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1、常见微生物培养标本的采集12A proper clinical assessment is essential for optimal use of laboratory services!3 正确获取临床微生物检查标本是 保证检查质量与提高病原分离阳性率最基本也是最关键的环节，这包括适宜的取材 时间、适当的取材 部位与适当的 方式获取检查标本。451. 标本采集的一般原则（1）采集部位标本的采集部位以能够反映活动的病程为标准。如伤寒患者，发病第1周应采集血液，第2周应采集粪便和尿液，否则影响细菌的检出率。 （2）采集时机采集时间最好是病程早期、急性期，且必须在使用抗菌药物之前采集，确保病原菌
2、的检出。 （3）患者的准备痰标本采集前，患者应该进行口腔清洁（包括摘假牙、刷牙、漱口等）；尿液采集前，患者应有足够的憋尿时间（不低于2h）。64）采集方法用于厌氧菌培养的临床标本，应尽量用注射器采集抽吸物，一般不要用拭子采集标本（除非是在床边采样并立刻接种）；脓肿部位采集最好不要直接采集脓汁部位，应采集脓腔底部或腔壁组织送检；自然排尿应采集中段尿；皮疹穿刺应采集第一滴血作培用；血液标本采集应遵循两侧部位、两瓶、两套的原则。7（5）适量采集标本 为避免因标本量少引起的假阴性结果，标本最小采集量固体标本不少于1g，液体标本通常不少于1ml（分枝杆菌及真菌检查不少于10ml）。（6）无菌操作 采集标
3、本时严格执行无菌操作程序。（7）标本收集 采集的标本均应盛于惰性、广口、带螺旋帽、容积不小于50ml的无菌容器内送检。82. 标本运送的一般原则标本采集后应在1530min内送至实验室，若有延迟也应在2h内送至实验室，否则会影响病原菌的检出。厌氧培养标本原则上应在床边接种。标本如延迟送检，需保存在相应的运送培养基中。怀疑标本中有理化因素敏感的微生物（包括淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌和流感嗜血杆菌等苛养型细菌）应立即运送和处理。通常血液、脑脊液、生殖道、眼或内耳标本不要冷藏保存。93. 标本接收与处理的一般原则有时送到实验室的标本没有按要求选材、采集或运送，检验这些未受控制标本得出的结果，可能会给临
4、床医生提供错误的信息，误导诊断和治疗。因此，实验室必须建立严格的接收或拒收标准，以杜绝没有按要求选材、采集或运送的标本进入检验程序。10不合格标本的拒收标准如下：不合格标本的拒收标准如下： （1）不正确的运送温度；）不正确的运送温度； （2）不正确的运送工具；）不正确的运送工具； （3）延长送检时间；）延长送检时间； （4）标本容器上未贴标签或错贴标签；）标本容器上未贴标签或错贴标签； （5）标本有泄漏；）标本有泄漏； （6）盛标本的容器被压碎或有破裂；）盛标本的容器被压碎或有破裂； （7）标本有明显污染；）标本有明显污染； （8）标本量不足或已干涸；）标本量不足或已干涸； （9）24h内重复
5、送检的标本（血培养除外）；内重复送检的标本（血培养除外）； （10）对某种试验不适合的标本（如尿液做支）对某种试验不适合的标本（如尿液做支原体培养等）。原体培养等）。11我科现在使用的进口血培养瓶12我科现在使用的国产血培养瓶13我科现用的无菌拭子管14我科现用的无菌杯15一、血液及骨髓培养严格的无菌操作：1.标准的皮肤消毒程序：a 70%乙醇擦拭静脉穿刺部位等待30S以上。b 1%-2%碘酊作用30S或10%碘伏60S,从穿刺点向外画圈消毒，至消毒区域直径3cm以上。c 70%乙醇脱碘：对碘过敏的患者，用70%乙醇消毒60S，待乙醇挥发干燥后采血。16一、血液及骨髓培养2.采血部位通常为肘静
6、脉。疑似细菌性心内膜炎时以肘动脉或股动脉采血为宜。对疑为细菌性骨髓炎或伤寒病人，在病灶或髂前（后）上棘处严格消毒后抽取骨髓1ml作培养。17一、血液及骨髓培养3.采血量与接种培养瓶程序成人通常是810ml/瓶，儿童15ml/瓶。对于血培养瓶的接种程序：a 用蝶形针：穿刺后需氧瓶厌氧瓶拔去瓶子再拔蝶形针。b 用注射器：厌氧瓶需氧瓶拔去注射器然后轻轻颠倒混匀数次，以防止血液凝固。18一、血液及骨髓培养4.采血时间、血培养频率、培养瓶的选择实际操作中采血的原则是尽量在使用抗菌实际操作中采血的原则是尽量在使用抗菌药物之前采集。药物之前采集。一般的病人不同部位采集2套。一般2周内没有用过抗菌药物的门诊或
