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1、蛋白质(蛋白质(蛋白质(蛋白质(IIII)蛋白质的结构蛋白质的结构蛋白质的结构蛋白质的结构蛋白质II蛋白质的共价结构蛋白质的共价结构蛋白质的共价结构蛋白质的共价结构n nn蛋白质的一级结构(蛋白质的一级结构(蛋白质的一级结构(蛋白质的一级结构(Primary structurePrimary structure)n nn定义:蛋白质的共价结构,即蛋白质分子内部定义:蛋白质的共价结构,即蛋白质分子内部定义:蛋白质的共价结构,即蛋白质分子内部定义:蛋白质的共价结构,即蛋白质分子内部定义:蛋白质的共价结构,即蛋白质分子内部定义:蛋白质的共价结构,即蛋白质分子内部通过共价键连接而形成的结构形式通过共价
2、键连接而形成的结构形式通过共价键连接而形成的结构形式通过共价键连接而形成的结构形式通过共价键连接而形成的结构形式通过共价键连接而形成的结构形式n nn氨基酸在蛋白质内的排列顺序氨基酸在蛋白质内的排列顺序氨基酸在蛋白质内的排列顺序氨基酸在蛋白质内的排列顺序氨基酸在蛋白质内的排列顺序氨基酸在蛋白质内的排列顺序n nn二硫键的位置和连接顺序二硫键的位置和连接顺序二硫键的位置和连接顺序二硫键的位置和连接顺序二硫键的位置和连接顺序二硫键的位置和连接顺序n nn侧链基团的修饰和连接情况侧链基团的修饰和连接情况侧链基团的修饰和连接情况侧链基团的修饰和连接情况侧链基团的修饰和连接情况侧链基团的修饰和连接情况n
3、 nn是否磷酸化,磷酸化位置是否磷酸化,磷酸化位置是否磷酸化,磷酸化位置是否磷酸化,磷酸化位置是否磷酸化,磷酸化位置是否磷酸化,磷酸化位置n nn是否糖基化,糖基化位置,糖链组成是否糖基化,糖基化位置,糖链组成是否糖基化,糖基化位置,糖链组成是否糖基化,糖基化位置,糖链组成是否糖基化,糖基化位置,糖链组成是否糖基化,糖基化位置,糖链组成n nn是否酯化,酯化位置,酯的组成是否酯化,酯化位置,酯的组成是否酯化,酯化位置,酯的组成是否酯化,酯化位置,酯的组成是否酯化,酯化位置,酯的组成是否酯化,酯化位置,酯的组成n nn是否有辅基或其他分子是否有辅基或其他分子是否有辅基或其他分子是否有辅基或其他分
4、子是否有辅基或其他分子是否有辅基或其他分子, , ,连接方式连接方式连接方式连接方式连接方式连接方式蛋白质IIn nn肽肽肽肽肽肽 键键键键键键n nn蛋白质是氨基酸通过脱水缩合形成肽键而形成的蛋白质是氨基酸通过脱水缩合形成肽键而形成的蛋白质是氨基酸通过脱水缩合形成肽键而形成的蛋白质是氨基酸通过脱水缩合形成肽键而形成的蛋白质是氨基酸通过脱水缩合形成肽键而形成的蛋白质是氨基酸通过脱水缩合形成肽键而形成的n nn实验证据实验证据实验证据实验证据实验证据实验证据 (1 11)蛋白质分子中游离的)蛋白质分子中游离的)蛋白质分子中游离的)蛋白质分子中游离的)蛋白质分子中游离的)蛋白质分子中游离的-氨基,
5、氨基,氨基,氨基,氨基,氨基,-羧基很少。若水解,游离羧基很少。若水解,游离羧基很少。若水解,游离羧基很少。若水解,游离羧基很少。若水解,游离羧基很少。若水解,游离-氨基,氨基,氨基,氨基,氨基,氨基,- - - 羧基以等羧基以等羧基以等羧基以等羧基以等羧基以等molmolmol数增加数增加数增加数增加数增加数增加 说明说明说明说明说明说明 氨基,氨基,氨基,氨基,氨基,氨基,-羧基参与某种羧基参与某种羧基参与某种羧基参与某种羧基参与某种羧基参与某种结合,水解时,这种结合断开。结合,水解时,这种结合断开。结合,水解时,这种结合断开。结合,水解时,这种结合断开。结合,水解时,这种结合断开。结合,
6、水解时,这种结合断开。 (2 22) 人工合成肽可以被蛋白酶水解人工合成肽可以被蛋白酶水解人工合成肽可以被蛋白酶水解人工合成肽可以被蛋白酶水解人工合成肽可以被蛋白酶水解人工合成肽可以被蛋白酶水解 O OO (3 33) 包含包含包含包含包含包含-C-N- H-C-N- H-C-N- H基团的化合物如双缩脲基团的化合物如双缩脲基团的化合物如双缩脲基团的化合物如双缩脲基团的化合物如双缩脲基团的化合物如双缩脲H HH2 22N-CO-NH-NHN-CO-NH-NHN-CO-NH-NH2 22能与能与能与能与能与能与硫酸铜硫酸铜硫酸铜硫酸铜硫酸铜硫酸铜- -氢氧化钠溶液产生双缩脲颜色反应。天然蛋白质也
7、存同氢氧化钠溶液产生双缩脲颜色反应。天然蛋白质也存同氢氧化钠溶液产生双缩脲颜色反应。天然蛋白质也存同氢氧化钠溶液产生双缩脲颜色反应。天然蛋白质也存同氢氧化钠溶液产生双缩脲颜色反应。天然蛋白质也存同氢氧化钠溶液产生双缩脲颜色反应。天然蛋白质也存同样反应。样反应。样反应。样反应。样反应。样反应。 (4 44)人工合成的多聚)人工合成的多聚)人工合成的多聚)人工合成的多聚)人工合成的多聚)人工合成的多聚AAAAAA的的的的的的X XX射线衍射图案和红外吸收光谱与天射线衍射图案和红外吸收光谱与天射线衍射图案和红外吸收光谱与天射线衍射图案和红外吸收光谱与天射线衍射图案和红外吸收光谱与天射线衍射图案和红外
8、吸收光谱与天然的纤维状蛋白质十分相似。然的纤维状蛋白质十分相似。然的纤维状蛋白质十分相似。然的纤维状蛋白质十分相似。然的纤维状蛋白质十分相似。然的纤维状蛋白质十分相似。(5 55)我国在世界上首次人工合成蛋白质)我国在世界上首次人工合成蛋白质)我国在世界上首次人工合成蛋白质)我国在世界上首次人工合成蛋白质)我国在世界上首次人工合成蛋白质)我国在世界上首次人工合成蛋白质- -结晶牛胰岛素的成功,结晶牛胰岛素的成功,结晶牛胰岛素的成功,结晶牛胰岛素的成功,结晶牛胰岛素的成功,结晶牛胰岛素的成功,完全证明了蛋白质的肽链结构学说的正确性。完全证明了蛋白质的肽链结构学说的正确性。完全证明了蛋白质的肽链结
9、构学说的正确性。完全证明了蛋白质的肽链结构学说的正确性。完全证明了蛋白质的肽链结构学说的正确性。完全证明了蛋白质的肽链结构学说的正确性。蛋白质IIn nn肽键的特点肽键的特点肽键的特点肽键的特点肽键的特点肽键的特点n nn酰胺键:酰胺键:酰胺键:酰胺键:酰胺键:酰胺键: 由于酰胺氮上的孤对电子与相邻羰基的共由于酰胺氮上的孤对电子与相邻羰基的共由于酰胺氮上的孤对电子与相邻羰基的共由于酰胺氮上的孤对电子与相邻羰基的共由于酰胺氮上的孤对电子与相邻羰基的共由于酰胺氮上的孤对电子与相邻羰基的共振作用,表现出高稳定性振作用,表现出高稳定性振作用,表现出高稳定性振作用,表现出高稳定性振作用,表现出高稳定性振
10、作用,表现出高稳定性 n nnC CCN NN具具具具具具404040404040双键性质双键性质双键性质双键性质双键性质双键性质 n nnC CCO OO具具具具具具404040404040单键性质单键性质单键性质单键性质单键性质单键性质 n nn共振杂化体共振杂化体共振杂化体共振杂化体共振杂化体共振杂化体n nn亚氨基(亚氨基(亚氨基(亚氨基(亚氨基(亚氨基(NHNHNH)pH 0pH 0pH 0141414没有明显的解离和质子没有明显的解离和质子没有明显的解离和质子没有明显的解离和质子没有明显的解离和质子没有明显的解离和质子化倾向化倾向化倾向化倾向化倾向化倾向n nn肽键是一个平面,称肽
11、平面。可以有反式顺式结构,肽键是一个平面,称肽平面。可以有反式顺式结构,肽键是一个平面,称肽平面。可以有反式顺式结构,肽键是一个平面,称肽平面。可以有反式顺式结构,肽键是一个平面,称肽平面。可以有反式顺式结构,肽键是一个平面,称肽平面。可以有反式顺式结构,但旋转能障较高,反式稳定(但旋转能障较高,反式稳定(但旋转能障较高,反式稳定(但旋转能障较高,反式稳定(但旋转能障较高,反式稳定(但旋转能障较高,反式稳定(ProProPro例外)例外)例外)例外)例外)例外)n nn蛋白质中的每一个氨基酸单位称氨基酸残基蛋白质中的每一个氨基酸单位称氨基酸残基蛋白质中的每一个氨基酸单位称氨基酸残基蛋白质中的每
12、一个氨基酸单位称氨基酸残基蛋白质中的每一个氨基酸单位称氨基酸残基蛋白质中的每一个氨基酸单位称氨基酸残基(residueresidueresidue)蛋白质IIn nn肽链结构的命名与书写肽链结构的命名与书写肽链结构的命名与书写肽链结构的命名与书写肽链结构的命名与书写肽链结构的命名与书写n nn根据含根据含根据含根据含根据含根据含AaAaAa的数目命名:的数目命名:的数目命名:的数目命名:的数目命名:的数目命名:*肽肽肽肽肽肽n nn从从从从从从NHNHNH2 22末端末端末端末端末端末端AaAaAa残基开始,称为:某氨基酰某氨基酰残基开始,称为:某氨基酰某氨基酰残基开始,称为:某氨基酰某氨基酰
13、残基开始,称为:某氨基酰某氨基酰残基开始,称为:某氨基酰某氨基酰残基开始,称为:某氨基酰某氨基酰某氨基酰某氨基酰某氨基酰某氨基酰某氨基酰某氨基酰.氨基酸氨基酸氨基酸氨基酸氨基酸氨基酸n nn书写时氨基端在左边,羧基端在右边;以氨基酸的书写时氨基端在左边,羧基端在右边;以氨基酸的书写时氨基端在左边,羧基端在右边;以氨基酸的书写时氨基端在左边,羧基端在右边;以氨基酸的书写时氨基端在左边,羧基端在右边;以氨基酸的书写时氨基端在左边,羧基端在右边;以氨基酸的三字缩写或单字缩写代表对应的氨基酸;用短横线三字缩写或单字缩写代表对应的氨基酸;用短横线三字缩写或单字缩写代表对应的氨基酸;用短横线三字缩写或单字
14、缩写代表对应的氨基酸;用短横线三字缩写或单字缩写代表对应的氨基酸;用短横线三字缩写或单字缩写代表对应的氨基酸;用短横线代表氨基酸残基之间的肽键代表氨基酸残基之间的肽键代表氨基酸残基之间的肽键代表氨基酸残基之间的肽键代表氨基酸残基之间的肽键代表氨基酸残基之间的肽键蛋白质II肽的物理化学性质肽的物理化学性质n nn一般物理性质一般物理性质一般物理性质一般物理性质n nn短肽晶体、熔点很高(离子晶体、偶极离子)短肽晶体、熔点很高(离子晶体、偶极离子)短肽晶体、熔点很高(离子晶体、偶极离子)短肽晶体、熔点很高(离子晶体、偶极离子)短肽晶体、熔点很高(离子晶体、偶极离子)短肽晶体、熔点很高(离子晶体、偶
15、极离子)n nn肽的两性解离肽的两性解离肽的两性解离肽的两性解离肽的两性解离肽的两性解离n nn决定于游离氨基末端、游离羧基末端以及侧链基团决定于游离氨基末端、游离羧基末端以及侧链基团决定于游离氨基末端、游离羧基末端以及侧链基团决定于游离氨基末端、游离羧基末端以及侧链基团决定于游离氨基末端、游离羧基末端以及侧链基团决定于游离氨基末端、游离羧基末端以及侧链基团n nn肽链羧基的肽链羧基的肽链羧基的肽链羧基的肽链羧基的肽链羧基的pKpKpK比氨基酸的大一些,而氨基的比氨基酸的大一些,而氨基的比氨基酸的大一些,而氨基的比氨基酸的大一些,而氨基的比氨基酸的大一些,而氨基的比氨基酸的大一些,而氨基的pK
16、pKpK则则则则则则要小一些要小一些要小一些要小一些要小一些要小一些n nn多肽等电点的计算多肽等电点的计算多肽等电点的计算多肽等电点的计算多肽等电点的计算多肽等电点的计算n nn中性肽的等电点中性肽的等电点中性肽的等电点中性肽的等电点中性肽的等电点中性肽的等电点n nn酸性肽的等电点酸性肽的等电点酸性肽的等电点酸性肽的等电点酸性肽的等电点酸性肽的等电点n nn碱性肽的等电点碱性肽的等电点碱性肽的等电点碱性肽的等电点碱性肽的等电点碱性肽的等电点蛋白质IIn nn常见化学反应常见化学反应常见化学反应常见化学反应n nnN N N端氨基酸残基与茚三酮、端氨基酸残基与茚三酮、端氨基酸残基与茚三酮、端
17、氨基酸残基与茚三酮、端氨基酸残基与茚三酮、端氨基酸残基与茚三酮、DNFBDNFBDNFB、PITCPITCPITC等反应等反应等反应等反应等反应等反应n nnC C C氨基酸残基成酯、成酰胺、成盐氨基酸残基成酯、成酰胺、成盐氨基酸残基成酯、成酰胺、成盐氨基酸残基成酯、成酰胺、成盐氨基酸残基成酯、成酰胺、成盐氨基酸残基成酯、成酰胺、成盐n nn侧链氨基酸的反应侧链氨基酸的反应侧链氨基酸的反应侧链氨基酸的反应侧链氨基酸的反应侧链氨基酸的反应n nn磷酸化:磷酸化:磷酸化:磷酸化:磷酸化:磷酸化:TyrTyrTyr、SerSerSer、ThrThrThrn nn酯化:酯化:酯化:酯化:酯化:酯化:S
18、erSerSer、ThrThrThr、TyrTyrTyrn nn糖基化:糖基化:糖基化:糖基化:糖基化:糖基化: Ser Ser Ser、ThrThrThr、CysCysCysn nn双缩脲反应(双缩脲反应(双缩脲反应(双缩脲反应(双缩脲反应(双缩脲反应(Biuret reactionBiuret reactionBiuret reaction):):):):):):n nn多肽与多肽与多肽与多肽与多肽与多肽与CuSOCuSOCuSO4 44碱性溶液反应,生成紫红色或蓝紫色的碱性溶液反应,生成紫红色或蓝紫色的碱性溶液反应,生成紫红色或蓝紫色的碱性溶液反应,生成紫红色或蓝紫色的碱性溶液反应,生成
19、紫红色或蓝紫色的碱性溶液反应,生成紫红色或蓝紫色的复合物,复合物,复合物,复合物,复合物,复合物,540nm540nm540nm处有最大光吸收。处有最大光吸收。处有最大光吸收。处有最大光吸收。处有最大光吸收。处有最大光吸收。n nn为肽和蛋白质特有(两个或两个以上肽键),氨基酸为肽和蛋白质特有(两个或两个以上肽键),氨基酸为肽和蛋白质特有(两个或两个以上肽键),氨基酸为肽和蛋白质特有(两个或两个以上肽键),氨基酸为肽和蛋白质特有(两个或两个以上肽键),氨基酸为肽和蛋白质特有(两个或两个以上肽键),氨基酸没有该反应。没有该反应。没有该反应。没有该反应。没有该反应。没有该反应。蛋白质II天然活性多
