80生物技术实践

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1、走向高考走向高考 生物生物路漫漫其修远兮路漫漫其修远兮 吾将上下而求索吾将上下而求索新课标版新课标版 二轮专题复二轮专题复习习生物技术实践生物技术实践专题八专题八考纲解读考纲解读考点预测考点预测1.微生物的利用微生物的利用(1)微生物的分离和培养;微生物的分离和培养;(2)某种微生物某种微生物数量的测定;数量的测定;(3)培养基对微生物的选择作用培养基对微生物的选择作用1.微生物的分离、培养微生物的分离、培养与计数与计数2培养基对微生物的选培养基对微生物的选择作用及灭菌技术择作用及灭菌技术3果酒、果醋及腐乳制果酒、果醋及腐乳制作的原理、过程作的原理、过程4制作泡菜并检测亚硝制作泡菜并检测亚硝酸

2、盐含量酸盐含量5制备和应用固定化酶制备和应用固定化酶6植物组织培养的过程植物组织培养的过程及影响因素及影响因素7DNA、血红蛋白的、血红蛋白的提取与分离提取与分离8芳香油、胡萝卜素的芳香油、胡萝卜素的提取与分离提取与分离2.生物技术在食品加工中的应用生物技术在食品加工中的应用(1)果酒和果醋的制作;果酒和果醋的制作;(2)腐乳的制作;腐乳的制作;(3)测定食品加工中可能产生的有害物质测定食品加工中可能产生的有害物质3.生物技术在其他方面的应用生物技术在其他方面的应用(1)植物组织培养;植物组织培养;(2)蛋白质的提取和分蛋白质的提取和分离;离;(3)PCR技术的基本操作和应用技术的基本操作和应

3、用4.酶的应用酶的应用(1)酶在食品制造和洗涤等方面的应用酶在食品制造和洗涤等方面的应用(2)制备和应用固定化酶制备和应用固定化酶复复习习指指导导:(1)从从类类型型、特特点点和和应应用用等等方方面面列列表表比比较较不不同同微生物培养基。微生物培养基。(2)将将果果酒酒、果果醋醋与与泡泡菜菜的的制制作作,特特定定微微生生物物的的分分离离纯纯化化等实践操作构建过程模型,可以加深对知识的记忆和理解。等实践操作构建过程模型,可以加深对知识的记忆和理解。(3)利用实例分析法理解果胶酶在果汁生产中的应用。利用实例分析法理解果胶酶在果汁生产中的应用。(4)利利用用列列表表比比较较法法突突破破直直接接使使用

4、用酶酶、固固定定化化酶酶和和固固定定化化细胞的内容。细胞的内容。(5)利利用用图图解解法法理理解解特特定定成成分分的的提提取取和和植植物物组组织织培培养养的的操操作程序。作程序。(6)联联系系生生长长素素和和细细胞胞分分裂裂素素的的作作用用分分析析在在植植物物组组织织培培养养中的作用。中的作用。高频热点精析高频热点精析2真题模拟强化真题模拟强化3体系整合拓展体系整合拓展1体系整合拓展体系整合拓展答答案案:水水、碳碳源源、氮氮源源、无无机机盐盐配配制制培培养养基基灭灭菌菌接接种种培培养养以以尿尿素素作作为为唯唯一一氮氮源源的的选选择择培培养养基基稀稀释释涂涂布布平平板板法法和和显显微微镜镜直直接

5、接计计数数法法富富含含纤纤维维素素的的选选择择培培养养基基刚刚果果红红染染色色法法酵酵母母菌菌在在无无氧氧的的条条件件下下进进行行酒酒精精发发酵酵温温度度为为3035,适适时时通通气气、控控制制糖糖源源供供应应让让豆豆腐腐长长出出毛毛霉霉加加盐盐腌腌制制加加卤卤汤汤装装瓶瓶密密封封腌腌制制泡泡菜菜坛坛的的选选择择,腌腌制制的的条条件件(如如腌腌制制的的时时间间、温温度度、食食盐盐用用量量)配配制制溶溶液液制制备备标标准准显显色色液液制制备备样样品品处处理理液液比比色色水水蒸蒸气气蒸蒸馏馏法法压压榨榨法法萃萃取取法法提提取取、纸纸层层析析法法鉴鉴定定分分解解纤纤维维素素和和果果胶胶,易于榨取果汁

6、易于榨取果汁1通常采用哪种方法来推测样品中的活菌数目?通常采用哪种方法来推测样品中的活菌数目?_2果果酒酒和和果果醋醋制制作作中中所所用用的的发发酵酵菌菌种种在在结结构构上上的的本本质质区区别是什么?别是什么?_3土土壤壤中中纤纤维维素素分分解解菌菌的的筛筛选选流流程程中中的的“选选择择培培养养”一一定需要吗?定需要吗?_4固定化细胞在使用上有什么要求?固定化细胞在使用上有什么要求?_5凝胶色谱法的原理是什么?凝胶色谱法的原理是什么?_答案:答案:1.稀释涂布平板法。稀释涂布平板法。2前前者者是是真真核核生生物物,后后者者是是原原核核生生物物,其其本本质质区区别别是是酵酵母菌有核膜包被的细胞核

