《人教版高中生物选修3专题2.2.2动物细胞融合与单体克隆抗体共53张PPT》由会员分享，可在线阅读，更多相关《人教版高中生物选修3专题2.2.2动物细胞融合与单体克隆抗体共53张PPT（53页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、专题2细胞工程动物细胞融合与单克隆抗体 2002年年12月月30日，日， 两场筹备了两场筹备了10年的年的“太太空婚礼空婚礼”首次在神舟四号飞船上举行，首次在神舟四号飞船上举行，植物细胞植物细胞“新人新人”黄花烟草黄花烟草和和革新一号烟草革新一号烟草叶肉细胞叶肉细胞原原生质体生质体，动物细胞动物细胞“新人新人”是小鼠是小鼠B淋巴细胞淋巴细胞和和骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞，两批新人同时在，两批新人同时在 “产房产房”电融合电融合仪内孕育新生命。仪内孕育新生命。“太空婚礼太空婚礼”这两场这两场“太空婚礼太空婚礼”实质是哪两项细胞工程技实质是哪两项细胞工程技术术植物体细胞杂交技术植物体细胞杂交技术动物细胞
2、融合技术动物细胞融合技术知识回顾知识回顾？再分化再分化？植物细胞杂交植物细胞杂交技术利用什么技术利用什么原理？原理？用什么方法可用什么方法可以诱导植物细以诱导植物细胞融合？胞融合？一、原理：一、原理：细胞膜具有流动性细胞膜具有流动性细胞的全能性细胞的全能性二、诱导方法：二、诱导方法：电刺激、聚乙二醇电刺激、聚乙二醇植物细胞杂交植物细胞杂交技术有什么用技术有什么用途？途？三、用途：三、用途：获得杂种植株获得杂种植株脱分化脱分化A细胞细胞B细胞细胞人工诱导人工诱导1.11.1动物动物细胞融合的概念细胞融合的概念杂交细胞杂交细胞 动物细胞融合（也称细胞杂动物细胞融合（也称细胞杂交）：是指交）：是指两
3、个或多个细胞两个或多个细胞融融合形成一个合形成一个单核细胞单核细胞的过程。的过程。一、动物细胞融合一、动物细胞融合阅读课本阅读课本P52P52及识图及识图2-232-23，并完，并完成学案第成学案第1 1页页【学习过程学习过程】细胞膜的流动性细胞膜的流动性灭活病毒、灭活病毒、PEGPEG、电激等、电激等融合后的细胞进行有丝分裂，融合后的细胞进行有丝分裂，形成完整的杂交细胞形成完整的杂交细胞诱导的手段？诱导的手段？融合后细胞的类型？融合后细胞的类型？ABAB杂种细胞遗传物质杂种细胞遗传物质有什么特点？有什么特点？三种三种AAAA、ABAB、BBBB（A A、B B）含两种生物的遗传物质含两种生物
4、的遗传物质1.21.2动物细胞融合过程动物细胞融合过程原理？原理？1.21.2动物细胞融合过程动物细胞融合过程 为什么灭活的为什么灭活的病毒能作诱导剂病毒能作诱导剂？灭活丧失感染性灭活丧失感染性保留融合活性保留融合活性灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面细胞膜被病毒颗粒穿通细胞膜被病毒颗粒穿通细胞膜被病毒颗粒穿通细胞膜被病毒颗粒穿通细胞膜连接细胞膜连接细胞膜连接细胞膜连接细胞融合，形成杂交细胞细胞融合，形成杂交细胞细胞融合，形成杂交细胞细胞融合，形成杂交细胞（细胞膜具有一定的流动性）（细胞膜具有一定的流动性）（细胞膜具
5、有一定的流动性）（细胞膜具有一定的流动性）1.31.3动物动物细胞融合技术的意义和应用细胞融合技术的意义和应用1.4 1.4 比较动、植物细胞杂交技术比较动、植物细胞杂交技术【例例1】能使动物细胞融合的特有的诱导因子是能使动物细胞融合的特有的诱导因子是 （ ）A.离心离心 B.灭活的病毒灭活的病毒 C.电刺激电刺激 D.振动振动【例例2】融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点（融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点（ ）A.具有原来两个或多个细胞的遗传信息具有原来两个或多个细胞的遗传信息 B.能无限增殖能无限增殖 C.可形成新个体可形成新个体 D.培养过程会贴壁培养过程会贴壁【例例3】动物细胞融合的作
