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1、第九章第九章 动物实验的基本操作技术动物实验的基本操作技术动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件n n遵循动物保护、保证动物福利的原则不造成动物的应激反应和伤害不造成动物实验人员自身的伤害n n确保实验结果的准确可靠动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件一一. 实验动物的抓取和固定实验动物的抓取和固定 l l大、小鼠的抓取和固定大、小鼠的抓取和固定抓取方法抓取方法 固定方法固定方法: 徒手固定徒手固定徒手固定徒手固定; ; ; ;固定板固定固定板固定固定板固定固定板固定; ; ; ;固定架固定固定架固定固定架固定固定架固定; ; ; ;简易固定简易固定简易固定简易固定 动物实验的基
2、本方法课件动物实验的基本方法课件Placing a mouse on a cage lid and grasping the loose skin behind the ears by the thumb and forefinger动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件Push the mouse into the restrainer动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件Leave the tail of the mouse outside the cover of the restrainer动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件Let the rat relaxes
3、on the top of the lid.动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件Stretch the body of the rat by pulling up its tail and then cover the rat with a towel by your left hand动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件Fold the skirts of towel under the rat from all directions 动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件Grasp up the left hindlimb of the rat to expose t
4、he abdomen动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件豚鼠的抓取与固定豚鼠的抓取与固定 抓取方法抓取方法 固定方法固定方法 徒手固定徒手固定徒手固定徒手固定固定板固定固定板固定固定板固定固定板固定抓豚鼠抓豚鼠时，一般不要抓腰腹部位，一般不要抓腰腹部位，否否则易造成肝破裂而引起死亡易造成肝破裂而引起死亡动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件家兔的抓取与固定家兔的抓取与固定 抓取方法抓取方法 固定方法固定方法徒手固定徒手固定徒手固定徒手固定; ; ; ;盒式固定盒式固定盒式固定盒式固定; ; ; ;台式固定台式固定台式固定台式固定 动物实
5、验的基本方法课件动物实验的基本方法课件犬的抓取与固定犬的抓取与固定 抓取方法抓取方法 固定方法固定方法慢性试验中犬的固定方法慢性试验中犬的固定方法 急急性性试试验验中中犬犬的的固固定定方方法法: :头头头头部部部部的的的的固固固固定定定定; ; ; ;四四四四肢固定肢固定肢固定肢固定 动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件二、性别鉴定二、性别鉴定n n一般情况下，哺乳类动物性别依据动物的肛门与外生殖器之间的距离加以区分。雄性要比雌性的距离更长。动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件Sexing mice - The distance between the anal and gen
6、ital orifices is greater in the male (left) compared to the female (right).动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件Sexing Rat- the distance between the anal and genital orifices is greater in the male (left) compared to the female (right)动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件Slight pressure is applied to the external genitalia to ex
7、pose the vulva of a female bunnySlight pressure is applied to the external genitalia to expose the penis of a male bunny动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件A female rabbitA male rabbit动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件三三.动物的编号、标记及去毛方动物的编号、标记及去毛方法法 n n动物的编号与标记：动物的编号与标记：常用的标记液：常用的标记液：3%5%3%5%苦味酸溶液（黄色）苦味酸溶液（黄色）苦味酸溶液（黄色）苦味酸溶液（黄色
8、） 0.5%0.5%中性红或碱性品红溶液（红色）中性红或碱性品红溶液（红色）中性红或碱性品红溶液（红色）中性红或碱性品红溶液（红色）2%2%硝酸银溶液（咖啡色，涂后需光照硝酸银溶液（咖啡色，涂后需光照硝酸银溶液（咖啡色，涂后需光照硝酸银溶液（咖啡色，涂后需光照1010分钟）分钟）分钟）分钟）煤焦油酒精溶液（黑色）煤焦油酒精溶液（黑色）煤焦油酒精溶液（黑色）煤焦油酒精溶液（黑色）动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件编号原则：编号原则：先左后右，从前到后。先左后右，从前到后。先左后右，从前到后。先左后右，从前到后。 左前肢记为左前肢记为左前肢记为左前肢记为1 1 1 1号，左侧腹部为号，左
9、侧腹部为号，左侧腹部为号，左侧腹部为2 2 2 2号，左号，左号，左号，左后肢后肢后肢后肢3 3 3 3号，头顶部为号，头顶部为号，头顶部为号，头顶部为4 4 4 4号，腰背部号，腰背部号，腰背部号，腰背部5 5 5 5号，号，号，号，尾基部尾基部尾基部尾基部6 6 6 6号，右前肢号，右前肢号，右前肢号，右前肢7 7 7 7号，右侧腹部号，右侧腹部号，右侧腹部号，右侧腹部8 8 8 8号，号，号，号，右后肢右后肢右后肢右后肢9 9 9 9号。编号超过号。编号超过号。编号超过号。编号超过10101010时，可使用两时，可使用两时，可使用两时，可使用两种不同颜色的溶液，把一种颜色作为种不同颜色的
10、溶液，把一种颜色作为种不同颜色的溶液，把一种颜色作为种不同颜色的溶液，把一种颜色作为个位数，另一种为十位数。个位数，另一种为十位数。个位数，另一种为十位数。个位数，另一种为十位数。 动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件n n穿耳孔法穿耳孔法 用专用耳空器在动物耳朵不同部位打一小孔或缺口表示一定号码的方法，原则是：左耳代表十位，右耳代表个位。实验动物：兔、犬、猪n n标牌法标牌法 一般挂在动物的颈部、耳朵、脚上 实验动物：犬、猴n n烙印法烙印法n n剪毛法剪毛法动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件实验动物被毛的去除方法实验动物被毛的去除方法 1.剪毛法剪毛法2.拔毛法拔毛法3.
