《动植物细胞大规模培养课件》由会员分享，可在线阅读，更多相关《动植物细胞大规模培养课件（78页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、动植物细胞培养与产品n动植物细胞培养是指动植物细胞在体外条件下的存活或生长,此时细胞不再形成组织。n其产品包括疫苗、单克隆抗体、免疫调节剂、酶和激素等。动植物细胞大规模培养课件 动植物细胞大规模培养课件动、植物细胞培养与微生物培养区别n动物细胞无细胞壁，且大多数哺乳动物细胞附着在固体或半固体的表面才能生长；对营养要求严格，除氨基酸、维生素、盐类、葡萄糖或半乳糖外，还需有血清。动物细胞对环境敏感，包括pH、溶氧、温度、剪切应力都比微生物有更严的要求，一般须严格的监测和控制。n植物细胞对营养要求较动物细胞简单。但由于植物细胞培养一般要求在高密度下才能得到一定浓度的培养产物，以及植物细胞生长较微生物
2、要缓慢，长时间的培养对无菌要求及反应器的设计也提出特殊的要求。动植物细胞大规模培养课件动植物、微生物细胞的培养比较微生物动物细胞植物细胞 大 小悬浮生长营养要求生长速率代谢调节环境敏感细胞分化剪切应力敏感传统变异，筛选技术细胞或产物浓度1-10可以简单快，倍增时间0.5-5小时内部不敏感无低广泛使用较高10-100多数细胞需附着表面才能生长非常复杂慢，倍增时间15-100小时内部、激素非常敏感有非常高不常使用低10-100可以，但易结团，无单个细胞较复杂慢，倍增时间24-74小时内部、激素能忍受广泛范围有高有时使用低动植物细胞大规模培养课件第一节 植物细胞培养技术 n在人工控制下高密度大量培养
3、有益植物细胞技术称之为植物细胞大规模培养，其目的在于通过细胞工业规模培养，获得细胞、初级及次级代谢产物，为药品、食品及化工行业提供服务。尽管植物细胞实验室与工业化培养在技术上有许多相似之处，但培养方式、设备及条件和培养基等亦有很大差别。 动植物细胞大规模培养课件动植物细胞大规模培养课件一、植物细胞培养过程特点n1 、植物细胞的特性成团 n植物细胞要大得多，其平均直径要比微生物细胞大30100倍。n同时植物细胞通常是以细胞数在2200之间，直径为2mm左右的非均相集合细胞团的方式存在。n细胞团通常由以下几种方式存在：n在细胞分裂后没有进行细胞分离；n在间歇培养过程中细胞处于对数生长后期时，开始分
4、泌多糖和蛋白质；n以其他方式形成粘性表面，从而形成细胞团。 动植物细胞大规模培养课件n2、植物细胞培养液的流变特性 ：n由于植物细胞常常趋于成团，且不少细胞在培养过程中容易产生粘多糖等物质，使氧传递速率降低，影响了细胞的生长。n影响培养基粘度的因素：影响培养基粘度的因素： 细胞本身和细胞分泌物 细胞年龄、形态和细胞团的大小 n一般规则一般规则：在相同的浓度下，大细胞团的培养液的表观粘度明显大于小细胞团的培养液的表观粘度 动植物细胞大规模培养课件n3、植物细胞培养过程中的氧传递 n所有的植物细胞都是好气性的，需要连续不断地供氧。 n植物细胞培养时对溶氧的变化非常敏感，太高或太低均会对培养过程产生
5、不良地影响。n与微生物培养过程相反，植物细胞培养过程并不需要高的气液传质速率，而是要控制供氧量，以保持较低的溶氧水平。 动植物细胞大规模培养课件n长春花细胞培养时，当通气量从0.25L(Lmin)上升至0.38L(Lmin)时，细胞的相对生长速率可从0.34d/L上升至0.41d/L；而当通气量再增加时，细胞的生长速率反而会下降。 n不同氧浓度时对毛地黄细胞进行了培养，当培养基中氧浓度从10饱和度升至30饱和度时，细胞的生长速率从0.15d/L至0.20d/L，如果溶氧浓度继续上升至40饱和度时，细胞的生长速率却反而降至0.17d-1。动植物细胞大规模培养课件n研究发现，植物细胞能非光合地固定