6、用中最重要的是（动物细胞融合的作用中最重要的是（ ）A.克服远源杂交不亲和克服远源杂交不亲和 B.制备单克隆抗体制备单克隆抗体 C.培育新物种培育新物种 D.生产杂种细胞生产杂种细胞 BBA强调：强调：效应效应B淋巴细胞是淋巴细胞是能够产生抗体的能够产生抗体的B淋巴细淋巴细胞，下文将其简称为胞，下文将其简称为B淋淋巴细胞巴细胞抗体：能够与抗原发生特抗体：能够与抗原发生特异性结合的异性结合的免疫球蛋白免疫球蛋白。能产生抗体的细胞是能产生抗体的细胞是浆细浆细胞（即效应胞（即效应B细胞）。细胞）。二、单克隆抗体二、单克隆抗体B B B B淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞效应效应效应效应B B B B
7、淋巴淋巴淋巴淋巴细胞细胞细胞细胞记忆记忆记忆记忆B B B B淋巴淋巴淋巴淋巴细胞细胞细胞细胞分化分化分化分化抗体的传统生产方法抗体的传统生产方法抗原抗原 反复注射动物反复注射动物从动物的从动物的血清血清中分离抗体中分离抗体该法制备抗体的缺点：该法制备抗体的缺点：产量低、纯度低，且抗产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度体的特异性差、灵敏度低。低。单克隆抗体！单克隆抗体！人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的体内的B B淋巴细胞可以产生多达百万种以上淋巴细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每一个的特异性抗体，但是每一个B B细胞只分泌一细胞
8、只分泌一种特异性抗体。要想获得大量的单一抗体，种特异性抗体。要想获得大量的单一抗体，必须克隆单一的必须克隆单一的B B淋巴细胞，形成细胞群淋巴细胞，形成细胞群。 请从以上文字资料中找出请从以上文字资料中找出单克隆抗体单克隆抗体的概念的概念用用单个单个B B淋巴细胞淋巴细胞进行（无性繁殖）克进行（无性繁殖）克隆，得到的隆，得到的基因型相同基因型相同的的细胞群能够分细胞群能够分泌一种泌一种化学性质单一化学性质单一、特异性强特异性强的抗体，的抗体，这种抗体就叫做单克隆抗体这种抗体就叫做单克隆抗体。2.1单克隆抗体的概念单克隆抗体的概念单克隆抗体的特点单克隆抗体的特点 人们发现，在动物发生免疫反应的过
9、程中，体内的人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B B细胞细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B B细胞只细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个单一抗体，必须用单个B B细胞进行无性繁殖，即克隆。细胞进行无性繁殖，即克隆。单克隆单克隆抗体：单个抗体：单个B B细胞克隆产生的细胞克隆产生的化学性化学性质单一、特异性强质单一、特异性强的抗体的抗体思考：思考：思考：思考：1、在体外培养的条件下，一个、在体外培养的条件下，一个B淋巴细胞有没淋巴细胞
10、有没有可能无限增殖？有可能无限增殖？不可能不可能2、我们学过的什么细胞具有这样的能力？、我们学过的什么细胞具有这样的能力？癌细胞癌细胞3、有什么办法让、有什么办法让B淋巴细胞也具有这样的能力？淋巴细胞也具有这样的能力？细胞融合细胞融合一个一个B B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体淋巴细胞只分泌一种特异性抗体骨髓瘤细胞（癌细胞）能无限增殖骨髓瘤细胞（癌细胞）能无限增殖杂种细胞杂种细胞动物细胞培养技术动物细胞培养技术、实验原理：、实验原理：动物细胞融合动物细胞融合创始人：米尔斯坦创始人：米尔斯坦创始人：米尔斯坦创始人：米尔斯坦单克隆单克隆抗体抗体既能产生特异性抗既能产生特异性抗体，又能大量繁殖体，又能
