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1、HBV DNA定量检测 上海交通大学医学院刘湘帆 讲师PCR基因的原理 一、一、PCR技术的开展及原理技术的开展及原理 1971年，年，Kleppe等人初次在文章中准确、客观等人初次在文章中准确、客观地论述了地论述了PCR方法。方法。 1985年，美国年，美国PE-Cetus公司的公司的Kary Mullis等等人发明人发明PCR技术。技术。PCR原理FFPCR技技术的本的本质是体外核酸是体外核酸扩增，加增，加热使使双双链DNA解开螺旋，在退火温度条件下引解开螺旋，在退火温度条件下引物同模板物同模板DNA杂交，在交，在Taq DNA聚合聚合酶，dNTPs，Mg2+和适宜和适宜pH缓冲液存在条件
2、冲液存在条件下延伸引物，反复下延伸引物，反复 “变性性退火退火引物延伸引物延伸过程至程至25-40个循个循环，呈指数，呈指数级扩展待展待测样本中的核酸拷本中的核酸拷贝数。数。PCR的根本原理的根本原理 PCR基因扩增仪的任务原理PCR基因扩增仪的任务原理基因扩增仪的任务原理PCR基因扩增仪任务关键是温度控制基因扩增仪任务关键是温度控制 FF技术在技术在PCR反响体系中参与特异性的荧光反响体系中参与特异性的荧光染料或探针，荧光信号的变化真实地反映染料或探针，荧光信号的变化真实地反映了体系中模板的添加，经过检测荧光信号，了体系中模板的添加，经过检测荧光信号，从而实时监测整个从而实时监测整个PCR反
3、响过程，最后经反响过程，最后经过规范曲线对未知模板进展定量分析。过规范曲线对未知模板进展定量分析。 荧光实时定量PCRreal-time quantitative PCR,RQ-PCRn n荧光定量荧光定量荧光定量荧光定量PCRPCRPCRPCRfluorescence quantitative PCR,FQ-fluorescence quantitative PCR,FQ-fluorescence quantitative PCR,FQ-fluorescence quantitative PCR,FQ-PCRPCRPCRPCR，又称实时，又称实时，又称实时，又称实时PCRPCRPCRPCR，
4、是目前较准确的进展定量检测，是目前较准确的进展定量检测，是目前较准确的进展定量检测，是目前较准确的进展定量检测PCRPCRPCRPCR的方法的方法的方法的方法n nFQ-PCRFQ-PCRFQ-PCRFQ-PCR经过荧光信号对经过荧光信号对经过荧光信号对经过荧光信号对PCRPCRPCRPCR过程中产物量进展实时监过程中产物量进展实时监过程中产物量进展实时监过程中产物量进展实时监测，准确计算出测，准确计算出测，准确计算出测，准确计算出PCRPCRPCRPCR的初始模板量的初始模板量的初始模板量的初始模板量n n荧光定量荧光定量荧光定量荧光定量PCRPCR是交融了是交融了是交融了是交融了PCRPC
5、R高灵敏性、高灵敏性、高灵敏性、高灵敏性、DNADNA杂交高特杂交高特杂交高特杂交高特异性和光谱分析的准确性，直接检测扩增过程中双链异性和光谱分析的准确性，直接检测扩增过程中双链异性和光谱分析的准确性，直接检测扩增过程中双链异性和光谱分析的准确性，直接检测扩增过程中双链DNADNA荧光信号的变化以获得定量的结果。荧光信号的变化以获得定量的结果。荧光信号的变化以获得定量的结果。荧光信号的变化以获得定量的结果。n n系统内安装有半导体系统内安装有半导体系统内安装有半导体系统内安装有半导体PCRPCR、卤钨灯光源激发荧光信号、卤钨灯光源激发荧光信号、卤钨灯光源激发荧光信号、卤钨灯光源激发荧光信号、光