6、一定浓度的CO2，如在空气中混以2%4%的CO2能够消除高通气量对长春花细胞生长和次级代谢物产率的影响。因此，对植物细胞培养来说，在要求培养液充分混合的同时，CO2和氧气的浓度只有达到某一平衡时，才会很好地生长，所以植物细胞培养有时需要通入一定量的CO2气体。CO2的含量水平对细胞的生长同样相当重要动植物细胞大规模培养课件 4、泡沫和表面粘附性 n植物细胞培养过程中产生泡沫的特性与微生物细胞培养产生的泡沫是不同的。植物细胞培养过程中产生的气泡比微生物培养系统中气泡大，且被蛋白质或粘多糖覆盖，因而粘性大，细胞极易被包埋于泡沫中，造成非均相的培养。尽管泡沫对于植物细胞来说，其危害性没有微生物细胞那
7、么严重，但如果不加以控制，随着泡沫和细胞的积累，也会对培养系统的稳定性产生很大的影响。 动植物细胞大规模培养课件二、培养基 n培养基的成分由无机盐类、碳源、维生素、植物生长激素、有机氮源、有机酸和一些复合物质组成。n选择培养基的基本原则：需要根据不同培养对象、培养目的及培养条件探索适宜培养基。 选择的培养基在培养过程使细胞总体积倍增时间1天左右为宜。 动植物细胞大规模培养课件三、培养方式 n悬浮培养法 n分批培养法n半连续培养法n连续培养法 n固定化培养法 动植物细胞大规模培养课件1、悬浮培养n分批培养法n主要采用气升式反应器，其培养过程用通气代替搅拌，细胞产量高于平叶轮培养器。n植物细胞生长
8、规律:随着细胞增长，培养液营养物质不断下降。细胞增长过程也分为延迟期、对数生长期、转换期、静止期及衰减期等阶段。 动植物细胞大规模培养课件动植物细胞大规模培养课件n半连续培养法:n在反应器中投料和接种培养一段时间后，将部分培养液和新鲜培养液进行交换的培养方法称之为半连续培养法。反应过程通常以一定时间间隔进行数次反复操作以达到培养细胞与生产有用物质的目的。 动植物细胞大规模培养课件连续培养法n采用连续培养反应器，在投料和接种培养一段时间后，以一定速度连续采集细胞与培养液，并以同样速度供给新鲜培养基，此种培养方式可使细胞生长环境长期维持恒定。n连续培养法细胞生产能力一般较分批法高，但因细胞生长缓慢
9、，培养时间长，要维持系统无菌状态，技术条件要求相当苛刻。 动植物细胞大规模培养课件n悬浮培养具有三个基本优点 ：n增加培养细胞与培养液的接触面，改善营养供应；n可带走培养物产生的有害代谢产物，避免有害代谢产物局部浓度过高等问题；n保证氧的充分供给。动植物细胞大规模培养课件悬浮培养设备动植物细胞大规模培养课件液体悬浮培养瓶 连续培养系统装置 悬浮培养生物反应器动植物细胞大规模培养课件鼓泡式反应器 内循环反应器 外循环反应器 非机械搅拌式反应器动植物细胞大规模培养课件非机械搅拌反应器的应用韩国KBT植物细胞反应器动植物细胞大规模培养课件2、悬浮培养生物反应器n1）机械搅拌式生物反应器优点：n能获得
10、较高的KLn2）剪切力动植物细胞大规模培养课件4，固定化培养法 n固定化培养采用固定化反应器，这类反应器有网状多孔板、尼龙网套及中空纤维膜等形式。n固定化培养法的优点:（1）提高了次生物质的合成、积累；（2）能长时间保持细胞活力；（3）可以反复使用；（4）抗剪切能力强；（5）耐受有毒前体的浓度高；（6）遗传性状较稳定；（7）后处理难度小；（8）更好的光合作用；（9）促进或改变产物的释放。n植物细胞的固定化常采用:海藻酸盐、卡拉胶、琼脂糖和琼脂材料，均采用包埋法，其他方式的固定化植物细胞很少使用。 动植物细胞大规模培养课件填充床/流化床反应器填充床反应器 流化床反应器 动植物细胞大规模培养课件膜