11、大量繁殖柯勒柯勒柯勒柯勒一个一个B B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖骨髓瘤细胞能无限增殖杂交瘤细胞杂交瘤细胞动物细胞培养技术动物细胞培养技术设计方案：设计方案：动物细胞融合技术动物细胞融合技术单克隆单克隆抗体抗体 既能产生特异性抗体，既能产生特异性抗体， 又能大量增殖的细胞又能大量增殖的细胞19751975年英国科学家年英国科学家米尔斯坦米尔斯坦和和柯勒柯勒的实验的实验3.3.过程：过程：免疫动免疫动物物注射抗原的目的是注射抗原的目的是什么？什么？获得能产生相应抗体的获得能产生相应抗体的B淋巴细胞（浆细胞）淋巴细胞（浆细胞）诱导细胞融合常诱导细胞
12、融合常用方法是什么？用方法是什么？灭活的仙灭活的仙台病毒台病毒如何进行筛选？如何进行筛选？具有筛选作用的培具有筛选作用的培养基（养基（HAT培养基）培养基）？种？种BB 、B瘤瘤 、瘤瘤瘤瘤 、杂交杂交细胞细胞如何获得大量的如何获得大量的单克隆抗体？单克隆抗体？免疫免疫B细胞和骨髓瘤细胞的制细胞和骨髓瘤细胞的制备备细胞融细胞融合合杂交瘤细胞的选择培养杂交瘤细胞的选择培养杂交瘤细胞的筛选杂交瘤细胞的筛选分泌单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立分泌单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立单克隆抗体的大量制备单克隆抗体的大量制备克隆化培养筛选（多孔细胞培养板克隆化培养筛选（多孔细胞培养板专一抗体阳性检测专一抗体阳性检测
13、4 4.如何进行杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化培养？如何进行杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化培养？融合后的细胞经选择性培养基培养后，能存活的细融合后的细胞经选择性培养基培养后，能存活的细胞就是杂交瘤细胞。但这些杂交瘤细胞并非都是能胞就是杂交瘤细胞。但这些杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞，通常用分泌所需抗体的细胞，通常用“有限稀释法有限稀释法”来选来选择。将杂交瘤细胞稀释，用多孔细胞培养板培养，择。将杂交瘤细胞稀释，用多孔细胞培养板培养，使每孔细胞不超过一个，通过培养让其增殖。然后使每孔细胞不超过一个，通过培养让其增殖。然后检测各孔上清液中细胞分泌的抗体（常用酶联免疫检测各孔上清液中细胞分泌的抗
14、体（常用酶联免疫吸附试验法），那些上清液可与特定抗原结合的培吸附试验法），那些上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔。阳性孔中的细胞还不能保证是来自养孔为阳性孔。阳性孔中的细胞还不能保证是来自单个细胞，挑选阳性孔的细胞继续进行有限稀释，单个细胞，挑选阳性孔的细胞继续进行有限稀释，一般需进行一般需进行3 34 4次，直至确信每个孔中增殖的细胞次，直至确信每个孔中增殖的细胞为单克隆细胞。该过程即为杂交瘤细胞的克隆化培为单克隆细胞。该过程即为杂交瘤细胞的克隆化培养。养。在多孔培养板上，在每孔只有一个杂交瘤在多孔培养板上，在每孔只有一个杂交瘤细胞的情况下，培养得到的细胞群是单个细胞的情况下，培养得到的
15、细胞群是单个杂交瘤细胞克隆得来的，所以产生的抗体杂交瘤细胞克隆得来的，所以产生的抗体必然是化学性质单一的，特异性强的单克必然是化学性质单一的，特异性强的单克隆抗体。这里的隆抗体。这里的单克隆单克隆确有确有单个细胞克隆单个细胞克隆的含义，只不过的含义，只不过克隆的克隆的不是不是B B淋巴细胞，而淋巴细胞，而是杂交瘤细胞是杂交瘤细胞。 杂交瘤细胞既能迅速大量繁殖，又能产生杂交瘤细胞既能迅速大量繁殖，又能产生专一抗体。专一抗体。过程：过程：抗原抗原小鼠小鼠效应效应B B细胞细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞细胞融合、筛选细胞融合、筛选多孔培养板单个细胞培养，筛选多孔培养板单个细胞培养，筛选