20、肽天然活性多肽n nn定义:定义:定义:定义:n nn在生物体中,多肽最重要的存在形式是作为蛋在生物体中,多肽最重要的存在形式是作为蛋在生物体中,多肽最重要的存在形式是作为蛋在生物体中,多肽最重要的存在形式是作为蛋在生物体中,多肽最重要的存在形式是作为蛋在生物体中,多肽最重要的存在形式是作为蛋白质的亚单位,但是,也有许多分子量比较小白质的亚单位,但是,也有许多分子量比较小白质的亚单位,但是,也有许多分子量比较小白质的亚单位,但是,也有许多分子量比较小白质的亚单位,但是,也有许多分子量比较小白质的亚单位,但是,也有许多分子量比较小的多肽以游离状态存在。这类多肽通常都具有的多肽以游离状态存在。这类
21、多肽通常都具有的多肽以游离状态存在。这类多肽通常都具有的多肽以游离状态存在。这类多肽通常都具有的多肽以游离状态存在。这类多肽通常都具有的多肽以游离状态存在。这类多肽通常都具有特殊的生理功能,常称为活性肽特殊的生理功能,常称为活性肽特殊的生理功能,常称为活性肽特殊的生理功能,常称为活性肽特殊的生理功能,常称为活性肽特殊的生理功能,常称为活性肽n nn常见活性多肽常见活性多肽常见活性多肽常见活性多肽n nn谷胱甘肽(谷胱甘肽(谷胱甘肽(谷胱甘肽(谷胱甘肽(谷胱甘肽(GSHGSHGSH)n nn -Glu-Cys-Gly-Glu-Cys-Gly-Glu-Cys-Glyn nn巯基缓冲剂巯基缓冲剂巯基
22、缓冲剂巯基缓冲剂巯基缓冲剂巯基缓冲剂蛋白质IIn nn脑啡肽(脑啡肽(脑啡肽(脑啡肽(脑啡肽(脑啡肽(enkephalinsenkephalinsenkephalins)n nn神经系统中产生的一类短肽,具有多种特殊生物学神经系统中产生的一类短肽,具有多种特殊生物学神经系统中产生的一类短肽,具有多种特殊生物学神经系统中产生的一类短肽,具有多种特殊生物学神经系统中产生的一类短肽,具有多种特殊生物学神经系统中产生的一类短肽,具有多种特殊生物学功能。功能。功能。功能。功能。功能。n nn蕈毒素、蛇毒素蕈毒素、蛇毒素蕈毒素、蛇毒素蕈毒素、蛇毒素蕈毒素、蛇毒素蕈毒素、蛇毒素n nn 鹅膏蕈碱鹅膏蕈碱鹅膏
23、蕈碱鹅膏蕈碱鹅膏蕈碱鹅膏蕈碱 :能与真核生物的能与真核生物的能与真核生物的能与真核生物的能与真核生物的能与真核生物的RNARNARNARNARNARNA聚合酶(聚合酶(聚合酶(聚合酶(聚合酶(聚合酶(RNA RNA RNA RNA RNA RNA polymerasepolymerasepolymerasepolymerasepolymerasepolymerase)和和和和和和牢固结合而抑制酶的活性,因牢固结合而抑制酶的活性,因牢固结合而抑制酶的活性,因牢固结合而抑制酶的活性,因牢固结合而抑制酶的活性,因牢固结合而抑制酶的活性,因而使而使而使而使而使而使RNARNARNARNARNARNA的
24、合成不能进行,但不影响原核生物的的合成不能进行,但不影响原核生物的的合成不能进行,但不影响原核生物的的合成不能进行,但不影响原核生物的的合成不能进行,但不影响原核生物的的合成不能进行,但不影响原核生物的RNARNARNARNARNARNA合成。合成。合成。合成。合成。合成。 n nn短肽类抗生素短肽类抗生素短肽类抗生素短肽类抗生素短肽类抗生素短肽类抗生素蛋白质II蛋白质一级结构测定蛋白质一级结构测定n nn氨基酸顺序测定的一般步骤氨基酸顺序测定的一般步骤氨基酸顺序测定的一般步骤氨基酸顺序测定的一般步骤n nn要求:要求:要求:要求:要求:要求:n nn样品均一样品均一样品均一样品均一样品均一样
25、品均一n nn纯度纯度纯度纯度纯度纯度97%97%97%以上以上以上以上以上以上n nn已知分子量已知分子量已知分子量已知分子量已知分子量已知分子量 (误差小于(误差小于(误差小于(误差小于(误差小于(误差小于10%10%10%)n nn一般步骤:一般步骤:一般步骤:一般步骤:一般步骤:一般步骤:n nn测定蛋白质分子中多肽链的数目测定蛋白质分子中多肽链的数目测定蛋白质分子中多肽链的数目测定蛋白质分子中多肽链的数目测定蛋白质分子中多肽链的数目测定蛋白质分子中多肽链的数目 n nn蛋白质末端残基(蛋白质末端残基(蛋白质末端残基(蛋白质末端残基(蛋白质末端残基(蛋白质末端残基(NHNHNH2 22
26、末端、末端、末端、末端、末端、末端、COOHCOOHCOOH末端)末端)末端)末端)末端)末端)molmolmol数数数数数数n nn蛋白质的分子量蛋白质的分子量蛋白质的分子量蛋白质的分子量蛋白质的分子量蛋白质的分子量 蛋白质IIn nn拆分蛋白质分子的多肽链拆分蛋白质分子的多肽链拆分蛋白质分子的多肽链拆分蛋白质分子的多肽链拆分蛋白质分子的多肽链拆分蛋白质分子的多肽链n nn测定多肽链的测定多肽链的测定多肽链的测定多肽链的测定多肽链的测定多肽链的AaAaAa组成组成组成组成组成组成n nn分析多肽链的分析多肽链的分析多肽链的分析多肽链的分析多肽链的分析多肽链的N NN末端和末端和末端和末端和末
27、端和末端和C CC末端残基末端残基末端残基末端残基末端残基末端残基 n nn断裂多肽链内的二硫键断裂多肽链内的二硫键断裂多肽链内的二硫键断裂多肽链内的二硫键断裂多肽链内的二硫键断裂多肽链内的二硫键n nn过甲酸氧化过甲酸氧化过甲酸氧化过甲酸氧化过甲酸氧化过甲酸氧化n nn巯基化合物还原巯基化合物还原巯基化合物还原巯基化合物还原巯基化合物还原巯基化合物还原n nn多肽链断裂成肽段多肽链断裂成肽段多肽链断裂成肽段多肽链断裂成肽段多肽链断裂成肽段多肽链断裂成肽段n nn酶解法酶解法酶解法酶解法酶解法酶解法 n nn化学法化学法化学法化学法化学法化学法n nn测定各个肽段的测定各个肽段的测定各个肽段的
28、测定各个肽段的测定各个肽段的测定各个肽段的AaAaAa顺序顺序顺序顺序顺序顺序n nn EdmanEdmanEdman降解法降解法降解法降解法降解法降解法n nn确定肽段在多肽链中的次序确定肽段在多肽链中的次序确定肽段在多肽链中的次序确定肽段在多肽链中的次序确定肽段在多肽链中的次序确定肽段在多肽链中的次序 n nn确定原多肽链中二硫键的位置确定原多肽链中二硫键的位置确定原多肽链中二硫键的位置确定原多肽链中二硫键的位置确定原多肽链中二硫键的位置确定原多肽链中二硫键的位置蛋白质IIn nn多肽多肽多肽多肽多肽多肽N N N末端分析方法末端分析方法末端分析方法末端分析方法末端分析方法末端分析方法n
29、nn二硝基氟苯(二硝基氟苯(二硝基氟苯(二硝基氟苯(二硝基氟苯(二硝基氟苯(DNFBDNFBDNFB or or or FDNBFDNBFDNB法),法),法),法),法),法),SangeSangeSange试剂试剂试剂试剂试剂试剂 n nn丹磺酰氯(丹磺酰氯(丹磺酰氯(丹磺酰氯(丹磺酰氯(丹磺酰氯(DNSDNSDNS)法)法)法)法)法)法 n nn原理:与原理:与原理:与原理:与原理:与原理:与DNFBDNFBDNFB相同相同相同相同相同相同n nn优点:优点:优点:优点:优点:优点:DNSDNSDNS具强烈的荧光,具强烈的荧光,具强烈的荧光,具强烈的荧光,具强烈的荧光,具强烈的荧光,检
30、测灵敏度可以达到检测灵敏度可以达到检测灵敏度可以达到检测灵敏度可以达到检测灵敏度可以达到检测灵敏度可以达到1 11 101010-9-9-9molmolmol比比比比比比DNFBDNFBDNFB法高法高法高法高法高法高100100100倍倍倍倍倍倍n nn苯异硫氰酸酯(苯异硫氰酸酯(苯异硫氰酸酯(苯异硫氰酸酯(苯异硫氰酸酯(苯异硫氰酸酯(PITCPITCPITC)法)法)法)法)法)法n nn氨肽酶法氨肽酶法氨肽酶法氨肽酶法氨肽酶法氨肽酶法 :n nn氨肽酶:氨肽酶:氨肽酶:氨肽酶:氨肽酶:氨肽酶:可以从多肽链的可以从多肽链的可以从多肽链的可以从多肽链的可以从多肽链的可以从多肽链的N NN端端
31、端端端端逐个逐个逐个逐个逐个逐个 降解氨基酸的降解氨基酸的降解氨基酸的降解氨基酸的降解氨基酸的降解氨基酸的肽链外切肽链外切肽链外切肽链外切肽链外切肽链外切酶酶酶酶酶酶n nn亮氨酸氨肽酶(亮氨酸氨肽酶(亮氨酸氨肽酶(亮氨酸氨肽酶(亮氨酸氨肽酶(亮氨酸氨肽酶(LAPLAPLAP):水解以:水解以:水解以:水解以:水解以:水解以LeuLeuLeu为为为为为为N NN末端的肽键速度为最末端的肽键速度为最末端的肽键速度为最末端的肽键速度为最末端的肽键速度为最末端的肽键速度为最大大大大大大 蛋白质IIn nn多肽多肽多肽多肽多肽多肽C C C末端分析方法末端分析方法末端分析方法末端分析方法末端分析方法末
32、端分析方法n nn肼解法肼解法肼解法肼解法肼解法肼解法n nn蛋白质蛋白质蛋白质蛋白质蛋白质蛋白质or or or 多肽无水肼多肽无水肼多肽无水肼多肽无水肼多肽无水肼多肽无水肼, C, C, C末端末端末端末端末端末端AaAaAa以游离形式存在,其他以游离形式存在,其他以游离形式存在,其他以游离形式存在,其他以游离形式存在,其他以游离形式存在,其他AaAaAa转变为相应的转变为相应的转变为相应的转变为相应的转变为相应的转变为相应的AaAaAa酰肼化物加入苯甲醛可以使酰肼化物加入苯甲醛可以使酰肼化物加入苯甲醛可以使酰肼化物加入苯甲醛可以使酰肼化物加入苯甲醛可以使酰肼化物加入苯甲醛可以使AaAaA
33、a酰肼化酰肼化酰肼化酰肼化酰肼化酰肼化物转变成二苯基衍生物沉淀,物转变成二苯基衍生物沉淀,物转变成二苯基衍生物沉淀,物转变成二苯基衍生物沉淀,物转变成二苯基衍生物沉淀,物转变成二苯基衍生物沉淀, C CC末端末端末端末端末端末端AaAaAa则在溶液中。则在溶液中。则在溶液中。则在溶液中。则在溶液中。则在溶液中。n nn缺点:缺点:缺点:缺点:缺点:缺点:GlnGlnGln、AspAspAsp、CysCysCys破坏不易测出,破坏不易测出,破坏不易测出,破坏不易测出,破坏不易测出,破坏不易测出,Arg OrnArg OrnArg Ornn nn还原法:还原法:还原法:还原法:还原法:还原法:n
34、nn肽链肽链肽链肽链肽链肽链C CC末端末端末端末端末端末端Aa Aa Aa + + + 硼氢化锂硼氢化锂硼氢化锂硼氢化锂硼氢化锂硼氢化锂 氨基醇氨基醇氨基醇氨基醇氨基醇氨基醇 n nn羧肽酶法羧肽酶法羧肽酶法羧肽酶法羧肽酶法羧肽酶法n nn最有效,最常用的测最有效,最常用的测最有效,最常用的测最有效,最常用的测最有效,最常用的测最有效,最常用的测C CC端殘基方法端殘基方法端殘基方法端殘基方法端殘基方法端殘基方法n nn羧肽酶:专一地从肽链的羧肽酶:专一地从肽链的羧肽酶:专一地从肽链的羧肽酶:专一地从肽链的羧肽酶:专一地从肽链的羧肽酶:专一地从肽链的C CC端逐个降解,释放出游离端逐个降解,
35、释放出游离端逐个降解,释放出游离端逐个降解,释放出游离端逐个降解,释放出游离端逐个降解,释放出游离AaAaAa肽肽肽肽肽肽链外切酶链外切酶链外切酶链外切酶链外切酶链外切酶 蛋白质IIn nn多肽链的部分断裂和肽段的拼接多肽链的部分断裂和肽段的拼接多肽链的部分断裂和肽段的拼接多肽链的部分断裂和肽段的拼接多肽链的部分断裂和肽段的拼接多肽链的部分断裂和肽段的拼接 n nn常用蛋白酶(内切酶)常用蛋白酶(内切酶)常用蛋白酶(内切酶)常用蛋白酶(内切酶)常用蛋白酶(内切酶)常用蛋白酶(内切酶)n nn胰蛋白酶胰蛋白酶胰蛋白酶胰蛋白酶胰蛋白酶胰蛋白酶( TrypsinTrypsinTrypsin ):n
36、nn专一性强、只断裂专一性强、只断裂专一性强、只断裂专一性强、只断裂专一性强、只断裂专一性强、只断裂LysLysLys、ArgArgArgArgArgArg的羧基参与形成的肽键的羧基参与形成的肽键的羧基参与形成的肽键的羧基参与形成的肽键的羧基参与形成的肽键的羧基参与形成的肽键n nn可以通过修饰增加或减少酶切位点可以通过修饰增加或减少酶切位点可以通过修饰增加或减少酶切位点可以通过修饰增加或减少酶切位点可以通过修饰增加或减少酶切位点可以通过修饰增加或减少酶切位点n nn糜蛋白酶(糜蛋白酶(糜蛋白酶(糜蛋白酶(糜蛋白酶(糜蛋白酶( ChymotrypsinChymotrypsinChymotryp
37、sin )n nn专一性专一性专一性专一性专一性专一性胰蛋白酶胰蛋白酶胰蛋白酶胰蛋白酶胰蛋白酶胰蛋白酶 ,断裂断裂断裂断裂断裂断裂Phe,Trp,TyrPhe,Trp,TyrPhe,Trp,Tyr等疏水芳香等疏水芳香等疏水芳香等疏水芳香等疏水芳香等疏水芳香AaAaAa的羧基所形成的肽键的羧基所形成的肽键的羧基所形成的肽键的羧基所形成的肽键的羧基所形成的肽键的羧基所形成的肽键n nn断裂键邻近的基团若为碱性:裂解能力断裂键邻近的基团若为碱性:裂解能力断裂键邻近的基团若为碱性:裂解能力断裂键邻近的基团若为碱性:裂解能力断裂键邻近的基团若为碱性:裂解能力断裂键邻近的基团若为碱性:裂解能力 ,酸性:裂
38、解,酸性:裂解,酸性:裂解,酸性:裂解,酸性:裂解,酸性:裂解能力能力能力能力能力能力 n nn嗜热菌蛋白酶(嗜热菌蛋白酶(嗜热菌蛋白酶(嗜热菌蛋白酶(嗜热菌蛋白酶(嗜热菌蛋白酶( thermolysinthermolysinthermolysin )n nn含含含含含含Zn. CaZn. CaZn. Ca, Zn Zn Zn是是是是是是活力必需的,活力必需的,活力必需的,活力必需的,活力必需的,活力必需的, CaCaCa与与与与与与热稳定有关热稳定有关热稳定有关热稳定有关热稳定有关热稳定有关n nn专一性差,断裂较短的多肽链专一性差,断裂较短的多肽链专一性差,断裂较短的多肽链专一性差,断裂较
39、短的多肽链专一性差,断裂较短的多肽链专一性差,断裂较短的多肽链ororor大肽段最适大肽段最适大肽段最适大肽段最适大肽段最适大肽段最适PH8PH8PH89 99蛋白质IIn nn胃蛋白酶(胃蛋白酶(胃蛋白酶(胃蛋白酶(胃蛋白酶(胃蛋白酶(PepsinPepsinPepsin)n nn专一性专一性专一性专一性专一性专一性 糜蛋白酶糜蛋白酶糜蛋白酶糜蛋白酶糜蛋白酶糜蛋白酶 ,要求被断裂键两侧的殘基都是,要求被断裂键两侧的殘基都是,要求被断裂键两侧的殘基都是,要求被断裂键两侧的殘基都是,要求被断裂键两侧的殘基都是,要求被断裂键两侧的殘基都是疏水性疏水性疏水性疏水性疏水性疏水性AaAaAan nn最适