11、反应器动植物细胞大规模培养课件三、影响细胞培养因素 n细胞种质影响 n外界因素影响 n光照影响 光对黄酮化合物形成的影响，培养物在光照特别是紫外光下黄酮及黄酮类醇糖苷积累的所有酶活性均增加。通常光照采用荧光灯，或者荧光灯和白炽灯混合，其光强度是30010000lx(6100m/m2s)可以连续光照，也可以每天光照1218h。 npHn培养基成分的影响: 增加氮、磷和钾的含量会使细胞的生长加快，增加培养基中的蔗糖含量可以增加细胞培养物的次生代谢物。 动植物细胞大规模培养课件n搅拌方式与通气的影响n生长调节剂n前体 前体的作用在植物细胞培养中未完全清楚，可能是外源前体激发了细胞中特定酶的作用，促使
12、次生代谢产物量的增加。 在细胞生长过程中生长调节剂的种类和数量对次生代谢产物的合成起着十分重要的作用。植物生长调节剂不仅会影响到细胞的生长和分化，而且也会影响到次生代谢产物的合成。生长素和细胞分裂素有使细胞分裂保持一致的作用，不同类型的生长素对次生代谢产物的合成有着不同的影响。生长调节剂对次级代谢的影响随着代谢产物的种类的不同而有很大的变化，对生长调节剂的应用需要非常慎重。 动植物细胞大规模培养课件第二节 动物细胞培养技术n动物细胞培养开始于本世纪初，到1962年规模开始扩大，发展至今已成为生物、医学研究和应用中广泛采用的技术方法，利用动物细胞培养生产具有重要医用价值的酶、生长因子、疫苗和单抗
13、等，已成为医药生物高技术产业的重要部分。大规模动物细胞培养在生物技术产业化进程中显示出强大的潜力。n利用动物细胞培养技术生产的生物制品已占世界生物高技术产品市场份额的50%。 动植物细胞大规模培养课件 动物细胞培养技术的发展动植物细胞大规模培养课件一、培养基 n天然培养基：工业用动物细胞培养基与实验室培养基基本一致，实验室用培养基需添加5一10小牛血清，但大规模培养动物细胞应用小牛血清.n组织细胞培养中常用的天然培养基是血清。这是因为血清中含有大量的蛋白质、核酸、激素等丰富的营养物质，对促进细胞生长繁殖，粘附及中和某些物质的毒性起着一定的作用。最常用的是小牛血清，胎牛血清。人血清用于一些人细胞
14、系。大多数动物细胞培养必须在培养基中添加血清，但在许多情况下，细胞可在无血清条件下维持和增殖。动植物细胞大规模培养课件n已有商品市售无血清培养基主要有下述3类： 基本合成培养基；基本合成培养基加生长因子；基本合成培养基加组织抽提物。 动植物细胞大规模培养课件合成培养基的种类虽多，但一般都含有氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和一些其它辅助性成分。在细胞培养中，大多数细胞需要谷氨酰胺作为能源和碳源 复杂培养基都含有核苷、柠檬酸循环中间体、丙酮酸、脂类、氧化还原剂如抗坏血酸、谷胱甘肽等及其他各种化合物。 动植物细胞大规模培养课件n第二类亦称为添加生长因子培养基，其特点是组成物质的种类与数量均为已知
15、，并可按需要增减与删除，其最大优点是：可用于培养不同种类的细胞及含血清培养基中不能生长的细胞；可用于杂种细胞、基因工程细胞及突变体细胞培养，生产有用物质。大大简化细胞培养产物分离纯化操作。动植物细胞大规模培养课件n目前人们正研究起血清作用的各类激素及生长因子，如铁传递蛋白、乙醇胺、胰岛素、促胃酸激素、维生素C、考的松及硒等成分的功能。以期获得更适宜于大规模培养动物细胞的培养基。 动植物细胞大规模培养课件在制备培养基时，通常要考虑以下因素：npH 碳酸盐缓冲系统由于毒性小、成本低、对培养物有营养作用 n缓冲能力n渗透压n粘度 培养基的粘度主要受血清含量的影响，在多数情况下，对细胞生长没有什么影响
16、。在搅拌条件下，用羧甲基纤维素增加培养基的粘度，可减轻细胞损害。这对在低血清浓度或无血清下条件下培养细胞显得尤为重要 。动植物细胞大规模培养课件二、培养技术 n动物细胞的体外培养有两种类型： 贴壁依赖性细胞: 大多数动物细胞在离体培养条件下都需要附着在带有适量正电荷的固体或半固体的表面上才能正常生长，并最终在附着表面扩展成单层。 非贴壁依赖性细胞 :可采用类似微生物培养的方法进行悬浮培养 动植物细胞大规模培养课件动物细胞大规模培养方法可概括为悬浮培养固定化培养微载体培养法 动植物细胞大规模培养课件1，细胞悬浮培养法 n细胞在培养液中呈悬浮状态生长繁殖的培养方法谓之悬浮培养法。其培养方式有n批量