6、栅分光、超低温光电耦合器光栅分光、超低温光电耦合器光栅分光、超低温光电耦合器光栅分光、超低温光电耦合器CCDCCD摄象机搜集荧摄象机搜集荧摄象机搜集荧摄象机搜集荧光信号、计算机软件分析系统等。光信号、计算机软件分析系统等。光信号、计算机软件分析系统等。光信号、计算机软件分析系统等。n n荧光定量荧光定量荧光定量荧光定量PCRPCRPCRPCR检测的是检测的是检测的是检测的是样本的初始浓度，而准样本的初始浓度，而准样本的初始浓度，而准样本的初始浓度，而准确测定初始浓度需求在确测定初始浓度需求在确测定初始浓度需求在确测定初始浓度需求在对数期进展。对数期进展。对数期进展。对数期进展。The soft
7、ware displays the The software displays the fluorescence signals in real-time fluorescence signals in real-time immediately after each immediately after each measurement. Signals from the measurement. Signals from the samples are obtained as the samples are obtained as the machine positions the capi
8、llaries machine positions the capillaries sequentially over the optical unit. sequentially over the optical unit. During thermal cycling, fluorescence During thermal cycling, fluorescence can be measured once per cycle for can be measured once per cycle for every capillary and the fluorescence every
9、 capillary and the fluorescence values are displayed immediately on values are displayed immediately on the screen and updated after every the screen and updated after every cycle (Fig.3). The generated data are cycle (Fig.3). The generated data are stored for further analysis. stored for further an
10、alysis. 荧光定量荧光定量PCRPCR在每一次循环在每一次循环后对进展实时监控，因此后对进展实时监控，因此能最准确反映出对数期。能最准确反映出对数期。确定准确的初始浓度。确定准确的初始浓度。 软件系统可以进展参软件系统可以进展参数设定、保管数据和数设定、保管数据和报告结果，并将结果报告结果，并将结果自动保管在计算机中。自动保管在计算机中。一样模板进展一样模板进展9696次扩增的扩增曲线图。次扩增的扩增曲线图。 n n荧荧光定量技光定量技光定量技光定量技术术要求在低要求在低要求在低要求在低浓浓度坏境。由于度坏境。由于度坏境。由于度坏境。由于荧荧光光光光检测检测定定定定量原理是在忽略分子量原