7、住院病人用普通瓶，2周内用过抗菌药物的门诊或住院病人用抗生素中和瓶。需要特别注意的是抽好血后要注明抽血的时间。19一、血液及骨髓培养采血后该立即常温送检，如不能及时送检采血后该立即常温送检，如不能及时送检请常温下保存不超过请常温下保存不超过24h，切勿冷藏。，切勿冷藏。20二、各种闭锁性的无菌体液培养闭锁性的穿刺液包括脑脊液、胸水、腹水、心包液、胆汁、关节液及鞘膜液等。一般可以按血培养操作。需要特别注意的是：血培养瓶中的抗凝物质SPS（聚茴香脑磺酸钠）可能抑制个别细菌的生长，如脑膜炎、淋病奈瑟菌。21三、尿液培养原则：原则： 标本采集应力争在未使用抗生素之标本采集应力争在未使用抗生素之 前，注
8、意避免消毒剂污染标本。前，注意避免消毒剂污染标本。 22三、尿液培养1. 清洁中段尿：清洁中段尿： 最最好好留留取取早早晨晨清清洁洁中中段段尿尿标标本本，嘱嘱咐咐患患者者睡睡前前少少饮饮水水，清清晨晨起起床床后后用用肥肥皂皂水水清清洗洗会会阴阴部部，女女性性应应用用手手分分开开大大阴阴唇唇，男男性性应应翻翻上上包包皮皮，仔仔细细清清洗洗，再再用用清清冲冲洗洗尿尿道道口口周周围围；开开始始排排尿尿，将将前前段段尿尿排排去去，中中段段尿尿约约1020ml直直接接排排入入专专用用的的无无菌菌容容器器中中，立立即即送送检检，2h内内接接种种。该该方方法法简简单单易易行行，是是最最常常用用的的尿尿培培养
9、养标标本本收收集集方方法法，但但很很容容易易受受到到会会阴阴部部细细菌菌污污染染，应应由由医医务务人人员员采采集集或或在在医医务务人人员员指导下由患者正确留取指导下由患者正确留取。23三、尿液培养2.耻骨上膀胱穿刺：耻骨上膀胱穿刺： 使使用用无无菌菌注注射射器器直直接接从从耻耻骨骨上上经经皮皮肤肤消消毒毒穿穿入入膀膀胱胱吸吸取取尿尿液液，是是评评估估膀膀胱胱内内细细菌菌感感染染的的“金金标标准准”方方法法，但但有有一一定定的的痛痛苦苦，患患者者难难以以接接受受。主主要要用用于于厌厌氧氧菌菌培培养养或或留留取取标标本本困困难难的的婴婴儿儿尿标本的采集。尿标本的采集。24三、尿液培养3.直接导尿：
10、直接导尿： 按按常常规规方方法法对对会会阴阴部部进进行行消消毒毒后后，用用导导尿尿管管直直接接经经尿尿道道插插入入膀膀胱胱，获获取取膀膀胱胱尿尿液液，可可减减少少尿尿液液标标本本污污染染，准准确确地地反反映映膀膀胱胱感感染染情情况况。但但有有可可能能将将下下尿尿道道细细菌菌引引入入膀膀胱胱，导导致致继继发发感感染染，一般不提倡使用。一般不提倡使用。25三、尿液培养4.留置导尿管收集尿液：留置导尿管收集尿液： 利利用用留留置置导导尿尿管管采采集集标标本本时时，应应先先消消毒毒导导尿尿管管外外部部，按按无无菌菌操操作作方方法法用用注注射射器器穿穿刺刺导导尿尿管管吸吸取取尿尿液液，操操作作时时应应防
11、防止止混混入入消消毒毒剂剂，注注意意不不能能从从尿尿液液收收集集袋袋中中采采集集尿尿液液。长长期期留留置置导导尿尿管管者者，应在更换新导尿管应在更换新导尿管24h内留取。内留取。26三、尿液培养采集容器采集容器1.应应由由不不与与尿尿液液成成份份发发生生反反应应的的惰惰性性材材料制成；料制成；2.洁净、无菌、加盖、密封、防渗漏；洁净、无菌、加盖、密封、防渗漏； 不含防腐剂和抑菌剂；不含防腐剂和抑菌剂；3.广广口口、具具有有较较宽宽的的底底部部、容容积积应应大大于于50ml、盒盖易于开启。、盒盖易于开启。27三、尿液培养标本运送标本运送 标标本本采采集集后后应应及及时时送送检检、及及时时接接种种
