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1、生物实验专题生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定一、还原性糖与斐林试剂反应生成砖红色沉淀。一、还原性糖与斐林试剂反应生成砖红色沉淀。葡葡萄萄糖糖、果果糖糖等等0.05g/mL的的NaOH+0.05g/mL 的的CuSO41.配置斐林配置斐林试剂2.加入组织样液加入组织样液3.水浴煮沸水浴煮沸2min鉴定脂肪将将染色的花生切片置于染色的花生切片置于显微微镜下下观察：察：苏丹苏丹：橘黄色：橘黄色苏丹苏丹：红色：红色鉴定蛋白质蛋白蛋白质与双与双缩脲试剂产生紫色反生紫色反应。组织样液组织样液+0.1g/mL的的NaOH+0.01g/mL的的CuSO4提供碱性环境提供碱性环境反应物反应物显显微微镜
2、镜的的结结构构显微镜的使用显微镜的使用1.用低倍用低倍镜观察。察。（1）对光：光：调节反光反光镜和光圈。和光圈。（2）调焦：先用粗准焦螺旋，再用焦：先用粗准焦螺旋，再用细准焦螺旋准焦螺旋（3）观察，并将要察，并将要进一步一步观察的材察的材料移到料移到视野中央野中央2.用高倍用高倍镜观察。主察。主动镜头转换器将器将高倍高倍镜对准通光孔。准通光孔。思考：思考：1.显微微镜的放大倍数的放大倍数为：目镜放大倍数目镜放大倍数物镜放大倍数物镜放大倍数2.物镜的镜筒的长度与放大倍数物镜的镜筒的长度与放大倍数的关系：的关系：放大倍数越大，镜筒越长（目镜放大倍数越大，镜筒越长（目镜则相反）。镜头与玻片之间的距则
3、相反）。镜头与玻片之间的距离就越短。离就越短。3.要把视野左下方的材料移到要把视野左下方的材料移到视野的中央，应该怎样操作？视野的中央，应该怎样操作？向左下方移动向左下方移动4.将低倍镜换用高倍镜后，视野将低倍镜换用高倍镜后，视野的细胞数目和亮度怎样变化？的细胞数目和亮度怎样变化？细胞数目减少，亮度变暗。细胞数目减少，亮度变暗。观察细胞质的流动观察细胞质的流动1.制作装片：在制作装片：在载玻片上滴一玻片上滴一滴清水，将材料放在清水中滴清水，将材料放在清水中央，盖上盖玻片。央，盖上盖玻片。2.观察察观察植物细胞的有丝分裂1.解离在10时至14时剪下洋葱根尖23mm，置于15%盐酸和95%酒精的混
4、合液中解离23min（至酥软）。（使组织中的细胞相互分离开来）2.漂洗 将根尖取出，用清水漂洗10min。 3.染色染色 将根尖放在培养皿中，用龙胆紫染色将根尖放在培养皿中，用龙胆紫染色35MIN。4.制片：制片： 用用镊子将根尖弄碎，子将根尖弄碎，盖上盖玻片，在其上再加一片盖上盖玻片，在其上再加一片载玻片，用拇指玻片，用拇指压片。片。5.低倍镜观察低倍镜观察:寻找分生区寻找分生区 6.高倍镜观察高倍镜观察思考思考:在显微镜在显微镜下观察到的哪下观察到的哪一个时期的细一个时期的细胞最多胞最多?比较过氧化氢酶和铁离子的催化效率新鲜新鲜的肝的肝脏研脏研磨液磨液FeCl3+H2O2+H2O2酶较多酶
5、较多堵住试管口堵住试管口堵住试管口堵住试管口插入点燃插入点燃的卫生香的卫生香插入点燃插入点燃的卫生香的卫生香产生大量的气泡产生大量的气泡产生少量的气泡产生少量的气泡卫生香燃烧猛烈卫生香燃烧猛烈卫生香燃烧猛烈卫生香燃烧猛烈结论结论:酶具有高效性酶具有高效性探索淀粉酶对淀粉和蔗糖水解的作用探索淀粉酶对淀粉和蔗糖水解的作用非非还还原原性性糖糖水解水解葡萄糖葡萄糖+果糖果糖蔗糖蔗糖还原性糖还原性糖水解水解麦芽糖麦芽糖水解水解葡萄糖葡萄糖原理原理:淀粉淀粉+2mL淀淀粉酶粉酶2mL淀淀粉溶液粉溶液2mL蔗蔗糖溶液糖溶液60度水浴度水浴5min斐林试剂斐林试剂+水浴煮沸水浴煮沸1min 产生砖红色沉淀产生
