性传播疾病实验室检测ppt课件

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1、性传播疾病的实验室检测1一、概述一、概述- -梅毒病原体梅毒病原体n n(一)、名(一)、名词词n n由梅毒螺旋体感染引起的一种慢性全身性性由梅毒螺旋体感染引起的一种慢性全身性性由梅毒螺旋体感染引起的一种慢性全身性性由梅毒螺旋体感染引起的一种慢性全身性性传传播疾病播疾病播疾病播疾病n n是我国是我国是我国是我国卫卫生部生部生部生部规规定的重点防治性病之一定的重点防治性病之一定的重点防治性病之一定的重点防治性病之一n n中中中中华华人民共和国人民共和国人民共和国人民共和国传传染病防治法染病防治法染病防治法染病防治法规规定的乙定的乙定的乙定的乙类传类传染病染病染病染病n n世界世界世界世界卫卫生生

2、生生组织组织列列列列为为世界上最常世界上最常世界上最常世界上最常见见的的的的5050种种种种传传染病之一染病之一染病之一染病之一 n n梅毒螺旋体(梅毒螺旋体(Treponema pallidum,TP )n n是梅毒的病原体,因其透明,不易着色,故又称是梅毒的病原体,因其透明,不易着色,故又称是梅毒的病原体,因其透明,不易着色,故又称是梅毒的病原体,因其透明,不易着色,故又称苍苍白螺白螺白螺白螺旋体旋体旋体旋体 2n n(二)、免二)、免 疫疫n n以以细胞免疫胞免疫为主主,体液免疫只有一定的,体液免疫只有一定的辅助防御作用助防御作用n n当螺旋体从体内清除后可再感染当螺旋体从体内清除后可再

3、感染,而且仍,而且仍可出可出现一期梅毒症状一期梅毒症状n n此病周期性潜伏与再此病周期性潜伏与再发的原因可能与体内的原因可能与体内产生的免疫力有关生的免疫力有关3n n(三)、抗(三)、抗(三)、抗(三)、抗 原原原原n n1 1表面特异性抗原表面特异性抗原表面特异性抗原表面特异性抗原:刺激机体:刺激机体:刺激机体:刺激机体产产生特异凝集抗体及密螺生特异凝集抗体及密螺生特异凝集抗体及密螺生特异凝集抗体及密螺旋体制旋体制旋体制旋体制动动或溶解抗体,后者加或溶解抗体,后者加或溶解抗体,后者加或溶解抗体,后者加补补体可溶解螺旋体体可溶解螺旋体体可溶解螺旋体体可溶解螺旋体n n2 2螺旋体内螺旋体内螺

4、旋体内螺旋体内类类属抗原:属抗原:属抗原:属抗原:可可可可产产生生生生补补体体体体结结合抗体,与非病原合抗体,与非病原合抗体,与非病原合抗体,与非病原性螺旋体有交叉反性螺旋体有交叉反性螺旋体有交叉反性螺旋体有交叉反应应n n3 3,螺旋体与宿主,螺旋体与宿主,螺旋体与宿主,螺旋体与宿主组织组织磷脂形成的复合抗原磷脂形成的复合抗原磷脂形成的复合抗原磷脂形成的复合抗原:当螺旋体侵:当螺旋体侵:当螺旋体侵:当螺旋体侵入入入入组织组织后,后,后,后,组织组织中的磷脂可粘附在螺旋体上,形成复合中的磷脂可粘附在螺旋体上,形成复合中的磷脂可粘附在螺旋体上,形成复合中的磷脂可粘附在螺旋体上,形成复合抗原,此种

5、复合抗原可刺激机体抗原,此种复合抗原可刺激机体抗原,此种复合抗原可刺激机体抗原,此种复合抗原可刺激机体产产生抗磷脂的自身免疫生抗磷脂的自身免疫生抗磷脂的自身免疫生抗磷脂的自身免疫抗体,称抗体,称抗体,称抗体,称为为反反反反应应素素素素(AegaginAegagin),可与牛心肌或其他正),可与牛心肌或其他正),可与牛心肌或其他正),可与牛心肌或其他正常常常常动动物心肌提取的物心肌提取的物心肌提取的物心肌提取的类类脂脂脂脂质质抗原起沉淀反抗原起沉淀反抗原起沉淀反抗原起沉淀反应应(康氏(康氏(康氏(康氏试验试验)或或或或补补体体体体结结合反合反合反合反应应(华华氏氏氏氏试验试验) 4二、检测方法二