11、剃毛法剃毛法4.脱毛法脱毛法常用的化学药品：常用的化学药品：硫化钡（硫化钡（BaSBaS）、硫化钠）、硫化钠（NaSNaS）、硫化钙（）、硫化钙（CaSCaS） 动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件四四.动物的麻醉方法动物的麻醉方法常用的麻醉剂常用的麻醉剂1.1.挥发性麻醉剂挥发性麻醉剂:乙醚、氯仿等乙醚、氯仿等2.非非挥挥发发性性麻麻醉醉剂剂：苯苯巴巴比比妥妥钠钠、戊戊巴巴比比妥妥钠钠、硫硫喷喷妥妥钠钠等等巴巴比比妥妥类类的的衍衍生生物物，盐盐酸氯胺酮、水合氯醛等酸氯胺酮、水合氯醛等3.中药麻醉剂：中药麻醉剂：洋金花、东莨菪碱等洋金花、东莨菪碱等 动物实验的基本方法课件动物实验的基本
12、方法课件动物的麻醉方法动物的麻醉方法1全身麻醉全身麻醉吸入法吸入法:腹腔和静脉给药麻醉法腹腔和静脉给药麻醉法 2.局部麻醉局部麻醉:盐酸普鲁卡因、盐酸可卡因盐酸普鲁卡因、盐酸可卡因动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件常用麻醉药的剂量及注射途径种种类类戊巴比妥戊巴比妥硫贲妥钠硫贲妥钠盐酸氯胺酮盐酸氯胺酮水合氯醛水合氯醛乌拉坦乌拉坦mg/kgmg/kg途径途径mg/kgmg/kg途径途径mg/kgmg/kg途径途径mg/kmg/kg g途径途径mg/kmg/kg g小鼠小鼠35355050IVIVIPIP25255050I.V.I.V.IPIP22-4422-44IMIM400400IPI
13、P- - -大鼠大鼠25255050IVIVIPIP20204040IVIVIPIP22-4422-44IMIM300300IPIP0.750.75IPIP豚鼠豚鼠30304040IVIVIPIP20205555IVIVIPIP22-4422-44IMIM200-200-300300IPIP1.51.5IPIP家兔家兔30304040IVIVIPIP2020IVIV22-4422-441.01.0IVIVIPIP狗狗3030IVIV2525IVIV125125IVIV1.01.0IVIV猪猪45k45g45kgkg30-2030-201515IVIVIVIV10-910-95 5IVIVIVI
14、V10-1510-1510-1510-15IMIMIMIM动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件麻醉注意事项麻醉注意事项麻醉注意事项麻醉注意事项: : 静静脉脉注注射射必必须须缓缓慢慢，同同时时观观察察肌肌肉肉紧紧张张性性、角角膜膜反反射射和和对对皮皮肤肤夹夹捏捏的的反反应应，当当这这些些活活动动明明显显减弱或消失时，停止注射。减弱或消失时，停止注射。 麻麻醉醉时时要要注注意意保保温温。保保温温方方法法有有：实实验验桌桌内内装灯，电褥，台灯照射等装灯，电褥，台灯照射等 作作慢慢性性实实验验时时，在在寒寒冷冷季季节节，麻麻醉醉剂剂在在注注射射前应加热至动物体温水平。前应加热至动物体温水平。
15、 注意保持动物的呼吸道的通畅注意保持动物的呼吸道的通畅. .动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件五五.动物的给药途径和方法动物的给药途径和方法 实实验验动动物物的的给给药药方方法法主主要要分分为为注注射射法法和和投投入入法法两两种种，注注射射法法又又分分为为：皮皮下下注注射射、肌肌肉肉注注射射、腹腹腔腔注注射射、脑脑膜膜下下注注射射、脑脑内内注注射射、胸胸腔腔内内注注射射、腰腰椎椎内内注注射射、静静脉脉注注射射、关关节节腔腔注注射射和和心心内内注注射射等等方方法法，投投入入法法可可分分为为：鼻鼻腔腔内内投投入入、胃胃腔腔内内投投入入、肠肠管管内内投投入入、气管内投入以及经口腔投入。气管
16、内投入以及经口腔投入。动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件1、小鼠的给药途径和方法、小鼠的给药途径和方法 灌胃（灌胃（i.g）:动物要固定好；头颈部保持平展；动物要固定好；头颈部保持平展；动物要固定好；头颈部保持平展；动物要固定好；头颈部保持平展；要沿着口角进针，再顺着食管方向插入胃内；决要沿着口角进针，再顺着食管方向插入胃内；决要沿着口角进针，再顺着食管方向插入胃内；决要沿着口角进针，再顺着食管方向插入胃内；决不可进针不顺就硬向里插。不可进针不顺就硬向里插。不可进针不顺就硬向里插。不可进针不顺就硬向里插。皮下注射（皮下注射（s.c）:常选用颈背部皮肤。常选用颈背部皮肤。常选用颈背部皮
17、肤。常选用颈背部皮肤。 动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件皮内注射（皮内注射（i.d）:观察皮肤血管的通透性变化观察皮肤血管的通透性变化观察皮肤血管的通透性变化观察皮肤血管的通透性变化及观察皮内反应，多用于接种、致敏实验等。雄及观察皮内反应，多用于接种、致敏实验等。雄及观察皮内反应，多用于接种、致敏实验等。雄及观察皮内反应，多用于接种、致敏实验等。雄性较雌性皮肤紧密，注射难度大。性较雌性皮肤紧密，注射难度大。性较雌性皮肤紧密，注射难度大。性较雌性皮肤紧密，注射难度大。肌肉注射（肌肉注射（肌肉注射（肌肉注射（i.mi.mi.mi.m）：）：）：）：较少应用较少应用较少应用较少应用 腹腔
