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1、第三次实验第三次实验感染动物的尸解、病原性细菌感染动物的尸解、病原性细菌1试管架上器材：按接种针、接种环、油性笔分别放置在试试管架上器材：按接种针、接种环、油性笔分别放置在试管架中间两行。管架中间两行。器材使用以后，必须放回原处，依次摆整器材使用以后，必须放回原处，依次摆整齐。齐。2实验室器材实验室器材 整齐有序整齐有序,值日生最后整理要求如图。值日生最后整理要求如图。3病原性球菌病原性球菌 Pathogenic cocci葡萄球菌属葡萄球菌属 Staphylococcus金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌 S. aureas链球菌属球菌属 Streptococcus链球菌球菌肺炎肺炎链球菌球菌 S
2、. pneumoniae奈瑟菌属奈瑟菌属 Neisseria脑膜炎奈膜炎奈瑟菌瑟菌 N. meningitidis淋病奈淋病奈瑟瑟菌菌 N. gonorrhoeae 41.1.病原性球菌的形病原性球菌的形态染色染色镜下下观察与血平板察与血平板培养特点（示教）培养特点（示教）2.2.病原性球菌的胞外病原性球菌的胞外酶试验1 1）致病性葡萄球菌的血）致病性葡萄球菌的血浆凝固凝固酶试验血血浆凝固凝固酶试管法（示教）管法（示教）血血浆凝固凝固酶玻片法（个人操作）玻片法（个人操作）2 2）透明）透明质酸酸酶试验（示教）（示教）3.3.肺炎肺炎链球菌感染小白鼠，尸解小白鼠球菌感染小白鼠，尸解小白鼠 肺炎肺
3、炎链球菌球菌荚膜染色（个人操作）膜染色（个人操作）51 1、病原性球菌的形态染色镜下观察与血、病原性球菌的形态染色镜下观察与血平板培养特点平板培养特点镜下示教片：下示教片：葡萄球菌、葡萄球菌、链球菌、肺炎球菌、肺炎链球菌、球菌、脑膜炎球菌膜炎球菌（形状、大小、排列、染色（形状、大小、排列、染色 ）菌落菌落观察：察：金葡、白葡、乙型溶血性金葡、白葡、乙型溶血性链球菌球菌（形（形态、大小、表面、大小、表面、边缘、透明度、色素、透明度、色素、溶血性）溶血性）6葡萄球菌葡萄球菌链球菌链球菌7脑膜炎球菌脑膜炎球菌8金葡菌普通平板金葡菌普通平板9金葡菌血平板金葡菌血平板10表皮葡萄球菌血平板表皮葡萄球菌血
4、平板11色素溶血素甘露醇发酵血浆凝固酶耐热核酸酶致病性葡萄球菌金葡金黄色非致病性葡萄球菌表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌白色或柠檬色鉴别致病性葡萄球菌与非致病性葡萄球菌鉴别致病性葡萄球菌与非致病性葡萄球菌5大指标大指标12乙型溶血性乙型溶血性链球菌血平板球菌血平板甲型溶血性链球菌血平板甲型溶血性链球菌血平板132 2、病原性球菌的胞外酶试验、病原性球菌的胞外酶试验1）致病性葡萄球菌的血浆凝固酶试验致病性葡萄球菌的血浆凝固酶试验问：致病性葡萄球菌血：致病性葡萄球菌血浆凝固凝固酶有几种形式？有几种形式？作用机制各如何？作用机制各如何？血血浆凝固凝固酶试管法（示教管法（示教）血血浆凝固凝固酶玻片法（个人操作
5、）玻片法（个人操作）14（1）标记后，生理后，生理盐水各水各1滴滴（2）无菌操作，取菌苔少）无菌操作，取菌苔少许，与，与N.S. 混匀，混匀，观察有无自凝察有无自凝（3）各加兔血）各加兔血浆1滴，混匀滴，混匀（4）观察察现象：象：出出现颗粒状凝集：粒状凝集：不凝集：不凝集：白葡金葡（5）得出结论：）得出结论：15玻片法玻片法16试管法试管法血浆凝固酶使血浆凝固血浆凝固酶使血浆凝固172、病原性球菌的胞外酶试验、病原性球菌的胞外酶试验2）透明质酸酶试验）透明质酸酶试验（1）分组：实验组：0.5ml溶血性链球菌培养物滤液+1%胎盘蓝对照组：0.5ml生理盐水+1%胎盘蓝（2）取家兔一只，将其背部两
6、侧对应部位剪毛、消毒（3）于家兔背部两侧分别皮内注射混合物0.5ml（4）注射完毕立即测量两侧胎盘蓝扩散直径，1h后再次测量两侧胎盘蓝直径（5）观察结果，得出结论18对照组对照组试验组试验组注射混合物后：注射混合物后：19试验组试验组对照组对照组60分钟后：分钟后：203.3.肺炎链球菌感染小白鼠，尸解小白鼠肺炎链球菌感染小白鼠，尸解小白鼠212223243. 3. 肺炎肺炎链球菌球菌HissHiss荚膜染色（个人操作）膜染色（个人操作）取小鼠腹腔液取小鼠腹腔液涂片（均匀）涂片（均匀）自然干燥自然干燥1%结晶紫结晶紫20%硫酸铜夜冲洗硫酸铜夜冲洗 吸干、镜检吸干、镜检 倾去多余染液倾去多余染液2225染色结果：染色结果： 背景背景-紫色、菌体紫色、菌体-紫色、荚膜紫色、荚膜-无色无色26作作业绘图注意事注意事项：用用红蓝蜡笔蜡笔绘图。注意菌体大小合适注意菌体大小合适标出菌体出菌体颜色，色，显示肺炎双球菌典型排列方式示肺炎双球菌典型排列方式特殊特殊结构构荚膜膜显示淡紫色或无色，示淡紫色或无色，荚膜无壁膜无壁结构，构，绘图时一定注意一定注意27