6、、检测方法- -病原体检查病原体检查n n梅毒螺旋体检查是诊断早期梅毒的最佳方法。 n n诊断一期梅毒、二期梅毒时,可取患者的渗出液或淋巴结穿刺术得到的组织液,在暗视野显微镜下观察螺旋体的特征性形态和运动方式.n n病原学检查的主要方法有暗视显微镜检查、镀银染色法和直接荧光法51.1.暗暗视视野野显显微微镜检查镜检查、镀银镀银染色和染色和荧荧光抗梅毒螺旋体光抗梅毒螺旋体单单克隆抗体等克隆抗体等检查检查方法,直接方法,直接镜检镜检到梅毒螺旋体,在到梅毒螺旋体,在临临床可确床可确诊诊梅毒,且具有快速、方便、易操作的特点。梅毒,且具有快速、方便、易操作的特点。暗暗视视野野显显微微镜检查镜检查已被世界

7、已被世界卫卫生生组织组织指定指定为为性病性病实验实验室必室必备项备项目之一。目之一。2.2.螺旋体螺旋体检查检查是是诊诊断早期断早期现现症梅毒的最佳方法症梅毒的最佳方法,对对于患于患者的早期者的早期诊诊断、及断、及时时治治疗疗、预预后和尽早切断后和尽早切断传传染源都染源都有十分重要的意有十分重要的意义义。3.3.如未如未见见到梅毒螺旋体,并不能排除患梅毒的可能性,到梅毒螺旋体,并不能排除患梅毒的可能性,6暗视野显微镜检查暗视野显微镜检查7检测方法-血清学检测 根据检测所用抗原不同,临床血清试验分为两大类:1.非梅毒螺旋体抗原血清试验2.梅毒螺旋体抗原血清试验9检测方法-非梅毒螺旋体血清试验n性

8、病研究实验室试验(VDRL)n不加热血清反应素试验(USR)n血浆反应素环状卡片试验(RPR、TRUST)10检测方法-非梅毒螺旋体血清试验n所有的非梅毒螺旋体血清试验的抗原基本成分都一样,其基本成分是心磷脂 、卵磷脂和胆固醇n抗原抗体结合形成复合物 凝集成网状沉淀颗粒 被肉眼所见n上述方法的敏感性和特异性都基本相似11RPRRPR结果结果12TRUSTTRUST结果结果13检测方法非梅毒螺旋体血清试验临床意义n非梅毒螺旋体抗原血清试验方法简单、快速、敏感性和特异性较好。适用于大量人群的筛查。n早期梅毒硬下疳出现1周-2周后,血清可呈阳性。n经治疗后血清滴度可下降并阴性,故可作为疗效观察、判愈

9、、复发或再感染的指征。14检测方法-非梅毒螺旋体血清试验特点n前带现象 指非梅毒螺旋体抗原血清试验中,有时血清中存在高浓度的抗体时出现的弱阳性、不典型或阴性反应的结果,而临床上又象二期梅毒,此时将血清稀释后再进行试验,出现了阳性的结果,该现象称为前带现象。15检测方法-梅毒螺旋体血清试验 采用梅毒螺旋体作抗原,是特异性的抗原体反应。n梅毒螺旋体血球凝集试验(TPHA)n梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TP-PA)n荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)、n梅毒螺旋体酶联免疫试验(ELSA-TP)n梅毒螺旋体蛋白印迹试验(WB-Test)16梅毒螺旋体血清试验的临床意义n作为非梅毒螺旋体抗原血

10、清试验(如RPR等)初筛阳性标本的确证试验。n梅毒患者经过抗梅治疗后,ELSA、TPPA试验仍可阳性,故TPPA试验阳性不能作为疗效观察的指标。nELSA、TPPA阳性不能区分既往感染和现症感染,应结合非梅毒螺旋体抗原血清试验结果进行诊断。17梅毒血清假阳性反应n n技技技技术术性假阳性反性假阳性反性假阳性反性假阳性反应应:如:如:如:如实验实验室操作室操作室操作室操作错误错误,标标本溶本溶本溶本溶血等,如重复血等,如重复血等,如重复血等,如重复试验试验,无梅毒患者血清,无梅毒患者血清,无梅毒患者血清,无梅毒患者血清试验试验成成成成为为阳阳阳阳性。性。性。性。n n生物学假阳性反生物学假阳性反

11、生物学假阳性反生物学假阳性反应应:因非螺旋体抗原血清:因非螺旋体抗原血清:因非螺旋体抗原血清:因非螺旋体抗原血清试验试验是是是是非特异性的,在其它一些疾病,尤以感染性疾病,非特异性的,在其它一些疾病,尤以感染性疾病,非特异性的,在其它一些疾病,尤以感染性疾病,非特异性的,在其它一些疾病,尤以感染性疾病,也可也可也可也可释释放心放心放心放心拟拟脂至血液中,脂至血液中,脂至血液中,脂至血液中,产产生反生反生反生反应应素,素,素,素,如麻如麻如麻如麻风风、麻疹、麻疹、麻疹、麻疹、疟疟疾、疾、疾、疾、传传染性肝炎、病毒性肺炎、染性肝炎、病毒性肺炎、染性肝炎、病毒性肺炎、染性肝炎、病毒性肺炎、传传染性染