40、最适最适最适最适最适PH2PH2PH2,可用来确定二硫键的位置,可用来确定二硫键的位置,可用来确定二硫键的位置,可用来确定二硫键的位置,可用来确定二硫键的位置,可用来确定二硫键的位置n nn金黄色葡萄球菌蛋白酶(金黄色葡萄球菌蛋白酶(金黄色葡萄球菌蛋白酶(金黄色葡萄球菌蛋白酶(金黄色葡萄球菌蛋白酶(金黄色葡萄球菌蛋白酶(GluGluGlu蛋白酶)蛋白酶)蛋白酶)蛋白酶)蛋白酶)蛋白酶)n nn磷酸缓冲液磷酸缓冲液磷酸缓冲液磷酸缓冲液磷酸缓冲液磷酸缓冲液PH7.8PH7.8PH7.8,能在,能在,能在,能在,能在,能在GluGluGlu殘基和殘基和殘基和殘基和殘基和殘基和AspAspAsp殘基的
41、羧基侧殘基的羧基侧殘基的羧基侧殘基的羧基侧殘基的羧基侧殘基的羧基侧断裂肽键断裂肽键断裂肽键断裂肽键断裂肽键断裂肽键n nnNHNHNH4 44HCOHCOHCO3 33缓冲液缓冲液缓冲液缓冲液缓冲液缓冲液PH7.8PH7.8PH7.8,或或或或或或醋酸铵缓冲液醋酸铵缓冲液醋酸铵缓冲液醋酸铵缓冲液醋酸铵缓冲液醋酸铵缓冲液PH4.0PH4.0PH4.0中,中,中,中,中,中,只只只只只只能断裂能断裂能断裂能断裂能断裂能断裂GluGluGlu殘基的羧基侧肽键殘基的羧基侧肽键殘基的羧基侧肽键殘基的羧基侧肽键殘基的羧基侧肽键殘基的羧基侧肽键n nn梭状芽孢杆菌蛋白酶(梭状芽孢杆菌蛋白酶(梭状芽孢杆菌蛋白
42、酶(梭状芽孢杆菌蛋白酶(梭状芽孢杆菌蛋白酶(梭状芽孢杆菌蛋白酶(ArgArgArg蛋白酶)蛋白酶)蛋白酶)蛋白酶)蛋白酶)蛋白酶)n nn专门裂解专门裂解专门裂解专门裂解专门裂解专门裂解ArgArgArg殘基殘基殘基殘基殘基殘基的的的的的的COOHCOOHCOOH所形成的肽键,对不溶性所形成的肽键,对不溶性所形成的肽键,对不溶性所形成的肽键,对不溶性所形成的肽键,对不溶性所形成的肽键,对不溶性蛋白质的蛋白质的蛋白质的蛋白质的蛋白质的蛋白质的长时间裂解长时间裂解长时间裂解长时间裂解长时间裂解长时间裂解很有效很有效很有效很有效很有效很有效 蛋白质IIn nn肽段的拼接次序确定肽段的拼接次序确定肽段
43、的拼接次序确定肽段的拼接次序确定肽段的拼接次序确定肽段的拼接次序确定n nn利用不同的方法获得多种肽段组合利用不同的方法获得多种肽段组合利用不同的方法获得多种肽段组合利用不同的方法获得多种肽段组合利用不同的方法获得多种肽段组合利用不同的方法获得多种肽段组合n nn断裂点位置差异越大越好断裂点位置差异越大越好断裂点位置差异越大越好断裂点位置差异越大越好断裂点位置差异越大越好断裂点位置差异越大越好n nn断裂点不宜过多或过少断裂点不宜过多或过少断裂点不宜过多或过少断裂点不宜过多或过少断裂点不宜过多或过少断裂点不宜过多或过少n nn确定确定确定确定确定确定N NN、C CC末端的末端的末端的末端的末
44、端的末端的AaAaAa残基残基残基残基残基残基n nn确定各个肽段的确定各个肽段的确定各个肽段的确定各个肽段的确定各个肽段的确定各个肽段的AaAaAa顺序顺序顺序顺序顺序顺序n nn根据不同的肽段组合内根据不同的肽段组合内根据不同的肽段组合内根据不同的肽段组合内根据不同的肽段组合内根据不同的肽段组合内AaAaAa顺序的部分重叠,确定肽段的拼顺序的部分重叠,确定肽段的拼顺序的部分重叠,确定肽段的拼顺序的部分重叠,确定肽段的拼顺序的部分重叠,确定肽段的拼顺序的部分重叠,确定肽段的拼接次序接次序接次序接次序接次序接次序n nn二硫键的位置确定二硫键的位置确定二硫键的位置确定二硫键的位置确定二硫键的位
45、置确定二硫键的位置确定n nn胃蛋白酶水解胃蛋白酶水解胃蛋白酶水解胃蛋白酶水解胃蛋白酶水解胃蛋白酶水解n nn过甲酸打开二硫键过甲酸打开二硫键过甲酸打开二硫键过甲酸打开二硫键过甲酸打开二硫键过甲酸打开二硫键n nn双向电泳法分析。双向电泳法分析。双向电泳法分析。双向电泳法分析。双向电泳法分析。双向电泳法分析。蛋白质IIn nn蛋白质的一级结构和生物功能的关系蛋白质的一级结构和生物功能的关系蛋白质的一级结构和生物功能的关系蛋白质的一级结构和生物功能的关系n nn同源蛋白质的种属差异与生物进化同源蛋白质的种属差异与生物进化同源蛋白质的种属差异与生物进化同源蛋白质的种属差异与生物进化同源蛋白质的种属
46、差异与生物进化同源蛋白质的种属差异与生物进化n nn基本概念:基本概念:基本概念:基本概念:基本概念:基本概念:n nn同源蛋白质:在不同的有机体中实现同一功能的蛋白质同源蛋白质:在不同的有机体中实现同一功能的蛋白质同源蛋白质:在不同的有机体中实现同一功能的蛋白质同源蛋白质:在不同的有机体中实现同一功能的蛋白质同源蛋白质:在不同的有机体中实现同一功能的蛋白质同源蛋白质:在不同的有机体中实现同一功能的蛋白质n nn顺序同源:同源蛋白质的顺序同源:同源蛋白质的顺序同源:同源蛋白质的顺序同源:同源蛋白质的顺序同源:同源蛋白质的顺序同源:同源蛋白质的AaAaAa顺序的相似性。顺序的相似性。顺序的相似性
47、。顺序的相似性。顺序的相似性。顺序的相似性。n nn不变残基:同源蛋白质不变残基:同源蛋白质不变残基:同源蛋白质不变残基:同源蛋白质不变残基:同源蛋白质不变残基:同源蛋白质AaAaAa顺序中对所有的种属来说都相同顺序中对所有的种属来说都相同顺序中对所有的种属来说都相同顺序中对所有的种属来说都相同顺序中对所有的种属来说都相同顺序中对所有的种属来说都相同的的的的的的AaAaAa残基残基残基残基残基残基n nn可变残基:不同种属有相当大的变化的可变残基:不同种属有相当大的变化的可变残基:不同种属有相当大的变化的可变残基:不同种属有相当大的变化的可变残基:不同种属有相当大的变化的可变残基:不同种属有相
48、当大的变化的AaAaAa残基残基残基残基残基残基n nn生物学意义生物学意义生物学意义生物学意义生物学意义生物学意义n nn生物进化的标记,生物进化的标记,生物进化的标记,生物进化的标记,生物进化的标记,生物进化的标记,e.g.e.g.e.g.细胞色素细胞色素细胞色素细胞色素细胞色素细胞色素C CCn nn遗传变异的分子基础,遗传变异的分子基础,遗传变异的分子基础,遗传变异的分子基础,遗传变异的分子基础,遗传变异的分子基础,e.g.e.g.e.g.镰刀型贫血病镰刀型贫血病镰刀型贫血病镰刀型贫血病镰刀型贫血病镰刀型贫血病蛋白质IIn nn一级结构的改变与蛋白质的活性变化一级结构的改变与蛋白质的活
49、性变化一级结构的改变与蛋白质的活性变化一级结构的改变与蛋白质的活性变化一级结构的改变与蛋白质的活性变化一级结构的改变与蛋白质的活性变化n nn局部断裂与蛋白质的激活局部断裂与蛋白质的激活局部断裂与蛋白质的激活局部断裂与蛋白质的激活局部断裂与蛋白质的激活局部断裂与蛋白质的激活n nn胰岛素原的激活胰岛素原的激活胰岛素原的激活胰岛素原的激活胰岛素原的激活胰岛素原的激活n nn前胰岛素原前胰岛素原前胰岛素原前胰岛素原前胰岛素原前胰岛素原(N(N(N末端多一段肽链末端多一段肽链末端多一段肽链末端多一段肽链末端多一段肽链末端多一段肽链, ,信号肽引导新生的多肽信号肽引导新生的多肽信号肽引导新生的多肽信号
50、肽引导新生的多肽信号肽引导新生的多肽信号肽引导新生的多肽链进入内质网链进入内质网链进入内质网链进入内质网链进入内质网链进入内质网) ) ) 胰岛素原胰岛素原胰岛素原胰岛素原胰岛素原胰岛素原( (信号肽被切信号肽被切信号肽被切信号肽被切信号肽被切信号肽被切) (Golgi) (Golgi) (Golgi体体体体体体) ) ) 胰岛素胰岛素胰岛素胰岛素胰岛素胰岛素( (肽酶催化胰岛素的二个特定肽键断裂肽酶催化胰岛素的二个特定肽键断裂肽酶催化胰岛素的二个特定肽键断裂肽酶催化胰岛素的二个特定肽键断裂肽酶催化胰岛素的二个特定肽键断裂肽酶催化胰岛素的二个特定肽键断裂) )n nn血液凝固的机制血液凝固的机
51、制血液凝固的机制血液凝固的机制血液凝固的机制血液凝固的机制n nn131313种凝血因子构成凝血系统种凝血因子构成凝血系统种凝血因子构成凝血系统种凝血因子构成凝血系统种凝血因子构成凝血系统种凝血因子构成凝血系统n nn血浆纤维蛋白原在凝血酶的激活作用下转变为不溶性血浆纤维蛋白原在凝血酶的激活作用下转变为不溶性血浆纤维蛋白原在凝血酶的激活作用下转变为不溶性血浆纤维蛋白原在凝血酶的激活作用下转变为不溶性血浆纤维蛋白原在凝血酶的激活作用下转变为不溶性血浆纤维蛋白原在凝血酶的激活作用下转变为不溶性纤维蛋白。纤维蛋白。纤维蛋白。纤维蛋白。纤维蛋白。纤维蛋白。n nn激活作用是通过凝血酶切去纤维蛋白原激活
52、作用是通过凝血酶切去纤维蛋白原激活作用是通过凝血酶切去纤维蛋白原激活作用是通过凝血酶切去纤维蛋白原激活作用是通过凝血酶切去纤维蛋白原激活作用是通过凝血酶切去纤维蛋白原N NN末端富含酸末端富含酸末端富含酸末端富含酸末端富含酸末端富含酸性氨基酸的性氨基酸的性氨基酸的性氨基酸的性氨基酸的性氨基酸的A AA、B BB肽,然后在肽,然后在肽,然后在肽,然后在肽,然后在肽,然后在XIIIaXIIIaXIIIa(纤维蛋白稳定因(纤维蛋白稳定因(纤维蛋白稳定因(纤维蛋白稳定因(纤维蛋白稳定因(纤维蛋白稳定因子)作用下,发生交联而实现凝血子)作用下,发生交联而实现凝血子)作用下,发生交联而实现凝血子)作用下,
53、发生交联而实现凝血子)作用下,发生交联而实现凝血子)作用下,发生交联而实现凝血 蛋白质IIn nn其他一级结构变化与功能其他一级结构变化与功能其他一级结构变化与功能其他一级结构变化与功能其他一级结构变化与功能其他一级结构变化与功能n nn磷酸化:许多生物酶可以通过磷酸化磷酸化:许多生物酶可以通过磷酸化磷酸化:许多生物酶可以通过磷酸化磷酸化:许多生物酶可以通过磷酸化磷酸化:许多生物酶可以通过磷酸化磷酸化:许多生物酶可以通过磷酸化/ /去磷酸化实现活性去磷酸化实现活性去磷酸化实现活性去磷酸化实现活性去磷酸化实现活性去磷酸化实现活性的改变。的改变。的改变。的改变。的改变。的改变。n nn连接糖链:活
54、性、抗原性、寿命连接糖链:活性、抗原性、寿命连接糖链:活性、抗原性、寿命连接糖链:活性、抗原性、寿命连接糖链:活性、抗原性、寿命连接糖链:活性、抗原性、寿命n nn连接脂质:活性、溶解性连接脂质:活性、溶解性连接脂质:活性、溶解性连接脂质:活性、溶解性连接脂质:活性、溶解性连接脂质:活性、溶解性蛋白质II蛋白质的二级结构蛋白质的二级结构蛋白质的二级结构蛋白质的二级结构n nn二级结构的定义和研究方法二级结构的定义和研究方法二级结构的定义和研究方法二级结构的定义和研究方法二级结构的定义和研究方法二级结构的定义和研究方法:n nn定义:定义:定义:定义:定义:定义:n nn蛋白质的二级结构蛋白质的
55、二级结构蛋白质的二级结构蛋白质的二级结构蛋白质的二级结构蛋白质的二级结构( ( ( ( (SecondarystructureSecondarystructureSecondarystructure) ) ) ) )是指肽链的主链在空是指肽链的主链在空是指肽链的主链在空是指肽链的主链在空是指肽链的主链在空是指肽链的主链在空间的排列间的排列间的排列间的排列间的排列间的排列, , , , ,或规则的几何走向、旋转及折叠。它只涉及肽链主或规则的几何走向、旋转及折叠。它只涉及肽链主或规则的几何走向、旋转及折叠。它只涉及肽链主或规则的几何走向、旋转及折叠。它只涉及肽链主或规则的几何走向、旋转及折叠。它只
56、涉及肽链主或规则的几何走向、旋转及折叠。它只涉及肽链主链的构象及链内或链间形成的氢键链的构象及链内或链间形成的氢键链的构象及链内或链间形成的氢键链的构象及链内或链间形成的氢键链的构象及链内或链间形成的氢键链的构象及链内或链间形成的氢键n nn研究方法研究方法研究方法研究方法研究方法研究方法:n nnX-X-X-X-X-X-衍射衍射衍射衍射衍射衍射n nn圆二色性圆二色性圆二色性圆二色性圆二色性圆二色性n nn核磁共振核磁共振核磁共振核磁共振核磁共振核磁共振n nn荧光偏振荧光偏振荧光偏振荧光偏振荧光偏振荧光偏振蛋白质IIn nn肽平面二面角与蛋白质二级结构肽平面二面角与蛋白质二级结构肽平面二面
57、角与蛋白质二级结构肽平面二面角与蛋白质二级结构n nnC C C -N-N-N1 11,C C C -C-C-C2 22单键,可自由旋转单键,可自由旋转单键,可自由旋转单键,可自由旋转单键,可自由旋转单键,可自由旋转n nn 角角角角角角- - -绕绕绕绕绕绕C C C -N-N-N1 11键旋转的角度键旋转的角度键旋转的角度键旋转的角度键旋转的角度键旋转的角度n nn 角角角角角角- - -绕绕绕绕绕绕C C C -C-C-C2 22键旋转的角度键旋转的角度键旋转的角度键旋转的角度键旋转的角度键旋转的角度n nn 、 原则上可以在原则上可以在原则上可以在原则上可以在原则上可以在原则上可以在-
58、180-+180-180-+180-180-+180 之间任意取值之间任意取值之间任意取值之间任意取值之间任意取值之间任意取值n nn多肽链的所有可能构象都能用多肽链的所有可能构象都能用多肽链的所有可能构象都能用多肽链的所有可能构象都能用多肽链的所有可能构象都能用多肽链的所有可能构象都能用 、 这两个这两个这两个这两个这两个这两个构象角构象角构象角构象角构象角构象角描述,描述,描述,描述,描述,描述, 每一对每一对每一对每一对每一对每一对 、 称称称称称称肽平面的二面角。肽平面的二面角。肽平面的二面角。肽平面的二面角。肽平面的二面角。肽平面的二面角。n nnRamachandranRamach