12、，室室温温下下保保存存时时间间不不得得超超过过2h（夏夏季季保保存存时时间间应应适适当当缩缩短短或或冷冷藏藏保保存存），4C冷冷藏藏保保存存时时间间不不得得超超过过8h，但但应应注注意意冷冷藏藏保保存存的的标标本本不不能用于淋病奈瑟菌培养。能用于淋病奈瑟菌培养。28四、粪便培养 腹泻、大便每日3次，性状异常，可为稀便、水样便、粘液便、脓血便伴有恶心、呕吐、发热、腹痛等全身不适症；粪便涂片WBC 5个/HP。来自疫区的患者等。29四、粪便培养用药前自然排便后挑取有脓血或黏液部位的粪便23g,液状粪便取絮状物12ml盛于无菌容器内送检（不超过2小时）。如不能及时送检，应按1:10比例与PH7.0磷
13、酸盐甘油缓冲液混合保存。30四、粪便培养对于排便困难或婴幼儿可用直肠拭子采集法（Cary-Blair运送培养基）送检（4冰箱保存不超过24小时）。需要强调的是粪便培养要在抗生素使用之前或抗生素使用3天内采集。31五、呼吸道标本培养一、上呼吸道标本采集培养上呼吸道标本包括鼻、鼻咽、口咽拭子标本。在用抗生素之前（最好是晨起）患者在用抗生素之前（最好是晨起）患者用清水漱口后，选无菌、不含抑制剂的预用清水漱口后，选无菌、不含抑制剂的预先用生理盐水或营养肉汤蘸湿的拭子直接先用生理盐水或营养肉汤蘸湿的拭子直接在感染部位擦拭取样（有假膜或脓液存在在感染部位擦拭取样（有假膜或脓液存在的最好从膜底下擦拭）。采集
14、后立即送检，的最好从膜底下擦拭）。采集后立即送检，2h。转运拭子不超过。转运拭子不超过24h。32五、呼吸道标本培养二、下呼吸道标本采集培养1.痰2.气管吸出物3.气管镜标本33五、呼吸道标本培养（一）自然咳痰：1.以晨痰为好，咳痰前，患者用无菌生理盐水或凉开水漱口；2.指导患者用力咳出深部痰，勿留取唾液和鼻咽腔分泌物。3.对于自然咳痰有困难的患者，可用雾化吸入45的100g/LNaCl水溶液诱痰或无菌吸痰管抽取气管深部分泌物。34五、呼吸道标本培养用无菌防漏容器收集标本，贴好标本信息（条码）后，在在1h2h内（室温）送至微生物实验室内（室温）送至微生物实验室。注1：若送检标本超过 2h，将导
15、致有临床意义的致病菌数量减少，非苛养的口咽部定植菌过度生长。为防止口咽部正常菌群的过度生长，可将标本放置 28环境，但培养分离到肺炎链球菌等苛养菌的机会和数量会减少。注2：若标本延迟送检超过 2h 后未冷藏（超过 2h24h，28），应在报告中说明因延误送检标本，可能对培养结果造成的影响。35六、尿道、生殖道标本培养一、尿道标本：患者排尿1h以后采集。先用无菌生理盐水或洁净清水局部清洗，采取从尿道口溢出的脓性分泌物。无脓性分泌物溢出者，男性通过按摩，女性从阴道内压迫尿道或向前按摩使分泌物溢出采集标本。或者无菌拭子尿道内24cm旋转停留20s后取出分泌物送检。36六、尿道、生殖道标本培养二、生殖
16、道溃疡标本无菌生理盐水和手术刀清除溃疡面露出溃疡基底，渗出物集聚较明显时用拭子或吸管采集。37六、尿道、生殖道标本培养三、宫颈、阴道、子宫内膜、输卵管、羊水、组织标本。四、前列腺、精液标本。需要注意B群链球菌筛查的阴道口和/或直肠拭子标本。38七、开放性脓液及创伤分泌物培养在使用抗生素之前在使用抗生素之前1.先用生理盐水冲洗先用生理盐水冲洗2.揭去表面的结痂或表皮，有脓液的去除表揭去表面的结痂或表皮，有脓液的去除表 面的脓液。面的脓液。 3.用沾湿生理盐水的无菌微生物拭子旋转的用沾湿生理盐水的无菌微生物拭子旋转的 去伤口底部肉芽组织处的脓液或分泌物于去伤口底部肉芽组织处的脓液或分泌物于30分钟
17、内送检。最长不能超过分钟内送检。最长不能超过2小时。小时。39总结微生物标本的采集：微生物标本的采集：1、尽量在使用抗生素之前采集标本，、尽量在使用抗生素之前采集标本，如无法如无法 停止抗生素的使用，尽量停止抗生素的使用，尽量在下一次使用抗生素之前采集标本。在下一次使用抗生素之前采集标本。2、注意无菌操作，尽量去除杂菌的、注意无菌操作，尽量去除杂菌的污染。对各种不同部位的采集方法污染。对各种不同部位的采集方法要熟悉。要熟悉。40总结3、采集好标本后要及时送检。、采集好标本后要及时送检。4、要做好查对工作，务必要做、要做好查对工作，务必要做到患者信息、标本类型、采集到患者信息、标本类型、采集部位、采集方法、采集时间要部位、采集方法、采集时间要标识清楚。标识清楚。41不合格标本42不合格标本43不合格标本44合格标本45唾唾 液液脓痰脓痰粘液样痰粘液样痰带血痰带血痰46 谢谢 谢！谢！47