12、性染性染性单单核核核核细细胞增多症,系胞增多症,系胞增多症,系胞增多症,系统统性性性性红红斑狼斑狼斑狼斑狼疮疮,非典型性肺,非典型性肺,非典型性肺,非典型性肺炎、甚至妊娠都可出炎、甚至妊娠都可出炎、甚至妊娠都可出炎、甚至妊娠都可出现现阳性,但阳性,但阳性,但阳性,但这类这类患者血清反患者血清反患者血清反患者血清反应应滴度低,很少超滴度低,很少超滴度低,很少超滴度低,很少超过过1 1:8 8。而且半年内。而且半年内。而且半年内。而且半年内渐转渐转成阴成阴成阴成阴性。性。性。性。另外可用特异性的梅毒血清反另外可用特异性的梅毒血清反另外可用特异性的梅毒血清反另外可用特异性的梅毒血清反应证实应证实。如

13、用。如用。如用。如用FTAFTAABSABS试验试验18假阴性反应n n在梅毒螺旋体感染后在梅毒螺旋体感染后12周内可呈阴性反周内可呈阴性反应n n梅毒螺旋体感染不久即开始治梅毒螺旋体感染不久即开始治疗n n晚期梅毒患者的血清中反晚期梅毒患者的血清中反应素含量低,敏素含量低,敏感性低的梅毒血清感性低的梅毒血清试验易出易出现阴性反阴性反应n n在二期梅毒在二期梅毒时RPR试验也可出也可出现阴性反阴性反应,前前带现象象(prozone phenomenon) 19血清学检测的几个特点n n在最初的两周可能是阴性在最初的两周可能是阴性结果果n nFTA、TPPA和和ELISA在所有在所有阶段都最敏感

14、段都最敏感n nVDRL和和RPR在三期梅毒期可能在三期梅毒期可能为阴性阴性n nVDRL-CSF仅用于用于诊断神断神经性梅毒性梅毒20淋球菌实验室诊断技术淋球菌实验室诊断技术21概况概况- -病原学病原学n n淋病是指由淋病奈瑟菌淋病是指由淋病奈瑟菌(Neisseria gonorrhoeae,(Neisseria gonorrhoeae,简简称淋球菌称淋球菌) )引起的各种化引起的各种化脓脓性感染,是一种性感染,是一种经经典的常典的常见见的性的性传传播疾病播疾病. .n n淋球菌淋球菌为为革革兰兰阴性双球菌,大小阴性双球菌,大小约约0.60.80.60.8 m m。通常。通常成成对对生生长

15、长,两菌接触面平坦。,两菌接触面平坦。n n淋球菌与奈瑟属的另一种致病菌淋球菌与奈瑟属的另一种致病菌脑脑膜炎球菌及其他膜炎球菌及其他共栖奈瑟菌在生物学上有共栖奈瑟菌在生物学上有许许多相似性,可通多相似性,可通过过生化生化特性加以特性加以鉴别鉴别。淋球菌。淋球菌原发性感染部位主要为男性尿道或原发性感染部位主要为男性尿道或女性宫颈管内膜女性宫颈管内膜22概况概况- -流行病学流行病学淋病的淋病的传传播途径有以下二种:播途径有以下二种: 1)1)直直接接性性接接触触感感染染:成成人人淋淋病病几几乎乎全全部部通通过过性接触感染。性接触感染。 2)2)间间接接接接触触感感染染:儿儿童童可可通通过过污污染

16、染了了淋淋球球菌菌的的物物品品间间接接感感染染。新新生生儿儿可可通通过过母母亲亲产产道道分分泌泌物物间间接感染接感染。23淋病的实验室诊断方法淋病的实验室诊断方法n n直接显微镜检查,观察淋球菌细胞;n n分离培养淋球菌;n n非培养技术检测淋球菌细胞成份如抗原或DNA(EIA, PCR/LCR) 24标本的采集和运送标本的采集和运送n n 取材的部位 年年龄龄 性性别别 性接触方式性接触方式 临临床表床表现现n n取材拭子 藻酸钙拭子藻酸钙拭子 普普 通通 棉棉 拭拭子子 涤纶拭子涤纶拭子 25标本的采集和运送标本的采集和运送- -取材部位取材部位n n男性男性 异性恋者异性恋者: :采集尿

17、道采集尿道标标本,有口淫史者加取咽部本,有口淫史者加取咽部标标本;本; 同性恋者同性恋者: : 采集尿道、直采集尿道、直肠肠及咽部及咽部标标本本. .n n女性女性 采采集集宫宫颈颈标标本本,必必要要时时从从尿尿道道、直直肠肠、咽咽部部、前前庭庭大大腺腺和和尿尿道道旁腺取材;旁腺取材;n n幼女幼女 采集阴道分泌物;采集阴道分泌物;n n新生儿眼炎患者新生儿眼炎患者 采集眼采集眼结结膜分泌物,膜分泌物,对对其母其母亲亲采集采集宫颈宫颈、尿道及直、尿道及直肠标肠标本。本。 26标本的采集和运送标本的采集和运送- -取材方法取材方法尿道尿道n n男性患者男性患者 用用手手指指从从阴阴茎茎根根部部向

