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1、凝聚胺方法不规则抗体筛选实验的应用佳木斯市妇幼保健院佳木斯市妇幼保健院佳木斯市妇幼保健院佳木斯市妇幼保健院 【输血科输血科输血科输血科】凝聚胺方法不规则抗体课件项项项项目目目目名称：名称：名称：名称：不规则抗体筛选（凝聚胺法）不规则抗体筛选（凝聚胺法）不规则抗体筛选（凝聚胺法）不规则抗体筛选（凝聚胺法） 性质性质性质性质 1 1引进（引进（引进（引进（ ）自行改良（）自行改良（）自行改良（）自行改良（ ） 起止时间：起止时间：起止时间：起止时间：20102010年年年年2 2月月月月1515日日日日 申申申申请请请请人人人人姓名：姓名：姓名：姓名：梁冰梁冰梁冰梁冰 性别：性别：性别：性别：女女
2、女女 出生时间：出生时间：出生时间：出生时间：19581958年年年年3 3月月月月7 7日日日日职称：职称：职称：职称：主管检验师主管检验师主管检验师主管检验师 职务：职务：职务：职务：输血科主任输血科主任输血科主任输血科主任 凝聚胺方法不规则抗体课件l l开开开开展展展展不不不不规规规规则则则则抗抗抗抗体体体体筛筛筛筛选选选选的的的的预预预预期期期期目目目目的的的的: :ABOABO以以以以外外外外的的的的不不不不规规规规则则则则 抗抗抗抗体体体体是是是是引引引引起起起起血血血血型型型型鉴鉴鉴鉴定定定定困困困困难难难难和和和和交交交交叉叉叉叉配配配配血血血血不不不不合合合合的的的的主主主主
3、要要要要原原原原因因因因, ,因因因因此此此此，对对对对输输输输血血血血前前前前患患患患者者者者进进进进行行行行不不不不规规规规则则则则抗抗抗抗体体体体筛筛筛筛查查查查及及及及鉴鉴鉴鉴定定定定是是是是安安安安全全全全输输输输血血血血的的的的重重重重要要要要保保保保证证证证, ,也也也也是是是是避避避避免免免免或或或或减减减减少少少少医医医医疗疗疗疗纠纠纠纠纷纷纷纷和和和和事事事事故故故故发发发发生的必要手段生的必要手段生的必要手段生的必要手段. .l l开开开开展展展展不不不不规规规规则则则则抗抗抗抗体体体体筛筛筛筛选选选选的的的的临临临临床床床床意意意意义义义义: : 不不不不规规规规则则则
4、则抗抗抗抗体体体体是是是是指指指指 抗抗抗抗-A-A、抗抗抗抗-B-B或或或或抗抗抗抗-AB-AB以以以以外外外外的的的的其其其其他他他他抗抗抗抗体体体体。目目目目前前前前不不不不规规规规则则则则抗抗抗抗体体体体的的的的筛筛筛筛查查查查方方方方法法法法是是是是采采采采用用用用OO型型型型试试试试剂剂剂剂红红红红细细细细胞胞胞胞检检检检测测测测被被被被检检检检者者者者的的的的血血血血清清清清中的不规则抗体。中的不规则抗体。中的不规则抗体。中的不规则抗体。预期目的和意义和实施方案预期目的和意义和实施方案 凝聚胺方法不规则抗体课件l l由由由由于于于于有有有有临临临临床床床床意意意意义义义义的的的的
5、不不不不规规规规则则则则抗抗抗抗体体体体会会会会导导导导致致致致溶溶溶溶血血血血性性性性输输输输血血血血反反反反应应应应，破破破破坏坏坏坏输输输输入入入入的的的的不不不不配配配配合合合合的的的的红红红红细细细细胞胞胞胞或或或或缩缩缩缩短短短短其其其其寿寿寿寿命命命命，产产产产生生生生溶溶溶溶血血血血性性性性输输输输血血血血反反反反应应应应，轻轻轻轻则则则则影影影影响响响响治治治治疗疗疗疗效效效效果果果果，重重重重则则则则危危危危机机机机病病病病人人人人生生生生命命命命；此此此此外外外外，对对对对孕孕妇妇而而而而言言言言，不不不不规规规规则则则则抗抗抗抗体体体体会会会会引引引引起起起起新新新新生