16、能产生特定抗体的能产生特定抗体的细胞群细胞群体外培养体外培养 体内培养体内培养提取出单克隆抗体提取出单克隆抗体单抗制备过程分哪几步？单抗制备过程分哪几步？请用箭头把以下代表单克隆抗请用箭头把以下代表单克隆抗体制备过程步骤的图解的字母按正确顺序连接起来。顺体制备过程步骤的图解的字母按正确顺序连接起来。顺序是？序是？ 思考与探究思考与探究1.1.植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术有植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术有什么不同？什么不同？植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术基本相植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术基本相同，同，不同的是植物体细胞融合前需去掉细胞壁，不同的是植物体细胞融合前需去掉
17、细胞壁，然后再融合；动物细胞融合是两个体细胞直接融然后再融合；动物细胞融合是两个体细胞直接融合。合。 诱导融合方法不同：动物细胞诱导融合所用的方诱导融合方法不同：动物细胞诱导融合所用的方法比植物体细胞杂交多一类灭活的病毒诱导；结法比植物体细胞杂交多一类灭活的病毒诱导；结果不同：植物体细胞杂交培养成了杂种植株，而果不同：植物体细胞杂交培养成了杂种植株，而动物细胞融合只培养出了杂交细胞。动物细胞融合只培养出了杂交细胞。 2.2.制备单克隆抗体时，为什么要选用制备单克隆抗体时，为什么要选用B B淋巴细淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞？胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞？哺乳动物感染抗原后，其体内
18、会形成相应的哺乳动物感染抗原后，其体内会形成相应的B B淋巴细淋巴细胞，胞，B B淋巴细胞能分泌相应的抗体凝聚或杀死这些抗淋巴细胞能分泌相应的抗体凝聚或杀死这些抗原。动物在免疫反应的过程中，每一种原。动物在免疫反应的过程中，每一种B B淋巴细胞能淋巴细胞能分泌一种特异性抗体，要想获得大量的特异性抗体，分泌一种特异性抗体，要想获得大量的特异性抗体，必须使能分泌该单一抗体的必须使能分泌该单一抗体的B B淋巴细胞大量增殖。淋巴细胞大量增殖。B B淋淋巴细胞具有产生单一抗体的能力，但不能在体外增殖；巴细胞具有产生单一抗体的能力，但不能在体外增殖；骨髓瘤细胞是一种癌细胞，它能在体外培养条件下无骨髓瘤细胞
19、是一种癌细胞，它能在体外培养条件下无限增殖，但不能产生抗体。限增殖，但不能产生抗体。因此，把一种因此，把一种B B淋巴细胞淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合，产生与骨髓瘤细胞进行细胞融合，产生杂交瘤细胞，它会杂交瘤细胞，它会兼有两个亲本细胞的特性兼有两个亲本细胞的特性在体外培养条件下能不在体外培养条件下能不断增殖，同时能产生出某种特异性的抗体。断增殖，同时能产生出某种特异性的抗体。 3 3.为什么不只用两个而要用多个细胞进行动物细胞为什么不只用两个而要用多个细胞进行动物细胞间的融合？间的融合？就目前常用的细胞融合方法来看，不管是用物理的、化学就目前常用的细胞融合方法来看，不管是用物理的、化学的方
20、法，还是生物的方法，其融合率都不可能是的方法，还是生物的方法，其融合率都不可能是100%100%。仅。仅用两个细胞融合，其效率太低，不一定能得到融合细胞。用两个细胞融合，其效率太低，不一定能得到融合细胞。更重要的是，即使两个细胞已发生融合，但并不一定是研更重要的是，即使两个细胞已发生融合，但并不一定是研究者期望得到的细胞类型。目前动物细胞融合技术最有价究者期望得到的细胞类型。目前动物细胞融合技术最有价值的应用就是单克隆抗体的制备。我们以制备单克隆抗体值的应用就是单克隆抗体的制备。我们以制备单克隆抗体为例来说明这一问题。我们知道，体内产生的特异性抗体为例来说明这一问题。我们知道，体内产生的特异性
21、抗体种类可多达百万种以上，但是每一个种类可多达百万种以上，但是每一个B B淋巴细胞只分泌一淋巴细胞只分泌一种特异性抗体，如果仅取一个脾细胞（含种特异性抗体，如果仅取一个脾细胞（含B B淋巴细胞）和淋巴细胞）和一个瘤细胞杂交，我们不能确定该脾细胞分泌的抗体是否一个瘤细胞杂交，我们不能确定该脾细胞分泌的抗体是否正是我们所需要的；若用大量的脾细胞和瘤细胞进行融合，正是我们所需要的；若用大量的脾细胞和瘤细胞进行融合，就可以从融合细胞中筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞就可以从融合细胞中筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。 2.3单克隆抗体的应用单克隆抗体的应用诊断试剂诊断试剂最广泛应用最广泛应用准确、高效