18、向尿尿道道口口方方向向挤挤压压,有有症症状状患患者者可可挤挤出出脓脓液液,用用取取样样拭拭子子蘸蘸取取脓脓液液作作涂涂片片或或培培养养。对对挤挤压压后后无无明明显显分分泌泌物物时时,采采用用男男用用取取材材拭拭子子插插入入尿尿道道 2 23cm3cm,稍稍用用力力转动转动,保留数秒,保留数秒钟钟再取出,再取出, 以采集到粘膜上皮以采集到粘膜上皮细细胞。胞。n n女性患者女性患者 可可抵抵着着耻耻骨骨联联合合轻轻轻轻按按摩摩尿尿道道口口,挤挤压压出出分分泌泌物物。如如果无明果无明显显分泌物,可用同男性相似的上述方法取材。分泌物,可用同男性相似的上述方法取材。27标本的采集和运送标本的采集和运送-

19、 -取材方法取材方法宫颈宫颈 取取材材前前用用温温水水或或生生理理盐盐水水湿湿润润扩扩阴阴器器。应应避避免免使使用用防防腐腐剂剂和和润润滑滑剂剂,因因为为这这些些物物质质对对淋淋球球菌菌有有抑抑制制作作用用。仔仔细细检检查查阴阴道道壁壁和和宫宫颈颈,如如果果宫宫颈颈口口外外面面的的分分泌泌物物较较多多,先先用用无无菌菌棉棉拭拭清清除除过过多多的的宫宫颈颈粘粘液液。将将一一取取样样拭拭子子插插入入宫宫颈颈管管内内1 12cm2cm,稍稍用用力力转转动动,保保留留10103030秒后取出。秒后取出。28标本的采集和运送标本的采集和运送- -取材取材n n直直肠肠 将将取取样样拭拭子子插插入入肛肛门

20、门2 23cm3cm,从从紧紧靠靠肛肛环环边边的的隐隐窝窝中取材。避免接触中取材。避免接触粪粪便。便。n n阴道阴道 青青春春期期前前女女孩孩可可采采集集阴阴道道标标本本。将将取取样样拭拭子子置置于于阴道后穹窿阴道后穹窿10101515秒,采集阴道分泌物。秒,采集阴道分泌物。n n咽部咽部 从咽后壁或扁桃体从咽后壁或扁桃体隐窝隐窝取材取材 29标本的采集和运送标本的采集和运送- -运送运送n n淋淋球球菌菌的的抵抵抗抗力力弱弱,对对热热敏敏感感,不不耐耐干干燥燥。取取材材后后标标本本若若不不能能立立即即接接种种于于选选择择性性培培养养基基上上时时,需需采采用用运运送送系系统统。置置于于非非营营

21、养养型型运运送送培培养养基基中中的的标标本本应应在在1212小小时时内内送送到到实实验验室室,接接种种于于选选择择性性培培养养基基,分分离离阳阳性性率率可可达达90%90%以以上上。超超过过2424小小时则时则分离阳性率下降。分离阳性率下降。30直接显微镜检查直接显微镜检查染色方法染色方法: : 革革兰兰染液染液 美美兰兰染液染液 姬姬姆姆萨萨染液染液 荧荧光抗体光抗体 革革兰兰染染色色为为一一传传统统方方法法,因因简简便便、快快捷捷及及价价廉廉、仍仍然然为为最最广广泛泛采采用用的的方方法法。革革兰兰染染色色将将菌菌分分为为二二大大类类,即染成紫色的革即染成紫色的革兰兰阳性菌及染成阳性菌及染成

22、红红色的革色的革兰兰阴性菌。阴性菌。31直接显微镜检查的临床意义直接显微镜检查的临床意义n n男性淋菌性尿道炎的尿道男性淋菌性尿道炎的尿道标标本本 敏感性及特异性可高达敏感性及特异性可高达95%95%99%99%,具,具诊诊断价断价值值。n n宫颈标宫颈标本、无症状男性尿拭子及取自直本、无症状男性尿拭子及取自直肠肠的涂片的涂片时时 敏感性敏感性仅仅404070%70%。 不不推推荐荐直直接接显显微微镜镜检检查查诊诊断断直直肠肠和和咽咽部部淋淋球球菌菌感感染染。 亦亦不不能能用用于于疗疗后后判判愈愈。如如果果在在多多形形核核细细胞胞外外见见到形到形态态典型的革典型的革兰兰阴性双球菌,需做培养阴性

