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1、骨髓细胞学检查骨髓细胞学检查 Bone Marrow ExaminationBone Marrow Examination1.内容内容骨髓检查内容与部位骨髓检查内容与部位骨髓细胞学检骨髓细胞学检测测临床临床应用应用骨髓细胞学检骨髓细胞学检测的方法与测的方法与内容内容血细胞发育过程中形态演变的一般规律血细胞发育过程中形态演变的一般规律血细胞的正常形态学特征血细胞的正常形态学特征2.内容内容血细胞化学染色血细胞化学染色细胞免疫分型细胞免疫分型细胞遗传学分析细胞遗传学分析常见血液病骨髓细胞学检查特点常见血液病骨髓细胞学检查特点3.骨髓检查骨髓检查内容内容 4.骨髓穿刺或活检的部位骨髓穿刺或活检的部位
2、髂前髂前/ /后上棘（后上棘（posterior or anterior posterior or anterior Iliac Iliac crestcrest） 胸骨柄（胸骨柄（Sternum Sternum ）(aspiration only)(aspiration only)胫骨粗隆（胫骨粗隆（Tibia Tibia ）(infants 1 year old , (infants 1 year old , particularly particularly newborns) newborns) 脊柱棘突（脊柱棘突（SpinousSpinous processes of the pro
3、cesses of the vertebraevertebrae） (rarely used) (rarely used)Copyright The McGraw-Hill Companies, Inc. All Rights Reserved.5.骨髓骨髓细胞学检测细胞学检测临床临床应用应用诊断造血系统疾病诊断造血系统疾病：白血病、恶性组织细胞病、多发性骨髓瘤、再生障碍白血病、恶性组织细胞病、多发性骨髓瘤、再生障碍性贫血、巨幼细胞贫血、戈谢病、尼曼性贫血、巨幼细胞贫血、戈谢病、尼曼- -匹克病、海匹克病、海蓝色组织细胞病等蓝色组织细胞病等辅助诊断某些疾病：辅助诊断某些疾病： 骨髓转移瘤、淋巴
4、瘤的骨髓浸润、骨髓增生异常综合骨髓转移瘤、淋巴瘤的骨髓浸润、骨髓增生异常综合征、骨髓增殖性疾病、缺铁性贫血、溶血性贫血、脾征、骨髓增殖性疾病、缺铁性贫血、溶血性贫血、脾功能亢进和特发性血小板减少性紫癜功能亢进和特发性血小板减少性紫癜6.骨髓骨髓细胞学检测细胞学检测临床临床应用应用提高某些疾病的诊断率提高某些疾病的诊断率：疟原虫、黑热病原虫、狼疮细胞疟原虫、黑热病原虫、狼疮细胞细菌培养、细胞培养染色体培养、造血细胞集落培养细菌培养、细胞培养染色体培养、造血细胞集落培养7.骨髓骨髓细胞学检查的适应证细胞学检查的适应证外周血细胞成分及形态异常外周血细胞成分及形态异常不明原因的发热，肝、脾、淋巴结肿大
5、不明原因的发热，肝、脾、淋巴结肿大骨痛、骨质破坏、肾功能异常、黄疸、紫癜、血沉明显增加骨痛、骨质破坏、肾功能异常、黄疸、紫癜、血沉明显增加化疗后的疗效观察化疗后的疗效观察移植后的疾病复发监测移植后的疾病复发监测骨髓活检、造血祖细胞培养、染色体核型分析、微生物及寄骨髓活检、造血祖细胞培养、染色体核型分析、微生物及寄生虫学检查（如伤寒、疟疾）生虫学检查（如伤寒、疟疾）8.骨髓骨髓细胞学检查的禁忌证细胞学检查的禁忌证各种凝血因子缺陷引起的出血性疾病如血友病各种凝血因子缺陷引起的出血性疾病如血友病晚期妊娠的孕妇慎做骨髓穿刺术晚期妊娠的孕妇慎做骨髓穿刺术 9.骨髓骨髓细胞学检测的细胞学检测的方法方法和内