6、生生生儿儿儿儿溶溶溶溶血血血血病病病病，影影影影响响响响新新新新生生生生儿儿儿儿脏脏脏脏器器器器的的的的发发发发育育育育，并并并并使使使使其其其其智智智智力力力力发发发发育育育育受受受受到到到到伤伤伤伤害害害害，严严严严重重重重者者者者则则则则会会会会危危危危及及及及新新新新生生生生儿儿儿儿的的的的生生生生命命命命安安安安全全全全。因因因因此此此此，抗抗抗抗筛筛筛筛选选选选是是是是很必要而且必须的。其筛选的意义主要在于三个方面：很必要而且必须的。其筛选的意义主要在于三个方面：很必要而且必须的。其筛选的意义主要在于三个方面：很必要而且必须的。其筛选的意义主要在于三个方面：凝聚胺方法不规则抗体课件
7、 一一一一、献献献献血血血血者者者者的的的的血血血血清清清清或或或或血血血血浆浆浆浆进进进进行行行行抗抗抗抗体体体体筛筛筛筛查查查查，可可可可以以以以防防防防止止止止含含含含有有有有不不不不规规规规则则则则抗抗抗抗体体体体的的的的血血血血液液液液输输输输注注注注给给给给病病病病人人人人，避避避避免免免免由由由由于于于于献献献献血血血血者者者者血血血血液液液液中中中中的的的的不不不不规规规规则则则则抗抗抗抗体体体体引引引引起起起起病病病病人人人人红红红红细细细细胞胞胞胞的的的的破破破破坏坏坏坏而而而而引引引引起起起起的的的的溶溶溶溶血血血血性性性性输输输输血血血血反反反反应应应应，同同同同时时时
8、时可可可可以以以以减减减减少少少少血血血血液液液液浪浪浪浪费费费费，可可可可将将将将有有有有不不不不规规规规则则则则抗抗抗抗体的血液制备成抗体血清，用于稀有血型的检测。体的血液制备成抗体血清，用于稀有血型的检测。体的血液制备成抗体血清，用于稀有血型的检测。体的血液制备成抗体血清，用于稀有血型的检测。 二二二二、对对对对需需需需要要要要输输输输血血血血治治治治疗疗疗疗的的的的患患患患者者者者，进进进进行行行行不不不不规规规规则则则则抗抗抗抗体体体体筛筛筛筛查查查查，有有有有利利利利于于于于血血血血液液液液的的的的选选选选择择择择，从从从从而而而而有有有有充充充充分分分分的的的的时时时时间间间间来
9、来来来选选选选择择择择不不不不含含含含有有有有针针针针对对对对某某某某抗抗抗抗体体体体的的的的相相相相应应应应抗抗抗抗原原原原的的的的血血血血液液液液，从从从从而而而而防防防防止止止止因因因因为为为为输输输输注注注注含含含含有有有有某某某某抗抗抗抗体体体体相相相相应应应应抗抗抗抗原原原原的的的的血血血血液液液液而而而而引引引引起起起起溶溶溶溶血血血血性性性性输输输输血血血血反反反反应应应应，保保保保证证证证输输输输血血血血安全。安全。安全。安全。凝聚胺方法不规则抗体课件 三三三三、孕孕孕孕妇妇妇妇进进进进行行行行不不不不规规规规则则则则抗抗抗抗体体体体筛筛筛筛查查查查，可可可可以以以以尽尽尽尽