22、、简易、快速准确、高效、简易、快速单克隆抗体最主要的优点：单克隆抗体最主要的优点：特异性强，灵敏特异性强，灵敏度高，并能大量制备。度高，并能大量制备。“生物导弹生物导弹” 单克隆抗体药物单克隆抗体药物 单抗导向，药物为弹头单抗导向，药物为弹头治疗疾病和运载药物治疗疾病和运载药物主要用于治疗主要用于治疗癌症治疗癌症治疗，单克隆抗体作为载体，运载抗，单克隆抗体作为载体，运载抗癌药物，形成癌药物，形成“生物导弹生物导弹”，准确杀伤癌变细胞。准确杀伤癌变细胞。两个过程两个过程动物细胞培养过程动物细胞培养过程单克隆抗体制备过程单克隆抗体制备过程三个三个“一一”一个诱导细胞融合的新方法一个诱导细胞融合的新
23、方法 灭活病毒灭活病毒一个新细胞杂交瘤细胞一个新细胞杂交瘤细胞一个优势单克隆抗体特异性一个优势单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势强、灵敏度高的优势【例例4 4】科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（ ）A.A.经过免疫的经过免疫的B B淋巴细胞淋巴细胞 C.C.经过免疫的经过免疫的T T淋巴淋巴细胞细胞B.B.不经过免疫的不经过免疫的T T淋巴细胞淋巴细胞 D.D.不经过免疫的不经过免疫的B B淋淋巴细胞巴细胞【例例5 5】
24、单克隆抗体是由下列哪种细胞产生的单克隆抗体是由下列哪种细胞产生的 （ ）A.A.B B淋巴细胞淋巴细胞 B BT T淋巴细胞淋巴细胞 C C骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞 D D杂交瘤细胞杂交瘤细胞AD【例例6】用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中列实验步骤中错误错误的是（的是（ ）A A将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B B淋巴淋巴细胞细胞B B用纤维素酶处理用纤维素酶处理B B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞C C用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B B淋巴淋
25、巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合D D筛选杂交细胞，并从中选出能产生所需抗体的筛选杂交细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体细胞群，培养后提取单克隆抗体B练习：练习：1 1、动物细胞融合和植物原生质体融合比较，、动物细胞融合和植物原生质体融合比较，在动物细胞融合中有特殊性的是（在动物细胞融合中有特殊性的是（ ）A A、融合的原理、融合的原理 B B、融合的优点、融合的优点C C、融合的诱导手段、融合的诱导手段 D D、融合的过程、融合的过程练习：练习：2 2、动物细胞融合的目的中最重要的是（、动物细胞融合的目的中最重要的是（ ）A A、克服远缘杂交不亲和
26、、克服远缘杂交不亲和 B B、制备单克隆抗体、制备单克隆抗体C C、培育新物种、培育新物种 D D、生产杂种细胞、生产杂种细胞练习：练习：3 3、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（体，与骨髓瘤细胞融合的是（ ） A A、经过免疫的、经过免疫的B B淋巴细胞淋巴细胞 B B、不经过免疫的、不经过免疫的T T淋巴细胞淋巴细胞 C C、经过免疫的、经过免疫的T T淋巴细胞淋巴细胞 D D、不经过免疫的、不经过免疫的B B淋巴细胞淋巴细胞练习：练习：4.