59、andranRamachandran构象图构象图构象图构象图构象图构象图n nn可能构象分析:由于分子间的相互作用力,并非所可能构象分析:由于分子间的相互作用力,并非所可能构象分析:由于分子间的相互作用力,并非所可能构象分析:由于分子间的相互作用力,并非所可能构象分析:由于分子间的相互作用力,并非所可能构象分析:由于分子间的相互作用力,并非所有构象都可以形成有构象都可以形成有构象都可以形成有构象都可以形成有构象都可以形成有构象都可以形成n nnRamachandranRamachandranRamachandran构象图的预测作用构象图的预测作用构象图的预测作用构象图的预测作用构象图的预测作用
60、构象图的预测作用蛋白质II几种常见的二级结构几种常见的二级结构n nn - -螺旋(螺旋(螺旋(螺旋( -helix)-helix)n nn结构要点:结构要点:结构要点:结构要点:结构要点:结构要点:n nn肽链内每个残基肽链内每个残基肽链内每个残基肽链内每个残基肽链内每个残基肽链内每个残基C C C 的成对二面角的成对二面角的成对二面角的成对二面角的成对二面角的成对二面角和和和和和和各自取同一各自取同一各自取同一各自取同一各自取同一各自取同一数值数值数值数值数值数值 : 575757 484848n nn右手、左手螺旋。均由右手、左手螺旋。均由右手、左手螺旋。均由右手、左手螺旋。均由右手、左
61、手螺旋。均由右手、左手螺旋。均由L-L-L-型型型型型型AaAaAa残基构成残基构成残基构成残基构成残基构成残基构成 ,右手右手右手右手右手右手 - - -螺螺螺螺螺螺旋和左手旋和左手旋和左手旋和左手旋和左手旋和左手 - - -螺旋不是对映体,蛋白质中螺旋不是对映体,蛋白质中螺旋不是对映体,蛋白质中螺旋不是对映体,蛋白质中螺旋不是对映体,蛋白质中螺旋不是对映体,蛋白质中 - - -螺旋几乎螺旋几乎螺旋几乎螺旋几乎螺旋几乎螺旋几乎均为右手的,右手的比左手的稳定均为右手的,右手的比左手的稳定均为右手的,右手的比左手的稳定均为右手的,右手的比左手的稳定均为右手的,右手的比左手的稳定均为右手的,右手的
62、比左手的稳定n nn每圈螺旋占每圈螺旋占每圈螺旋占每圈螺旋占每圈螺旋占每圈螺旋占3.63.63.6个个个个个个AAAAAA残基,沿螺旋轴方向上升残基,沿螺旋轴方向上升残基,沿螺旋轴方向上升残基,沿螺旋轴方向上升残基,沿螺旋轴方向上升残基,沿螺旋轴方向上升0.54nm0.54nm0.54nm。 n nn肽链内形成氢键,氢键的取向几乎与轴平行,肽链内形成氢键,氢键的取向几乎与轴平行,肽链内形成氢键,氢键的取向几乎与轴平行,肽链内形成氢键,氢键的取向几乎与轴平行,肽链内形成氢键,氢键的取向几乎与轴平行,肽链内形成氢键,氢键的取向几乎与轴平行,第一第一第一第一第一第一个氨基酸残基的个氨基酸残基的个氨基
63、酸残基的个氨基酸残基的个氨基酸残基的个氨基酸残基的酰胺基团的酰胺基团的酰胺基团的酰胺基团的酰胺基团的酰胺基团的-C=O-C=O-C=O-C=O-C=O-C=O基基基基基基与与与与与与第四第四第四第四第四第四个氨基酸个氨基酸个氨基酸个氨基酸个氨基酸个氨基酸残基酰胺基团的残基酰胺基团的残基酰胺基团的残基酰胺基团的残基酰胺基团的残基酰胺基团的-NH-NH-NH-NH-NH-NH基基基基基基形成氢键。形成氢键。形成氢键。形成氢键。形成氢键。形成氢键。 蛋白质IIn nn - - -螺旋是不对称的分子结构,具有旋光能力,天然螺旋是不对称的分子结构,具有旋光能力,天然螺旋是不对称的分子结构,具有旋光能力,
64、天然螺旋是不对称的分子结构,具有旋光能力,天然螺旋是不对称的分子结构,具有旋光能力,天然螺旋是不对称的分子结构,具有旋光能力,天然-helix-helix-helix的不对称因素引起右旋。的不对称因素引起右旋。的不对称因素引起右旋。的不对称因素引起右旋。的不对称因素引起右旋。的不对称因素引起右旋。 n nn - - -螺旋结构的结构通式与命名螺旋结构的结构通式与命名螺旋结构的结构通式与命名螺旋结构的结构通式与命名螺旋结构的结构通式与命名螺旋结构的结构通式与命名n nn - - -螺旋结构中重复性结构螺旋结构中重复性结构螺旋结构中重复性结构螺旋结构中重复性结构螺旋结构中重复性结构螺旋结构中重复性
65、结构n nn命名:第一个数字表示每圈螺旋包含的残基数,下命名:第一个数字表示每圈螺旋包含的残基数,下命名:第一个数字表示每圈螺旋包含的残基数,下命名:第一个数字表示每圈螺旋包含的残基数,下命名:第一个数字表示每圈螺旋包含的残基数,下命名:第一个数字表示每圈螺旋包含的残基数,下标数字表示氢键封闭的环所包含的主链原子数,同标数字表示氢键封闭的环所包含的主链原子数,同标数字表示氢键封闭的环所包含的主链原子数,同标数字表示氢键封闭的环所包含的主链原子数,同标数字表示氢键封闭的环所包含的主链原子数,同标数字表示氢键封闭的环所包含的主链原子数,同时也可标出氢键封闭的环内的重复单位数时也可标出氢键封闭的环内
66、的重复单位数时也可标出氢键封闭的环内的重复单位数时也可标出氢键封闭的环内的重复单位数时也可标出氢键封闭的环内的重复单位数时也可标出氢键封闭的环内的重复单位数n nn常见的螺旋形式常见的螺旋形式常见的螺旋形式常见的螺旋形式常见的螺旋形式常见的螺旋形式n nn3.63.63.6131313螺旋螺旋螺旋螺旋螺旋螺旋(n=3)(n=3)(n=3):非整数螺旋,蛋白质中非整数螺旋,蛋白质中非整数螺旋,蛋白质中非整数螺旋,蛋白质中非整数螺旋,蛋白质中非整数螺旋,蛋白质中 - -螺旋结构的主螺旋结构的主螺旋结构的主螺旋结构的主螺旋结构的主螺旋结构的主要类型。要类型。要类型。要类型。要类型。要类型。n nn3
67、 33101010螺旋(螺旋(螺旋(螺旋(螺旋(螺旋(n=2n=2n=2):一般只出现在):一般只出现在):一般只出现在):一般只出现在):一般只出现在):一般只出现在 - -转角内转角内转角内转角内转角内转角内n nn4.44.44.4161616螺旋(螺旋(螺旋(螺旋(螺旋(螺旋(n=4n=4n=4): : : 紧缩螺旋,某些核酸结合蛋白紧缩螺旋,某些核酸结合蛋白紧缩螺旋,某些核酸结合蛋白紧缩螺旋,某些核酸结合蛋白紧缩螺旋,某些核酸结合蛋白紧缩螺旋,某些核酸结合蛋白 蛋白质IIn nn不同氨基酸对不同氨基酸对不同氨基酸对不同氨基酸对不同氨基酸对不同氨基酸对 - - -螺旋结构形成的影响螺旋
68、结构形成的影响螺旋结构形成的影响螺旋结构形成的影响螺旋结构形成的影响螺旋结构形成的影响n nn利用多聚氨基酸分析利用多聚氨基酸分析利用多聚氨基酸分析利用多聚氨基酸分析利用多聚氨基酸分析利用多聚氨基酸分析n nnR RR基小,不带电荷的基小,不带电荷的基小,不带电荷的基小,不带电荷的基小,不带电荷的基小,不带电荷的AaAaAa,易于形成,易于形成,易于形成,易于形成,易于形成,易于形成 - - -螺旋结构:螺旋结构:螺旋结构:螺旋结构:螺旋结构:螺旋结构:AlaAlaAla、ValValVal、 GluGluGlu、HisHisHis等等等等等等n nn当一圈螺旋形成以后,再加入残基形成螺旋就变
69、得容当一圈螺旋形成以后,再加入残基形成螺旋就变得容当一圈螺旋形成以后,再加入残基形成螺旋就变得容当一圈螺旋形成以后,再加入残基形成螺旋就变得容当一圈螺旋形成以后,再加入残基形成螺旋就变得容当一圈螺旋形成以后,再加入残基形成螺旋就变得容易了易了易了易了易了易了n nn带相同电荷的带相同电荷的带相同电荷的带相同电荷的带相同电荷的带相同电荷的AaAaAa,相互临近的区域,不容易形成,相互临近的区域,不容易形成,相互临近的区域,不容易形成,相互临近的区域,不容易形成,相互临近的区域,不容易形成,相互临近的区域,不容易形成 - - -螺螺螺螺螺螺旋结构旋结构旋结构旋结构旋结构旋结构n nnC CC 附近
70、支附近支附近支附近支附近支附近支链长的氨基酸,对链长的氨基酸,对链长的氨基酸,对链长的氨基酸,对链长的氨基酸,对链长的氨基酸,对 - - -螺旋的形成是不利的,螺旋的形成是不利的,螺旋的形成是不利的,螺旋的形成是不利的,螺旋的形成是不利的,螺旋的形成是不利的,尤其尤其尤其尤其尤其尤其IleIleIle将破坏将破坏将破坏将破坏将破坏将破坏 - - -螺旋的稳定螺旋的稳定螺旋的稳定螺旋的稳定螺旋的稳定螺旋的稳定n nnProProPro的的的的的的C C C -N-N-N1 11,C C C -C-C-C2 22单键单键单键单键单键单键不能旋转,不具有亚氨基,不不能旋转,不具有亚氨基,不不能旋转,
71、不具有亚氨基,不不能旋转,不具有亚氨基,不不能旋转,不具有亚氨基,不不能旋转,不具有亚氨基,不能形成链内氢键,所以能形成链内氢键,所以能形成链内氢键,所以能形成链内氢键,所以能形成链内氢键,所以能形成链内氢键,所以 - - -螺旋在螺旋在螺旋在螺旋在螺旋在螺旋在ProProPro处中断,形成结节处中断,形成结节处中断,形成结节处中断,形成结节处中断,形成结节处中断,形成结节(kinkkinkkink)。)。)。)。)。)。n nnGlyGlyGly由于空间位阻小,构象柔性大,由于空间位阻小,构象柔性大,由于空间位阻小,构象柔性大,由于空间位阻小,构象柔性大,由于空间位阻小,构象柔性大,由于空间
72、位阻小,构象柔性大, 常形成常形成常形成常形成常形成常形成-转角转角转角转角转角转角 蛋白质IIn nn - -折叠折叠折叠折叠( ( -pleated sheet)-pleated sheet)n nn结构要点结构要点结构要点结构要点结构要点结构要点n nn两条或多条几乎完全伸展的多肽链侧向聚集在一起,两条或多条几乎完全伸展的多肽链侧向聚集在一起,两条或多条几乎完全伸展的多肽链侧向聚集在一起,两条或多条几乎完全伸展的多肽链侧向聚集在一起,两条或多条几乎完全伸展的多肽链侧向聚集在一起,两条或多条几乎完全伸展的多肽链侧向聚集在一起,相邻肽链上的相邻肽链上的相邻肽链上的相邻肽链上的相邻肽链上的相邻
73、肽链上的NHNHNH和和和和和和C CCO OO之间形成有规则的氢键,之间形成有规则的氢键,之间形成有规则的氢键,之间形成有规则的氢键,之间形成有规则的氢键,之间形成有规则的氢键,这样的多肽构象就是这样的多肽构象就是这样的多肽构象就是这样的多肽构象就是这样的多肽构象就是这样的多肽构象就是 折叠。折叠。折叠。折叠。折叠。折叠。n nn平行式:各肽链的排列极性(平行式:各肽链的排列极性(平行式:各肽链的排列极性(平行式:各肽链的排列极性(平行式:各肽链的排列极性(平行式:各肽链的排列极性(NCNCNC)是同一方向的,)是同一方向的,)是同一方向的,)是同一方向的,)是同一方向的,)是同一方向的,
74、119119119 +113+113+113,重复周期,重复周期,重复周期,重复周期,重复周期,重复周期0.65nm0.65nm0.65nm,常见于,常见于,常见于,常见于,常见于,常见于球状蛋球状蛋球状蛋球状蛋球状蛋球状蛋白白白白白白 n nn反平行式:相邻肽链的极性相反,反平行式:相邻肽链的极性相反,反平行式:相邻肽链的极性相反,反平行式:相邻肽链的极性相反,反平行式:相邻肽链的极性相反,反平行式:相邻肽链的极性相反, 139139139 +135+135+135重重重重重重复周期复周期复周期复周期复周期复周期0.70nm0.70nm0.70nm,常见于常见于常见于常见于常见于常见于纤维状
75、蛋白纤维状蛋白纤维状蛋白纤维状蛋白纤维状蛋白纤维状蛋白 n nn所有的肽键都参与链间氢键的交联,氢键与肽链的长所有的肽键都参与链间氢键的交联,氢键与肽链的长所有的肽键都参与链间氢键的交联,氢键与肽链的长所有的肽键都参与链间氢键的交联,氢键与肽链的长所有的肽键都参与链间氢键的交联,氢键与肽链的长所有的肽键都参与链间氢键的交联,氢键与肽链的长轴接近垂直。轴接近垂直。轴接近垂直。轴接近垂直。轴接近垂直。轴接近垂直。n nn多肽主链为据齿状折叠构象,侧链的多肽主链为据齿状折叠构象,侧链的多肽主链为据齿状折叠构象,侧链的多肽主链为据齿状折叠构象,侧链的多肽主链为据齿状折叠构象,侧链的多肽主链为据齿状折叠
76、构象,侧链的C CC C CC 键几乎键几乎键几乎键几乎键几乎键几乎垂直于折叠片平面,侧链垂直于折叠片平面,侧链垂直于折叠片平面,侧链垂直于折叠片平面,侧链垂直于折叠片平面,侧链垂直于折叠片平面,侧链R RR基交替地分布在片层平面基交替地分布在片层平面基交替地分布在片层平面基交替地分布在片层平面基交替地分布在片层平面基交替地分布在片层平面的两侧的两侧的两侧的两侧的两侧的两侧蛋白质IIn nn纤维状蛋白的纤维状蛋白的纤维状蛋白的纤维状蛋白的纤维状蛋白的纤维状蛋白的 - - -折叠主要在不同肽链间形成,而球状折叠主要在不同肽链间形成,而球状折叠主要在不同肽链间形成,而球状折叠主要在不同肽链间形成,
77、而球状折叠主要在不同肽链间形成,而球状折叠主要在不同肽链间形成,而球状蛋白则可以在肽链的不同片段间形成蛋白则可以在肽链的不同片段间形成蛋白则可以在肽链的不同片段间形成蛋白则可以在肽链的不同片段间形成蛋白则可以在肽链的不同片段间形成蛋白则可以在肽链的不同片段间形成n nn常出现在常出现在常出现在常出现在常出现在常出现在 - - -折叠的折叠的折叠的折叠的折叠的折叠的AaAaAa:n nnIleIleIle、LeuLeuLeu、TyrTyrTyr、ValValVal、PhePhePhe、LysLysLysn nn-转角(转角(转角(转角( -trun-trun)n nn结构要点结构要点结构要点结构