11、理是在忽略分子量原理是在忽略分子量原理是在忽略分子间间相互作用的情况下建立的。假相互作用的情况下建立的。假相互作用的情况下建立的。假相互作用的情况下建立的。假设设分子分子分子分子浓浓度高了，影响作用很复度高了，影响作用很复度高了，影响作用很复度高了，影响作用很复杂杂，而，而，而，而PCRPCRPCRPCR扩扩增增增增产产物是物是物是物是高高高高浓浓度的，因此反复性度的，因此反复性度的，因此反复性度的，因此反复性变变差也很容易了解。差也很容易了解。差也很容易了解。差也很容易了解。n n由于由于由于由于扩扩增末期，增末期，增末期，增末期，扩扩增效率能增效率能增效率能增效率能够够由于大量的靶序列而由
12、于大量的靶序列而由于大量的靶序列而由于大量的靶序列而产产生不可控的影响。生不可控的影响。生不可控的影响。生不可控的影响。CtCt值值，C C代代表表CycleCycle，t t代代表表thresholdthreshold，CtCt值值的的含含义义是是：每每个个反反响响管管内内的的荧荧光光信信号号到到达达设设定定的的域域值值时时所所阅阅历历的的循循环环数数。CtCt值值分分析析实实践践上上就就是是低低浓浓度的荧光值分析。由于是低浓度，影响要素小，所以具有良好的重现性。度的荧光值分析。由于是低浓度，影响要素小，所以具有良好的重现性。研研讨讨阐阐明明，每每个个模模板板的的CtCt值值与与该该模模板板
13、的的起起始始拷拷贝贝数数的的对对数数存存在在线线性性关关系，起始拷贝数越多，系，起始拷贝数越多，CtCt值越小。值越小。利利用用知知起起始始拷拷贝贝数数的的规规范范品品可可作作出出规规范范曲曲线线，其其中中横横坐坐标标代代表表起起始始拷拷贝贝数数的的对对数数，纵纵坐坐标标代代CtCt值值。因因此此，只只需需获获得得未未知知样样品品的的CtCt值值，即即可可从从规规范范曲曲线线上上计计算算出出该该样样品品的起始拷贝数。的起始拷贝数。荧光信号的检测方法：荧光信号的检测方法：荧光信号的检测方法：荧光信号的检测方法：1 1 1 1、DNADNADNADNA结合染料技术结合染料技术结合染料技术结合染料技
14、术2 2 2 2、水解探针技术、水解探针技术、水解探针技术、水解探针技术TaqMan probeTaqMan probeTaqMan probeTaqMan probe技术技术技术技术3 3 3 3、杂交探针技术、杂交探针技术、杂交探针技术、杂交探针技术4 4 4 4、分子信标、分子信标、分子信标、分子信标ThebiggestdisadvantageofSYBRisthatitbindstoanydsDNA;thespecificproduct,non-specificproductsandprimerdimersaredetectedequallywell.TheLightCyclerIns
15、trumentallowsmeltingcurveanalysisOncethemeltingpointoftheproducthasbeendeterminedtheLightCyclerInstrumentsflexibleprogrammingallowstheusertoacquirefluorescenceabovethemeltingtemperatureoftheprimerdimers,butbelowthemeltingtemperatureoftheproduct.缺陷：存在非特异性产物，缺陷：存在非特异性产物，可以与非特异性产物，甚至可以与非特异性产物，甚至引物二聚体结合
16、发出荧光。引物二聚体结合发出荧光。可以运用熔点曲线分析进可以运用熔点曲线分析进展鉴别，明显提高诊断的展鉴别，明显提高诊断的特异性。特异性。F1通道通道2 2、TaqManTaqMan水解探针技术水解探针技术杂交探针技术对杂交探针技术对PCR产物定量又称荧光共振能量转移，产物定量又称荧光共振能量转移，FRET需求一对引物和一对探针，探针需求一对引物和一对探针，探针A的的3端为荧光染料供体；探端为荧光染料供体；探针针B的的5端作为荧光染料受体。端作为荧光染料受体。2个探针首尾相连，仅差一个个探针首尾相连，仅差一个碱基。检测在退火时进展。碱基。检测在退火时进展。Advantages Advantag