7、。母菌有核膜包被的细胞核。3土土壤壤中中纤纤维维素素分分解解菌菌的的筛筛选选流流程程中中的的“选选择择培培养养”是是否需要,应根据样品中目的菌株数量的多少来确定。否需要,应根据样品中目的菌株数量的多少来确定。4因因为为固固定定化化细细胞胞使使用用的的是是活活细细胞胞,因因而而要要定定期期提提供供全全面的营养物质,供细胞生长、繁殖。面的营养物质,供细胞生长、繁殖。5根据相对分子质量的大小分离蛋白质。根据相对分子质量的大小分离蛋白质。1下列关于植物芳香油的叙述,错误的是下列关于植物芳香油的叙述,错误的是()A挥发性强,易溶于有机溶剂,一般来说价格昂贵挥发性强,易溶于有机溶剂,一般来说价格昂贵B都都

8、是是由由天天然然植植物物的的茎茎、叶叶、树树干干、花花、果果实实和和种种子子等等部位萃取出来的浓缩液体部位萃取出来的浓缩液体C它是植物免疫和维护系统的精华它是植物免疫和维护系统的精华D植植物物芳芳香香油油广广泛泛地地应应用用于于轻轻工工、化化妆妆品品、饮饮料料和和食食品品制造等方面制造等方面 答案答案 B 解解析析 植植物物芳芳香香油油不不仅仅挥挥发发性性强强,而而且且易易溶溶于于有有机机溶溶剂剂。我我们们可可用用萃萃取取法法来来提提取取,但但这这不不是是唯唯一一方方法法。我我们们可可以以根根据据植植物物原原料料的的特特点点,选选择择不不同同的的提提取取方方法法,植植物物芳芳香香油油提提取取方

9、方法法常常用用的的有有蒸蒸馏馏法法、压压榨榨法法和和萃萃取取法法等等,植植物物芳芳香香油油的的存存在在对对于于保保护植物本身有重要作用。护植物本身有重要作用。2下下列列与与果果酒酒、果果醋醋和和腐腐乳乳制制作作相相关关的的叙叙述述,正正确确的的是是()A腐乳制作所需要的适宜温度最高腐乳制作所需要的适宜温度最高B果醋发酵包括无氧发酵和有氧发酵果醋发酵包括无氧发酵和有氧发酵C使用的菌种分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌使用的菌种分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌D使用的菌种都具有细胞壁、核糖体、使用的菌种都具有细胞壁、核糖体、DNA和和RNA 答案答案 D 解解析析 酵酵母母菌菌酒酒精精发发酵酵的的适适宜宜温

10、温度度为为1825,而而醋醋酸酸菌菌醋醋酸酸发发酵酵的的适适宜宜温温度度是是3035,腐腐乳乳制制作作中中豆豆腐腐长长出出毛毛霉霉的的适适宜宜温温度度是是1518,可可见见果果醋醋制制作作的的适适宜宜温温度度最最高高,A项项错错误误;果果醋醋制制作作过过程程中中的的菌菌种种醋醋酸酸菌菌为为好好氧氧细细菌菌,只只进进行行有有氧氧呼呼吸吸,B项项错错误误;制制作作腐腐乳乳的的菌菌种种主主要要是是毛毛霉霉,C项项错错误误;酵酵母母菌菌、醋醋酸酸菌菌、毛毛霉霉等等都都具具有有细细胞胞壁壁,都都有有DNA和和RNA,细细胞胞中都有核糖体,中都有核糖体,D项正确。项正确。3固固定定化化酶酶是是从从20世世

11、纪纪60年年代代迅迅速速发发展展起起来来的的一一种种技技术术。科科研研人人员员用用双双重重固固定定法法,即即采采用用戊戊二二醛醛作作为为交交联联剂剂(使使酶酶相相互互连连接接)、海海藻藻酸酸钠钠作作为为包包埋埋剂剂来来固固定定小小麦麦酯酯酶酶,以以研研究究固固定定化化酶酶的的相相关关性性质质和和最最佳佳固固定定条条件件。酶酶活活力力为为固固定定化化酶酶催催化化化化学学反反应应的的总总效效率率,包包括括酶酶活活性性和和酶酶的的数数量量。下下图图甲甲、乙乙、丙丙为为部部分分研究结果。下列有关叙述,错误的是研究结果。下列有关叙述,错误的是()A由由图图甲甲可可知知,固固定定化化小小麦麦酯酯酶酶比比游

12、游离离小小麦麦酯酯酶酶对对温温度度变化的适应性强变化的适应性强B由由图图乙乙可可知知,用用浓浓度度约约为为3%的的海海藻藻酸酸钠钠作作为为包包埋埋剂剂效效果最好果最好C由由图图丙丙可可知知,固固定定化化小小麦麦酯酯酶酶一一般般可可重重复复使使用用3次次,之之后若继续使用,则酶活力明显下降后若继续使用,则酶活力明显下降D固定小麦酯酶应直接采用海藻酸钠包埋法固定小麦酯酶应直接采用海藻酸钠包埋法 答案答案 D 解解析析 由由图图甲甲可可知知,在在一一定定范范围围内内,随随着着温温度度的的升升高高,固固定定化化小小麦麦酯酯酶酶的的酶酶活活力力始始终终比比游游离离小小麦麦酯酯酶酶的的酶酶活活力力高高,故