78、要点结构要点结构要点n nn三种类型:三种类型:三种类型:三种类型:三种类型:三种类型: 每种类型都有每种类型都有每种类型都有每种类型都有每种类型都有每种类型都有4 4 4个个个个个个AaAaAa残基残基残基残基残基残基n nn类型类型类型类型类型类型I II、类型、类型、类型、类型、类型、类型II IIII,均为伸展弯折(无螺旋),差别在于中心,均为伸展弯折(无螺旋),差别在于中心,均为伸展弯折(无螺旋),差别在于中心,均为伸展弯折(无螺旋),差别在于中心,均为伸展弯折(无螺旋),差别在于中心,均为伸展弯折(无螺旋),差别在于中心肽单位相互之间有肽单位相互之间有肽单位相互之间有肽单位相互之间
79、有肽单位相互之间有肽单位相互之间有180180180 的旋转关系的旋转关系的旋转关系的旋转关系的旋转关系的旋转关系n nn类型类型类型类型类型类型IIIIIIIII在第一和第三个氨基酸残基之间形成一小段在第一和第三个氨基酸残基之间形成一小段在第一和第三个氨基酸残基之间形成一小段在第一和第三个氨基酸残基之间形成一小段在第一和第三个氨基酸残基之间形成一小段在第一和第三个氨基酸残基之间形成一小段3 33101010螺旋螺旋螺旋螺旋螺旋螺旋n nn弯曲处的第一个残基的弯曲处的第一个残基的弯曲处的第一个残基的弯曲处的第一个残基的弯曲处的第一个残基的弯曲处的第一个残基的C=OC=OC=O和第四个残基的和第
80、四个残基的和第四个残基的和第四个残基的和第四个残基的和第四个残基的NHNHNH之间之间之间之间之间之间形成一个形成一个形成一个形成一个形成一个形成一个414141氢键。产生一种不很稳定的环形结构氢键。产生一种不很稳定的环形结构氢键。产生一种不很稳定的环形结构氢键。产生一种不很稳定的环形结构氢键。产生一种不很稳定的环形结构氢键。产生一种不很稳定的环形结构n nn -转角多数都处在球状蛋白质分子表面转角多数都处在球状蛋白质分子表面转角多数都处在球状蛋白质分子表面转角多数都处在球状蛋白质分子表面转角多数都处在球状蛋白质分子表面转角多数都处在球状蛋白质分子表面 蛋白质IIn nn常出现在常出现在常出现
81、在常出现在常出现在常出现在-转角的转角的转角的转角的转角的转角的AaAaAan nn类型类型类型类型类型类型II IIII的的的的的的C CC3 33常为常为常为常为常为常为GlyGlyGlyn nnAsnAsnAsn、AspAspAsp、ProProPro、CysCysCys、SerSerSer、ThrThrThr蛋白质II蛋白质的三级结构蛋白质的三级结构n nn定义:定义:n nn蛋白质的三级结构蛋白质的三级结构蛋白质的三级结构蛋白质的三级结构蛋白质的三级结构蛋白质的三级结构( ( ( ( ( (TertiaryStructureTertiaryStructureTertiaryStruc
82、ture) ) ) ) ) )是指在是指在是指在是指在是指在是指在二级结构基础上,肽链的不同区段的侧链基团二级结构基础上,肽链的不同区段的侧链基团二级结构基础上,肽链的不同区段的侧链基团二级结构基础上,肽链的不同区段的侧链基团二级结构基础上,肽链的不同区段的侧链基团二级结构基础上,肽链的不同区段的侧链基团相互作用在空间进一步盘绕、折叠形成的包括相互作用在空间进一步盘绕、折叠形成的包括相互作用在空间进一步盘绕、折叠形成的包括相互作用在空间进一步盘绕、折叠形成的包括相互作用在空间进一步盘绕、折叠形成的包括相互作用在空间进一步盘绕、折叠形成的包括主链和侧链构象在内的特征三维结构。主链和侧链构象在内的
83、特征三维结构。主链和侧链构象在内的特征三维结构。主链和侧链构象在内的特征三维结构。主链和侧链构象在内的特征三维结构。主链和侧链构象在内的特征三维结构。n nn单条肽链构成的蛋白质所具有的最高级构象单条肽链构成的蛋白质所具有的最高级构象单条肽链构成的蛋白质所具有的最高级构象单条肽链构成的蛋白质所具有的最高级构象单条肽链构成的蛋白质所具有的最高级构象单条肽链构成的蛋白质所具有的最高级构象n nn蛋白质表现完整生物活性的最低构象要求,即只有蛋白质表现完整生物活性的最低构象要求,即只有蛋白质表现完整生物活性的最低构象要求,即只有蛋白质表现完整生物活性的最低构象要求,即只有蛋白质表现完整生物活性的最低构
84、象要求,即只有蛋白质表现完整生物活性的最低构象要求,即只有具有了完整的三级结构,才能表现出蛋白质的生物具有了完整的三级结构,才能表现出蛋白质的生物具有了完整的三级结构,才能表现出蛋白质的生物具有了完整的三级结构,才能表现出蛋白质的生物具有了完整的三级结构,才能表现出蛋白质的生物具有了完整的三级结构,才能表现出蛋白质的生物活性活性活性活性活性活性蛋白质IIn nn超二级结构(超二级结构(超二级结构(超二级结构(super-secondary structuresuper-secondary structure)n nn定义:定义:定义:定义:定义:定义:n nn在蛋白质中,特别是球状蛋白质中,若
85、干相邻的二在蛋白质中,特别是球状蛋白质中,若干相邻的二在蛋白质中,特别是球状蛋白质中,若干相邻的二在蛋白质中,特别是球状蛋白质中,若干相邻的二在蛋白质中,特别是球状蛋白质中,若干相邻的二在蛋白质中,特别是球状蛋白质中,若干相邻的二级结构单元组合在一起。彼此相互作用,形成有规级结构单元组合在一起。彼此相互作用,形成有规级结构单元组合在一起。彼此相互作用,形成有规级结构单元组合在一起。彼此相互作用,形成有规级结构单元组合在一起。彼此相互作用,形成有规级结构单元组合在一起。彼此相互作用,形成有规则,在空间上能辨认的二级结构组合体充当三级结则,在空间上能辨认的二级结构组合体充当三级结则,在空间上能辨认
86、的二级结构组合体充当三级结则,在空间上能辨认的二级结构组合体充当三级结则,在空间上能辨认的二级结构组合体充当三级结则,在空间上能辨认的二级结构组合体充当三级结构的构体,称为超二级结构。构的构体,称为超二级结构。构的构体,称为超二级结构。构的构体,称为超二级结构。构的构体,称为超二级结构。构的构体,称为超二级结构。n nn在结构的组织层次上高于二级结构,但没有构成完整的结在结构的组织层次上高于二级结构,但没有构成完整的结在结构的组织层次上高于二级结构,但没有构成完整的结在结构的组织层次上高于二级结构,但没有构成完整的结在结构的组织层次上高于二级结构,但没有构成完整的结在结构的组织层次上高于二级结
87、构,但没有构成完整的结构域构域构域构域构域构域n nn常见的超二级结构常见的超二级结构常见的超二级结构常见的超二级结构常见的超二级结构常见的超二级结构n nn型型型型型型n nn由两股或三股右手由两股或三股右手由两股或三股右手由两股或三股右手由两股或三股右手由两股或三股右手 helixhelixhelix彼此缠绕而成的左手超螺旋,彼此缠绕而成的左手超螺旋,彼此缠绕而成的左手超螺旋,彼此缠绕而成的左手超螺旋,彼此缠绕而成的左手超螺旋,彼此缠绕而成的左手超螺旋,重复距离约为重复距离约为重复距离约为重复距离约为重复距离约为重复距离约为14nm14nm14nmn nn是是是是是是 角蛋白、肌球蛋白、原
88、肌球蛋白、纤维蛋白质中的角蛋白、肌球蛋白、原肌球蛋白、纤维蛋白质中的角蛋白、肌球蛋白、原肌球蛋白、纤维蛋白质中的角蛋白、肌球蛋白、原肌球蛋白、纤维蛋白质中的角蛋白、肌球蛋白、原肌球蛋白、纤维蛋白质中的角蛋白、肌球蛋白、原肌球蛋白、纤维蛋白质中的一种超二级结构一种超二级结构一种超二级结构一种超二级结构一种超二级结构一种超二级结构 蛋白质IIn nn helixhelixhelix的结构作出相应调整的结构作出相应调整的结构作出相应调整的结构作出相应调整的结构作出相应调整的结构作出相应调整n nn每圈螺旋为每圈螺旋为每圈螺旋为每圈螺旋为每圈螺旋为每圈螺旋为3.53.53.5个残基,重复单位个残基,重
89、复单位个残基,重复单位个残基,重复单位个残基,重复单位个残基,重复单位0.0.0. 51nm51nm51nm n nn单个的单个的单个的单个的单个的单个的 helixhelixhelix每隔每隔每隔每隔每隔每隔7 77个残基重复一次个残基重复一次个残基重复一次个残基重复一次个残基重复一次个残基重复一次 n nn稳定因素是非极性侧链间的范德华力稳定因素是非极性侧链间的范德华力稳定因素是非极性侧链间的范德华力稳定因素是非极性侧链间的范德华力稳定因素是非极性侧链间的范德华力稳定因素是非极性侧链间的范德华力n nn型型型型型型n nn由二段平行式的由二段平行式的由二段平行式的由二段平行式的由二段平行式
90、的由二段平行式的 链和一段连接链组成,此超二级结构链和一段连接链组成,此超二级结构链和一段连接链组成,此超二级结构链和一段连接链组成,此超二级结构链和一段连接链组成,此超二级结构链和一段连接链组成,此超二级结构称称称称称称单位单位单位单位单位单位n nn连接链连接链连接链连接链连接链连接链 helixhelixhelix或或或或或或无规则卷曲大体上反平行于无规则卷曲大体上反平行于无规则卷曲大体上反平行于无规则卷曲大体上反平行于无规则卷曲大体上反平行于无规则卷曲大体上反平行于 链链链链链链n nn最常见的最常见的最常见的最常见的最常见的最常见的组合是由三段平行式的组合是由三段平行式的组合是由三段
91、平行式的组合是由三段平行式的组合是由三段平行式的组合是由三段平行式的 链和二段链和二段链和二段链和二段链和二段链和二段 helixhelixhelix链构成,此超二级结构称链构成,此超二级结构称链构成,此超二级结构称链构成,此超二级结构称链构成,此超二级结构称链构成,此超二级结构称Rossmann-Rossmann-Rossmann-折叠折叠折叠折叠折叠折叠n nn几乎所有的实例(只有两个例外)中连接都是以右手交叉几乎所有的实例(只有两个例外)中连接都是以右手交叉几乎所有的实例(只有两个例外)中连接都是以右手交叉几乎所有的实例(只有两个例外)中连接都是以右手交叉几乎所有的实例(只有两个例外)中
92、连接都是以右手交叉几乎所有的实例(只有两个例外)中连接都是以右手交叉连接方式处于连接方式处于连接方式处于连接方式处于连接方式处于连接方式处于 折叠的一侧折叠的一侧折叠的一侧折叠的一侧折叠的一侧折叠的一侧蛋白质IIn nn型型型型型型n nn 曲折和回形拓扑结构(曲折和回形拓扑结构(曲折和回形拓扑结构(曲折和回形拓扑结构(曲折和回形拓扑结构(曲折和回形拓扑结构( )组合的二种超二级结构)组合的二种超二级结构)组合的二种超二级结构)组合的二种超二级结构)组合的二种超二级结构)组合的二种超二级结构 n nn 曲折:曲折:曲折:曲折:曲折:曲折:由在一级结构上连续,在由在一级结构上连续,在由在一级结构
93、上连续,在由在一级结构上连续,在由在一级结构上连续,在由在一级结构上连续,在 折叠中相邻的三条反折叠中相邻的三条反折叠中相邻的三条反折叠中相邻的三条反折叠中相邻的三条反折叠中相邻的三条反平行式,平行式,平行式,平行式,平行式,平行式, 链通过紧凑的链通过紧凑的链通过紧凑的链通过紧凑的链通过紧凑的链通过紧凑的 转角连接而成,转角连接而成,转角连接而成,转角连接而成,转角连接而成,转角连接而成, 曲折含有曲折含有曲折含有曲折含有曲折含有曲折含有与与与与与与 helixhelixhelix相近数目的氢键。相近数目的氢键。相近数目的氢键。相近数目的氢键。相近数目的氢键。相近数目的氢键。n nn回形拓扑
94、结构(回形拓扑结构(回形拓扑结构(回形拓扑结构(回形拓扑结构(回形拓扑结构( ):):):):):):反平行式反平行式反平行式反平行式反平行式反平行式 折叠片中常出现的一折叠片中常出现的一折叠片中常出现的一折叠片中常出现的一折叠片中常出现的一折叠片中常出现的一种超二级结构。种超二级结构。种超二级结构。种超二级结构。种超二级结构。种超二级结构。n nn三级结构的主要维系因素三级结构的主要维系因素三级结构的主要维系因素三级结构的主要维系因素三级结构的主要维系因素三级结构的主要维系因素n nn氢键、疏水键、离子键和范德华力等。氢键、疏水键、离子键和范德华力等。氢键、疏水键、离子键和范德华力等。氢键、
95、疏水键、离子键和范德华力等。氢键、疏水键、离子键和范德华力等。氢键、疏水键、离子键和范德华力等。n nn疏水键,在蛋白质三级结构中起着重要作用。疏水键,在蛋白质三级结构中起着重要作用。疏水键,在蛋白质三级结构中起着重要作用。疏水键,在蛋白质三级结构中起着重要作用。疏水键,在蛋白质三级结构中起着重要作用。疏水键,在蛋白质三级结构中起着重要作用。n nn 蛋白结构的实例蛋白结构的实例蛋白结构的实例蛋白结构的实例蛋白结构的实例蛋白结构的实例n nn球状蛋白球状蛋白球状蛋白球状蛋白球状蛋白球状蛋白n nn纤维状蛋白纤维状蛋白纤维状蛋白纤维状蛋白纤维状蛋白纤维状蛋白n nn角蛋白角蛋白角蛋白角蛋白角蛋白
96、角蛋白(KeratinKeratinKeratin)n nn - -角蛋白角蛋白角蛋白角蛋白角蛋白角蛋白n nn - - -角蛋白角蛋白角蛋白角蛋白角蛋白角蛋白n nn胶原蛋白胶原蛋白胶原蛋白胶原蛋白胶原蛋白胶原蛋白蛋白质IIn nn定定定定 义:义:义:义:n nn蛋白质的四级结构蛋白质的四级结构蛋白质的四级结构蛋白质的四级结构蛋白质的四级结构蛋白质的四级结构(Quaternary Structure)(Quaternary Structure)(Quaternary Structure)(Quaternary Structure)(Quaternary Structure)(Quatern