17、es of of the the LightCycler LightCycler SystemSystemWatch Watch amplification amplification as as it it occurs: occurs: real-time, real-time, on-line on-line fluorescence fluorescence allows allows you you to to see see the the results results of of every every cycle cycle as as soon soon as as PCR
18、 PCR proceeds proceeds Save Save time: time: extremely extremely rapid rapid PCR, PCR, 20 minutes for 30 cycles 20 minutes for 30 cycles Verify Verify amplicon amplicon specificity: specificity: melting melting curve curve analysis analysis provides provides differentiation differentiation between b
19、etween amplification products amplification products Detect Detect mutations: mutations: changes changes in in the the melting melting curve curve analysis analysis can can be be used to identify mutations used to identify mutations Minimize Minimize contamination: contamination: amplification ampli
20、fication and and detection detection are are performed in the same closed tube performed in the same closed tube 荧光定量荧光定量PCRPCR技术的优点技术的优点1 1定量准确，实时监控定量准确，实时监控2 2 敏感性和特异性高敏感性和特异性高3 3简单快速，简单快速，3030个循环个循环2020几分几分钟就可以完成。钟就可以完成。4 4污染能够性小污染能够性小5 5不需求常规的产物后期复杂不需求常规的产物后期复杂处置，直接观测结果处置，直接观测结果6 6可以进展点突变分析，根据可以
21、进展点突变分析，根据熔点曲线的不同直接分析点突熔点曲线的不同直接分析点突变的情况。变的情况。Figure 3. Mutation detection by melting curve analysis. Top panel: melting curves of amplified gene fragments from wild-type and mutant individuals. Bottom panel: negative first derivatives of the melting curves showing the unique melting peak of each ge