23、双球菌,需做培养进进行确行确证证。32淋球菌培养淋球菌培养n n培养法培养法为诊为诊断淋病的金断淋病的金标标准准. .n n对对女性淋病的确女性淋病的确诊应诊应做淋球菌培养做淋球菌培养 n n从从选择选择性培养基上分离出淋球菌即可性培养基上分离出淋球菌即可诊诊断淋病。断淋病。n n培养的敏感性培养的敏感性81100%81100%。n n培养的培养的优优点有:点有: 特异性极高(特异性极高(100%100%);); 可可发现发现无症状淋球菌感染患者;无症状淋球菌感染患者; 可确可确诊诊儿童性虐待;儿童性虐待; 可用于可用于进进一步作一步作药药敏敏试验试验; 可用于治可用于治疗疗后的判愈后的判愈试

24、验试验。33淋球菌培养淋球菌培养- -培养条件培养条件n n培培养养条条件件 : 35 35 3636,含含5%5%10% 10% COCO2 2,湿湿润润(70%70%湿度)的湿度)的环环境。境。 COCO2 2环环境境可可由由COCO2 2培培养养箱箱、COCO2 2产产气气袋袋及及烛烛缸缸提提供供。使使用用烛烛缸缸时时,应应使使用用白白色色、无无芳芳香香味味的的无无毒毒性性蜡蜡烛烛。在在烛烛缸底部放些浸水棉球以保持一定的湿度。缸底部放些浸水棉球以保持一定的湿度。n n培养培养时间时间:24482448小小时时34淋球菌培养淋球菌培养- -培养条件培养条件35淋球菌培养淋球菌培养- -观察

25、结果观察结果n n培培养养2424小小时时后后检检查查平平皿皿,此此时时没没有有菌菌生生长长的的平平皿皿应应继继续续培培养养至至4848小小时时,仍仍无无菌菌生生长长才才可可丢丢弃弃,作出淋球菌培养阴性的作出淋球菌培养阴性的报报告。告。n n对对选选择择性性培培养养基基上上分分离离的的直直径径在在0.50.51mm1mm,无无色、灰白色的半透明菌落色、灰白色的半透明菌落应应作作进进一步一步鉴鉴定。定。36淋球菌培养淋球菌培养- -观察结果观察结果37淋球菌培养淋球菌培养- -淋球菌的初步鉴定淋球菌的初步鉴定n n初步初步鉴鉴定淋球菌的主要依据定淋球菌的主要依据 菌落特征氧化酶试验 革兰染色38

26、淋球菌氧化酶阳性淋球菌氧化酶阳性39淋球菌培养淋球菌培养- -淋球菌的确证试验淋球菌的确证试验n n糖发酵试验n n免疫学试验 -荧光抗体染色 -协同凝集试验 n n酶底物试验n nDNA探针试验 40淋球菌的鉴定特征淋球菌的鉴定特征菌落形态菌落形态淋球菌样淋球菌样革兰染色革兰染色革兰阴性双球菌革兰阴性双球菌氧化酶试验氧化酶试验阳性阳性过氧化物酶试验过氧化物酶试验阳性阳性快速糖发酵试验快速糖发酵试验G+L-M-S-G+L-M-S-内酰胺酶内酰胺酶阳性阳性PPNGPPNG或阴性或阴性41非培养诊断技术非培养诊断技术n n非培养技非培养技术术的特点的特点 不依不依赖赖于活的病原体的存在,无需特殊运

27、送条件;于活的病原体的存在,无需特殊运送条件; 仅仅适合尿道或适合尿道或宫颈标宫颈标本,以及尿液(本,以及尿液(PCR/LCRPCR/LCR);); 不能不能进进行抗生素敏感性行抗生素敏感性试验试验 用于判愈用于判愈试验试验需在治需在治疗疗后至少后至少3 3 周以上周以上进进行行. .42 生殖道沙眼衣原体感染43生殖道沙眼衣原体感染-病原体n n沙眼衣原体有沙眼衣原体有15个血清型,个血清型,A, B, Ba, C, D-K, LI, L2, L3n n-A, B, Ba和和C型最常引起沙眼型最常引起沙眼n nD-K型主要感染泌尿生殖道型主要感染泌尿生殖道n nLI, L2, L3型引起性病

28、性淋巴肉芽型引起性病性淋巴肉芽肿44生殖道沙眼衣原体感染-病原体n非淋菌性尿道炎(非淋菌性尿道炎(NGU)是指由性是指由性接触接触传染的一种尿道炎,它在染的一种尿道炎,它在临床上有尿道炎的表床上有尿道炎的表现,但在尿道,但在尿道分泌物中分泌物中查不到淋球菌。不到淋球菌。n40-50%由沙眼衣原体引起,由沙眼衣原体引起,20-30%由支原体引起,尚有由支原体引起,尚有10-20%由阴道毛滴虫、白色念珠菌和由阴道毛滴虫、白色念珠菌和单纯疱疹病毒等引起。疱疹病毒等引起。45病原学 革兰阴性、专性细胞内寄生的微生物衣原体有特殊的发育周期,可见2种不同的结构 原体:感染型,较小,呈球形 始体:增殖型,大