6、砖红色沉淀叶绿体中色素的提取和分离原理原理:1.光合色素能溶解在丙光合色素能溶解在丙酮中，因此可中，因此可以用丙以用丙酮提取色素。提取色素。2.不同色素在层析液中的溶解度不同，不同色素在层析液中的溶解度不同，溶解度大的就在滤纸中扩散得快，溶解度大的就在滤纸中扩散得快，溶解度小的就扩散得慢溶解度小的就扩散得慢.操作操作:1.将叶片剪碎将叶片剪碎,放在研钵中，加入放在研钵中，加入少量少量SIO2和和CACO3研磨研磨.帮助研磨帮助研磨 保护色素保护色素2.过滤过滤,注意防止挥发注意防止挥发.3.制作滤纸条制作滤纸条,画滤液细线画滤液细线.4.将层析液倒入烧杯，将层析液倒入烧杯，将滤纸条朝下一端插入
7、层析液，将滤纸条朝下一端插入层析液，不能让层析液触及滤液细线不能让层析液触及滤液细线.结果结果:橙黄橙黄色色胡萝卜素胡萝卜素黄色黄色叶黄素叶黄素蓝绿色蓝绿色叶绿素叶绿素a黄绿色黄绿色叶绿素叶绿素b观察植物细胞的质壁分离与复原原理原理:细胞液胞液浓度度外界溶液浓度外界溶液浓度细胞失水细胞失水质壁分离质壁分离细胞吸水细胞吸水质壁分离质壁分离复原复原操作:1.取洋葱表皮制作取洋葱表皮制作临时装片装片.2.用显微镜观察。用显微镜观察。3.在盖玻片一侧滴加在盖玻片一侧滴加0.3g/mL的蔗糖溶的蔗糖溶液，用吸水纸引流液，用吸水纸引流.重复几次重复几次.4.高倍镜观察质壁分离高倍镜观察质壁分离.5.在盖玻
8、片一侧滴加清水在盖玻片一侧滴加清水,用吸水纸引流用吸水纸引流.重复几次重复几次.6.高倍镜观察质壁分离复原高倍镜观察质壁分离复原.DNA的粗提取和鉴定原理:1.DNA在不同浓度的NaCl中的溶解度不同，在0.14mol/L的NaCl中溶解度最小_容易析出.2.DNA不溶于酒精,但是细胞中的某些物质可以溶于酒精。_提取杂质较少的DNA 3.DNA遇二苯胺变蓝_鉴定DNA.操作：操作：1.提取提取鸡血血细胞的胞的细胞核物胞核物质将制将制备好的好的鸡血血细胞液胞液510mL，注入到注入到烧杯中，向杯中，向烧杯中加入杯中加入20mL蒸蒸馏水，同水，同时用玻璃棒沿一个用玻璃棒沿一个方向方向搅拌，使血拌，
9、使血细胞加速破裂。用胞加速破裂。用纱布布过滤，取，取滤液。液。2.溶解细胞核内的溶解细胞核内的DNA 将将5mol/L的氯化钠的氯化钠40mL加入到滤加入到滤液中，并用玻璃棒沿一个方向搅拌液中，并用玻璃棒沿一个方向搅拌1min。3.析出含析出含DNA的粘稠物的粘稠物 沿烧杯壁缓慢加入蒸馏水，同沿烧杯壁缓慢加入蒸馏水，同时用玻璃棒沿一个方向搅拌，加时用玻璃棒沿一个方向搅拌，加蒸馏水至粘稠物不再增加。蒸馏水至粘稠物不再增加。4.滤取含取含DNA的粘稠物的粘稠物用放有多用放有多层纱布的漏斗布的漏斗过滤，取取纱布上的粘稠物。布上的粘稠物。5.用用2MOL/L的氯化钠将的氯化钠将DNA的粘的粘稠物再溶解。稠物再溶解。6.过滤含有含有DNA的的氯化化钠溶液，取溶液，取滤液。液。7.提取含杂质较少的提取含杂质较少的DNA 在在滤液中加入冷却的、体积分数为滤液中加入冷却的、体积分数为95%的酒精，并用玻璃棒沿一个方向的酒精，并用玻璃棒沿一个方向搅拌，把出现的丝状物卷起。搅拌，把出现的丝状物卷起。8.DNA的鉴定的鉴定取两支试管，各加入浓度为取两支试管，各加入浓度为0.015MOL/L的氯化钠溶液，将丝状物的氯化钠溶液，将丝状物溶解，然后，向两支试管各加入溶解，然后，向两支试管各加入4ML的二苯胺试剂。水浴煮沸的二苯胺试剂。水浴煮沸5MIN.