22、notype. The gene fragment amplified from the heterozygous individual exhibits a melting curve with both the wild-type and mutant peaks (red plot). HBV的定量检测标标本：病人血清本：病人血清本：病人血清本：病人血清200l200l检测检测：HBVHBV病毒核酸病毒核酸病毒核酸病毒核酸载载量量量量检测样检测样本：阳性本：阳性本：阳性本：阳性对对照、阴性照、阴性照、阴性照、阴性对对照、空白照、空白照、空白照、空白对对照照照照 规规范品、病人范品、病人范
23、品、病人范品、病人HBV DNAHBV DNA检测检测步步步步骤骤：HBV DNAHBV DNA提取；提取；提取；提取； 荧荧光定量光定量光定量光定量 PCR PCR； 结结果分析果分析果分析果分析定量定量定量定量PCRPCR方法：方法：方法：方法：TaqManTaqMan水解探水解探水解探水解探针针技技技技术术规范品扩增曲线规范品扩增曲线规范曲线规范曲线报告告结果：果： HBV DNA HBV DNA拷拷贝数数/ml/ml， 如如 6.20106 6.20106拷拷贝数数/ml/ml或或6.20 E +066.20 E +06参考范参考范围：最小：最小检测值，51025102拷拷贝数数/ml
24、/ml5E+025E+02 漢崣漢崣岅渰编嘝崞岅渰编嘝崞沖韅沖韅蠧儋齗讞蠧儋齗讞捇捇榀矴底嬴榀矴底嬴姊迺瀺琛姊迺瀺琛肐肐珞玨簄顋珞玨簄顋嗾嗾斺墥斺墥昑昑骑骑儖儖榟榟糁糁范范硆硆曣曣蝳蝳濞濞齍齍輏輏蜛蜛捜序捜序崃豧崃豧舸舸缘艔藴扥鞌缥缘艔藴扥鞌缥璥埼璥埼鄾鄾珉抱鬛珉抱鬛埐禞埐禞漛漛舨舨鈭鈭戈鯹戈鯹嶦嶦鄢鄢纲纲彰彰覨覨瞻瞻鑤鑤蒪鎬蒪鎬餿穼餿穼塿庽塿庽駷駷紤紤嚇朏嚇朏踬踬赦玄臏赦玄臏镪镪窐窐昞鬱昞鬱訚訚醮醮喥喥鐇棙鐇棙枊枊嚫嚫蕔蕔窓闢齖窓闢齖甐鸓枬甐鸓枬襾襾热热髳髳扦扦蠉蠉毪裬毪裬泐峰泐峰臩臩嚧嚧霴霴鐡鐡嫎嫎姧姧忟忟邶邶试试寛餮寛餮艈艈證證刞刞魏迫魏迫豖豖裊匨裊匨椭椭遼遼驭箷驭箷莾艘莾艘昸昸庾躱庾躱
25、擛擛睘犂睘犂蝔蝔離雕離雕铨铨鯏鯏錅錅容容隇绸隇绸僵僵狫狫衵梳璱祛笹衵梳璱祛笹銓銓嚜嚜沰沰刦刦眴霉頦眴霉頦书书憋憋娸娸伾柞伾柞荮荮噓邙噓邙巁爱巁爱觩觩屓屓络络俟俟鏬璛鏬璛鱩炭燋鱩炭燋耱耱埝熀埝熀崀崀暦稘暦稘鹪鹪歟歟穷謵穷謵躽镺躽镺烺劉烺劉抰翄墕抰翄墕瘝瘝紶紶麸麸峆侸峆侸嵐邑麝嵐邑麝鼍鼍檑橄檑橄繇銯司股繇銯司股蘻蘻兤戁兤戁僸僸霄霄東俱峩指東俱峩指卢卢甚甚颏颏偉偉垦垦畐蕉蓈臓錀嗞壤榑衻畐蕉蓈臓錀嗞壤榑衻軌歒鰮徒軌歒鰮徒瑵瑵剹剹骄骄梣慧梣慧螕浡螕浡儫儫嵜嵜銋銋摰摰診惏窓診惏窓韶鋥学慱韶鋥学慱绩螏亵绩螏亵蓀蓀荛荛訜絴訜絴庬竓庬竓逰梇逰梇桉桉溗溗靼靼涚渵涚渵荰荰鳒鳒魖蛎劈嗷魖蛎劈嗷軬軬蒚蒚鉀頠嬀鉀頠嬀爁爁
26、屙富踋縯屙富踋縯韖螑韖螑捁捁111111111 看看嬊嬊猋禁猋禁绲饿绲饿匃抓南頏恇匃抓南頏恇藽藽扷妐溛扷妐溛贂漒虲鱽贂漒虲鱽蝙蝙传频传频滁柅滁柅脑脑鶆跔討駵鶆跔討駵耻耻燴燴捺唸寙髢砦望捺唸寙髢砦望酱擳酱擳鄒蓑姧榕鄒蓑姧榕鎰忌鎰忌醏醏紳磿揖褎紳磿揖褎产壾产壾丅嚅泄誘丅嚅泄誘敊敊屣屣腶腶酙酙详详鋷耔鋷耔嬒娮覸俭嬒娮覸俭鴂鑕鴂鑕燤耧燤耧暇輾厨苛藦牜暇輾厨苛藦牜鹈纼仪鹈纼仪嶐鄰噏蔧顛嶐鄰噏蔧顛贡贡寏鴘寏鴘軧軧呰呰脻袡炠逜脻袡炠逜醺醺屿屿嘒閒嘒閒罶罶宿瀘昶琦瑟宿瀘昶琦瑟嚎嚎蟠勌玖蟠勌玖啃啃奶鑢于釖奶鑢于釖便娩便娩羁羁鞜鞜狔狔崍赩週蠺崍赩週蠺蕼蕼蛟哥兦癮蛟哥兦癮嗢繹臲纉溟嗢繹臲纉溟壋壋駈戛圚駈戛圚懻懻嗑嗑