13、故固固定定化化小小麦麦酯酯酶酶比比游游离离小小麦麦酯酯酶酶对对温温度度变变化化的的适适应应性性强强;由由图图乙乙可可知知,海海藻藻酸酸钠钠浓浓度度约约为为3%时时,酶酶活活力力最最高高;由由图图丙丙可可知知,固固定定化化小小麦麦酯酯酶酶使使用用3次次后后,若若继继续续使使用用则则其其酶酶活活力力明明显显下下降降;一一般般来来说说,酶酶的的固固定定适适合合采采用用化化学学结结合合法法、物物理理吸吸附附法法,细细胞胞的固定适合采用包埋法。的固定适合采用包埋法。高频热点精析高频热点精析1微生物的培养微生物的培养微生物的利用和传统发酵技术的应用微生物的利用和传统发酵技术的应用2微生物的分离与计数微生物

14、的分离与计数土壤中分解尿素的土壤中分解尿素的细菌的分离细菌的分离分解纤维素的微生物的分解纤维素的微生物的分离分离筛选筛选原理原理在选择培养基的配在选择培养基的配方中,把尿素作为方中,把尿素作为培养基中的唯一氮培养基中的唯一氮源,原则上只有能源,原则上只有能利用尿素的微生物利用尿素的微生物才能生长才能生长在以纤维素为唯一碳源在以纤维素为唯一碳源的培养基上,只有能分的培养基上,只有能分解纤维素的微生物能够解纤维素的微生物能够生长生长土壤中分解尿素的细土壤中分解尿素的细菌的分离菌的分离分解纤维素的微生物的分分解纤维素的微生物的分离离计数计数法法(1)显微镜直接计数法:显微镜直接计数法:原理:利用特定

15、细菌计数板或血细胞计数板,原理:利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量缺点:不能区分死菌与活菌缺点:不能区分死菌与活菌(2)间接计数法间接计数法(活菌计数法活菌计数法):原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品菌,通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少个活菌中大约含有多少个活菌土壤中分解尿素的细菌土壤中分解尿素的细菌的分离的分离分解纤维素

16、的微生物的分离分解纤维素的微生物的分离计数计数法法缺点:当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察缺点:当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的是一个菌落到的是一个菌落计算公式:每克样品中的菌株数计算公式:每克样品中的菌株数C/VM,其中,其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表代表涂布平板时所用的稀释液的体积涂布平板时所用的稀释液的体积(mL),M代表稀释倍代表稀释倍数数注意事项:注意事项:a设置重复组,增强实验的说服力与准确性。设置重复组,增强实验的说服力与准确性。b.为了为了保证结果准确,一般选择菌落数在保证结果准确,一般选择菌落数在30

17、300的平板进行的平板进行计数计数3.果酒、果醋、腐乳及泡菜的制作原理及过程果酒、果醋、腐乳及泡菜的制作原理及过程4.亚硝酸盐在整个发酵过程中含量的变化趋势亚硝酸盐在整个发酵过程中含量的变化趋势下列关于微生物分离和培养的叙述,错误的是下列关于微生物分离和培养的叙述,错误的是()A微生物培养前,需对培养基进行消毒微生物培养前,需对培养基进行消毒B测定土壤样品中的细菌数目,常用菌落计数法测定土壤样品中的细菌数目,常用菌落计数法C分离土壤中不同的微生物,要采用不同的稀释度分离土壤中不同的微生物,要采用不同的稀释度D分分离离能能分分解解尿尿素素的的细细菌菌,要要以以尿尿素素作作为为培培养养基基中中的的

18、唯唯一氮源一氮源 解解析析 微微生生物物培培养养前前,需需对对培培养养基基进进行行灭灭菌菌,而而不不是是消消毒。毒。 答案答案 A生活中有许多微生物技术的应用,请分析回答:生活中有许多微生物技术的应用,请分析回答:(1)家家庭庭酿酿酒酒时时先先将将米米煮煮熟熟,其其目目的的是是_。冷冷却却到到30后后才才能能加加酒酒药药的的原原因因是是_。如如果果时时常常开开坛坛盖盖取取酒酒,不久酒就会变酸,其原因是不久酒就会变酸,其原因是_。(2)腐腐乳乳制制作作过过程程中中,豆豆腐腐相相当当于于微微生生物物生生长长的的_。豆豆腐腐变变为为味味道道鲜鲜美美的的腐腐乳乳的的原原因因是是_,制制作腐乳的实验流程

19、是作腐乳的实验流程是_。(3)在在制制作作泡泡菜菜过过程程中中,主主要要起起作作用用的的微微生生物物是是_,检检测测泡泡菜菜中中亚亚硝硝酸酸盐盐的的含含量量时时,使使用用对对氨氨基基苯苯磺磺酸酸溶溶液液和和_溶液检测,泡菜溶液会出现玫瑰红色。溶液检测,泡菜溶液会出现玫瑰红色。 答答案案 (1)杀杀灭灭其其中中的的杂杂菌菌太太高高的的温温度度会会抑抑制制甚甚至至杀杀死死酵酵母母菌菌醋醋酸酸菌菌在在有有氧氧条条件件下下,将将酒酒精精变变为为醋醋酸酸(2)培培养养基基毛毛霉霉等等微微生生物物产产生生的的蛋蛋白白酶酶能能将将豆豆腐腐中中的的蛋蛋白白质质分分解解成成小小分分子子的的肽肽和和氨氨基基酸酸;