29、,呈圆形或卵圆形46沙眼衣原体感染的并发症n n附睾炎附睾炎n n前列腺炎前列腺炎n nReiter病病47直肠炎n n多多发于男性同性恋者,由于男性同性恋者,由LGU株引起株引起n n在男性同性恋者中,直在男性同性恋者中,直肠沙眼衣原体的分沙眼衣原体的分离率离率为48;而在男性直;而在男性直肠炎患者中,炎患者中,分离率分离率为12n n临床表床表现:轻者无症状,重者有直者无症状,重者有直肠疼痛、疼痛、出血、腹泻及粘液性分泌物出血、腹泻及粘液性分泌物48女性感染宫颈炎n n约1/3左右的病人无任何左右的病人无任何临床症状床症状n n阴道分泌物:稀薄至阴道分泌物:稀薄至脓性,正常至增多有性,正常

30、至增多有气味气味n n宫颈充血,水充血,水肿,脆性增加,脆性增加n n宫颈管口粘液管口粘液脓性分泌物性分泌物49尿道炎n n大多数女性尿道沙眼衣原体感染无症状大多数女性尿道沙眼衣原体感染无症状n n急性尿道急性尿道综合症:可与急性合症:可与急性细菌性膀胱炎菌性膀胱炎的症状相似,如排尿困的症状相似,如排尿困难、尿、尿频、尿急、尿急n n6080的尿道感染者同的尿道感染者同时合并合并宫颈感感染染50盆腔炎(PID)n n衣原体衣原体宫颈炎炎2040n n上生殖道感染上生殖道感染1040n n有症状有症状PID51新生儿感染n n分娩分娩时传播播n n沙眼衣原体活沙眼衣原体活动性感染的孕性感染的孕妇

31、,其新生儿,其新生儿的感染率的感染率n n在任何部位的感染在任何部位的感染5070n n新生儿新生儿结膜炎黄膜炎黄050n n至少有至少有50的的结膜炎患儿同膜炎患儿同时有鼻咽感染有鼻咽感染n n30的鼻咽感染的鼻咽感染发展展为衣原体肺炎衣原体肺炎52男性感染非淋菌性尿道炎n n潜伏期:潜伏期:13周周n n症状:尿道粘液性或粘液症状:尿道粘液性或粘液脓性分泌物,并性分泌物,并有尿痛、尿道不适等症状。有尿痛、尿道不适等症状。53沙眼衣原体感染- -实验室检测实验室检测F细胞培养F抗原检测试验 (酶联免疫吸附免疫吸附实验、直接、直接荧光法、光法、快速抗原快速抗原试验)FF直接涂片直接涂片显显微微

32、镜检查镜检查F核酸扩增检测(NAAT)法FF抗体抗体检测检测 54衣原体的培养评 价v敏感性7080v特异性100缺点v费时(需35天),费力,技术要求高v不宜作为临床常规检查v不宜用于大规模的筛查和流行病学调查 55抗原检测评 价酶联免疫吸附试验n敏感性和特异性与直接免疫荧光法相似 敏感性:7997 高 特异性: 9799 高 n试验结果阴性时,不能完全排除沙眼衣原体感染,有可能是沙眼衣原体数量不足或标本采集不当的缘故56抗原检测评 价直接免疫荧光法v敏感性70%90%v特异性83%99%v由于有可能将某些发光颗粒(白细胞、上皮细胞、色素颗粒)、细菌和酵母菌误认为沙眼衣原体,因此此法对于实验

33、人员的技术水平要求较高57抗原检测抗原快速检测:优 点n简易,方便,快速,尤其适用于基层单位缺 点n标本中需要足够数量的沙眼衣原体抗原,否则有假阴性结果58核酸扩增检测n核酸扩增技术是通过扩增沙眼衣原体的多拷贝基因(如隐蔽性质粒、染色体和RNA)检测病原体。方法包括聚合酶链反应(PCR)连接酶链反应(LCR)等温链置换扩增技术(SDA)转录介导扩增技术(TMA)核酸序列扩增技术(NASBA)实时荧光PCR等。59核酸扩增检测n核算扩增检测具有很高的敏感性和特异性,世界卫生组织已推荐为扩大的生殖道沙眼衣原体感染实验室诊断的“金标准”。n核算扩增检测不仅可用于宫颈、尿道标本中沙眼衣原体的检测,也可