27、 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ ） 淋巴细胞淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞小鼠骨髓瘤细胞B淋巴细胞自身融淋巴细胞自身融 合细胞合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 杂交瘤细胞杂交瘤细胞 A B C D 练习：练习：5 5、研究单克隆抗体治疗癌症的思路是（、研究单克隆抗体治疗癌症的思路是（ ）A A利用单克隆抗体特异性地对抗癌细胞利用单克隆抗体特异性地对抗癌细胞 B
28、B以单克隆抗体作抗癌药物杀死癌细胞以单克隆抗体作抗癌药物杀死癌细胞C C抗癌物质在克隆细胞中大量合成抗癌物质在克隆细胞中大量合成D D单克隆抗体携带抗癌药物特异性地与癌细胞单克隆抗体携带抗癌药物特异性地与癌细胞结合结合练习：练习：6 6只能使动物细胞融合的常用诱导方法（只能使动物细胞融合的常用诱导方法（ ） A APEGPEG B B灭活的病毒灭活的病毒 C C电刺激电刺激 D D离心离心7 7、“生物导弹生物导弹”是指是指 （ ） A.A.单克隆抗体单克隆抗体 B.B.杂交瘤细胞杂交瘤细胞 C.C.产生特定抗体的产生特定抗体的B B淋巴细胞淋巴细胞 D.D.在单抗上连接抗癌药物在单抗上连接抗
29、癌药物练习：练习：8 8、下列关于单克隆抗体的制备和应用的叙述中，、下列关于单克隆抗体的制备和应用的叙述中，不正确的是（不正确的是（ ）A AB B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合，一般不淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合，一般不 需要灭活的仙台病毒或聚乙二醇诱导需要灭活的仙台病毒或聚乙二醇诱导B B融合后形成的杂交瘤细胞既能无限增殖，又融合后形成的杂交瘤细胞既能无限增殖，又 能产生单克隆抗体能产生单克隆抗体C C体外培养时，一个效应体外培养时，一个效应B B淋巴细胞可以产生淋巴细胞可以产生 抗体，但不能无限增殖抗体，但不能无限增殖D D单克隆抗体与常规抗体相比，特异性强，灵单克隆抗体与常规抗体相比，特异性
30、强，灵 敏度高，优越性明显敏度高，优越性明显A9. 9. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B B淋巴细胞淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ ） 淋巴细胞淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞小鼠骨髓瘤细胞B B淋巴细胞自身融合细胞淋巴细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞 A A B B C C D D C(1)(1)若若A A细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则B B细胞是取自小
31、鼠细胞是取自小鼠体内的体内的 细胞，细胞，从小鼠体内提取分离该细胞之从小鼠体内提取分离该细胞之前，应给小鼠注射前，应给小鼠注射_类物质。类物质。（2）d过程过程是一个是一个_过程，该过程的进过程，该过程的进行常用行常用_或或_的诱导。的诱导。(3)(3)假设仅考虑某两个细胞的融合，则可形成假设仅考虑某两个细胞的融合，则可形成 种种类型的类型的C C细胞，因此需用细胞，因此需用_培养基筛选出培养基筛选出D D细胞细胞用于培养，用于培养，D D细胞的名称是细胞的名称是 ，其特点是，其特点是_。效应效应B 抗原抗原 细胞融合细胞融合 聚乙二醇聚乙二醇 灭活的病毒灭活的病毒 选择性选择性 3既能无限增