18、注射（腹腔注射（腹腔注射（腹腔注射（i.pi.pi.pi.p）: : : :静脉注射（静脉注射（静脉注射（静脉注射（i.vi.v）：）：）：）：一般采用尾静脉注射。小鼠尾一般采用尾静脉注射。小鼠尾一般采用尾静脉注射。小鼠尾一般采用尾静脉注射。小鼠尾部背腹各有一根动脉，两侧各有一根静脉。部背腹各有一根动脉，两侧各有一根静脉。部背腹各有一根动脉，两侧各有一根静脉。部背腹各有一根动脉，两侧各有一根静脉。动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件2、大鼠的给药途径和方法、大鼠的给药途径和方法灌灌灌灌胃胃胃胃: :左左左左手手手手按按按按徒徒徒徒手手手手固固固固定定定定方方方方式式式式固固固固定定定定
19、大大大大鼠鼠鼠鼠, , , ,使使使使大大大大鼠鼠鼠鼠伸伸伸伸开开开开两前肢两前肢两前肢两前肢, , , ,手掌握住大鼠背。方法与小鼠相同。手掌握住大鼠背。方法与小鼠相同。手掌握住大鼠背。方法与小鼠相同。手掌握住大鼠背。方法与小鼠相同。皮皮皮皮下下下下注注注注射射射射：常常常常选选选选在在在在左左左左侧侧侧侧下下下下腹腹腹腹部部部部或或或或后后后后腿腿腿腿皮皮皮皮肤肤肤肤处处处处，方方方方法同小鼠。法同小鼠。法同小鼠。法同小鼠。 皮皮皮皮内内内内注注注注射射射射：常常常常选选选选用用用用背背背背部部部部脊脊脊脊柱柱柱柱两两两两侧侧侧侧的的的的皮皮皮皮肤肤肤肤，方方方方法法法法同同同同小鼠。小鼠
20、。小鼠。小鼠。 动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件肌肉注射：肌肉注射：一般选择股二头肌注射，但应一般选择股二头肌注射，但应避免伤及坐骨神经，否则会导致后肢瘫痪避免伤及坐骨神经，否则会导致后肢瘫痪 腹腔注射：腹腔注射：用左手的大拇指、食指和中指用左手的大拇指、食指和中指从大鼠的前肢和头部后面抓住大鼠，同时从大鼠的前肢和头部后面抓住大鼠，同时用身体抵住大鼠的两后肢使之固定，使腹用身体抵住大鼠的两后肢使之固定，使腹部向上并伸展，注射方法与小鼠相同。部向上并伸展，注射方法与小鼠相同。静脉注射：静脉注射：尾静脉尾静脉动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件动物实验的基
21、本方法课件动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件3、兔的给药途径和方法、兔的给药途径和方法灌胃：确保灌胃管插入胃内；药液推完后将残留在灌胃管内的药物用水冲入胃内，确保给药剂量的准确皮内注射：背部脊柱两侧的皮肤皮下注射：背部和腿部皮肤肌肉注射腹腔注射静脉注射：耳缘静脉动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件Disinfect of skin on the top of thigh muscle动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件Insert needle perpendicular to the surface of skin and inject the substance
22、inside the syringe动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件Disinfect of injection site by 75% alcohol directly or 75% alcohol cotton ball动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件Pinch the skin up and insert the needle in for injection动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件Keep the needle tip in skin for a while after injection to prevent leakage of subs
23、tance from the needle which due to imbalance pressure of emulsion inside the syringe.动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件Ear vein before administering of tranquilizer动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件Ear vein after administering of tranquilizer动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件Insert needle into the ear vein with needle tip surface face
24、 up动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件六、动物血液的采集方法1、大小鼠的血液采集方法眶静脉丛（窦）采血（多次重复）：轻压颈部两侧，眼球充分外突眶动脉和眶静脉取血（大量采血）：尽量使动物眼周围皮肤往眼后压，眼球突出充血，弯头镊迅速夹去眼球动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件尾静脉采血：剪尾或切开尾静脉：将尾巴在热水中浸泡数分钟或用酒精/二甲苯反复擦试针刺尾静脉其它：心脏采血、大血管采血等动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件2、兔、豚鼠的血液采集方法耳中央动脉采血：兔耳缘静脉采血：兔心脏采血：兔、豚鼠颈动（静）脉采血：背跖静脉