20、脂脂肪肪酶酶能能将将豆豆腐腐中中的的脂脂肪肪水水解解为为甘甘油油和和脂脂肪肪酸酸让让豆豆腐腐上上长长出出毛毛霉霉加加盐盐腌腌制制加加卤卤汤汤装装瓶瓶密密封封腌腌制制(3)乳酸菌乳酸菌N1萘基乙二胺盐酸盐萘基乙二胺盐酸盐 解解析析 (1)酿酿酒酒过过程程中中要要防防止止杂杂菌菌干干扰扰,将将米米煮煮熟熟可可杀杀灭灭其其中中的的杂杂菌菌。温温度度过过高高时时放放入入酵酵母母菌菌会会将将酵酵母母菌菌杀杀死死。醋醋酸酸菌菌在在有有氧氧条条件件下下,将将酒酒精精变变为为醋醋酸酸,从从而而使使酒酒变变酸酸。(2)豆豆腐腐的的主主要要营营养养成成分分是是蛋蛋白白质质和和脂脂肪肪,它它们们可可为为微微生生物物

21、的的生生长长提提供供营营养养;在在毛毛霉霉等等多多种种微微生生物物分分泌泌的的蛋蛋白白酶酶和和脂脂肪肪酶酶的的作作用用下下,豆豆腐腐中中的的蛋蛋白白质质和和脂脂肪肪分分别别分分解解成成小小分分子子的的肽肽和和氨氨基基酸酸、甘甘油油和和脂脂肪肪酸酸等等营营养养成成分分,从从而而使使豆豆腐腐变变为为味味道道鲜鲜美美的的腐腐乳乳。(3)泡泡菜菜的的制制作作是是利利用用乳乳酸酸菌菌的的发发酵酵,在在发发酵酵的的过过程程中中会会产产生生大大量量的的亚亚硝硝酸酸盐盐,在在酸酸性性条条件件下下亚亚硝硝酸酸盐盐与与对对氨氨基基苯苯磺磺酸酸发发生生反反应应后,与后,与N1萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。萘

22、基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。1酶在食品制造和洗涤等方面的应用酶在食品制造和洗涤等方面的应用(1)纤维素酶与果胶酶:纤维素酶与果胶酶:酶的应用酶的应用组成组成作用作用纤维素酶纤维素酶C1酶酶CX酶酶葡萄糖苷酶葡萄糖苷酶纤维素在纤维素在C1酶、酶、Cx酶的作酶的作用下分解成纤维二糖,再在用下分解成纤维二糖,再在葡萄糖苷酶的作用下将纤维葡萄糖苷酶的作用下将纤维二糖分解为葡萄糖二糖分解为葡萄糖果胶酶果胶酶多聚半乳糖醛酸酶、果多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶、果胶酯酶胶分解酶、果胶酯酶都能将不溶性果胶分解成可都能将不溶性果胶分解成可溶性半乳糖醛酸溶性半乳糖醛酸(2)加酶洗衣粉:加酶洗衣粉:概概念念:

23、指指含含酶酶制制剂剂的的洗洗衣衣粉粉,目目前前常常用用的的酶酶制制剂剂有有蛋蛋白白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶四类。酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶四类。洗涤原理:洗涤原理:种类种类洗涤原理洗涤原理洗涤的物质种类洗涤的物质种类蛋白酶蛋白酶可将蛋白质水解为易可将蛋白质水解为易溶解或分散于洗涤液溶解或分散于洗涤液中的小分子的肽或氨中的小分子的肽或氨基酸基酸血渍、奶渍及各种食血渍、奶渍及各种食品类的蛋白质污垢品类的蛋白质污垢脂肪酶脂肪酶把脂肪水解为较易溶把脂肪水解为较易溶解的甘油和脂肪酸解的甘油和脂肪酸食品的油渍、人体皮食品的油渍、人体皮脂、口红脂、口红种类种类洗涤原理洗涤原理洗涤的物质种类洗涤的物质种

24、类淀粉酶淀粉酶能使淀粉分解为可溶能使淀粉分解为可溶性的麦芽糖、葡萄糖性的麦芽糖、葡萄糖来自面条等的污垢来自面条等的污垢纤维纤维素酶素酶使纤维的结构变得蓬使纤维的结构变得蓬松,从而使渗入到纤松,从而使渗入到纤维深处的尘土和污垢维深处的尘土和污垢能够与洗衣粉充分接能够与洗衣粉充分接触,达到更好的去污触,达到更好的去污效果效果2.固定化酶和固定化细胞的比较固定化酶和固定化细胞的比较项目项目固定化酶固定化酶固定化细胞固定化细胞常用方法常用方法化学结合法、物理吸化学结合法、物理吸附法附法包埋法包埋法优点优点可反复使用;可反复使用;有利于工艺的连续有利于工艺的连续化、管道化,同时降化、管道化,同时降低了生