17、法n半连续法n连续法n适用于培养确立细胞株、杂交瘤细胞、肿瘤细胞、血液细胞及淋巴组织细胞，用于大量生产疫苗、-干扰素、白介素及单克隆抗体等药品。n此法不适于包括二倍体细胞在内的正常组织细胞的培养。 动植物细胞大规模培养课件细胞悬浮培养法的优点n可连续收集部分细胞进行移植继代培养，传代时无需消化分散，免遭酶类、EDTA及机械损害。n细胞收率高，并可连续测定细胞浓度，还有可能实现大规模直接克隆培养。 动植物细胞大规模培养课件n培养过程中，为确保细胞呈单颗粒均匀悬浮状态，需采用搅拌或气升式反应器，以较低搅拌速度及一定速度通入含5CO2的无菌空气，保持细胞悬浮态并维持培养液溶解氧。n此外不同细胞悬浮条
18、件亦异，为使细胞不致凝集、成团或沉淀，在配制培养基的基础盐溶液中不加钙和镁离子。间歇或连续更换部分培养液，可维持pH值，若使用HEPES缓冲盐溶液时尚可不必连续通入含5CO2空气。 动植物细胞大规模培养课件工艺流程动植物细胞大规模培养课件2，固定化培养法 n细胞限制或定位于特定空间位置的培养技术谓之细胞固定化培养法。动物细胞几乎都可采用固定化方法培养。固定化方法有：n吸附法（所用载体有陶瓷颗粒、玻璃珠及硅胶颗粒 ）n包埋法 （将细胞包埋于琼脂、琼脂糖、胶原及血纤维等海绵状基质中） 动植物细胞大规模培养课件固定化培养优点 n细胞可维持在较小体积培养液中生长； n细胞损伤程度低； n易于更换培养液
19、； n细胞和培养液易于分离； n培养液中产物浓度高，简化了产品分离纯化操作。 动植物细胞大规模培养课件固定化培养装置n多层平板装置n螺旋卷膜培养器n多层托盘式培养器n卷带式培养器n中空纤维及流化床式培养器 动植物细胞大规模培养课件中空纤维培养器优点 n细胞生长密度高，可达l08个毫升以上，细胞处于接近生理状态的理化梯度中；n营养物质可有效分布，代谢废物可及时排除；n细胞培养可达数月，易于实现连续培养；n细胞分泌的蛋白质浓度高。产品纯度可高达60一90；利于降低成本；n反应器体积小并可用于培养多种细胞。 动植物细胞大规模培养课件带中空纤维束的动物细胞悬浮培养反应器带中空纤维束的动物细胞悬浮培养反
20、应器动植物细胞大规模培养课件3，微载体培并方法 n将细胞吸附于微载体表面，在培养液中进行悬浮培养，使细胞在微载体表面长成单层的培养方法称为微载体培养法或微珠培养法。 n制备微载体的材料:聚苯乙烯、交联葡萄糖、聚丙烯酰胺、纤维素衍生物、几丁质、明胶等。n通常用特殊的技术制成100200m直径的圆形颗粒， 动植物细胞大规模培养课件微载体培养优点 n兼有固定化培养与悬浮培养双重特点，培养过程细胞产物量与常规单层培养相同，通过增加培养罐体积即可达到扩大培养规模的目的，减少厂房及设备投资，节约动力消耗及人力，又便于对反应系统进行检测与控制。 n使贴壁细胞可以像悬浮培养那样进行。微载体表面光滑，有的还在表
21、面深层，使表面带有少量正电荷，适合于细胞贴附。微载体大多都是一次性的，不能重复使用。 动植物细胞大规模培养课件气腔式动物细胞培养反应器气腔式动物细胞培养反应器动植物细胞大规模培养课件实例-韩国KBT动物细胞反应器动植物细胞大规模培养课件三、培养条件控制 n动物细胞生长缓慢，又具有锚地依赖性，培养时为防止污染，除反应器密封性能良好外，尚需添加抗生素，培养过程还要求培养器、管道及接头处所用材质不可释放出对细胞有毒害的物质。 n在分批培养时，随着细胞生长，营养消耗，必然产生乳酸等代谢物的积累，引起细胞衰退死亡，需更换培养液或移植继代培养。 动植物细胞大规模培养课件n动物细胞培养过程亦应控制一定的环境