25、采血：豚鼠动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件Fix the position of needle by your left thumb and withdraw blood from the ear vein动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件Press a cotton ball on the top of the injection site before pull out the needle.动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件Apply clip on the top of the cotton ball for 2-3 minutes to stop fu
26、rther bleeding 动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件Apply same procedure as collecting blood from ear vein for blood collection from ear artery动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件Restrain the anesthetized rabbit on the surgical table动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件Remove the hair around the neck area动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件Make a 5 cm open
27、ing on the middle line of the neck动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件Search the carotid artery with a tissue forceps and a homeostatic forceps.动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件Isolate the carotid artery from the vagus nerve and other connective tissue动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件Tie up the distal end of the carotid artery by silk
28、 suture动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件Clip the proximal end of the carotid artery with a bulldog clamp动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件Insert a 16 G intravenous catheter into the artery动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件Fix the position of the catheter tip by two silk suture knots动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件Release the bulldog clamp and
29、collect blood from the artery though the catheter into the centrifuge tube动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件3、犬的血液采集方法前后肢皮下浅层静脉采血：颈静脉采血隐动（静）脉采血股动脉采血心脏采血动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件七、动物的安乐死方法（一）.原则：尽量减少动物的痛苦，避免产生惊恐、挣扎、喊叫注意实验人员的安全方法容易操作不能影响实验结果尽可能缩短致死时间判断是否死亡时不仅要看呼吸，而且要观察神经反射、肌肉松弛等情况动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件（二）.方法颈椎脱臼法：大、小鼠、豚鼠、兔空气栓塞法：兔、猫、犬放血法：大、小鼠、豚鼠、兔、猫、犬断头法：大、小鼠、沙鼠动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件药物法：药物吸入：大、小鼠、豚鼠等；CO2、CO、乙醚、氯仿等药物注射：兔、犬静脉注射 氯化钾、巴比妥类麻醉剂、DDT等动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件动物实验的基本方法课件
