【大学课件】多聚酶链式反应扩增DNA片段

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1、本本课课时时栏栏目目开开关关知识知识储备区储备区学习学习探究区探究区自我自我检测区检测区第第1414课时课时 http:/ 温度温度 温度温度 过碱过碱 分子结构分子结构 两条两条 反向平行反向平行 脱氧核糖和磷酸脱氧核糖和磷酸 碱基对碱基对 氢键氢键 A G 碱基互补配对碱基互补配对 本本课课时时栏栏目目开开关关知识知识储备区储备区学习学习探究区探究区自我自我检测区检测区http:/ 模板模板 分裂前的间分裂前的间 第一次第一次染色体染色体 解旋解旋 每一条母链每一条母链 脱氧核苷酸脱氧核苷酸 双螺旋双螺旋 完全相同完全相同 间间本本课课时时栏栏目目开开关关知识知识储备区储备区学习学习探究区

2、探究区自我自我检测区检测区http:/ 本本课课时时栏栏目目开开关关知识知识储备区储备区学习学习探究区探究区自我自我检测区检测区http:/ 本本课课时时栏栏目目开开关关知识知识储备区储备区学习学习探究区探究区自我自我检测区检测区http:/ 本本课课时时栏栏目目开开关关知识知识储备区储备区学习学习探究区探究区自我自我检测区检测区http:/ 胞嘧啶胞嘧啶 腺嘌呤腺嘌呤 鸟嘌呤团鸟嘌呤团 胸腺嘧啶胸腺嘧啶 脱氧核糖脱氧核糖 磷酸基磷酸基 胸腺嘧啶脱氧核苷酸胸腺嘧啶脱氧核苷酸 氢键氢键 碱基对碱基对 一条脱氧核苷酸链一条脱氧核苷酸链 本本课课时时栏栏目目开开关关知识知识储备区储备区学习学习探究区

3、探究区自我自我检测区检测区http:/ 条件条件组分分作用作用模板模板DNA的的 条条单链提供复制的模板提供复制的模板原料原料四种四种 .合成合成DNA子子链的原料的原料酶酶解旋解旋酶酶打开打开 .DNA聚合聚合酶酶催化催化 .能量能量为解螺旋和合成子解螺旋和合成子链供能供能引物引物RNA为DNA聚合聚合酶酶提供合成的提供合成的 .起点起点两两 脱氧核苷酸脱氧核苷酸 ATP DNA双螺旋双螺旋 合成合成DNA子链子链 3端端 本本课课时时栏栏目目开开关关知识知识储备区储备区学习学习探究区探究区自我自我检测区检测区http:/ 解旋解旋 3 碱基互补配对碱基互补配对 DNA聚合聚合 3 引物引物

4、 DNA连接连接 双螺旋双螺旋 本本课课时时栏栏目目开开关关知识知识储备区储备区学习学习探究区探究区自我自我检测区检测区http:/ 本本课课时时栏栏目目开开关关知识知识储备区储备区学习学习探究区探究区自我自我检测区检测区http:/ 体内复制体内复制PCR反应反应解旋解旋在解旋酶作用下在解旋酶作用下,细细胞胞提供能量提供能量,部分解开部分解开加热至加热至95 ,双链全双链全部解开部解开,不需解旋酶不需解旋酶引物引物一小段一小段RNA可以是可以是RNA或单或单链链DNA分子片段分子片段合成合成子链子链在引物基础上在引物基础上,一条一条链连续合成链连续合成,另一条另一条链不连续合成链不连续合成分

5、别从两条链的引物分别从两条链的引物端开始,都是连续合端开始,都是连续合成,控制温度成,控制温度72 本本课课时时栏栏目目开开关关知识知识储备区储备区学习学习探究区探究区自我自我检测区检测区http:/ 特点特点边解旋边复制边解旋边复制,半保留复制半保留复制体外迅速扩增体外迅速扩增Taq DNA聚合酶聚合酶不需要不需要需要需要循环循环次数次数受生物体自身控制受生物体自身控制30多次多次相同点相同点生物体内的生物体内的DNA复制和复制和PCR体外体外DNA扩增都扩增都需要模板、四种脱氧核苷酸作原料、酶,子链需要模板、四种脱氧核苷酸作原料、酶,子链延伸的方向都是从延伸的方向都是从5端到端到3端,且都

6、需要在一端,且都需要在一定的缓冲溶液中进行定的缓冲溶液中进行本本课课时时栏栏目目开开关关知识知识储备区储备区学习学习探究区探究区自我自我检测区检测区http:/ 本本课课时时栏栏目目开开关关知识知识储备区储备区学习学习探究区探究区自我自我检测区检测区http:/ 本本课课时时栏栏目目开开关关知识知识储备区储备区学习学习探究区探究区自我自我检测区检测区http:/ 本本课课时时栏栏目目开开关关知识知识储备区储备区学习学习探究区探究区自我自我检测区检测区http:/ 本本课课时时栏栏目目开开关关知识知识储备区储备区学习学习探究区探究区自我自我检测区检测区http:/ 变性变性 复性复性 延伸延伸

7、本本课课时时栏栏目目开开关关知识知识储备区储备区学习学习探究区探究区自我自我检测区检测区http:/ 准备准备 移液移液 混合混合 离心离心反应反应 本本课课时时栏栏目目开开关关知识知识储备区储备区学习学习探究区探究区自我自我检测区检测区http:/ 高压灭菌高压灭菌 20 移液器移液器 离心管离心管 本本课课时时栏栏目目开开关关知识知识储备区储备区学习学习探究区探究区自我自我检测区检测区http:/ 本本课课时时栏栏目目开开关关知识知识储备区储备区学习学习探究区探究区自我自我检测区检测区http:/ 本本课课时时栏栏目目开开关关知识知识储备区储备区学习学习探究区探究区自我自我检测区检测区ht

8、tp:/ C 本本课课时时栏栏目目开开关关知识知识储备区储备区学习学习探究区探究区自我自我检测区检测区http:/ C 本本课课时时栏栏目目开开关关知识知识储备区储备区学习学习探究区探究区自我自我检测区检测区http:/ 引物引物复性复性放入放入PCR仪仪稀释稀释调零调零本本课课时时栏栏目目开开关关知识知识储备区储备区学习学习探究区探究区自我自我检测区检测区http:/ C 本本课课时时栏栏目目开开关关知识知识储备区储备区学习学习探究区探究区自我自我检测区检测区http:/ D 本本课课时时栏栏目目开开关关知识知识储备区储备区学习学习探究区探究区自我自我检测区检测区http:/ B 本本课课时时栏栏目目开开关关知识知识储备区储备区学习学习探究区探究区自我自我检测区检测区http:/ C 本本课课时时栏栏目目开开关关知识知识储备区储备区学习学习探究区探究区自我自我检测区检测区http:/ 本本课课时时栏栏目目开开关关知识知识储备区储备区学习学习探究区探究区自我自我检测区检测区http:/ 本本课课时时栏栏目目开开关关知识知识储备区储备区学习学习探究区探究区自我自我检测区检测区http:/

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