10、早早早早发发发发现现现现不不不不规规规规则则则则抗抗抗抗体体体体，可可可可以以以以在在在在孕孕孕孕期期期期进进进进行行行行新新新新生生生生儿儿儿儿溶溶溶溶血血血血病病病病的的的的预预预预防防防防和和和和治治治治疗疗疗疗，减减减减少少少少不不不不规规规规则则则则抗抗抗抗体体体体对对对对胎胎胎胎儿儿儿儿或或或或新新新新生生生生儿儿儿儿带带带带来来来来的的的的伤伤伤伤害害害害，提提提提高高高高胎胎胎胎儿儿儿儿或新生儿的身体素质。或新生儿的身体素质。或新生儿的身体素质。或新生儿的身体素质。 该该该该项项项项目目目目的的的的实实实实施施施施方方方方案案案案：1 1月月月月3 3日日日日起起起起由由由由科
11、科科科主主主主任任任任带带带带领领领领输输输输血血血血科科科科全全全全体体体体成成成成员员员员对对对对不不不不规规规规则则则则抗抗抗抗体体体体筛筛筛筛选选选选( (凝凝凝凝聚聚聚聚胺胺胺胺法法法法) )的的的的一一一一切切切切知知知知识识识识要要要要点点点点及及及及操操操操作作作作方方方方法法法法进进进进行行行行强强强强化化化化训训训训练练练练。自自自自1 1月月月月1010日日日日开开开开始始始始对对对对不不不不规规规规则则则则抗抗抗抗体体体体筛筛筛筛选选选选试试试试验验验验应应应应用用用用于于于于有有有有输输输输血血血血史史史史、妊妊妊妊娠娠娠娠史史史史的的的的患患患患者者者者。然然然然后
12、后后后通通通通过过过过对对对对各各各各种种种种患患患患者者者者标标标标本本本本检检检检测测测测结结结结果果果果的的的的分分分分析析析析对对对对该该该该项项项项目目目目的的的的操操操操作作作作价价价价值值值值及及及及可可可可以以以以为为为为科科科科室室室室创创创创造造造造的的的的效效效效益益益益进进进进行行行行评评评评价价价价。2 2月月月月1010日日日日上上上上报报报报医医医医务务务务科科科科，并并并并通通通通知知知知临临临临床床床床实实实实施施施施该该该该项项项项目目目目的的的的注注注注意意意意事事事事项项项项。最最最最终终终终于于于于2 2月月月月1515日日日日将将将将该该该该项项项项
13、目目目目应用于临床。应用于临床。应用于临床。应用于临床。凝聚胺方法不规则抗体课件美美国国、日日本本、澳澳大大利利亚亚等等国国家家均均已已将将不不规规则则抗抗体体筛筛查查列列美美国国、日日本本、澳澳大大利利亚亚等等国国家家均均已已将将不不规规则则抗抗体体筛筛查查列列入入常常规规检检测测，而而我我国国卫卫生生行行政政部部门门目目前前尚尚未未要要求求对对献献血血入入常常规规检检测测，而而我我国国卫卫生生行行政政部部门门目目前前尚尚未未要要求求对对献献血血者者进进行行抗抗体体筛筛选选，在在临临床床也也只只有有少少数数医医院院对对患患者者进进行行抗抗者者进进行行抗抗体体筛筛选选，在在临临床床也也只只有有
14、少少数数医医院院对对患患者者进进行行抗抗体体筛筛选选。我我国国目目前前大大多多数数临临床床医医院院输输血血科科（或或血血库库）的的体体筛筛选选。我我国国目目前前大大多多数数临临床床医医院院输输血血科科（或或血血库库）的的配配血血水水平平比比较较落落后后，一一直直沿沿用用室室温温盐盐水水方方法法配配血血，此此方方配配血血水水平平比比较较落落后后，一一直直沿沿用用室室温温盐盐水水方方法法配配血血，此此方方法法只只能能检检出出不不配配合合的的法法只只能能检检出出不不配配合合的的IgMIgM类类抗抗体体，不不能能检检出出不不配配合合的的类类抗抗体体，不不能能检检出出不不配配合合的的IgGIgG抗抗体体