22、条件，如培养温度、溶解氧、pH、罐压及搅拌速度等。 n动物细胞对环境变化适应能力较微生物细胞小得多，故条件控制精密度要求更高。其中特别重要的是溶解氧和pH的控制。动植物细胞大规模培养课件气体交换n (1)氧气 气相中的重要成分是氧气和二氧化碳。各种培养对氧的要求不同，大多数动物细胞培养适合于大气中的氧含量或更低些。据报道，对培养基硒含量的要求与氧浓度有关，硒有助于除去呈自由基状态的氧。在大规模细胞培养中，氧可能成为细胞密度的限制因素。n (2)二氧化碳 二氧化碳对动物细胞培养起着相对复杂的作用。动植物细胞大规模培养课件动植物细胞大规模培养课件培养温度n来源不同的动物细胞，其最适生长温度不尽相同
23、。 例如鱼属变温动物，鱼细胞对温度变化耐受力较强，冷水、凉水、温水鱼细胞适宜培养温度分别为20、23、26，昆虫细胞为2528，人和哺乳动物细胞最适宜的温度为37，温度不超过39。细胞代谢强度与温度成正比，偏高于此温度范围，细胞的正常代谢和生长将会受到影响，甚至导致死亡。n变温动物细胞有较大的温度范围，但应保持在一个恒定值，且在所属动物的正常温度范围内，培养反应器既能加热，又能冷却，因为培养温度可能要求低于环境温度。n温度调节的范围最大不超过0.5。培养温度不仅始终一致，而且在培养器各个部位都应恒定，在培养中温度的恒定比准确更重要。动植物细胞大规模培养课件pHn动物细胞合适的pH值一船在7.2
24、7.4，低于6.8或高于7.6都对细胞产生不利的影响，严重时可导致细胞褪变或死亡。n不同细胞对pH也有不同要求：原代培养细胞对pH变动耐受性差，传代细胞系耐受性较强。n对于同一种细胞，生长期和维持期最适pH也不尽相同，对大多数细胞来说，偏酸性环境比碱性环境更利于生长，如有人证明，原代羊水细胞培养在pH6.8时最适。动植物细胞大规模培养课件渗透压n渗透压对动物细胞也有影响。有些动物细胞如HeLa细胞或其它确定细胞系，对渗透压具有较大耐受性，而原代细胞和正常二倍体细胞对渗透压波动比较敏感。人血浆渗透压约290mOsm/kg，为细胞的理想渗透压，对多数细胞来说，260320mOsm/kg是适宜的 动
25、植物细胞大规模培养课件动物细胞大规模培养工艺动物细胞大规模培养工艺 先将组织切成碎片，然后用溶解蛋白质的酶处理得到单个细胞，收集细胞并离心。获得的细胞植入营养培养基中，使之增殖至覆盖瓶壁表面，用酶把细胞消化下来，再接种到若干培养瓶以扩大培养，获得的细胞可作为“种子”进行液氮保存。 动植物细胞大规模培养课件第三节 微藻（micro algae）的培养技术n一、微藻的生物学特点及分类n微藻定义：n藻类是能够进行放氧光合作用的自养无胚植物，按照细胞大小可分为两类:大藻(如海带、紫菜、裙带等)和微藻（如小球藻、螺旋藻、钦藻、栅藻、紫球藻、雨生红球藻、鱼腥藻等)。微藻一般是指那些在显微镜下才能辨别形态的
26、微小藻类。动植物细胞大规模培养课件n迄今已知的藻类约有30 000余种，其中微藻约占70 ，即20 000余种。微藻特征：细抱微小、形态多样、适应强、分布广泛。根据微藻生长的环境可分为水生微藻、陆生微藻和气生微藻三种生态类群。水生微藻又有淡水生和海水生之分，根据生活方式不同又可分为浮游微藻和底栖微藻。动植物细胞大规模培养课件n微藻有原核微藻和真核微藻两大类，蓝藻和原绿藻属原核微藻，其他藻都属于真核微藻。n生长方式：虽然微藻在传统意义上是光合生物，其主要的营养方式是光自养，但有关微藻生理生化特性的研究表明，微藻也存在着其他的营养模式，并且在某些环境条件下，这些营养模式对微藻的生存和繁殖具有重要意