34、用于男女性尿液标本的检测。 n开展核酸检测的实验室应通过有关部门考核取得开展临床核酸检测技术资格证。60显微镜检查n n涂片涂片姬姆姆萨染色、碘染色或帕氏染色直接染色、碘染色或帕氏染色直接镜检可可发现沙眼衣原体包涵体。只适合新沙眼衣原体包涵体。只适合新生儿眼生儿眼结膜刮片的膜刮片的检查。61抗体检测n n抗体抗体检测n n血清抗体水平升高(血清抗体水平升高(1:64),见于沙眼衣原于沙眼衣原体性附睾炎、体性附睾炎、输卵管炎。新生儿衣原体肺卵管炎。新生儿衣原体肺炎中沙眼衣原体炎中沙眼衣原体IgM抗体滴度升高。抗体滴度升高。62 生殖器疱疹(HSV-2)63生殖器疱疹n n有有单纯疱疹病毒感染泌尿

35、生殖器及肛疱疹病毒感染泌尿生殖器及肛门部部位皮肤粘膜引起的常位皮肤粘膜引起的常见性病性病n n单纯疱疹病毒有两种疱疹病毒有两种类型:型:HSV-!和和HSV-2,多数生殖器疱疹由多数生殖器疱疹由HSV2引起引起n n本病呈慢性复本病呈慢性复发过程,尚无程,尚无彻底治愈的方底治愈的方法法64病原体n nHSV是双是双联DNA病毒,属于人病毒,属于人类疱疹病毒疱疹病毒a亚科,人科,人类是是HSV的唯一自然宿主的唯一自然宿主n n病毒病毒颗粒直径粒直径约150nm,其中央其中央为病毒核心,病毒核心,含有病毒基因含有病毒基因组DNAn n病毒具有嗜感病毒具有嗜感觉神神经节而形成潜伏感染状而形成潜伏感染

36、状态的特征的特征n n潜伏部位:骶神潜伏部位:骶神经根区根区65病原学n nHSV-2是生殖器疱疹的主要病原体,是生殖器疱疹的主要病原体,HSV1引起的生殖器疱疹引起的生殖器疱疹约占占该病的病的1040。今年来,。今年来,HSV-1所致生殖器疱疹增多,所致生殖器疱疹增多,这与口交等性行与口交等性行为方式有关。方式有关。66血清学检测的意义HSV感染的血清流行病学调查鉴别诊断原发性及非原发性HSV感染n n感染者性伴的HSV感染状况的判断n n孕妇产前监测67样品的采集n n 原原发性生殖器疱疹的病程性生殖器疱疹的病程为23周,周,病毒排放的持病毒排放的持续时间平均平均为12d。复。复发性生殖器

37、疱疹的病程性生殖器疱疹的病程为1周周2周,周,病毒排放的持病毒排放的持续时间平均平均为4d。取材。取材时,应尽可能取疱液和尽可能取疱液和溃疡,以提高,以提高检查的阳性率。取材后,将的阳性率。取材后,将标本放入本放入装有装有1ml-2ml病毒运送液或病毒运送液或hanks液的液的小瓶中送小瓶中送检,或直接涂片作,或直接涂片作细胞学胞学检查或病毒的直接免疫或病毒的直接免疫荧光光检查。68实验室诊断方法n细胞学检查n n抗原检测n n病毒培养69n抗原检测:n n用免疫学方法检测HSV抗原是目前最常用的快速诊断方法。这些方法以抗HSV抗体为基础,包括直接免疫荧光法、免疫酶染色和酶联免疫吸附实验(EL

38、ISA).其中直接免疫荧光法应用较多。70 尖尖锐湿疣湿疣71病原体n n尖尖锐湿疣又称尖圭湿疣、生殖器疣或性病湿疣又称尖圭湿疣、生殖器疣或性病疣,是有某些疣,是有某些类型的人型的人类乳乳头瘤病毒瘤病毒n n是最小的是最小的DNA病毒病毒n n有有100多种多种亚型,不同型型,不同型别的致病性不同的致病性不同n n病毒只能在人体存活病毒只能在人体存活n n病毒不能在体外病毒不能在体外组织培养、培养、细胞培养和胞培养和实验动物中生物中生长72n n(HPV)引起的增生性疾病。在性活引起的增生性疾病。在性活跃人群人群中,通中,通过性接触而性接触而发生肛生肛门生殖器疣,目生殖器疣,目前,已被公前,已

39、被公认为性性传播疾病之一。本病与播疾病之一。本病与癌有一定关系,日益癌有一定关系,日益为人人们所重所重视。其。其亚临床感染也引起人床感染也引起人们注意。注意。73临床表现n n好好发年年龄:性活:性活跃的年的年轻人人n n潜伏期:潜伏期:13月月n n开始开始为小而淡小而淡红色丘疹,色丘疹,渐增大增多,表增大增多,表面凹凸不平面凹凸不平n n通常无自通常无自觉症状症状74n n临床床检查: (一)醋酸白(一)醋酸白(一)醋酸白(一)醋酸白试验试验 用用用用3-5%3-5%醋酸外搽或湿敷,醋酸外搽或湿敷,醋酸外搽或湿敷,醋酸外搽或湿敷,2-52-5分分分分钟钟后,肛后,肛后,肛后,肛门则门则需需