97、ary Structure)是是是是是是指由多条各自具有一、二、三级结构的肽链通指由多条各自具有一、二、三级结构的肽链通指由多条各自具有一、二、三级结构的肽链通指由多条各自具有一、二、三级结构的肽链通指由多条各自具有一、二、三级结构的肽链通指由多条各自具有一、二、三级结构的肽链通过非共价键连接起来的结构形式;各个亚基在过非共价键连接起来的结构形式;各个亚基在过非共价键连接起来的结构形式;各个亚基在过非共价键连接起来的结构形式;各个亚基在过非共价键连接起来的结构形式;各个亚基在过非共价键连接起来的结构形式;各个亚基在这些蛋白质中的空间排列方式及亚基之间的相这些蛋白质中的空间排列方式及亚基之间的相
98、这些蛋白质中的空间排列方式及亚基之间的相这些蛋白质中的空间排列方式及亚基之间的相这些蛋白质中的空间排列方式及亚基之间的相这些蛋白质中的空间排列方式及亚基之间的相互作用关系。互作用关系。互作用关系。互作用关系。互作用关系。互作用关系。n nn这种蛋白质分子中,最小的单位通常称为亚基或亚这种蛋白质分子中,最小的单位通常称为亚基或亚这种蛋白质分子中,最小的单位通常称为亚基或亚这种蛋白质分子中,最小的单位通常称为亚基或亚这种蛋白质分子中,最小的单位通常称为亚基或亚这种蛋白质分子中,最小的单位通常称为亚基或亚单位单位单位单位单位单位( ( ( ( ( (Subunit)Subunit)Subunit),
99、它一般由一条肽链构成,无生理活,它一般由一条肽链构成,无生理活,它一般由一条肽链构成,无生理活,它一般由一条肽链构成,无生理活,它一般由一条肽链构成,无生理活,它一般由一条肽链构成,无生理活性或不具有完整生理活性性或不具有完整生理活性性或不具有完整生理活性性或不具有完整生理活性性或不具有完整生理活性性或不具有完整生理活性n nn由多个亚基聚集而成的蛋白质常常称为寡聚蛋白由多个亚基聚集而成的蛋白质常常称为寡聚蛋白由多个亚基聚集而成的蛋白质常常称为寡聚蛋白由多个亚基聚集而成的蛋白质常常称为寡聚蛋白由多个亚基聚集而成的蛋白质常常称为寡聚蛋白由多个亚基聚集而成的蛋白质常常称为寡聚蛋白蛋白质的四级结构蛋
100、白质的四级结构蛋白质IIn nn四级结构的类型和维系四级结构的类型和维系四级结构的类型和维系四级结构的类型和维系n nn类型:类型:类型:类型:类型:类型:n nn同聚体:由相同的亚基通过非共价键聚集而成的寡同聚体:由相同的亚基通过非共价键聚集而成的寡同聚体:由相同的亚基通过非共价键聚集而成的寡同聚体:由相同的亚基通过非共价键聚集而成的寡同聚体:由相同的亚基通过非共价键聚集而成的寡同聚体:由相同的亚基通过非共价键聚集而成的寡聚蛋白聚蛋白聚蛋白聚蛋白聚蛋白聚蛋白n nn异聚体:由不同的亚基通过非共价键聚集而成的寡异聚体:由不同的亚基通过非共价键聚集而成的寡异聚体:由不同的亚基通过非共价键聚集而成
101、的寡异聚体:由不同的亚基通过非共价键聚集而成的寡异聚体:由不同的亚基通过非共价键聚集而成的寡异聚体:由不同的亚基通过非共价键聚集而成的寡聚蛋白聚蛋白聚蛋白聚蛋白聚蛋白聚蛋白n nn根据亚基的数目可以称:同根据亚基的数目可以称:同根据亚基的数目可以称:同根据亚基的数目可以称:同根据亚基的数目可以称:同根据亚基的数目可以称:同*聚体,异聚体,异聚体,异聚体,异聚体,异聚体,异*聚体聚体聚体聚体聚体聚体n nn四级结构的维系四级结构的维系四级结构的维系四级结构的维系四级结构的维系四级结构的维系n nn疏水力是维系四级结构的主要方式疏水力是维系四级结构的主要方式疏水力是维系四级结构的主要方式疏水力是维
102、系四级结构的主要方式疏水力是维系四级结构的主要方式疏水力是维系四级结构的主要方式n nn亚基之间的契合关系亚基之间的契合关系亚基之间的契合关系亚基之间的契合关系亚基之间的契合关系亚基之间的契合关系蛋白质IIn nn寡聚蛋白质与别构效应寡聚蛋白质与别构效应寡聚蛋白质与别构效应寡聚蛋白质与别构效应n nn基本概念基本概念基本概念基本概念基本概念基本概念n nn别构效应(别构效应(别构效应(别构效应(别构效应(别构效应(allostericeffectallostericeffectallostericeffect):):):):):):指蛋白质与配基结指蛋白质与配基结指蛋白质与配基结指蛋白质与配基
103、结指蛋白质与配基结指蛋白质与配基结合改变蛋白质的构象,进而改变蛋白质的生物活性合改变蛋白质的构象,进而改变蛋白质的生物活性合改变蛋白质的构象,进而改变蛋白质的生物活性合改变蛋白质的构象,进而改变蛋白质的生物活性合改变蛋白质的构象,进而改变蛋白质的生物活性合改变蛋白质的构象,进而改变蛋白质的生物活性的现象的现象的现象的现象的现象的现象n nn别构蛋白质(别构蛋白质(别构蛋白质(别构蛋白质(别构蛋白质(别构蛋白质(allostericproteinallostericproteinallostericprotein):):):):):):具有别构效应的具有别构效应的具有别构效应的具有别构效应的具有
104、别构效应的具有别构效应的蛋白质,多为蛋白质,多为蛋白质,多为蛋白质,多为蛋白质,多为蛋白质,多为寡聚蛋白,寡聚蛋白,寡聚蛋白,寡聚蛋白,寡聚蛋白,寡聚蛋白,包括包括包括包括包括包括活性部位活性部位活性部位活性部位活性部位活性部位和和和和和和调节部位调节部位调节部位调节部位调节部位调节部位n nn同位效应:同位效应:同位效应:同位效应:同位效应:同位效应:指别构蛋白质与一种配基的结合对于该指别构蛋白质与一种配基的结合对于该指别构蛋白质与一种配基的结合对于该指别构蛋白质与一种配基的结合对于该指别构蛋白质与一种配基的结合对于该指别构蛋白质与一种配基的结合对于该蛋白和蛋白和蛋白和蛋白和蛋白和蛋白和同种
105、配基同种配基同种配基同种配基同种配基同种配基的结合能力的影响的结合能力的影响的结合能力的影响的结合能力的影响的结合能力的影响的结合能力的影响n nn正协同效应正协同效应正协同效应正协同效应正协同效应正协同效应 :第一个配基的结合引起第二个,第三个第一个配基的结合引起第二个,第三个第一个配基的结合引起第二个,第三个第一个配基的结合引起第二个,第三个第一个配基的结合引起第二个,第三个第一个配基的结合引起第二个,第三个配配配配配配基更容易结合。这种同位效应称正协同效应基更容易结合。这种同位效应称正协同效应基更容易结合。这种同位效应称正协同效应基更容易结合。这种同位效应称正协同效应基更容易结合。这种同
106、位效应称正协同效应基更容易结合。这种同位效应称正协同效应 n nn负协同效应负协同效应负协同效应负协同效应负协同效应负协同效应 :第一个配基的结合导致第二个,第三个第一个配基的结合导致第二个,第三个第一个配基的结合导致第二个,第三个第一个配基的结合导致第二个,第三个第一个配基的结合导致第二个,第三个第一个配基的结合导致第二个,第三个 配基更难结合,这种同位效应称负协同效应配基更难结合,这种同位效应称负协同效应配基更难结合,这种同位效应称负协同效应配基更难结合,这种同位效应称负协同效应配基更难结合,这种同位效应称负协同效应配基更难结合,这种同位效应称负协同效应 蛋白质IIn nn异位效应:异位效
107、应:异位效应:异位效应:异位效应:异位效应:如果蛋白质分子中,相互之间发生作用如果蛋白质分子中,相互之间发生作用如果蛋白质分子中,相互之间发生作用如果蛋白质分子中,相互之间发生作用如果蛋白质分子中,相互之间发生作用如果蛋白质分子中,相互之间发生作用的部位是不同的,也即活性部位上所发生的反应将的部位是不同的,也即活性部位上所发生的反应将的部位是不同的,也即活性部位上所发生的反应将的部位是不同的,也即活性部位上所发生的反应将的部位是不同的,也即活性部位上所发生的反应将的部位是不同的,也即活性部位上所发生的反应将受到调节部位与效应物结合的影响,称受到调节部位与效应物结合的影响,称受到调节部位与效应物
108、结合的影响,称受到调节部位与效应物结合的影响,称受到调节部位与效应物结合的影响,称受到调节部位与效应物结合的影响,称异位效应异位效应异位效应异位效应异位效应异位效应n nn血红蛋白的结构与功能血红蛋白的结构与功能血红蛋白的结构与功能血红蛋白的结构与功能血红蛋白的结构与功能血红蛋白的结构与功能 n nn组成:组成:组成:组成:组成:组成:4 4 4个亚基组成个亚基组成个亚基组成个亚基组成个亚基组成个亚基组成,成年人红细胞由成年人红细胞由成年人红细胞由成年人红细胞由成年人红细胞由成年人红细胞由 、 两种亚两种亚两种亚两种亚两种亚两种亚基各两条构成基各两条构成基各两条构成基各两条构成基各两条构成基各
109、两条构成n nn每条肽链都卷曲成球状,每条肽链都卷曲成球状,每条肽链都卷曲成球状,每条肽链都卷曲成球状,每条肽链都卷曲成球状,每条肽链都卷曲成球状,都有一个空隙容纳一个血都有一个空隙容纳一个血都有一个空隙容纳一个血都有一个空隙容纳一个血都有一个空隙容纳一个血都有一个空隙容纳一个血红素,它们都能与氧气结合。以红素,它们都能与氧气结合。以红素,它们都能与氧气结合。以红素,它们都能与氧气结合。以红素,它们都能与氧气结合。以红素,它们都能与氧气结合。以 2 22 2 22四聚体四聚体四聚体四聚体四聚体四聚体 形式存形式存形式存形式存形式存形式存在一分子在一分子在一分子在一分子在一分子在一分子HbHbH
110、b能与能与能与能与能与能与4 4 4分子氧气分子氧气分子氧气分子氧气分子氧气分子氧气结合结合结合结合结合结合n nn分析分析分析分析分析分析HbHbHb与氧气结合,与氧气结合,与氧气结合,与氧气结合,与氧气结合,与氧气结合,发现发现发现发现发现发现HbHbHb的的的的的的4 4 4个亚基和个亚基和个亚基和个亚基和个亚基和个亚基和4 4 4个氧气结个氧气结个氧气结个氧气结个氧气结个氧气结合时平衡常数(合时平衡常数(合时平衡常数(合时平衡常数(合时平衡常数(合时平衡常数(K K Keqeqeq)并不相同)并不相同)并不相同)并不相同)并不相同)并不相同。而是有。而是有。而是有。而是有。而是有。而是
111、有4 4 4个不同的个不同的个不同的个不同的个不同的个不同的平衡常数,平衡常数,平衡常数,平衡常数,平衡常数,平衡常数,HbHbHb与最后一个氧气结合时其结合力最大与最后一个氧气结合时其结合力最大与最后一个氧气结合时其结合力最大与最后一个氧气结合时其结合力最大与最后一个氧气结合时其结合力最大与最后一个氧气结合时其结合力最大 蛋白质IIn nnHbHbHb与氧气结合将影响其四级结构,即亚基与亚基之与氧气结合将影响其四级结构,即亚基与亚基之与氧气结合将影响其四级结构,即亚基与亚基之与氧气结合将影响其四级结构,即亚基与亚基之与氧气结合将影响其四级结构,即亚基与亚基之与氧气结合将影响其四级结构,即亚基
112、与亚基之间的相对位置发生变动,这种变化增强了间的相对位置发生变动,这种变化增强了间的相对位置发生变动,这种变化增强了间的相对位置发生变动,这种变化增强了间的相对位置发生变动,这种变化增强了间的相对位置发生变动,这种变化增强了HbHbHb和和和和和和O OO2 22的的的的的的亲和力亲和力亲和力亲和力亲和力亲和力n nn蛋白质各级结构之间的相互关系蛋白质各级结构之间的相互关系蛋白质各级结构之间的相互关系蛋白质各级结构之间的相互关系n nn各级结构之间的递进各级结构之间的递进各级结构之间的递进各级结构之间的递进各级结构之间的递进各级结构之间的递进n nn一级结构对高级结构的指导作用一级结构对高级结
113、构的指导作用一级结构对高级结构的指导作用一级结构对高级结构的指导作用一级结构对高级结构的指导作用一级结构对高级结构的指导作用n nn一级结构是高级结构的基础一级结构是高级结构的基础一级结构是高级结构的基础一级结构是高级结构的基础一级结构是高级结构的基础一级结构是高级结构的基础n nn高级结构由一级结构和其他构象指导因素共同决定高级结构由一级结构和其他构象指导因素共同决定高级结构由一级结构和其他构象指导因素共同决定高级结构由一级结构和其他构象指导因素共同决定高级结构由一级结构和其他构象指导因素共同决定高级结构由一级结构和其他构象指导因素共同决定n nn最低势能原则最低势能原则最低势能原则最低势能
114、原则最低势能原则最低势能原则:分子的稳定构象往往是该分子内结构势能:分子的稳定构象往往是该分子内结构势能:分子的稳定构象往往是该分子内结构势能:分子的稳定构象往往是该分子内结构势能:分子的稳定构象往往是该分子内结构势能:分子的稳定构象往往是该分子内结构势能最低的状态最低的状态最低的状态最低的状态最低的状态最低的状态n nn微环境和折叠辅助因子的影响微环境和折叠辅助因子的影响微环境和折叠辅助因子的影响微环境和折叠辅助因子的影响微环境和折叠辅助因子的影响微环境和折叠辅助因子的影响n nn 高级结构对低级结构的影响高级结构对低级结构的影响高级结构对低级结构的影响高级结构对低级结构的影响高级结构对低级
115、结构的影响高级结构对低级结构的影响蛋白质II蛋白质II蛋白质IIresidueresidue蛋白质IIC CNN键长:键长:键长:键长:0.184nm0.184nmC CNN键长:键长:键长:键长:0.127nm0.127nmCNCN键长:键长:键长:键长:0.132nm0.132nm0.132nm0.132nm蛋白质II蛋白质II蛋白质II蛋白质II蛋白质II一种四肽的结构一种四肽的结构一种四肽的结构一种四肽的结构蛋白质IISer-Val-Tyr -Asp- GlnSer-Val-Tyr -Asp- Gln蛋白质II上面结构为全部质子化的离子形式上面结构为全部质子化的离子形式溶液的溶液的溶液
116、的溶液的pHpH功能团解离(带电)状况功能团解离(带电)状况功能团解离(带电)状况功能团解离(带电)状况占优势离占优势离占优势离占优势离子的净电子的净电子的净电子的净电荷荷荷荷 -COOH-COOHCOOHCOOH -NH-NH2 2 -NH-NH2 23.53.5COOHCOOHCOOHCOOH+ + N H N H3 3+ + N H N H3 3+2+23.53.54.54.5COOCOOCOOHCOOH+ + N H N H3 3+ + N H N H3 3+1+14.54.57.87.8COOCOOCOOCOO+ + N H N H3 3+ + N H N H3 30 07.87.8