27、义。动植物细胞大规模培养课件动植物细胞大规模培养课件微藻的应用价值微藻是海洋生物资源的重要组成部分，它具有三个基本特性:n种类很多，生理学和生化特性范围很广，因此微藻能产生很多功能独特的脂肪、多糖、蛋白、类胡萝卜素等生物活性物质;n微藻能低成本地将用于标记的同位素13 C、15N和2H结合进入体内，因而这类标记元素可进人微藻产生的各种代谢产物中;n微藻包括了一个大而尚未开发的生物类群.因而提供了一个实质_上未开发的资源宝库、微藻的特性，决定了微藻在医药、食品、水产养殖、化工、能源、环保农业及航天等领域有着重要的开发价值。动植物细胞大规模培养课件二、微藻的培养及生物反应器1、微藻大规模培养的特点
28、：n必须要用光照、反应器的比表面积很大，培养液的深度必须尽可能的小；采用自然光，培养条件基木上无法控制；采用内部光源的反应器，温度控制困难。n在微藻培养过程中的混合除了具有促进气液传质、液固传递、温度与营养均匀分布、防止藻细胞沉降等作用外，还必须使藻细胞在与光反应器表面垂直的这个方向上要能充分混合。动植物细胞大规模培养课件n从气液传质角度来看，微藻培养过程中氧和二氧化碳的传递方向与常规的好氧生物传递方向正好相反。n培养液对氧和二氧化碳的溶解度差异较大。n微藻的培养过程中无菌要求低。动植物细胞大规模培养课件微藻培养的要求：n合适的光照强度n合适的温度n合适的无机碳源及其他营养物质n合适的pH值n
29、合适的混合n合适的氧解析n避免污染动植物细胞大规模培养课件微藻大规模培养的生物反应器n敞开室培养反应器n封闭室光生物反应器动植物细胞大规模培养课件敞开式培养反应器n优点：成本低，建造容易，操作方便n缺点：培养效率低 培养条件无法控制 易收到杂藻、水生动物大气中粉尘的污 染 雨水会使培养基稀释 反应器中水分蒸发量大 生产期短动植物细胞大规模培养课件封闭式光培养生物反应器优点n培养密度高一微藻细胞浓度每升可达几十克(比敞开n式跑道池中的细胞浓度高出l一2个数量级)，这给采收带来了很大的方便，光合效率高（16.6）。n培养条件易于控制，除了自然光强度无法控制外，其他条件均可自动控制，这对微藻代谢产物
30、的大量积累非常有利。n无污染，可实现纯种培养。n生产期延长，甚至可终年生产。n适合于所有微藻的光自养培养，尤其适合于微藻代谢产物的生产对于转基因微藻及同位素标记性化合物产生藻，则必须用封闭式光十物反应器来培养。动植物细胞大规模培养课件封闭式光培养反应器设计原则：n高光照表面积和体积比n高气体交换效率n适合的循环方式n改善光的传播途径、分配和质量n防止有害次生代谢产物的积累n较易实现培养条件的优化控制n尽量降低生产成本动植物细胞大规模培养课件封闭式光培养反应器几种类型n管道式光培养反应器n圆筒形光培养反应器n扁平箱式光培养反应器n浅层槽式反应器n浅层溢流光培养反应器n光纤光培养反应器动植物细胞大
31、规模培养课件动植物细胞大规模培养课件动植物细胞大规模培养课件微藻的光自养生长影响因子n光照n温度npHn营养盐n溶解氧动植物细胞大规模培养课件思考题n动物、植物和微生物细胞的特点以及培养条件的区别？n植物细胞培养的定义，培养过程的特点？n植物细胞培养培养基组成？选择培养基原则？n植物细胞培养方式？各有何特点？n悬浮培养的基本优点？悬浮培养生物反应器优点？n植物细胞固定化培养反应器种类及固定化培养的优点？n影响植物细胞培养的因素？动植物细胞大规模培养课件n动物细胞培养的培养基和无菌要求？n制备动物细胞培养基需要考虑的因素？动物细胞培养方式？n动物细胞悬浮培养的优点n动物细胞固定化培养的优点？常用的固定化培养装置？中空纤维培养器的优点？微载体培养的优点n动物细胞培养的条件控制？CO2在动物细胞培养中的特殊作用？n微藻的生物学特点、分类及应用价值？n微藻大规模培养的特点、培养要求，大规模培养的生物反应器种类，个有何优点？n封闭式生物反应器设计原则？动植物细胞大规模培养课件