6、容和内容骨髓涂片骨髓涂片肉眼肉眼观察观察: :低倍镜低倍镜检查：检查：判断标本是否满意：判断标本是否满意：取材取材制片制片染色染色确定骨髓增生度（见后表确定骨髓增生度（见后表) ) 计数巨核细胞计数巨核细胞： 7 73535个。个。观察有无异常细胞观察有无异常细胞及其他：及其他：转移瘤细胞、戈谢细胞、尼曼转移瘤细胞、戈谢细胞、尼曼-匹克细胞、疟原虫匹克细胞、疟原虫10.增生程度增生程度成熟红细胞成熟红细胞: 有核有核细胞细胞有核细胞均数有核细胞均数/高倍高倍镜视野镜视野常见病例常见病例增生极度活跃1: 1100急慢性白血病增生明显活跃10: 150-100急慢性白血病、增生性贫血增生活跃20:
7、 120-50正常骨髓象、增生性贫血增生减低50: 15-10再生障碍性贫血增生极度减低200: 15再生障碍性贫血备注：40物镜为高倍镜视野骨髓增生程度骨髓增生程度11.骨髓增生程度骨髓增生程度12.骨髓检查方法骨髓检查方法油镜下观察油镜下观察有核细胞分类：有核细胞分类：200-500个有核细胞。计算出各系统各阶段有核细胞的百分个有核细胞。计算出各系统各阶段有核细胞的百分率。率。计算粒计算粒/ /红比值：正常人约红比值：正常人约2 24:14:1。细胞形态观察细胞形态观察 : :正常或异常细胞正常或异常细胞其他：如寄生虫其他：如寄生虫 骨髓象的分析与报告骨髓象的分析与报告13.造血系统造血系
8、统14.血细胞形态演变的一般规律血细胞形态演变的一般规律形态演变规律形态演变规律细胞体积细胞体积由大到小，但是巨核细胞系相反，早幼粒较原粒大由大到小，但是巨核细胞系相反，早幼粒较原粒大细胞形态细胞形态巨核细胞、浆细胞、单核细胞由圆形或椭圆形到不规则，巨核细胞、浆细胞、单核细胞由圆形或椭圆形到不规则，淋巴、粒系和红系基本上为圆形不变淋巴、粒系和红系基本上为圆形不变细胞质细胞质量量由少渐多，淋巴细胞变化不大。由少渐多，淋巴细胞变化不大。染色染色由深蓝变浅，甚至淡红，红系最终为橘红色由深蓝变浅，甚至淡红，红系最终为橘红色颗粒颗粒从无颗粒（原始细胞）到嗜天青颗粒（早幼粒）在到特异从无颗粒（原始细胞）到
9、嗜天青颗粒（早幼粒）在到特异性颗粒，红细胞一般无颗粒性颗粒，红细胞一般无颗粒细胞核细胞核大小大小由大到小，由规则变不规则，甚至分叶，红系形态一直规由大到小，由规则变不规则，甚至分叶，红系形态一直规则到最终脱；巨核细胞由小到大。则到最终脱；巨核细胞由小到大。染色质染色质由细致疏松渐变为粗糙、致密或凝集成块，着色由浅变深。由细致疏松渐变为粗糙、致密或凝集成块，着色由浅变深。核仁核仁由有到无由有到无细胞核细胞核/细胞质比例细胞质比例 由大到小，巨核细胞相反由大到小，巨核细胞相反15.血细胞形态演变的一般规律血细胞形态演变的一般规律16.粒细胞系统粒细胞系统 占占5060% 5060% 有核细胞有核细
10、胞 细胞类型细胞类型 比例比例 原始粒细胞原始粒细胞 1%1% 早幼粒细胞早幼粒细胞 5%5% 中幼粒细胞中幼粒细胞 15%15% 晚幼粒细胞晚幼粒细胞 15%15% 嗜酸性粒细胞嗜酸性粒细胞 55 嗜碱性粒细胞嗜碱性粒细胞 115%15%49.铁染色铁染色50.细胞免疫分型细胞免疫分型原理：用单克隆抗体及免疫学技术对细胞原理：用单克隆抗体及免疫学技术对细胞表面和表面和/ /或细胞质存在的特异性抗原进行或细胞质存在的特异性抗原进行检测。分析细胞所属系列、分化程度和功检测。分析细胞所属系列、分化程度和功能状态。能状态。检测方法：检测方法：1.1.免疫荧光法免疫荧光法（临床常用流式细胞仪检测）（临