117、10.210.2COOCOOCOOCOONHNH2 2+ + N H N H3 3-1-110.210.2COOCOOCOOCOONHNH2 2NHNH2 2-2-2蛋白质II+NHNH3 3-Glu-Glu-Glu-COO-Glu-Glu-Glu-COO- -COO-COO-COO-COO-COO-COO-pKpK-NH2-NH2=8.6,Pk=8.6,Pk-COOH-COOH=3.26,pK=3.26,pKRR=4.45=4.45因为该肽最多带一个正电荷;而最多可以因为该肽最多带一个正电荷;而最多可以因为该肽最多带一个正电荷;而最多可以因为该肽最多带一个正电荷;而最多可以带四个负电荷;所以
118、等电点时,应该是三带四个负电荷;所以等电点时,应该是三带四个负电荷;所以等电点时,应该是三带四个负电荷;所以等电点时,应该是三个侧链基团不离解,而末端个侧链基团不离解,而末端个侧链基团不离解,而末端个侧链基团不离解,而末端COOHCOOH离解,离解,离解,离解,pI=1/2pI=1/2(pKpKRR+pK+pK-COOH-COOH)蛋白质II+NHNH33-Lys-Lys-Lys-COO-Lys-Lys-Lys-COO- -+NHNH33+NHNH33+NHNH33pKpK-NH2-NH2=8.6,Pk=8.6,Pk-COOH-COOH=3.26=3.26,pKpKRR =10.58=10.5
119、8该肽最多可有四个正电荷、一个负电该肽最多可有四个正电荷、一个负电该肽最多可有四个正电荷、一个负电该肽最多可有四个正电荷、一个负电荷,所以等电点时,应该是末端荷,所以等电点时,应该是末端荷,所以等电点时,应该是末端荷,所以等电点时,应该是末端+NHNH33离解,而三个侧链基团,有两离解,而三个侧链基团,有两离解,而三个侧链基团,有两离解,而三个侧链基团,有两个离解,因此个离解,因此个离解,因此个离解,因此pI= pI= pKpKRR+lg+lg(2/12/1)蛋白质II蛋白质II蛋白质II+H3N-Tyr-Gly-Gly-Phe-Met-COO-+H3N-Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu
120、-COO-Met-脑啡肽脑啡肽 Leu-脑啡肽脑啡肽蛋白质IIn nn n nnL-Leu-D-Phe-L-Pro-L-ValL-Leu-D-Phe-L-Pro-L-ValL-Leu-D-Phe-L-Pro-L-Valn nn n nn L-Orn L-Orn L-Orn L-Orn L-Orn L-Ornn nn n nn L-Val-L-Pro-D-Phe-L-Leu L-Val-L-Pro-D-Phe-L-Leu L-Val-L-Pro-D-Phe-L-Leun nn n nn短杆菌肽短杆菌肽短杆菌肽短杆菌肽短杆菌肽短杆菌肽S(S(S(S(S(S(环十肽环十肽环十肽环十肽环十肽环十肽)
121、) ) ) ) )n nn 由由由由由由细细细细细细菌菌菌菌菌菌分分分分分分泌泌泌泌泌泌的的的的的的多多多多多多肽肽肽肽肽肽,有有有有有有时时时时时时也也也也也也都都都都都都含含含含含含有有有有有有D-D-D-D-D-D-氨氨氨氨氨氨基基基基基基酸酸酸酸酸酸和和和和和和一一一一一一些些些些些些不不不不不不常常常常常常见见见见见见氨氨氨氨氨氨基基基基基基酸酸酸酸酸酸,如如如如如如鸟鸟鸟鸟鸟鸟氨氨氨氨氨氨酸酸酸酸酸酸(Ornithine, Ornithine, Ornithine, Ornithine, Ornithine, Ornithine, 缩写为缩写为缩写为缩写为缩写为缩写为 Orn Or
122、n Orn Orn Orn Orn)。)。)。)。)。)。 蛋白质II蛋白质IIn n几条多肽链借助非共价键连接在一几条多肽链借助非共价键连接在一起,称为寡聚蛋白质,如,血红蛋起,称为寡聚蛋白质,如,血红蛋白为四聚体,烯醇化酶为二聚体;白为四聚体,烯醇化酶为二聚体;可用可用8mol/L8mol/L尿素或尿素或6mol/L6mol/L盐酸胍处盐酸胍处理,即可分开多肽链理,即可分开多肽链( (亚基亚基).).蛋白质II可以通过加入盐酸胍可以通过加入盐酸胍可以通过加入盐酸胍可以通过加入盐酸胍方法解离多肽链之间方法解离多肽链之间方法解离多肽链之间方法解离多肽链之间的非共价力;应用过的非共价力;应用过的
123、非共价力;应用过的非共价力;应用过甲酸氧化法或巯基还甲酸氧化法或巯基还甲酸氧化法或巯基还甲酸氧化法或巯基还原法拆分多肽链间的原法拆分多肽链间的原法拆分多肽链间的原法拆分多肽链间的二硫键。二硫键。二硫键。二硫键。蛋白质IIn nn水解蛋白质获得水解蛋白质获得水解蛋白质获得水解蛋白质获得水解蛋白质获得水解蛋白质获得AaAaAa混合液混合液混合液混合液混合液混合液n nn色谱分析氨基酸色谱分析氨基酸色谱分析氨基酸色谱分析氨基酸色谱分析氨基酸色谱分析氨基酸组成和含量组成和含量组成和含量组成和含量组成和含量组成和含量n nn分析水解液氨含分析水解液氨含分析水解液氨含分析水解液氨含分析水解液氨含分析水解液
124、氨含量,推导酰胺氨量,推导酰胺氨量,推导酰胺氨量,推导酰胺氨量,推导酰胺氨量,推导酰胺氨基酸的含量。基酸的含量。基酸的含量。基酸的含量。基酸的含量。基酸的含量。蛋白质II溴化氰水解法,能选择性地切割由溴化氰水解法,能选择性地切割由溴化氰水解法,能选择性地切割由溴化氰水解法,能选择性地切割由甲硫氨酸的羧基所形成的肽键甲硫氨酸的羧基所形成的肽键甲硫氨酸的羧基所形成的肽键甲硫氨酸的羧基所形成的肽键蛋白质IIEdmanEdman(苯异硫氰酸酯法)苯异硫氰酸酯法)苯异硫氰酸酯法)苯异硫氰酸酯法)蛋白质II蛋白质II蛋白质II蛋白质II多肽多肽多肽多肽 or or 蛋白质末端蛋白质末端蛋白质末端蛋白质末端
125、NHNH22PITCPITC PTCPTC多肽多肽多肽多肽 or or 蛋白质蛋白质蛋白质蛋白质 有机溶剂有机溶剂有机溶剂有机溶剂 NN末端的末端的末端的末端的PTCPTCAAAA发生环化发生环化发生环化发生环化 生成苯乙内酰硫脲的衍生物生成苯乙内酰硫脲的衍生物生成苯乙内酰硫脲的衍生物生成苯乙内酰硫脲的衍生物 脱离肽链脱离肽链脱离肽链脱离肽链 除去除去除去除去NN末端末端末端末端AAAA后剩下的肽链仍然是完整的。后剩下的肽链仍然是完整的。后剩下的肽链仍然是完整的。后剩下的肽链仍然是完整的。 (因为,因为,因为,因为,PTCPTC的引入,只使第一个肽键稳定性降低)的引入,只使第一个肽键稳定性降低
126、)的引入,只使第一个肽键稳定性降低)的引入,只使第一个肽键稳定性降低)干燥干燥干燥干燥 / / 薄层薄层薄层薄层 气相气相气相气相 HPLC HPLC层析层析层析层析 色谱色谱色谱色谱蛋白质IIn nEdman Edman Edman Edman (苯异硫氰酸酯法)氨基酸顺序分析法实际上也苯异硫氰酸酯法)氨基酸顺序分析法实际上也苯异硫氰酸酯法)氨基酸顺序分析法实际上也苯异硫氰酸酯法)氨基酸顺序分析法实际上也是一种是一种是一种是一种N-N-N-N-端分析法。此法的特点是能够不断重复循环,端分析法。此法的特点是能够不断重复循环,端分析法。此法的特点是能够不断重复循环,端分析法。此法的特点是能够不断
127、重复循环,将肽链将肽链将肽链将肽链N-N-N-N-端氨基酸残基逐一进行标记和解离。端氨基酸残基逐一进行标记和解离。端氨基酸残基逐一进行标记和解离。端氨基酸残基逐一进行标记和解离。E E E Ed d d dm m m ma a a an n n n氨氨氨氨基基基基酸酸酸酸顺顺顺顺序序序序分分分分析析析析法法法法蛋白质II蛋白质蛋白质蛋白质蛋白质or or 多肽无水肼多肽无水肼多肽无水肼多肽无水肼肼解肼解肼解肼解 CC末端末端末端末端AAAA以其他以其他以其他以其他AAAA转变为转变为转变为转变为游离形式存在相应的游离形式存在相应的游离形式存在相应的游离形式存在相应的AAAA酰肼化物酰肼化物酰肼
128、化物酰肼化物苯甲醛苯甲醛苯甲醛苯甲醛存在于上清液中二苯基衍生物存在于上清液中二苯基衍生物存在于上清液中二苯基衍生物存在于上清液中二苯基衍生物FDNBFDNB、DNSDNS、层析法。、层析法。、层析法。、层析法。蛋白质IIn nTrypsinTrypsin:R R1 1=Lys=Lys、ArgArgn n当当当当R R2 2=Pro=Pro=Pro=Pro,抑制水解,抑制水解,抑制水解,抑制水解肽链水解位点水解位点胰胰蛋蛋白白酶酶蛋白质II多多多多 肽肽肽肽 链链链链1 .21 .2环己酮环己酮环己酮环己酮 马来酸酐(咘丁烯二酸酐)马来酸酐(咘丁烯二酸酐)马来酸酐(咘丁烯二酸酐)马来酸酐(咘丁烯
129、二酸酐)修饰修饰修饰修饰ArgArg的胍基的胍基的胍基的胍基 保护保护保护保护LysLys上的上的上的上的 NHNH22胰蛋白酶胰蛋白酶 胰蛋白酶胰蛋白酶 LysLys水解水解水解水解ArgArg不水解不水解不水解不水解 Lys Lys 的肽键的肽键的肽键的肽键只断开只断开只断开只断开ArgArg不水解不水解不水解不水解的肽键的肽键的肽键的肽键蛋白质II 多多多多 肽肽肽肽 链链链链 氮丙啶氮丙啶氮丙啶氮丙啶 Cys Cys殘基侧链被修饰殘基侧链被修饰殘基侧链被修饰殘基侧链被修饰成成成成AECysAECys,类似,类似,类似,类似LysLys侧链侧链侧链侧链 (具(具(具(具 NH2NH2)
130、胰蛋白酶胰蛋白酶胰蛋白酶胰蛋白酶CysCys羧基侧的肽键羧基侧的肽键羧基侧的肽键羧基侧的肽键蛋白质IIn n胰凝乳蛋白酶胰凝乳蛋白酶胰凝乳蛋白酶胰凝乳蛋白酶(ChymotrypsinChymotrypsin)R R1 1=Phe,Trp,Tyr=Phe,Trp,Tyr水水水水解较快解较快解较快解较快; ; ; ; 而而而而 LeuLeu, MetMet,HisHis水解稍水解稍水解稍水解稍慢。慢。慢。慢。n n当当当当R R2 2=Pro=Pro,抑制水解,抑制水解,抑制水解,抑制水解肽链水解位点水解位点糜糜蛋蛋白白酶酶蛋白质IIn nPepsinPepsin:R R R R1 1 1 1 和
131、和和和R R2 2=Phe, Trp, =Phe, Trp, =Phe, Trp, =Phe, Trp, TyrTyrTyrTyr,LeuLeuLeuLeu以及其以及其以及其以及其它疏水性氨基酸它疏水性氨基酸它疏水性氨基酸它疏水性氨基酸, , , ,水解速度较快水解速度较快水解速度较快水解速度较快。R R R R1 1 1 1=Pro=Pro=Pro=Pro则不水解则不水解则不水解则不水解肽链水解位点水解位点胃胃蛋蛋白白酶酶蛋白质IIn nthermolysinthermolysin: R R R R2 2 2 2=Phe, Trp, Tyr=Phe, Trp, Tyr=Phe, Trp, T
132、yr=Phe, Trp, Tyr,LeuLeuLeuLeu,Ile, MetIle, MetIle, MetIle, Met以及其以及其以及其以及其它疏水性强的氨基酸它疏水性强的氨基酸它疏水性强的氨基酸它疏水性强的氨基酸, , , ,水解速度较快。水解速度较快。水解速度较快。水解速度较快。R R R R2 2 2 2=Gly=Gly=Gly=Gly、ProProProPro不水解不水解不水解不水解R R R R1 1 1 1和和和和R R R R3 3 3 3= Pro= Pro= Pro= Pro抑制水解抑制水解抑制水解抑制水解肽链水解位点水解位点嗜嗜热热菌菌蛋蛋白白酶酶蛋白质II确定肽段在
133、多肽链中的次序确定肽段在多肽链中的次序 利用两套或多套肽段的氨基酸顺序利用两套或多套肽段的氨基酸顺序彼此间的交错重叠,拼凑出整条多肽链彼此间的交错重叠,拼凑出整条多肽链的氨基酸顺序。的氨基酸顺序。蛋白质II所得资料所得资料所得资料所得资料氨基末端残基氨基末端残基氨基末端残基氨基末端残基 H H羧基末端残基羧基末端残基羧基末端残基羧基末端残基 S S第一套肽段第一套肽段第一套肽段第一套肽段 第二套肽段第二套肽段第二套肽段第二套肽段OUSOUSSEOSEOPS PS WTOU WTOUEOVEEOVE VERL VERLRLARLAAPSAPSHOWT HOWT HO HO HOWTOUSEOVE
134、RLAPS第一套肽段第一套肽段第二套肽段第二套肽段HOWTOUSEO VERLAPS推断全顺序推断全顺序 HOWTOUSEOUVEPLAPS借助重叠肽确定肽段次序:借助重叠肽确定肽段次序:末端残基末端残基 H S 末端肽段末端肽段 HOWT APS OUS蛋白质IIn n一般采用胃蛋白酶处理没有断开二硫键一般采用胃蛋白酶处理没有断开二硫键的多肽链,的多肽链,n n利用电泳技术分离开各个肽段,用过甲利用电泳技术分离开各个肽段,用过甲酸处理后,在垂直方向上再次电泳。由酸处理后,在垂直方向上再次电泳。由于二硫键断裂后,肽段的大小、电荷性于二硫键断裂后,肽段的大小、电荷性质会发生变化,因此,会出现偏离
135、对角质会发生变化,因此,会出现偏离对角线的现象线的现象n n利用已知的肽段组成和排序,可以推知利用已知的肽段组成和排序,可以推知二硫键位置二硫键位置蛋白质II蛋白质II蛋白质II蛋白质II蛋白质II蛋白质IIn n胰岛素原包括胰岛素原包括胰岛素原包括胰岛素原包括A A、B B链和链和链和链和C C链链链链n nC C链即连接肽,在储存颗链即连接肽,在储存颗链即连接肽,在储存颗链即连接肽,在储存颗粒(粒(粒(粒(storage granulestorage granule)中,)中,)中,)中,可以为特殊的肽酶切去,可以为特殊的肽酶切去,可以为特殊的肽酶切去,可以为特殊的肽酶切去,而转变成活性的