15、，而而抗抗体体，而而ABOABO血血型型系系统统以以外外的的其其他他血血型型系系统统的的绝绝大大多多数数血血型型系系统统以以外外的的其其他他血血型型系系统统的的绝绝大大多多数数该项医疗技术的基本概况该项医疗技术的基本概况 国内外应用情况国内外应用情况 凝聚胺方法不规则抗体课件抗抗体体是是抗抗体体是是IgGIgG性性质质的的抗抗体体，因因此此，含含有有不不规规则则抗抗体体（抗抗性性质质的的抗抗体体，因因此此，含含有有不不规规则则抗抗体体（抗抗- -A A、抗抗- -B B或或抗抗- -A AB B以以外外的的其其他他抗抗体体，如如抗抗- -D D）的的血血液液给给病病人人输输用用后后，此此不不规
16、规则则抗抗体体会会引引起起急急或或迟迟发发性性输输血血反反应应，往往往往给给病病人人生生命命带带来来危危险险。为为提提高高血血液液质质量量，保保证证输输血血患患者者的的输输血血安安全全，提提高高输输血血治治疗疗效效果果，避避免免患患者者输输用用含含有有不不规规则则抗抗体体引引起起的的输输血血反反应应，使使我我院院输输血血事事业业与与世世界界接接轨轨，应应该该对对献献血血者者或或输输血血者者进进行行不不规规则则抗抗体体筛筛选选。凝聚胺方法不规则抗体课件l不不规规则则抗抗体体筛筛选选试试验验（凝凝聚聚胺胺法法）是是在在凝凝聚聚胺胺试试验验法法的的辅辅助助作作用用下下让让受受检检者者血血清清与与特特
17、殊殊试试剂剂红红细细胞胞-筛筛选选红红细细胞胞发发生生免免疫疫反反应应，以以发发现现在在37下下有有活活性性抗抗体体的的试试验验方法。方法。l抗抗体体筛筛选选试试验验（凝凝聚聚胺胺法法）不不一一定定能能检检验验出出所所有有有有临临床床意意义义的的抗抗体体，一一些些低低频频率率抗抗原原产产生生的的抗抗体体或或者者剂剂量量效效应应的的抗抗体体，可可能能被被漏漏检检，这这时时需需选选择择抗抗原原性性更更完完全全和和特特异异性性更更敏敏感感的的筛筛选选细细胞胞做做试试验验，或或用用更更高高敏敏感感度度的的技技术术作检验。作检验。技术路线技术路线 （包括总体安排和进度步骤及其可行性论证）（包括总体安排和
18、进度步骤及其可行性论证） 凝聚胺方法不规则抗体课件总总体体安安排排及及进进度度步步骤骤：1月月3日日起起由由科科主主任任带带领领输输血血科科全全体体成成员员对对不不规规则则抗抗体体筛筛选选(凝凝聚聚胺胺法法)的的一一切切知知识识要要点点及及操操作作方方法法进进行行强强化化训训练练。自自1月月10日日开开始始对对不不规规则则抗抗体体筛筛选选试试验验应应用用于于有有输输血血史史、妊妊娠娠史史的的患患者者。然然后后通通过过对对各各种种患患者者标标本本检检测测结结果果的的分分析析对对该该项项目目的的操操作作价价值值及及可可以以为为科科室室创创造造的的效效益益进进行行评评价价。2月月10日日上上报报医医
19、务务科科，并并通通知知临临床床实实施施该该项项目目的的注注意意事事项项。最最终终于于2月月15日日将将该该项项目目应应用于临床。用于临床。凝聚胺方法不规则抗体课件 1.取取试试管管3支支，各各加加被被检检血血清清（或或血血浆浆）100ul，分分别别加加入入3-5%筛检红细胞各筛检红细胞各50ul。 2.各各加加LIM0.65ml，混混匀匀后后，再再加加入入Polybrene溶溶液液100ul，并混合均匀。，并混合均匀。 3.用用输输血血科科专专用用离离心心机机3400rpm/min离离心心10秒秒，然然后后倒倒掉掉上清液，不要沥干，让管底残留约上清液，不要沥干，让管底残留约0.1ml液体。液体