11、床常用流式细胞仪检测）2. 2. 免疫酶染色法免疫酶染色法3. ABC3. ABC法法51.细胞免疫分型的临床应用细胞免疫分型的临床应用1.1.有助于识别有助于识别不同不同系列的细胞系列的细胞2. 2. 识别不同的淋巴细胞识别不同的淋巴细胞3. 3. 用于检测用于检测T T淋巴细胞亚群淋巴细胞亚群4. 4. 用于识别不同分化阶段的细胞用于识别不同分化阶段的细胞52.细胞免疫分型的临床应用细胞免疫分型的临床应用5. 5. 有助于识别不同功能状态的细胞有助于识别不同功能状态的细胞6. 6. 有助于对不同系列和不同分化阶段的细胞进有助于对不同系列和不同分化阶段的细胞进行分离和研究行分离和研究7.7.
12、可用于各种白血病细胞的免疫表型分析可用于各种白血病细胞的免疫表型分析8. 8. 可用于白血病微小残留病的检测可用于白血病微小残留病的检测 53.细胞免疫表型细胞免疫表型(immunophenotypes)(immunophenotypes)常用各系血细胞常用各系血细胞CDCD抗原抗原1 1、T T系：系：CD1-CD8CD1-CD8（CD6CD6不用）不用）2 2、B B系：系：CD10, CD19-CD24, FMC7CD10, CD19-CD24, FMC73 3、髓系：、髓系：CD11b,CD13-CD16,CD33,CD64CD11b,CD13-CD16,CD33,CD644 4、干祖
13、：、干祖：CD34, CD117, CD38, HLA-DRCD34, CD117, CD38, HLA-DR54.B B 淋巴细胞免疫表型淋巴细胞免疫表型泛泛B B标志：标志：CD19,HLA-DR,cCD79a/CD22CD19,HLA-DR,cCD79a/CD22幼稚幼稚B B标志：标志：CD34,TdT,CD10CD34,TdT,CD10成熟成熟B B标志：标志：CD23,FMC7CD23,FMC755.T T淋巴细胞免疫表型淋巴细胞免疫表型泛泛T:T: CD2,CD5,CD7,cCD3CD2,CD5,CD7,cCD3幼稚幼稚T:T: CD34,TdT,CD1a,CD4/8CD34,T
14、dT,CD1a,CD4/8成熟成熟T:T: CD3,CD4,CD8CD3,CD4,CD856.单核细胞免疫表型单核细胞免疫表型全单核细胞标志：全单核细胞标志：CD33,CD13,HLA-DRCD33,CD13,HLA-DR幼稚单核细胞标志：幼稚单核细胞标志：CD34,CD117CD34,CD117成熟单核细胞标志：成熟单核细胞标志：CD14,CD64CD14,CD6457.粒细胞免疫表型粒细胞免疫表型全粒细胞标志：全粒细胞标志：CD13,CD33,CmpoCD13,CD33,Cmpo幼稚粒细胞标志：幼稚粒细胞标志：CD34,CD117,HLA-DRCD34,CD117,HLA-DR成熟粒细胞标
15、志：成熟粒细胞标志：D15,CD11b,CD10,CD64D15,CD11b,CD10,CD6458.诊断白血病主要标记诊断白血病主要标记B-ALL: CD34, HLA-DR, CD19, CD10+/-, B-ALL: CD34, HLA-DR, CD19, CD10+/-, cCD79acCD79aT-ALL: CD34, CD38, CD7, CD2+/-, CD5+/-, T-ALL: CD34, CD38, CD7, CD2+/-, CD5+/-, cCD3cCD3AML: AML: CD34, CD117, CD33, CD13, cMPOCD34, CD117, CD33, C