25、产成本低了生产成本可以连续发酵,节约可以连续发酵,节约成本;成本;保持酶在细胞保持酶在细胞内的原始状况,增加了内的原始状况,增加了酶的稳定性;酶的稳定性;操作容操作容易易不足不足酶在固定化时活力酶在固定化时活力有所损失;有所损失;不适用于多酶反应不适用于多酶反应 细胞膜、细胞壁会阻碍细胞膜、细胞壁会阻碍底物的渗透和扩散,降底物的渗透和扩散,降低反应效率低反应效率3.制备固定化酵母细胞及用固定化酵母细胞发酵制备固定化酵母细胞及用固定化酵母细胞发酵下下列列关关于于固固定定化化酶酶和和固固定定化化细细胞胞的的叙叙述述,正正确确的的是是()A固定化细胞技术在多步连续催化反应方面优势明显固定化细胞技术在

26、多步连续催化反应方面优势明显B固定化酶的应用中,要控制好固定化酶的应用中,要控制好pH、温度和溶解氧、温度和溶解氧C利利用用固固定定化化酶酶降降解解水水体体中中的的有有机机磷磷农农药药,需需提提供供适适宜宜的营养条件的营养条件D利利用用固固定定化化酵酵母母细细胞胞进进行行发发酵酵,糖糖类类的的作作用用只只是是作作为为反应底物反应底物 解解析析 固固定定化化酶酶不不像像普普通通酶酶那那样样对对环环境境要要求求那那么么高高,耐耐受受性性比比较较好好,故故B错错;利利用用固固定定化化酶酶降降解解水水体体中中的的有有机机磷磷农农药药,是是通通过过酶酶催催化化化化学学反反应应实实现现的的,不不需需要要提

27、提供供营营养养条条件件,故故C错错;利利用用固固定定化化酵酵母母细细胞胞进进行行发发酵酵时时糖糖类类的的作作用用有有:作作为为反反应应底底物物和作为碳源来调节酵母菌的代谢方式,和作为碳源来调节酵母菌的代谢方式,D错。错。 答案答案 A某同学进行苹果汁制作实验,工艺流程如图所示。某同学进行苹果汁制作实验,工艺流程如图所示。请回答:请回答:(1)图图中中用用KMnO4溶溶液液浸浸泡泡苹苹果果的的目目的的是是_。黑黑曲曲霉霉提提取取液液中中含含有有的的_可可分分解解果果胶胶,从从而而使使果果汁汁澄澄清清。固固定定化化柱柱中中填填充充的的石石英英砂砂通通过过_方方式式将将酶酶固固定定化化,酶酶被被固定

28、后用蒸馏水洗涤固定化柱是为了除去固定后用蒸馏水洗涤固定化柱是为了除去_。(2)实实验验中中,操操作作流流程程A和和B的的先先后后顺顺序序为为_。在在苹苹果果汁汁澄澄清清过过程程中中,应应关关闭闭的的流流速速调调节节阀阀是是_。要要测测定定从从固固定定化化柱柱流流出出的的苹苹果果汁汁中中是是否否还还有有果果胶胶,可可取取一一定定量量的的果果汁汁与与等等量量的的_混混合合,如如果果出出现现_现现象象,说说明明果果胶胶还还没没有被完全水解。为使果胶完全水解,应将流速调有被完全水解。为使果胶完全水解,应将流速调_。(3)实实验验后后,将将洗洗涤涤过过的的固固定定化化柱柱在在低低温温环环境境中中保保存存

29、若若干干天天,该该固固定定化化柱柱仍仍可可用用于于苹苹果果汁汁制制作作实实验验,说说明明固固定定化化酶酶可可被被_使用。使用。 答答案案 (1)消消毒毒果果胶胶酶酶吸吸附附未未被被固固定定的的酶酶等等物物质质(2)A、B阀阀1乙醇浑浊乙醇浑浊(沉淀沉淀)慢慢(3)重复重复 解解析析 (1)在在制制作作工工艺艺中中必必须须对对原原材材料料消消毒毒,这这样样才才能能保保证证后后续续实实验验的的成成功功。KMnO4是是强强氧氧化化剂剂,可可以以起起到到对对苹苹果果的的消消毒毒作作用用。使使果果胶胶分分解解的的物物质质是是果果胶胶酶酶。在在制制备备固固定定化化酶酶时时,石石英英砂砂具具有有吸吸附附作作

30、用用。为为了了除除去去未未被被固固定定的的酶酶等等物物质质,需需用用蒸蒸馏水洗涤固定化柱。馏水洗涤固定化柱。(2)实实验验中中应应先先制制备备好好固固定定化化酶酶,再再对对苹苹果果进进行行榨榨汁汁处处理理,否否则则易易使使果果汁汁被被污污染染。在在苹苹果果汁汁澄澄清清过过程程中中,应应将将调调节节阀阀1关关闭闭,否否则则在在产产物物中中会会混混入入较较多多的的果果胶胶酶酶。要要测测定定从从固固定定化化柱柱流流出出的的苹苹果果汁汁中中是是否否还还有有果果胶胶,可可取取一一定定量量的的果果汁汁与与等等量量的的乙乙醇醇混混合合,如如果果出出现现浑浑浊浊或或沉沉淀淀的的现现象象(乙乙醇醇对对果果胶胶有

