荚膜真菌观察

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1、 实验三、细菌荚膜、真菌形态观察实验三、细菌荚膜、真菌形态观察一、菌种一、菌种 1 1、细菌荚膜：细菌荚膜：胶质芽胞杆菌（胶质芽胞杆菌（Bacillus mucilaginosus） 2 2、真菌真菌：（：（2 2）葡枝根霉）葡枝根霉 （Rhizopus stolonifer）：）： 观察观察孢囊孢子，假根孢囊孢子，假根 （3 3）黑曲霉）黑曲霉 （Aspergillus niger）：）： 观察观察分生孢子，足细胞分生孢子，足细胞 （4 4）青霉）青霉 （Penicillium sp.）：）： 观察观察帚状分生孢子梗帚状分生孢子梗 二、实验步骤二、实验步骤（一）水浸片法观察（一）水浸片法观察

2、黑曲霉：黑曲霉： 用解剖针挑取少量用解剖针挑取少量黑黑曲霉菌块（适当带一点培养基）曲霉菌块（适当带一点培养基）放在载玻片的一侧放在载玻片的一侧, ,滴上滴上5050乙醇一滴乙醇一滴, ,用解剖针轻轻拨动洗涤。在同一玻片的另一侧加一滴蒸用解剖针轻轻拨动洗涤。在同一玻片的另一侧加一滴蒸馏水，将洗去分生孢子的菌丝置于蒸馏水中，用解剖针将菌丝尽量分散，馏水，将洗去分生孢子的菌丝置于蒸馏水中，用解剖针将菌丝尽量分散，盖盖上盖玻片，用橡皮或塑料轻轻敲击，上盖玻片，用橡皮或塑料轻轻敲击，1010x x，40x 40x 物镜观察菌丝、足细胞、物镜观察菌丝、足细胞、分生孢子梗、顶囊。分生孢子梗、顶囊。5050乙

3、醇乙醇菌块在乙醇菌块在乙醇中洗去孢子中洗去孢子菌块移入水滴菌块移入水滴盖玻片压散菌块盖玻片压散菌块 ( (二二) )水浸片法观察水浸片法观察假丝酵母：从菌苔生长边缘挑一小块菌体假丝酵母：从菌苔生长边缘挑一小块菌体, ,放载玻放载玻 片上片上, , 滴一滴蒸馏水一滴蒸馏水, ,盖上盖玻片，用橡皮或塑料轻轻敲击，盖上盖玻片，用橡皮或塑料轻轻敲击， 10 10x x，40x 40x 物镜观察物镜观察（三）插片法（三）插片法观察青霉观察青霉 从培养青霉的平板中拔出一片盖玻片从培养青霉的平板中拔出一片盖玻片, ,沿盖玻片斜插的角度拨出沿盖玻片斜插的角度拨出, , 每人限拔一片每人限拔一片. .盖玻片放于

4、干净载玻片上盖玻片放于干净载玻片上, , 用用10x 10x ，40x 40x 观察观察 青霉的菌丝和帚状分生孢子梗青霉的菌丝和帚状分生孢子梗 （青霉的分生孢子梗上有成串分生孢子（青霉的分生孢子梗上有成串分生孢子, ,可能遮住帚状分生孢子梗可能遮住帚状分生孢子梗) )（四（四) )解剖镜解剖镜观察观察根霉：根霉： 将培养根霉的培养皿盖开口向上将培养根霉的培养皿盖开口向上, ,放于解剖镜上放于解剖镜上, , 直接观察菌丝、直接观察菌丝、 假根、孢子囊。假根、孢子囊。（五）荚膜染色（五）荚膜染色( (负染色法负染色法) ) 1 1、涂片：接种环取胶质芽胞杆菌、涂片：接种环取胶质芽胞杆菌( (多取点

5、多取点) )浸放入水滴（少量）中浸放入水滴（少量）中, , 充分混匀并涂片充分混匀并涂片, ,涂片面积尽量大涂片面积尽量大, ,不必干燥即可进行下步不必干燥即可进行下步: : 2 2、刮片：在载玻片的一侧加一滴黑素，另取边缘平整的载玻片，、刮片：在载玻片的一侧加一滴黑素，另取边缘平整的载玻片， 以以3030O O角将其边缘浸入黑素中向右端拖动角将其边缘浸入黑素中向右端拖动( (只拖一次只拖一次) )，将黑素，将黑素 涂成一薄层。涂成一薄层。 3 3、镜检：、镜检：1010x x ，40x 40x 物镜观察物镜观察 （注意物镜不要接触黑素，不要用注意物镜不要接触黑素，不要用100x100x油镜观察油镜观察）荚膜染色图示荚膜染色图示拖动黑素黑素 菌体涂片菌体荚膜三、作业三、作业 绘制胶质芽胞杆菌绘制胶质芽胞杆菌 (40x)、 根霉根霉 ( (解剖镜或普通显微镜解剖镜或普通显微镜1010x x) )、青霉、青霉 (40 (40x x) )、黑曲霉、黑曲霉(40(40x x) ) 、假丝酵母假丝酵母(40X)(40X)形态，形态，注明各部分名称。注明各部分名称。根霉青霉 黑曲霉假丝酵母