16、D13, cMPOM3: CD34-, HLA-DR-M3: CD34-, HLA-DR-M2: CD19+: t(8, 21)M2: CD19+: t(8, 21)M4/M5: CD14+M4/M5: CD14+M6: GlyA+, CD71+M6: GlyA+, CD71+M7: IIb/IIIa(CD41, CD61)+M7: IIb/IIIa(CD41, CD61)+59.白血病的流式细胞仪检测结果白血病的流式细胞仪检测结果60.急性白血病细胞免疫表型特点急性白血病细胞免疫表型特点CD19CD7CD33CD13HLA-DRTdTB-ALL+-+/-T-ALL-+-/+AML-+-ALL
17、ALL与与AMLAML细胞免疫表型特点细胞免疫表型特点61.急性淋巴细胞白血病免疫表型特点急性淋巴细胞白血病免疫表型特点系列系列亚型亚型主要蛋白标记主要蛋白标记系列系列亚型亚型主要蛋白标记主要蛋白标记B系列系列早期早期B型型CD19+，CD10-T系列系列 前前T型型CD7+，CD2-普通型普通型CD19+，CD10+T细胞型细胞型CD7+，CD2+前前B型型CD19-，胞质，胞质链链+B细胞型细胞型CD19+，胞膜，胞膜Ig+62.急性髓细胞性白血病急性髓细胞性白血病亚型亚型典型的蛋白标记典型的蛋白标记亚型亚型典型的蛋白标记典型的蛋白标记M0CD34，CD33，CD13M4CD34，CD33
18、，CD15，CD14，CD13M1同上同上M5CD33，CD15，CD14，CD13M2CD34，CD33，CD15，CD13M6CD33，血型糖蛋白，血型糖蛋白M3CD33，CD13，（，（HLA-DR阴性）阴性）M7CD33，CD41，CD42，CD6163.细胞遗传学检测细胞遗传学检测64.细胞遗传学检测细胞遗传学检测65.常见血液病的血液学特征常见血液病的血液学特征贫血贫血(anemia)(anemia)白血病白血病(leukemia)(leukemia)骨髓增生异常综合症骨髓增生异常综合症(myelodysplastic (myelodysplastic syndrome)syndr
19、ome)多发性骨髓瘤多发性骨髓瘤(multiple myeloma)(multiple myeloma)66.缺铁性贫血缺铁性贫血(iron deficiency (iron deficiency anemia)anemia)参数参数变化变化红细胞形态红细胞形态小细胞低色素性，中央苍白区明显扩大而呈小细胞低色素性，中央苍白区明显扩大而呈环状，并可见嗜多色性及点彩红细胞增多环状，并可见嗜多色性及点彩红细胞增多红细胞红细胞减少减少血红蛋白血红蛋白减少，更明显减少，更明显白细胞及分类白细胞及分类一般正常，严重减少一般正常，严重减少血小板血小板一般正常，严重时可减少一般正常，严重时可减少网织红细胞网织
20、红细胞轻度增度或正常轻度增度或正常血象变化67.缺铁性贫血缺铁性贫血(iron deficiency (iron deficiency anemia)anemia)血血象象变变化化红细胞中央苍白区明显扩大而呈环状68.缺铁性贫血缺铁性贫血(iron deficiency (iron deficiency anemia)anemia)骨髓象变化骨髓象变化变化变化骨髓增生程度骨髓增生程度明显活跃明显活跃红细胞系红细胞系增生活跃，幼红细胞百分率常增生活跃，幼红细胞百分率常30%30%。使粒。使粒红细胞比例降低。红系以中幼及晚幼红细红细胞比例降低。红系以中幼及晚幼红细胞为主，贫血严重时，中幼红较晚幼红
