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1、实验一实验一 沉淀反应沉淀反应n n沉淀反应(precipitation)是可溶性抗原与相应抗体在电解质存在的条件下发生特异性结合所出现的沉淀现象。 单向扩散试验单向扩散试验n n这是一种定量试验,一般是用已知的抗体测未知这是一种定量试验,一般是用已知的抗体测未知的抗原。由于抗体已于凝胶混合,不会在扩散,的抗原。由于抗体已于凝胶混合,不会在扩散,仅抗原从小孔向四周扩散,因此称为单向琼脂扩仅抗原从小孔向四周扩散,因此称为单向琼脂扩散试验。散试验。 单向琼脂扩散试验的基本过程单向琼脂扩散试验的基本过程 单向琼脂扩散试验的结果单向琼脂扩散试验的结果 抗原含量与沉淀环直径的关系抗原含量与沉淀环直径的关
2、系Mancini曲线曲线 抗原含量与沉淀环直径的关系抗原含量与沉淀环直径的关系Fahey曲线曲线双向琼脂扩散试验双向琼脂扩散试验 n n在琼脂内抗原和抗体在凝胶中不同孔内各自向四周扩散,彼此在相遇处特异性结合,形成白色沉淀线,称为双向琼脂扩散 双扩散实验结果双扩散实验结果 免疫电泳技术免疫电泳技术 n n免疫电泳技术(免疫电泳技术(immunoelectrophoresis immunoelectrophoresis techniquetechnique)是可溶性抗原和抗体在直流电场的作)是可溶性抗原和抗体在直流电场的作用下,在凝胶内加速定向运动,彼此相遇结合,用下,在凝胶内加速定向运动,彼此
3、相遇结合,在比例合适处形成可见的沉淀物。在比例合适处形成可见的沉淀物。 免疫电泳技术包括以下几种具体方法免疫电泳技术包括以下几种具体方法 n n对流免疫电泳n n火箭免疫电泳n n免疫电泳n n免疫固定电泳对流免疫电泳结果对流免疫电泳结果 n n对流免疫电泳是将双向免疫扩散与电泳相结合对流免疫电泳是将双向免疫扩散与电泳相结合的定向加速的免疫扩散技术。的定向加速的免疫扩散技术。火箭电泳示意图火箭电泳示意图 n n火箭免疫电泳是将单向免疫扩散与电泳相结合的火箭免疫电泳是将单向免疫扩散与电泳相结合的一项定量检测技术一项定量检测技术 免疫电泳基本过程免疫电泳基本过程免疫电泳结果免疫电泳结果 免疫固定电
4、泳免疫固定电泳n n免疫固定电泳是区带电泳与沉淀反应相结合的技术。首先将样本进行区带电泳,然后将浸有抗体的滤纸贴于其上,让抗原抗体发生沉淀反应,洗脱游离的抗体,形成的沉淀保留在凝胶中 免疫固定电泳(免疫固定电泳(IgA型)型)实验二实验二 凝集反应凝集反应n n细菌和红细胞等颗粒性抗原,与相应抗体在电解质存在的条件下,特异性结合,出现肉眼可见的凝集现象,称为凝集反应 。直接凝集反应直接凝集反应n n直接凝集反应是颗粒性抗原在电解质参与下直接与相应抗体结合,出现凝集。反应中的抗原可以称为凝集原(agglutinogen),参与反应的抗体称为凝集素(agglutinin)。 间接凝集试验间接凝集试验n n间接凝集反应是将可溶性抗原(或抗体)吸附在一种与免疫无关的惰性颗粒表面,使其成为致敏载体,在与相应的抗体或抗原反应,在电解质存在的条件下,载体颗粒被动地发生凝集。(正向)间接凝集试验(正向)间接凝集试验反向间接凝集试验反向间接凝集试验间接凝集抑制试验间接凝集抑制试验 自身红细胞凝集试验自身红细胞凝集试验抗球蛋白试验抗球蛋白试验n n抗球蛋白试验是1945年由Coombs建立的一种抗球蛋白抗体参与的血凝试验,用于检测抗红细胞不完全抗体,因此又称为Coombs试验 直接直接Coombs试验试验间接间接Coombs试验试验