽可将挥发性较强挥发性较强的芳香油携带出来形成油水混合
38、物，冷却后水油分层。方法：水中蒸馏：原料放在沸水中加热蒸馏。水上蒸馏：原料隔放在沸水上加热蒸馏。水汽蒸馏：利用外来高温水蒸气加热蒸馏。不足：有些原料不适宜于水中蒸馏，如柑橘、柠檬等易焦糊，有效成分容易水解有些原料不适宜于水中蒸馏，如柑橘、柠檬等易焦糊，有效成分容易水解。通常用压榨法通常用压榨法（通过机械压缩力将液相物从液固两相混合物中分离出来的一种简单操作）4、萃取法：原理：芳香油易溶于有机溶剂有机溶剂，溶剂挥发后得到芳香油。如石油醚、酒精、乙醚等。方法：原料浸泡在溶剂中得到浸泡液有机溶剂挥发芳香油。不足：有机溶剂中的杂质影响芳香油的品质不足：有机溶剂中的杂质影响芳香油的品质5、安装蒸馏仪器一
39、般都按照自下而上、从左到右的顺序自下而上、从左到右的顺序。拆卸仪器的顺序与安装时相反。相反。具体安装顺序和方法如下。（1）固定热源酒精灯。（2）固定蒸馏瓶，使其离热源的距离如教科书中图6-2 所示，并且保持蒸馏瓶轴心与铁架台的水平面垂直。（3）安装蒸馏头，使蒸馏头的横截面与铁架台平行。（4）连接冷凝管。保证上端出水口向上上端出水口向上，通过橡皮管与水池相连；下端进水口向下下端进水口向下，通过橡皮管与水龙头相连。（5）连接接液管（或称尾接管）。（6）将接收瓶瓶口对准尾接管的出口。常压蒸馏一般用锥形瓶而不用烧杯作接受器，接收瓶应在实验前称重，并做好记录。（ 7）将温度计固定在蒸馏头上，使温度计水银
40、球的上限与蒸馏头侧管的下限处在同一水平线上。温度计水银球的上限与蒸馏头侧管的下限处在同一水平线上。蒸馏完毕，应先撤出热源，然后停止通水，最后拆卸蒸馏装置，拆卸的顺序与安装时相反。6、玫瑰精油的提取0.1g/mL0.1g/mL 氯化钠溶液：促使油水混合物中油和水的分离。氯化钠溶液：促使油水混合物中油和水的分离。无水硫酸钠：吸收油层中的水分。无水硫酸钠：吸收油层中的水分。注意事项：蒸馏时间不能过短，温度不能过高。7、橘皮精油的提取橘皮精油的主要成分：柠檬烯，主要分布在橘皮中。石灰水：防止压榨时滑脱，提高出油率，降低压榨液黏稠度，过滤不堵塞筛眼。石灰水：防止压榨时滑脱，提高出油率，降低压榨液黏稠度，
41、过滤不堵塞筛眼。小苏打、硫酸钠：促进油和水的分离（用量分别为橘皮质量的小苏打、硫酸钠：促进油和水的分离（用量分别为橘皮质量的0.250.25和和 5 5）。）。实验步骤：新鲜橘皮用清水清洗沥干。石灰水浸泡清水漂洗粉碎和压榨：将橘皮粉碎，加入小苏打和硫酸钠后，用压榨机压榨得到压榨液。过滤压榨液：用布袋过滤，滤液再高速离心处理，分离出上层橘皮油。静置处理：将橘皮油在510冰箱中静置 57d，分离出上层澄清橘皮油。再次过滤：将下层橘皮油用滤纸过滤，滤液与上层橘皮油合并，得到橘皮精油。分析：静置处理目的：除去果蜡和水分。十二、胡萝卜素的提取十二、胡萝卜素的提取1、胡萝卜素性质：橘黄色结晶，橘黄色结晶，
42、化学性质比较稳定，不溶于水微溶于乙醇，易溶于石油醚等有机不溶于水微溶于乙醇，易溶于石油醚等有机溶剂。溶剂。2、提取胡萝卜素实验方法：萃取萃取步骤粉碎：使原料与有机溶剂充分接触，增大溶解度粉碎：使原料与有机溶剂充分接触，增大溶解度。干燥：脱水温度太高，干燥时间太长会导致胡萝卜素分解。萃取3、萃取剂的选择水溶性的：乙醇、丙酮水不溶性的：石油醚、乙酸乙酯、 乙醚、苯、四氯化碳等选择：具有较高的沸点，能够充分溶解胡萝卜素，并且不与水混溶。选择：具有较高的沸点，能够充分溶解胡萝卜素，并且不与水混溶。4、影响萃取的因素主要因素：萃取剂的性质和使用量主要因素：萃取剂的性质和使用量次要因素：原料颗粒的大小、紧
43、密程度、含水量、萃取的温度和时间等次要因素：原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等一般来说，原料颗粒小，萃取温度高，时间长，需要提取的物质就能够充分溶解，萃取效果就一般来说，原料颗粒小，萃取温度高，时间长，需要提取的物质就能够充分溶解，萃取效果就好。萃取前，要将胡萝卜进行粉碎和干燥好。萃取前，要将胡萝卜进行粉碎和干燥5、胡萝卜素提取装置的设计：萃取过程应该避免明火加热，采用水浴加热，水浴加热，是因为有机溶剂都是易燃物，直接使用明火加热容易引起燃烧爆炸。为了防止加热时有机溶剂挥发，还要在加热瓶口安装回流冷凝装置。萃取液的浓缩可直接使用蒸馏装置。在浓缩之前，还要进行过滤，除去萃取液中的不溶物。过滤：除去萃取液中的不溶物浓缩：蒸发出有机溶剂鉴定：纸层析法纸层析法基线：滤纸下端距底边 2 处做一基线，在基线上取A、B、C、D 四点。点样：用最细的注射器针头（毛细吸管）吸取样品进行点样。点样应该快速细致，在基线上形成直径左右的圆点，每次点样后，可用吹风机将溶剂吹干，注意保持滤纸干燥。等滤纸上的点样液自然挥发干后，将滤纸卷成圆筒状，至于装有深的石油醚的密封玻璃瓶中。等各种色素完全分开后，观察标准样品中位于展开剂前沿的胡萝卜素层析带。