20、。 4.轻轻轻轻摇摇动动试试管管，目目测测红红细细胞胞有有无无凝凝集集，如如无无凝凝集集，则则必必须重做。须重做。 5.最最后后加加入入Resuspending100ul，轻轻轻轻摇摇动动试试管管混混合合并并同同时时观观察察结结果果。如如凝凝集集散散开开，表表示示由由Polybrene引引起起的的非非特特异异性性凝凝集集，抗抗体体筛筛检检结结果果为为阴阴性性。如如凝凝集集不不散散开开，则则为为红红细细胞胞抗抗原原抗抗体体结结合合的的特特异异性性反反应应，抗抗体体筛筛检检结结果果为为阳阳性性，应应进进一一步步做抗体鉴定。做抗体鉴定。 疗效判定标准疗效判定标准 凝聚胺方法不规则抗体课件l不规则抗体
21、筛选试验（凝聚胺法）不规则抗体筛选试验（凝聚胺法）l适应症：适应症：l第第一一类类产产前前病病人人：测测定定非非典典型型抗抗体体以以排排除除新新生生儿儿溶溶血血病病 发生的可能。发生的可能。l第第二二类类输输血血前前病病人人：确确定定供供应应相相应应抗抗原原阴阴性性血血液液，供供血血 者、受血者之间相容性评估。者、受血者之间相容性评估。l第第三三类类献献血血员员：避避免免有有阳阳性性抗抗体体阳阳性性血血，发发现现稀稀有有血血型型 的献血者。的献血者。l禁忌症：禁忌症：参照静脉采血禁忌症。参照静脉采血禁忌症。 适应症适应症 禁忌症禁忌症 不良反应不良反应 凝聚胺方法不规则抗体课件l质量控制措施质
22、量控制措施：输血科室内质量控制输血科室内质量控制l开开展展该该项项医医疗疗技技术术具具备备的的条条件件：（包包括括课课题题负负责责人人的的学学术术水水平平和和学学术术地地位位、技技术术力力量量、现现有有仪仪器器设设备备、实实验验动动物物、试试剂剂及对本课题已做了哪些工作等）及对本课题已做了哪些工作等）l人人员员配配置置：中中级级及及以以上上职职称称1人人，检检验验师师1人人，护护师师1人人，检检验士验士2人。人。l设设备备要要求求：常常温温冰冰箱箱2台台（分分别别存存放放试试剂剂和和患患者者血血液液标标本本）、Baso离心机离心机1台、奥林巴斯光学显微镜台、奥林巴斯光学显微镜1台、校准加样器台
23、、校准加样器2支。支。l试试剂剂要要求求：BASO凝凝聚聚胺胺介介质质试试剂剂、不不规规则则抗抗体体筛筛选选专专用用细细胞、输血科专用试管若干、试管架。胞、输血科专用试管若干、试管架。凝聚胺方法不规则抗体课件2010年新技术新项目应用反馈情况年新技术新项目应用反馈情况科别：科别： 输血科输血科 负责人：负责人： 梁冰梁冰 项目名称：项目名称：不规则抗体筛选（凝聚胺法）不规则抗体筛选（凝聚胺法） 完成例数：完成例数：1350例例 经济收入：经济收入：70350元元 开开展展情情况况简简介介：开开展展不不规规则则抗抗体体筛筛选选以以来来，由由于于临临床床医医生生的的大大力力配配合合，输输血血科科同同仁仁的的不不懈懈努努力力，在在检检查查的的1350例例患患者者中中发发现现5例例带带有有不不规规则则抗抗体体的的患患者者，其其中中男男性性患患者者1人人(该该患患者者有有多多次次输输血血史史。)；女女性性患患者者4例例，其其中三例有妊娠史，中三例有妊娠史，1例有输血史和妊娠史。例有输血史和妊娠史。 凝聚胺方法不规则抗体课件 谢谢大家！谢谢大家！凝聚胺方法不规则抗体课件