32、殖又能产生特异性抗体既能无限增殖又能产生特异性抗体 杂交瘤细胞杂交瘤细胞(4)(4)在培养时通过在培养时通过_分裂方式大量繁殖。分裂方式大量繁殖。D D细细胞体外培养需要注意的条件是（要求答胞体外培养需要注意的条件是（要求答5 5项）项）_。（5 5）单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面，）单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面，与常规抗体相比，其特点是与常规抗体相比，其特点是_。特异性强、灵敏度高特异性强、灵敏度高 有丝有丝有丝有丝无菌、无毒的环境；充足的营养；适宜的温度和无菌、无毒的环境；充足的营养；适宜的温度和pHpH；适宜的气体环境适宜的气体环境 1111、（1）单克隆抗体是指）单克
33、隆抗体是指 。（2 2）制备单克隆抗体的步骤：）制备单克隆抗体的步骤：将将_注入小鼠体内，从小鼠脾脏中获得淋巴细注入小鼠体内，从小鼠脾脏中获得淋巴细胞，其中至少胞，其中至少1 1个淋巴细胞带有抗该抗原的抗体。个淋巴细胞带有抗该抗原的抗体。将步骤将步骤获得的获得的B B淋巴细胞与步骤淋巴细胞与步骤培养的骨髓瘤细胞培养的骨髓瘤细胞在在_的诱导下融合。的诱导下融合。将诱导后产生的多种细胞，放在将诱导后产生的多种细胞，放在_培养基的多孔培养基的多孔培养板上培养，筛选。培养板上培养，筛选。这样获得的杂交瘤细胞既具有这样获得的杂交瘤细胞既具有B B淋巴细胞淋巴细胞_的能力，又具有的能力，又具有_的本领。的
34、本领。检测和分离带有抗检测和分离带有抗X X抗体的阳性细胞，培养板中每孔放抗体的阳性细胞，培养板中每孔放一个细胞进行培养。一个细胞进行培养。将阳性细胞进行增殖，从而制备出大量抗该抗原的单克将阳性细胞进行增殖，从而制备出大量抗该抗原的单克隆抗体。隆抗体。化学性质单一，特异性强的抗体化学性质单一，特异性强的抗体 抗原抗原 聚乙二醇聚乙二醇选择性选择性 无限增殖无限增殖 产生专一抗体产生专一抗体（3）大量制备单克隆抗体的方法主要有两种：）大量制备单克隆抗体的方法主要有两种：体外培养法，可获得体外培养法，可获得10 g/mL的抗体；的抗体；动物体内动物体内诱生法可获得诱生法可获得520mmg/mL的抗
35、体。你选择的方法及原的抗体。你选择的方法及原因是因是 。（4 4）用本法制备出的单克隆抗体仍具有局限性，因）用本法制备出的单克隆抗体仍具有局限性，因为它是用小鼠的为它是用小鼠的_细胞制备的，其化学本质是细胞制备的，其化学本质是_，应用于人体，会作为，应用于人体，会作为 产生产生 ，解决这个问题的方法是，解决这个问题的方法是_。大量生产选大量生产选，小规模生产选，小规模生产选效应效应B蛋白质蛋白质异物异物免疫反应免疫反应采用人的效应采用人的效应B细胞制备细胞制备15、右图为某同学根据杂交瘤技术、右图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。据
36、图回答：体的实验方案。据图回答：（1）该方案能达到预期效果吗）该方案能达到预期效果吗？。原因是。原因是_。（2）图中）图中为为 过程，过程，常用常用 作为诱导剂。该细作为诱导剂。该细胞继承了胞继承了_ ，因此不仅能分泌，因此不仅能分泌_，还有，还有 本领。本领。不能不能 没有将抗原注入小鼠体内，无法获得没有将抗原注入小鼠体内，无法获得产生专一抗体的产生专一抗体的B淋巴细胞淋巴细胞 细胞融合细胞融合 灭活病毒灭活病毒 双亲细胞的遗传物质双亲细胞的遗传物质 特异性抗体特异性抗体 大量增殖大量增殖制备单克隆抗体制备单克隆抗体（3）该方案的目的是）该方案的目的是_。为什么给小鼠注射特定的为什么给小鼠注射特定的抗原蛋白？抗原蛋白？ 会有几种融合方式？会有几种融合方式？ 杂交瘤细胞是如何筛选出杂交瘤细胞是如何筛选出来的？有何特点？来的？有何特点？ 是否所有的杂交瘤细胞都是否所有的杂交瘤细胞都能产生专一性抗体？能产生专一性抗体？ 如何大规模进行培养得到如何大规模进行培养得到大量的单克隆抗体？大量的单克隆抗体？