31、有凝凝聚聚作作用用),说说明明果果胶胶还还没没有有被被完完全全分分解解。为为使使果果胶胶完完全全分分解解,应应将将流流速速调调慢慢,以以便便反反应应充充分分进进行行。(3)固固定定化化酶酶的的最最大大优优点点是是可可回回收收,重重复复使使用。用。生物技术在其他方面的应用生物技术在其他方面的应用2比较下表中植物茎的组织培养与花药植株培养比较下表中植物茎的组织培养与花药植株培养菊花茎的组织培养菊花茎的组织培养月季的花药培养月季的花药培养理论依据理论依据细胞的全能性细胞的全能性基本过程基本过程脱分化、再分化脱分化、再分化影响因素影响因素材料、营养、激素、材料、营养、激素、pH、温度、光照等、温度、光

32、照等选择材料选择材料体细胞体细胞花药花药(生殖细胞生殖细胞)操作流程操作流程制备培养基制备培养基外植外植体消毒体消毒接种接种培培养养移栽移栽栽培栽培选材选材材料消毒材料消毒接接种和培养种和培养筛选和诱筛选和诱导导移栽移栽栽培选育栽培选育2.植物组织培养技术和花药离体培养技术的异同植物组织培养技术和花药离体培养技术的异同3.五种生物成分的提取五种生物成分的提取提取提取物质物质提取提取方法方法提取原理提取原理步骤步骤DNA盐析法盐析法DNA和蛋白质和蛋白质等其他成分在不等其他成分在不同浓度的同浓度的NaCl溶溶液中溶解度不同液中溶解度不同DNA不溶于酒不溶于酒精溶液,但某些精溶液,但某些蛋白质则溶

33、于酒蛋白质则溶于酒精溶液精溶液将实验材料溶解在将实验材料溶解在2 mol/L的的NaCl溶液中,过滤溶液中,过滤加水稀释至加水稀释至0.14 mol/L/L的的NaClNaCl溶液使溶液使DNADNA析出并过滤,析出并过滤,再用再用2 mol/2 mol/L的的NaCl溶液溶解溶液溶解DNA加入与滤液体积相等的、加入与滤液体积相等的、冷却的体积分数为冷却的体积分数为95%的酒的酒精溶液精溶液提取物质提取物质提取方法提取方法提取原理提取原理步骤步骤血红血红蛋白蛋白凝胶色凝胶色谱法谱法根据相对分子质根据相对分子质量的大小量的大小样品处理样品处理粗分离粗分离纯化纯化纯度鉴定纯度鉴定电泳法电泳法根据各

34、种分子带根据各种分子带电性质的差异及电性质的差异及分子本身的大小、分子本身的大小、形状的不同形状的不同玫瑰玫瑰精油精油水蒸气水蒸气蒸馏法蒸馏法利用水蒸气将挥利用水蒸气将挥发性较强的植物发性较强的植物芳香油携带出来芳香油携带出来水蒸气蒸馏水蒸气蒸馏分离油层分离油层(加加NaCl)除水过滤除水过滤(加无加无水水Na2SO4)提取物质提取物质提取方法提取方法提取原理提取原理步骤步骤橘皮橘皮精油精油压榨法压榨法通过机械加压,通过机械加压,压榨出果皮中压榨出果皮中的芳香油的芳香油石灰水浸泡石灰水浸泡压榨、过滤、压榨、过滤、静置静置再次过滤再次过滤胡萝胡萝卜素卜素萃取法萃取法使提取物溶解使提取物溶解在有机

35、溶剂中,在有机溶剂中,蒸发后得到提蒸发后得到提取物取物粉碎、干燥粉碎、干燥萃取,过滤萃取,过滤浓缩浓缩A酵母和菜花均可作为提取酵母和菜花均可作为提取DNA的材料的材料BDNA既溶于既溶于2 mol/L NaCl溶液也溶于蒸馏水溶液也溶于蒸馏水C向向鸡鸡血血细细胞胞液液中中加加蒸蒸馏馏水水搅搅拌拌,可可见见玻玻棒棒上上有有白白色色絮絮状物状物DDNA溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热,冷却后变蓝溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热,冷却后变蓝 解解析析 酵酵母母和和菜菜花花细细胞胞均均为为真真核核细细胞胞,理理论论上上均均可可作作为为提提取取DNA的的材材料料;DNA既既溶溶于于2 mol/L /L NaCl

36、NaCl溶溶液液也也溶溶于于蒸蒸馏馏水水,在在2 2 mol/mol/L NaCl溶溶液液中中溶溶解解度度最最大大,在在0.14 mol/L NaCl溶溶液液中中溶溶解解度度最最小小;向向鸡鸡血血细细胞胞液液中中加加蒸蒸馏馏水水搅搅拌拌,是是为为了了加加速速细细胞胞膜膜和和核核膜膜破破裂裂,此此时时玻玻棒棒上上没没有有白白色色絮絮状状物物;鉴鉴定定DNA的的原原理理是是DNA溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热,冷却后变蓝。溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热,冷却后变蓝。 答案答案 C(2014广广州州)辣辣椒椒素素是是辣辣椒椒果果实实中中普普遍遍存存在在的的一一种种生生物物碱碱,广广泛泛用用于于食食品品保