21、细胞为主，贫血严重时，中幼红较晚幼红细胞更多，骨髓细胞内外铁染色阴性。胞更多，骨髓细胞内外铁染色阴性。粒细胞系粒细胞系粒细胞系相对减少，但各阶段细胞的比例粒细胞系相对减少，但各阶段细胞的比例及形态大致正常及形态大致正常 。淋巴细胞系淋巴细胞系无异常无异常巨核细胞系巨核细胞系正常正常69.缺铁性贫血缺铁性贫血(iron deficiency (iron deficiency anemia)anemia)红细胞常红细胞常30%30%，使，使G:EG:E降低。以中幼及晚幼红细胞降低。以中幼及晚幼红细胞为主，严重时，中幼红较晚幼红细胞更多为主，严重时，中幼红较晚幼红细胞更多骨骨髓髓象象变变化化70.缺
22、铁性贫血缺铁性贫血(iron deficiency (iron deficiency anemia)anemia)左图为铁染色（左图为铁染色（- -），右图为铁染色），右图为铁染色（+）骨骨髓髓铁铁染染色色71.溶血性贫血溶血性贫血 (hemolytic (hemolytic anemia)anemia)血象改变参数参数变化变化红细胞形态红细胞形态大小不均，易见大红细胞，嗜多色性红细胞和有核红大小不均，易见大红细胞，嗜多色性红细胞和有核红细胞，可见细胞，可见Howell-Jolly小体、点彩红细胞等，有时可小体、点彩红细胞等，有时可见靶形、球形、裂细胞等见靶形、球形、裂细胞等红细胞红细胞减少减
23、少血红蛋白血红蛋白减少，与红细胞平行减少减少，与红细胞平行减少白细胞及分类白细胞及分类急性时常增多，中性粒细胞比例升高急性时常增多，中性粒细胞比例升高血小板血小板急性时常增多急性时常增多网织红细胞网织红细胞增多，急性溶贫明显增多增多，急性溶贫明显增多72.溶血性贫血溶血性贫血 (hemolytic (hemolytic anemia)anemia)73.溶血性贫血溶血性贫血 (hemolytic (hemolytic anemia)anemia)74.溶血性贫血溶血性贫血 (hemolytic (hemolytic anemia)anemia)骨髓象改变骨髓象改变变化变化骨髓增生程度骨髓增生程
24、度明显活跃明显活跃红细胞系红细胞系增生活跃，幼红细胞百分率常增生活跃，幼红细胞百分率常30%30%，急性，急性时可时可50%50%。使粒红细胞比例降低。红系以。使粒红细胞比例降低。红系以中幼及晚幼红细胞为主，核分裂幼红细胞中幼及晚幼红细胞为主，核分裂幼红细胞多见，可见点彩红细胞等。成熟红细胞同多见，可见点彩红细胞等。成熟红细胞同外周血。外周血。粒细胞系粒细胞系粒细胞系相对减少，但各阶段细胞的比例粒细胞系相对减少，但各阶段细胞的比例及形态大致正常及形态大致正常 。淋巴细胞系淋巴细胞系无异常无异常巨核细胞系巨核细胞系正常正常75.溶血性贫血溶血性贫血 (hemolytic (hemolytic a
25、nemia)anemia)76.再生障碍性贫血再生障碍性贫血(aplastic (aplastic anemia)anemia) 急性再障血象改变急性再障血象改变参数参数变化变化红细胞形态红细胞形态正常细胞色素正常细胞色素红细胞红细胞显著减少显著减少血红蛋白血红蛋白显著减少，与红细胞平行减少。显著减少，与红细胞平行减少。白细胞及分类白细胞及分类明显减少，淋巴细胞相对增多，外周血一般明显减少，淋巴细胞相对增多，外周血一般不会出现幼稚细胞，中性粒不会出现幼稚细胞，中性粒0.5100.5109 9/L/L血小板血小板明显减少，明显减少，201020109 9/L/L网织红细胞网织红细胞明显减少，绝对
