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1、实验内容实验内容：补体的溶血作用（操作）大小吞噬细胞的吞噬作用（示教） 实验一实验一 非特异性免疫非特异性免疫1人体免疫系统屏障结构（如皮肤、粘膜血脑屏障、胎盘屏障）吞噬细胞体液因素(如补体、溶菌酶、乙型溶素等）细胞免疫体液免疫非特异性免疫特异性免疫人体免疫2 一、固有免疫的组成一、固有免疫的组成 （ 一）组织屏障及其作用一）组织屏障及其作用 1、皮肤黏膜及其附属成分的屏障作用、皮肤黏膜及其附属成分的屏障作用 物理屏障物理屏障 化学屏障化学屏障 微生物屏障微生物屏障 2、血脑屏障、血脑屏障 3、血胎屏障、血胎屏障3（二）固有免疫细胞（二）固有免疫细胞 吞噬细胞吞噬细胞、NK细胞、细胞、 NK1
2、.1+ T细胞细胞T细胞、细胞、B-1细胞细胞 （详见（详见p89 第九章）第九章）（三）固有免疫效应分子（三）固有免疫效应分子 补体补体、细胞因子、防御素、溶菌酶、乙型溶素、细胞因子、防御素、溶菌酶、乙型溶素4补体的溶血作用n概念 (complement)n存在于正常人或动物血清及组织液中一组与免疫相具有酶活性和自我调解作用的球蛋白质。因它们能协助和补充特异性抗体介导的免疫溶菌、溶血作用，故称为补体。它是由30种成分组成的复杂系统，部分成分遇热不稳定（56加热30分钟即可灭活）。 n三条激活途径的比较：(page 55)5n补体三条激活途径及共同末端效应全过程6本次实验涉及的原理 n绵羊红细
3、胞（SRBC）+SRBC溶血素Ag-Ab（IC）n识别：与免疫复合物抗体（Ig）中补体结合位点结合后其分子构象发生改变，致C1r及C1s被激活n活化：C4 、C2在激活C1的作用下分解产生C4b及C2b，两者组成C42b，它为C3转化酶C3分解产生C3b，与C42b结合形成C423（C5转化酶）C5分解产生C5bn膜攻击复合物形成：C5b进一步与C6、C7、C8、C9作用后，最终产生C5b6789（即膜攻击复合物），使SRBC穿孔，发生溶血反应。 7n膜攻击复合物（mebrane attack complex, MAC)结构示意图8n膜攻击复合物电镜观测示意图9 SRBC（Ag）+ 溶血素（溶
4、血素（ Ab） Ag-Ab（IC） 识别：识别： C1q 补体结合位点补体结合位点 活化：膜攻击复合体（活化：膜攻击复合体（MAC）形成）形成 效应：溶血效应：溶血原理原理实验一实验一 补体的溶血作用补体的溶血作用10实验材料：n2%SRBC1瓶（30ml）/列nSRBC溶血素1支（2.5ml）/2组n补体 1支（2.5ml）/2组n盐水 1瓶（30ml）/列n试管 3根/组(做好标记)n吸管 *试管及吸管的拿捏方法11豚鼠图12实验步骤管号2%SRBCSRBC溶血素补体盐水结果10.50.50.50.520.50.5-1.0-30.5-0.51.0-（如下图）加样37水浴15-30分钟,观察
5、结果1号管中SRBC溶解,液体由混浊变为澄清透明*实验结束后吸管置废液缸,试管置铁蓝框13 大小吞噬细胞 的比较大吞噬细胞(macrophage,monocyte)小吞噬细胞(neutrophile granulocyte)细胞类型细胞类型组织中巨噬细胞和单核细胞血液中中性粒细胞形态及形态及镜下特征镜下特征a. 胞体大、不规则，有伪足，边缘不整齐，胞内见不规则的大核b. 胞浆内见吞噬的鸡红细胞呈椭圆形、淡紫红色且有核a. 胞体较小，边缘较整齐，胞内见深紫色的分叶核及淡红色的中性颗粒b. 胞浆内见被吞噬的细菌团呈紫色功能功能参与非特异及特异性免疫参与非特异性免疫14n单核细胞n巨噬细胞15n巨噬细胞伪足包裹异物示意图16n中性粒细胞n嗜酸性粒细胞n嗜碱性粒细胞17n中性粒细胞形态n单核细胞形态18实验报告（内容）补体溶血实验原理、实验结果、结果分析19