37、保健健、医医药药工工业业等等领领域域。辣辣椒椒素素的的获获得得途途径径如如下下图所示。请回答下列问题。图所示。请回答下列问题。(1)图图中中和和分分别别表表示示辣辣椒椒组组织织培培养养中中细细胞胞的的_和和_过程。过程。(2)图图中中所所用用的的MS培培养养基基主主要要成成分分应应包包括括:大大量量元元素素、微微量量元元素素、有有机机物物(如如甘甘氨氨酸酸、烟烟酸酸、肌肌醇醇、维维生生素素以以及及_等等),还还需需要要添添加加多多种种植植物物激激素素,如如生生长长素素和和细细胞胞分分裂裂素素。培培养养基基中中的的生生长长素素和和细细胞胞分分裂裂素素用用量量的的比比值值_ (填填“高高”或或“低

38、低”)时时,有有利利于于芽芽的的分分化化。所所用用的的培培养养基基必必须须彻底灭菌,一般应采取的灭菌方法是彻底灭菌,一般应采取的灭菌方法是_。(3)培培养养外外植植体体的的培培养养基基一一般般是是固固体体培培养养基基,需需要要加加入入凝凝固固剂剂_。并并且且,在在培培养养获获得得辣辣椒椒脱脱毒毒苗苗的的过过程程中中,除除无无菌操作外,还需要注意菌操作外,还需要注意pH、_、_等条件的控制。等条件的控制。(4)图图中中第第二二条条获获得得辣辣椒椒素素途途径径:用用酶酶解解法法将将愈愈伤伤组组织织分分离离成成单单细细胞胞,再再选选择择高高产产细细胞胞系系进进行行培培养养。分分散散的的细细胞胞能能快

39、快速速增增殖殖,提提取取的的有有效效成成分分比比从从辣辣椒椒果果实实中中提提取取更更充充分分。酶酶解解法法用用到的酶有到的酶有_酶和酶和_酶。酶。(5)辣辣椒椒素素是是一一种种斥斥水水亲亲脂脂、易易溶溶于于乙乙醇醇、丙丙酮酮等等有有机机溶溶剂剂的的化化合合物物。可可以以采采用用_方方法法提提取取辣辣椒椒素素,该该方方法法需需要要对对原原材材料料进进行行_,再再用用酒酒精精、丙丙酮酮等等浸浸泡泡,并并利利用用_加加热热方方法法加加热热,加加热热瓶瓶口口安安装装回回流流冷冷凝凝装装置置,目目的的是是_。通通过过过过滤滤获获得得滤滤液液,若若要要获获得得辣辣椒椒素素结结晶晶,还还需需再再对对滤滤液液

40、加加热热蒸蒸发发出出有有机机溶溶剂剂,这这时时可可以以直直接接使使用用_装装置置进行。进行。 答答案案 (1)脱脱分分化化(去去分分化化)再再分分化化 (2)蔗蔗糖糖低低高高压压蒸蒸汽汽灭灭菌菌(3)琼琼脂脂温温度度光光照照(4)果果胶胶纤纤维维素素(5)萃取粉碎、干燥水浴防止有机溶剂的挥发蒸馏萃取粉碎、干燥水浴防止有机溶剂的挥发蒸馏 解解析析 (1)由由外外植植体体培培养养成成脱脱毒毒苗苗的的过过程程为为植植物物组组织织培培养过程,需经过脱分化、再分化两个阶段。养过程,需经过脱分化、再分化两个阶段。(2)MS培培养养基基主主要要成成分分包包括括大大量量元元素素、微微量量元元素素、有有机机物物

41、(如如甘甘氨氨酸酸、烟烟酸酸、肌肌醇醇、维维生生素素以以及及蔗蔗糖糖等等),还还要要添添加加植植物物激激素素(生生长长素素和和细细胞胞分分裂裂素素)来来启启动动细细胞胞分分裂裂、脱脱分分化化和和再再分分化化,当当细细胞胞分分裂裂素素较较多多,生生长长素素和和细细胞胞分分裂裂素素用用量量的的比比值值低低时时,有有利利于于芽芽的的分分化化;当当生生长长素素较较多多时时,有有利利于于根根的的分分化化。培培养养基基的的彻底灭菌常用高压蒸汽灭菌法。彻底灭菌常用高压蒸汽灭菌法。(3)培培养养外外植植体体的的培培养养基基一一般般是是固固体体培培养养基基,需需加加入入凝凝固固剂剂琼琼脂脂。在在植植物物组组织织

42、培培养养过过程程中中,除除无无菌菌操操作作外外,还还要要注注意意pH、温度、光照等条件的控制。、温度、光照等条件的控制。(4)酶解法用到的酶为纤维素酶和果胶酶。酶解法用到的酶为纤维素酶和果胶酶。(5)辣辣椒椒素素易易溶溶于于有有机机溶溶剂剂,可可以以用用萃萃取取法法提提取取。该该方方法法需需要要对对原原材材料料进进行行粉粉碎碎、干干燥燥,再再用用酒酒精精、丙丙酮酮等等浸浸泡泡,利利用用水水浴浴加加热热方方法法加加热热,这这是是因因为为有有机机溶溶剂剂都都是是易易燃燃物物,直直接接使使用用明明火火加加热热容容易易引引起起燃燃烧烧、爆爆炸炸。为为了了防防止止加加热热时时有有机机溶溶剂剂挥挥发发,还