136、胰岛素而转变成活性的胰岛素而转变成活性的胰岛素而转变成活性的胰岛素蛋白质II纤维蛋白原纤维蛋白原纤维蛋白原纤维蛋白原纤维蛋白原纤维蛋白原纤维蛋白原纤维蛋白原蛋白质II蛋白质II蛋白质II蛋白质II蛋白质II蛋白质II蛋白质II蛋白质II蛋白质II蛋白质II蛋白质II3.63.61313(n=3n=3)- -螺螺旋旋蛋白质II蛋白质II蛋白质II蛋白质II蛋白质II类类类类 型型型型2 2 2 23 3 3 3I I-60-60 -30-30 -90-90 0 0 IIII-60-60 +120+120 +80+80 0 0 IIIIII-60-60 -30-30 -60-60 -30-30 蛋
137、白质II蛋白质II蛋白质II蛋白质II蛋白质II蛋白质II蛋白质II蛋白质II蛋白质II毛发的结构n nn 一根毛发周围是一层一根毛发周围是一层一根毛发周围是一层一根毛发周围是一层一根毛发周围是一层一根毛发周围是一层鳞状细胞鳞状细胞鳞状细胞鳞状细胞鳞状细胞鳞状细胞(scaIe (scaIe (scaIe (scaIe (scaIe (scaIe cell)cell)cell)cell)cell)cell),中间为皮层,中间为皮层,中间为皮层,中间为皮层,中间为皮层,中间为皮层细胞细胞细胞细胞细胞细胞(cortical (cortical (cortical (cortical (cortica
138、l (cortical celI)celI)celI)celI)celI)celI)。皮层细胞横。皮层细胞横。皮层细胞横。皮层细胞横。皮层细胞横。皮层细胞横截面直径约为截面直径约为截面直径约为截面直径约为截面直径约为截面直径约为202020202020 m m m m m m。在这些细胞中,大纤在这些细胞中,大纤在这些细胞中,大纤在这些细胞中,大纤在这些细胞中,大纤在这些细胞中,大纤维沿轴向排列。所以维沿轴向排列。所以维沿轴向排列。所以维沿轴向排列。所以维沿轴向排列。所以维沿轴向排列。所以一根毛发具有高度有一根毛发具有高度有一根毛发具有高度有一根毛发具有高度有一根毛发具有高度有一根毛发具有高度
139、有序的结构。序的结构。序的结构。序的结构。序的结构。序的结构。n nn毛发性能就决定于毛发性能就决定于毛发性能就决定于毛发性能就决定于毛发性能就决定于毛发性能就决定于 螺旋结构以及这螺旋结构以及这螺旋结构以及这螺旋结构以及这螺旋结构以及这螺旋结构以及这样的组织方式。样的组织方式。样的组织方式。样的组织方式。样的组织方式。样的组织方式。蛋白质II -角蛋白的结构角蛋白的结构蛋白质II角蛋白分子中的二硫键蛋白质II卷发(烫发)的生物化学基础n n永久性卷发永久性卷发( (烫发烫发) )是一项生物化学工程是一项生物化学工程(biochemical engineering),(biochemical
140、engineering), 角蛋白在角蛋白在湿热条件下可以伸展转变为湿热条件下可以伸展转变为 构象,但在构象,但在冷却干燥时又可自发地恢复原状。冷却干燥时又可自发地恢复原状。n n这是因为这是因为 角蛋白的侧链角蛋白的侧链R R基一般都比较大,基一般都比较大,不适于处在不适于处在 构象状态,此外构象状态,此外 角蛋白中角蛋白中的螺旋多肽链间有着很多的二硫键交联,这的螺旋多肽链间有着很多的二硫键交联,这些交联键也是当外力解除后使肽链恢复原状些交联键也是当外力解除后使肽链恢复原状( ( 螺旋构象螺旋构象) )的重要力量。这就是卷发行的重要力量。这就是卷发行业的生化基础。业的生化基础。蛋白质II-角
141、蛋白n n丝心蛋白丝心蛋白丝心蛋白丝心蛋白(fibroin)(fibroin)(fibroin)(fibroin)这是蚕这是蚕这是蚕这是蚕丝和蜘蛛丝的一种蛋白质。丝和蜘蛛丝的一种蛋白质。丝和蜘蛛丝的一种蛋白质。丝和蜘蛛丝的一种蛋白质。丝心蛋白具有抗张强度高,丝心蛋白具有抗张强度高,丝心蛋白具有抗张强度高,丝心蛋白具有抗张强度高,质地柔软的特性,但不能质地柔软的特性,但不能质地柔软的特性,但不能质地柔软的特性,但不能拉伸。它具有拉伸。它具有拉伸。它具有拉伸。它具有0.7nm0.7nm0.7nm0.7nm周期,周期,周期,周期,这与这与这与这与 角蛋白在湿热中伸角蛋白在湿热中伸角蛋白在湿热中伸角蛋
142、白在湿热中伸展后形成的展后形成的展后形成的展后形成的 角蛋白很相角蛋白很相角蛋白很相角蛋白很相似似似似(0.65nm(0.65nm(0.65nm(0.65nm周期周期周期周期) ) ) )。丝心蛋。丝心蛋。丝心蛋。丝心蛋白是白是白是白是典型的反平行式折叠典型的反平行式折叠典型的反平行式折叠典型的反平行式折叠片,多肽链取锯齿状折叠片,多肽链取锯齿状折叠片,多肽链取锯齿状折叠片,多肽链取锯齿状折叠构象,酰胺基的取向使相构象,酰胺基的取向使相构象,酰胺基的取向使相构象,酰胺基的取向使相邻的邻的邻的邻的C C C C 为侧链腾出空间,为侧链腾出空间,为侧链腾出空间,为侧链腾出空间,从而避免了任何空间位
143、阻。从而避免了任何空间位阻。从而避免了任何空间位阻。从而避免了任何空间位阻。在这种结构中,侧链交替在这种结构中,侧链交替在这种结构中,侧链交替在这种结构中,侧链交替地分布在折叠片的两侧。地分布在折叠片的两侧。地分布在折叠片的两侧。地分布在折叠片的两侧。蛋白质II丝蛋白的结构丝蛋白的结构n n丝蛋白是由伸展的肽链沿纤维轴平行排列成反丝蛋白是由伸展的肽链沿纤维轴平行排列成反丝蛋白是由伸展的肽链沿纤维轴平行排列成反丝蛋白是由伸展的肽链沿纤维轴平行排列成反向向向向 - - - -折叠结构。分子中不含折叠结构。分子中不含折叠结构。分子中不含折叠结构。分子中不含 - - - -螺旋。丝蛋白的螺旋。丝蛋白的
144、螺旋。丝蛋白的螺旋。丝蛋白的肽链通常是由多个六肽单元重复而成。这六肽肽链通常是由多个六肽单元重复而成。这六肽肽链通常是由多个六肽单元重复而成。这六肽肽链通常是由多个六肽单元重复而成。这六肽的氨基酸顺序为:的氨基酸顺序为:的氨基酸顺序为:的氨基酸顺序为:n n-(Gly-Ser-Gly-Ala-Gly-AlaGly-Ser-Gly-Ala-Gly-Ala)n n- -蛋白质II蛋白质II胶原蛋白胶原蛋白n nn胶原蛋白或称胶原胶原蛋白或称胶原胶原蛋白或称胶原胶原蛋白或称胶原胶原蛋白或称胶原胶原蛋白或称胶原( ( ( ( ( (collagencollagencollagen) ) ) ) ) )
145、是很多脊椎动物和无脊椎动物体是很多脊椎动物和无脊椎动物体是很多脊椎动物和无脊椎动物体是很多脊椎动物和无脊椎动物体是很多脊椎动物和无脊椎动物体是很多脊椎动物和无脊椎动物体内含量最丰富的蛋白质,它也属于结构蛋白质,使骨、腱、内含量最丰富的蛋白质,它也属于结构蛋白质,使骨、腱、内含量最丰富的蛋白质,它也属于结构蛋白质,使骨、腱、内含量最丰富的蛋白质,它也属于结构蛋白质,使骨、腱、内含量最丰富的蛋白质,它也属于结构蛋白质,使骨、腱、内含量最丰富的蛋白质,它也属于结构蛋白质,使骨、腱、软骨和皮肤具有机械强度。胶原蛋白至少包括四种类型,称软骨和皮肤具有机械强度。胶原蛋白至少包括四种类型,称软骨和皮肤具有机
146、械强度。胶原蛋白至少包括四种类型,称软骨和皮肤具有机械强度。胶原蛋白至少包括四种类型,称软骨和皮肤具有机械强度。胶原蛋白至少包括四种类型,称软骨和皮肤具有机械强度。胶原蛋白至少包括四种类型,称胶原蛋白胶原蛋白胶原蛋白胶原蛋白胶原蛋白胶原蛋白I I I、II IIII、IIIIIIIII和和和IVIVIVn nn腱的胶原纤维具有很高的抗张强度腱的胶原纤维具有很高的抗张强度腱的胶原纤维具有很高的抗张强度腱的胶原纤维具有很高的抗张强度腱的胶原纤维具有很高的抗张强度腱的胶原纤维具有很高的抗张强度( ( ( ( (tensilestrengthtensilestrengthtensilestrength
147、) ) ) ) ),约为,约为,约为,约为,约为,约为20-30kg20-30kg20-30kg20-30kg20-30kg20-30kgmmmmmmmmmmmm2 2 2 22 2, , , , ,相当于相当于相当于相当于相当于相当于121212121212号冷拉钢丝的拉力。号冷拉钢丝的拉力。号冷拉钢丝的拉力。号冷拉钢丝的拉力。号冷拉钢丝的拉力。号冷拉钢丝的拉力。n nn胶原蛋白在体内以胶原纤维的形式存在。其基本组成单位是胶原蛋白在体内以胶原纤维的形式存在。其基本组成单位是胶原蛋白在体内以胶原纤维的形式存在。其基本组成单位是胶原蛋白在体内以胶原纤维的形式存在。其基本组成单位是胶原蛋白在体内以
148、胶原纤维的形式存在。其基本组成单位是胶原蛋白在体内以胶原纤维的形式存在。其基本组成单位是原胶原蛋白分子原胶原蛋白分子原胶原蛋白分子原胶原蛋白分子原胶原蛋白分子原胶原蛋白分子n nn一级结构分析表明,胶原蛋白一级结构分析表明,胶原蛋白一级结构分析表明,胶原蛋白一级结构分析表明,胶原蛋白一级结构分析表明,胶原蛋白一级结构分析表明,胶原蛋白 肽链的肽链的肽链的肽链的肽链的肽链的96%96%96%96%96%96%都是按三联体的重都是按三联体的重都是按三联体的重都是按三联体的重都是按三联体的重都是按三联体的重复顺序:复顺序:复顺序:复顺序:复顺序:复顺序:( ( ( ( ( (g1yxyg1yxyg1
149、yxy)n)n)n)n)n)n排列而成。排列而成。排列而成。排列而成。排列而成。排列而成。GlyGlyGlyGlyGlyGly数目占残基总数的三分数目占残基总数的三分数目占残基总数的三分数目占残基总数的三分数目占残基总数的三分数目占残基总数的三分之一,之一,之一,之一,之一,之一,x x x x x x常为常为常为常为常为常为ProProPro,y y y y y y常为常为常为常为常为常为OH-proOH-proOH-pro( ( ( ( ( (羟脯氨酸羟脯氨酸羟脯氨酸羟脯氨酸羟脯氨酸羟脯氨酸) ) ) ) ) )和和和和和和OH-lysOH-lysOH-lys(羟赖氨(羟赖氨(羟赖氨(羟赖
150、氨(羟赖氨(羟赖氨酸)。酸)。酸)。酸)。酸)。酸)。 蛋白质IIn nn胶原蛋白的二级结构是由三条肽链组成的三股螺旋,这是胶原蛋白的二级结构是由三条肽链组成的三股螺旋,这是胶原蛋白的二级结构是由三条肽链组成的三股螺旋,这是胶原蛋白的二级结构是由三条肽链组成的三股螺旋,这是胶原蛋白的二级结构是由三条肽链组成的三股螺旋,这是胶原蛋白的二级结构是由三条肽链组成的三股螺旋,这是一种右手超螺旋结构。螺距为一种右手超螺旋结构。螺距为一种右手超螺旋结构。螺距为一种右手超螺旋结构。螺距为一种右手超螺旋结构。螺距为一种右手超螺旋结构。螺距为8.6nm8.6nm8.6nm,每圈每股包含,每圈每股包含,每圈每股包
151、含,每圈每股包含,每圈每股包含,每圈每股包含303030303030个个个个个个残基。其中每一股螺旋又是一种特殊的左手螺旋,螺距为残基。其中每一股螺旋又是一种特殊的左手螺旋,螺距为残基。其中每一股螺旋又是一种特殊的左手螺旋,螺距为残基。其中每一股螺旋又是一种特殊的左手螺旋,螺距为残基。其中每一股螺旋又是一种特殊的左手螺旋,螺距为残基。其中每一股螺旋又是一种特殊的左手螺旋,螺距为0.95nm0.95nm0.95nm,每一螺圈含,每一螺圈含,每一螺圈含,每一螺圈含,每一螺圈含,每一螺圈含3.33.33.3个残基个残基个残基个残基个残基个残基, , , , , ,每一残基沿轴向的距离为每一残基沿轴向
152、的距离为每一残基沿轴向的距离为每一残基沿轴向的距离为每一残基沿轴向的距离为每一残基沿轴向的距离为0.29nm0.29nm0.29nmn nn原胶原蛋白分子在胶原纤维中都是有规则地按四分之一错原胶原蛋白分子在胶原纤维中都是有规则地按四分之一错原胶原蛋白分子在胶原纤维中都是有规则地按四分之一错原胶原蛋白分子在胶原纤维中都是有规则地按四分之一错原胶原蛋白分子在胶原纤维中都是有规则地按四分之一错原胶原蛋白分子在胶原纤维中都是有规则地按四分之一错位,首尾相接,并行排列组成纤维束。位,首尾相接,并行排列组成纤维束。位,首尾相接,并行排列组成纤维束。位,首尾相接,并行排列组成纤维束。位,首尾相接,并行排列组
153、成纤维束。位,首尾相接,并行排列组成纤维束。n nn原胶原蛋白分子经多级聚合形成胶原纤维。在电子显微镜原胶原蛋白分子经多级聚合形成胶原纤维。在电子显微镜原胶原蛋白分子经多级聚合形成胶原纤维。在电子显微镜原胶原蛋白分子经多级聚合形成胶原纤维。在电子显微镜原胶原蛋白分子经多级聚合形成胶原纤维。在电子显微镜原胶原蛋白分子经多级聚合形成胶原纤维。在电子显微镜下,胶原纤维呈现特有的横纹区带,区带间距为下,胶原纤维呈现特有的横纹区带,区带间距为下,胶原纤维呈现特有的横纹区带,区带间距为下,胶原纤维呈现特有的横纹区带,区带间距为下,胶原纤维呈现特有的横纹区带,区带间距为下,胶原纤维呈现特有的横纹区带,区带间
154、距为60-70nm60-70nm60-70nm,其大小取决于胶原的类型和生物来源,其大小取决于胶原的类型和生物来源,其大小取决于胶原的类型和生物来源,其大小取决于胶原的类型和生物来源,其大小取决于胶原的类型和生物来源,其大小取决于胶原的类型和生物来源蛋白质II胶原蛋白的结构蛋白质II胶原纤维中的交联结构蛋白质II胶原蛋白胶原蛋白蛋白质II生物体内胶原蛋白网蛋白质II四四级级结结构构的的结结构构模模型型蛋白质II蛋白质II蛋白质II四级结构的维系四级结构的维系四级结构的维系四级结构的维系蛋白质II血红蛋白与肌红蛋白血红蛋白与肌红蛋白血红蛋白与肌红蛋白血红蛋白与肌红蛋白蛋白质II蛋白质II蛋白质II蛋白质II蛋白质II蛋白质II蛋白质II蛋白质II蛋白质II蛋白质II蛋白质II蛋白质II