26、值明显减少，绝对值151015109 9/L/L，甚至为，甚至为0 0；77.再生障碍性贫血再生障碍性贫血(aplastic (aplastic anemia)anemia) 78.再生再生障碍性障碍性贫血贫血(aplastic (aplastic anemia)anemia) 79.再生障碍性贫血再生障碍性贫血(aplastic (aplastic anemia)anemia) 急性再障骨髓象改变急性再障骨髓象改变变化变化骨髓增生程度骨髓增生程度明显减低明显减低红细胞系红细胞系极度减少极度减少粒细胞系粒细胞系极度减少极度减少淋巴细胞系淋巴细胞系相对增多，浆细胞增高，可见非造血细胞相对增多，浆
27、细胞增高，可见非造血细胞巨核细胞系巨核细胞系显著减少显著减少80.再障骨髓活检再障骨髓活检Biopsy of AABiopsy of AA81.再生障碍性贫血再生障碍性贫血(aplastic (aplastic anemia)anemia) 慢性再障血象改变慢性再障血象改变参数参数变化变化红细胞形态红细胞形态正常细胞色素正常细胞色素红细胞红细胞减少减少血红蛋白血红蛋白减少，与红细胞平行减少。减少，与红细胞平行减少。白细胞及分类白细胞及分类减少，淋巴细胞相对增多，外周血一般不减少，淋巴细胞相对增多，外周血一般不会出现幼稚细胞会出现幼稚细胞血小板血小板减少减少,(30-50,(30-50）1010
28、9 9/L/L网织红细胞网织红细胞减少，绝对值减少，绝对值151030%30%甚至甚至50%50%，粒，粒/ /红红比倒置。幼红细胞形态异常，可见巨幼变、比倒置。幼红细胞形态异常，可见巨幼变、核型异常，可见幼红细胞岛，也可见环状核型异常，可见幼红细胞岛，也可见环状铁粒幼细胞增多。粒细可正常或减少，核铁粒幼细胞增多。粒细可正常或减少，核左移。左移。巨核细胞正常或增多，可见小圆巨核细胞、巨核细胞正常或增多，可见小圆巨核细胞、多个核巨核细胞等形态异常。多个核巨核细胞等形态异常。96.骨髓增生异常综合症骨髓增生异常综合症(myelodysplastic syndrome)(myelodysplasti
29、c syndrome)骨髓象改变骨髓象改变97.骨髓增生异常综合症骨髓增生异常综合症(myelodysplastic syndrome)(myelodysplastic syndrome)骨髓象改变骨髓象改变98.骨髓增生异常综合症骨髓增生异常综合症(myelodysplastic syndrome)(myelodysplastic syndrome)骨髓象改变骨髓象改变99.多发性骨髓瘤多发性骨髓瘤(multiple myeloma)(multiple myeloma)血象改变血象改变参数参数变化变化红细胞形态红细胞形态正常细胞色素，少数可呈低色素性或大细胞正常细胞色素，少数可呈低色素性或大
30、细胞性，红细胞呈缗钱状排列性，红细胞呈缗钱状排列红细胞红细胞不同程度减少不同程度减少血红蛋白血红蛋白不同程度减少不同程度减少白细胞及分类白细胞及分类 正常或减少，淋巴细胞比例相对增高，有时正常或减少，淋巴细胞比例相对增高，有时可见幼粒及幼红细胞，晚期可见骨髓瘤细胞。可见幼粒及幼红细胞，晚期可见骨髓瘤细胞。绝对值超过绝对值超过2102109 9/L/L可考虑诊断为浆细胞白可考虑诊断为浆细胞白血病。血病。血小板血小板正常或减少正常或减少100.多发性骨髓瘤多发性骨髓瘤(multiple myeloma)(multiple myeloma)血象改变血象改变101.多发性骨髓瘤多发性骨髓瘤(multiple myeloma)(multiple myeloma)骨髓象改变骨髓象改变102.本课件中部分图片摘选自本课件中部分图片摘选自ASH Image BankASH Image Bank，仅作为授课使用！，仅作为授课使用！Thank Thank you!you!103.