40、需需5min5min,病灶稍膨隆,大多数,病灶稍膨隆,大多数,病灶稍膨隆,大多数,病灶稍膨隆,大多数结结果可直接用肉眼果可直接用肉眼果可直接用肉眼果可直接用肉眼观观察,阴道内皮察,阴道内皮察,阴道内皮察,阴道内皮损损借助于阴道借助于阴道借助于阴道借助于阴道镜镜或放大或放大或放大或放大镜观镜观察更清察更清察更清察更清楚。楚。楚。楚。 结结果:人果:人果:人果:人类类乳乳乳乳头头瘤病毒感染部位瘤病毒感染部位瘤病毒感染部位瘤病毒感染部位现现百色改百色改百色改百色改变变,为为均匀一致的白色,均匀一致的白色,均匀一致的白色,均匀一致的白色,临临床可疑床可疑床可疑床可疑损损害或害或害或害或临临床未床未床未

41、床未见见皮皮皮皮损损的部位均可出的部位均可出的部位均可出的部位均可出现现白色改白色改白色改白色改变变,直径数毫米至数厘米,直径数毫米至数厘米,直径数毫米至数厘米,直径数毫米至数厘米,形形形形态规则态规则或不或不或不或不规则规则,边边界清楚,也可不什分清楚。界清楚,也可不什分清楚。界清楚,也可不什分清楚。界清楚,也可不什分清楚。75临床意义n n该方法方法简便、便、经济、快速使用方便,敏感、快速使用方便,敏感性性较高,高,对于于临床非典型和床非典型和亚临床感染的床感染的诊断有一定帮助,在治断有一定帮助,在治疗前使用以确定治前使用以确定治疗范范围,为防治或减少治防治或减少治疗后复后复发有一定有一定

42、帮助。但帮助。但该方法的特异性不高,有些慢性方法的特异性不高,有些慢性炎症,例如念珠菌性阴道炎、生殖器部位炎症,例如念珠菌性阴道炎、生殖器部位的外的外伤以及非特异性炎症引起的粘膜上皮以及非特异性炎症引起的粘膜上皮增厚等均可出增厚等均可出现假阳性假阳性结果。果。76n实验室室检查n n显显微微镜检查镜检查 通通过过PapPap涂片涂片发现宫颈发现宫颈麟状上皮内的麟状上皮内的损损害害n n病理学病理学检查检查 符合尖符合尖锐锐湿疣的病理学征象湿疣的病理学征象n n抗原抗原检测检测 免疫免疫组织组织化学化学检测标检测标本本HPVHPV抗原阳性抗原阳性n n核酸核酸扩扩增增实验实验 聚合聚合酶链酶链反

43、反应应法等法等检测检测可疑可疑损损害害标标本中本中HPVHPV核酸阳性核酸阳性 77一、性病实验室的建设基本条件一、性病实验室的建设基本条件1、人员要求实验室人员至少2名以上,其中具有中级卫生技术职称人员至少1名,。实验室技术人员应接受过地方或省级性病检测技术培训,并获得培训证书。2、基本设置(1)实验室根据所开项目的要求进行分区,包括常规性病检测、细菌培养、血清检测、样本接收室以及工作人员休息区等。78n(2)实验室应配置如下设备:普通显微镜、普通离心机、普通冰箱、CO2培养箱(或电热恒温培养箱)、电热烤箱、水浴箱、(酶标读数仪、洗板机)、普通天平、生物安全柜、水平旋转仪(梅毒检测用)、振荡

44、器、加样器(仪)、实验室恒温设备、高压蒸汽灭菌锅,安全防护用品。79开展性病开展性病实验实验室室项项目目(1)(1)n n病病 种种项项 目目n n梅毒梅毒病原体病原体检测检测梅毒螺旋体暗梅毒螺旋体暗视视野野检查检查(根据条件开展)(根据条件开展)非梅毒螺旋体抗原血清非梅毒螺旋体抗原血清试验试验(RPRRPR或或TRUSTTRUST) 梅毒螺旋体抗原血清梅毒螺旋体抗原血清试验试验( TPPA/ELISATPPA/ELISA)n n 淋病淋病涂片革涂片革兰兰染色染色镜检镜检淋球菌培养淋球菌培养氧化氧化酶试验酶试验n n沙眼衣原体感染沙眼衣原体感染抗原抗原检测检测80n n生殖器疱疹生殖器疱疹 抗原抗原检测检测(根据条件开展)(根据条件开展)细细胞培养(根据条件开展)胞培养(根据条件开展)n尖锐湿疣组织病理(根据条件开展)免疫组化(根据条件开展)n阴道滴虫病湿片镜检n念珠菌病10KOH湿片镜检n细菌性阴道病线索细胞检查81n 谢 谢!82

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