43、还要要在在加加热热瓶瓶口口安安装装回回流流装装置置。若若要要获获得得辣辣椒椒素素结结晶晶,还还需需再再对滤液加热蒸发出有机溶剂,这时可以直接使用蒸馏装置进行。对滤液加热蒸发出有机溶剂,这时可以直接使用蒸馏装置进行。真题模拟强化真题模拟强化1(2014广东,广东,4)下列叙述错误的是下列叙述错误的是()A醋酸菌在无氧条件下利用乙醇产生醋酸醋酸菌在无氧条件下利用乙醇产生醋酸B酵母菌在无氧条件下利用葡萄糖汁产生酒精酵母菌在无氧条件下利用葡萄糖汁产生酒精C泡菜腌制利用了乳酸菌的乳酸发酵泡菜腌制利用了乳酸菌的乳酸发酵D腐乳制作利用了毛霉等微生物的蛋白酶和脂肪酶腐乳制作利用了毛霉等微生物的蛋白酶和脂肪酶

44、答案答案 A 解解析析 通通过过醋醋酸酸发发酵酵、酒酒精精发发酵酵、乳乳酸酸发发酵酵和和腐腐乳乳制制作作,考考查查发发酵酵技技术术在在生生产产实实践践中中的的应应用用。醋醋酸酸菌菌是是严严格格的的好好氧氧菌菌,无无氧氧条条件件下下不不能能存存活活,因因此此醋醋酸酸菌菌将将乙乙醇醇氧氧化化为为乙乙酸酸必必需需持持续续通通氧氧;酵酵母母菌菌可可以以在在无无氧氧条条件件下下进进行行酒酒精精发发酵酵,产产生生酒酒精精;泡泡菜菜腌腌制制的的原原理理是是乳乳酸酸菌菌在在无无氧氧条条件件下下进进行行乳乳酸酸发发酵酵;腐腐乳乳主主要要利利用用毛毛霉霉等等真真菌菌中中的的蛋蛋白白酶酶和和脂脂肪肪酶酶将将蛋蛋白白

45、质质和和脂脂肪肪分分解解为为多多种氨基酸和芳香烃。种氨基酸和芳香烃。2(2014江江苏苏,18)下下列列关关于于加加酶酶洗洗衣衣粉粉的的叙叙述述,正正确确的是的是()A高高温温易易使使酶酶失失活活,因因此此冷冷水水洗洗涤涤去去污污效效果果应应该该比比温温水水好好B洗洗衣衣粉粉中中表表面面活活性性剂剂对对碱碱性性蛋蛋白白酶酶活活性性有有一一定定的的促促进进作用作用C在在pH低于低于7.0的自来水中,碱性蛋白酶依然能起作用的自来水中,碱性蛋白酶依然能起作用D洗洗衣衣粉粉中中酶酶主主要要是是通通过过快快速速分分解解溶溶在在水水里里的的污污渍渍发发挥挥作用作用 答案答案 C 解解析析 酶酶发发挥挥作作

46、用用需需要要一一个个适适宜宜的的温温度度,高高温温低低温温酶酶的的活活性性低低;洗洗衣衣粉粉中中的的表表面面活活性性剂剂可可以以降降低低溶溶液液表表面面张张力力,增增大大溶溶液液中中物物质质的的溶溶解解度度,可可提提高高洗洗涤涤效效果果,但但不不影影响响酶酶的的活活性性;洗洗衣衣粉粉中中酶酶主主要要是是通通过过快快速速分分解解衣衣物物上上的的污污渍渍发发挥挥作作用用;碱碱性性蛋蛋白白酶酶在在碱碱性性条条件件下下催催化化作作用用强强,但但在在pH低低于于7.0的的自自来来水水中中,依然能起作用。依然能起作用。3(2014江江苏苏高高三三联联考考)下下列列关关于于“DNA粗粗提提取取与与鉴鉴定定实

47、实验验”的叙述,正确的是的叙述,正确的是()A洗洗涤涤剂剂能能瓦瓦解解细细胞胞膜膜并并增增加加DNA在在NaCl溶溶液液中中的的溶溶解解度度B将将DNA丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝C常温下菜花匀浆中有些酶类会影响常温下菜花匀浆中有些酶类会影响DNA的提取的提取D用玻棒缓慢搅拌滤液会导致用玻棒缓慢搅拌滤液会导致DNA获得量减少获得量减少 答案答案 C 解解析析 提提取取植植物物细细胞胞中中DNA时时加加入入洗洗涤涤剂剂可可瓦瓦解解植植物物细细胞胞的的细细胞胞膜膜,利利于于DNA的的释释放放,但但不不能能增增加加DNA在在NaCl溶溶液液中中的的溶溶解解度度,A项项错错误误;含含DNA的的丝丝状状物物应应先先溶溶解解在在物物质质的的量量浓浓度度为为2 mol/L的的NaCl溶溶液液中中,再再加加入入二二苯苯胺胺试试剂剂在在沸沸水水浴浴条条件件下下检检测测,冷冷却却后后观观察察变变成成蓝蓝色色,B项项错错误误;菜菜花花匀匀浆浆中中含含有有DNA水水解解酶酶,常常温温下下其其活活性性较较高高,可可催催化化DNA水水解解从从而而影影响响DNA的的提提取取,C项项正正确确;用用玻玻璃璃棒棒缓缓慢慢搅搅拌拌滤滤液液不不会会使使DNA分分子断裂,即不会减少子断裂,即不会减少DNA的提取量,的提取量,D项错误。项错误。

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