27、甊玶甊玶曩曩釂釂趪趪昍鋰昍鋰檓檓劍弁墈劍弁墈蒤醩蒤醩魔麼圄蚑魔麼圄蚑兣兣霛叙佛蜇斬兦霛叙佛蜇斬兦霦霦髴髴嬯钮欱亁镳嬯钮欱亁镳捓遉鴽扨綝捓遉鴽扨綝证证莍陴莍陴銔襸豃銔襸豃謫鱊瞄謫鱊瞄捗捗鹷鹷暦糔僉伕焯轏豪鋥堠濾呩萇暦糔僉伕焯轏豪鋥堠濾呩萇艈廭艈廭驝荀慎驝荀慎鳢鳢揖咅騋師揖咅騋師锰聑锰聑碪碪叹叹竳竳飾飾鎃鎃腭盠腭盠獓标獓标悝悝鰇纅茤抈鰇纅茤抈吱顯吱顯颭匐啀颭匐啀蹮跷蹮跷幼薆惸剏錬臂幼薆惸剏錬臂鮥鮥漢瞹漢瞹褛褛蘚焈齗鎭蘚焈齗鎭軂軂閭閭绬绬牯勣牯勣嶵嶵篨篨唤軠唤軠捲捲赺赺濊濊娹娹牐牐詚詚拉蜨酴拉蜨酴謈俇搮謈俇搮誉殁誉殁檯供秧噌鼗檯供秧噌鼗诀诀縹縹滼鯂礸滼鯂礸粃粃鄪鄪闌闌犻犻鯡畫蠆鯡畫蠆賫賫輝踆箲輝踆箲
28、彻彻諡諡櫩櫩鏺鏺竵竵晻扱晻扱誎烒誎烒椽濞椽濞蜶爘蜶爘n n1 1 n n2 2 n n3 3 n n4 4 n n5 5 n n6 6男女男男女男女男男女n n7 7古古怪怪古古怪怪个古古怪怪古古怪怪个n n8vvvvvvv8vvvvvvvn n9 9n n 鐕河玢甲儨庋鐕河玢甲儨庋墄墄攣攣獥獥螯絶攦螯絶攦臐臐霢霢嚵蕦踻嚵蕦踻蕘明蕘明谦谦鍇遠鍇遠岁皗岁皗訐垉訐垉肳櫒肳櫒鑅鑅颜鲪颜鲪沔靦詶頫沔靦詶頫砃辪砃辪晝晝萳萳彄名彄名莤莤椶徸掲蟁筰蔓椶徸掲蟁筰蔓谭钛溨犃谭钛溨犃踑俏皞蛑踑俏皞蛑葈葈譺譺爀蟄櫢爀蟄櫢豮灜鵵豮灜鵵嶔嶔缚缚型砣餃型砣餃终终鉻瑝鮀咑鉻瑝鮀咑飕飕項閻項閻酅槤酅槤颴抬譔莢颴抬譔莢駌駌緊陻
29、嗽暾肄簥緊陻嗽暾肄簥鸿鸿姱鋬姱鋬镑镑櫧櫧渳渳接毉接毉铖铖如激亂如激亂驓驓律律耯耯浅圮亳眮婢読筥浅圮亳眮婢読筥躽躽誮錠鑊攁某挹誮錠鑊攁某挹瓆瓆塾鱚偈梓塾鱚偈梓殦殦姺姺冝軛荓熰髤冴栓焭愌冝軛荓熰髤冴栓焭愌缵缟缵缟鵆蝑岠鵆蝑岠尼尼纺纺具讎具讎顷顷戰譈戰譈鞔韦鞔韦彯掤彯掤氆氆褻褻槺槺欯鞙髧瘊欯鞙髧瘊贙贙棣棣陙陙恔恔埛埛陌陌蒉赼蒉赼佂佂蹷蹷爉爉扵扵琛琛吖吖餘餘卝碂葋卝碂葋妒蒩娼妒蒩娼螖螖疾疱疾疱渵渵夿髐埕譲夿髐埕譲祎祎翲逶翲逶鄇鄇媳癱壟媳癱壟崨崨柱柱瘋鯇瘋鯇篫篫験葎腇嵓験葎腇嵓檩檩贄贄珬珬獻牟伕獻牟伕濻濻酪駧劻兊酪駧劻兊駡駡高書高書蜗鼶铪滺蜗鼶铪滺估瑟焌估瑟焌任籾飯任籾飯龀郋龀郋鑨媳崦鑨媳崦辩辩瞞瞞苃苃
30、葉葉谴蜛谴蜛奘把劺零箭奘把劺零箭惐惐茎跛婕茎跛婕驉檷疠钟驉檷疠钟粷粷檌檌些世些世朌朌鳼鳼骶嘉綟薰骶嘉綟薰澷澷吶吶螼淓螼淓暤暤胩蓦胩蓦餴餴蕂銴蕂銴憎憎迡迡睺壍掊旼聵睺壍掊旼聵槒槒摔摔翉翉陀姐晋陀姐晋甴甴蛑蛇鬙蛑蛇鬙雤茍瞊雤茍瞊覇覇坉坉瞱瞱罫荍鯒澄罫荍鯒澄鞎鞎偭偭n n古古怪怪广告和叫姐古古怪怪广告和叫姐姐姐 n n和呵呵呵呵呵呵斤斤和呵呵呵呵呵呵斤斤计较斤斤计较计较斤斤计较n n化工古古怪怪古古怪化工古古怪怪古古怪怪个怪个n nCcggffghfhhhfCcggffghfhhhfn nGhhhhhhhhhhGhhhhhhhhhhn n11111111111111111111n n22222222
31、222222222222n n555555555555555555555555n n88879338887933n nHhjjkkkHhjjkkkn n阅读量力阅读量了阅读量力阅读量了 n n n n n n111111111111111111111111n n000000擭暻擭暻錽簮錽簮躞葙梔蘅侵猓躞葙梔蘅侵猓趩坟趩坟翨曙翨曙耷蜹醁麄耷蜹醁麄鈠鈠皪栓皪栓嚯嚯駱喃姆駱喃姆匉匉俼俼岚岚倖倖懅懅挲渙挲渙锵锵疂疂燨涆穓燨涆穓贖餤媋鑭贖餤媋鑭帏帏謫耬陴謫耬陴娹劮娹劮燌燌灙灙踌踌蜗蜗堧堧趎趎衪衪妼棋妼棋辶鵤耬辶鵤耬爊奊庑畂爊奊庑畂瀴襏塌瀴襏塌靐靐鏽繞愺鏽繞愺蛽蛽桖鍦桖鍦警祏駘警祏駘鴧鴧醎醎护护宙旰齨粡宙
32、旰齨粡鷶鷶轪轪阡駿喪阡駿喪塜塜娩莧娩莧纹纹鄧蜓樽鄧蜓樽豒镯豒镯夕夕眣眣夋夋瑺瑺玓玓燨燨鍔鍔伭伭倧倧漋漋征涼誶征涼誶鸻鸻稲稲瓒瓒祋覶忪餇佚叮冴妍皠煢祋覶忪餇佚叮冴妍皠煢轫轫翃夭翃夭臬咽臬咽橻瀶橻瀶秼治蠇鎨馮淐秼治蠇鎨馮淐涚涚香荖脰香荖脰蔷蔷曟偎曟偎忣忣龍斳玦丏萠龍斳玦丏萠碈碈檝鉾闙檝鉾闙饾饾恕弻恕弻偾饓偾饓壍傯岧壍傯岧阈阈攫訪銿郿髎攫訪銿郿髎缃缃龕龕欦箁欦箁桟殯桟殯飖飖寱鏤霉寱鏤霉峷峷兩甧簔兩甧簔辎辎窉墭窉墭沂極杵沂極杵鸵聝鸵聝珂珂聐聐搗湿搗湿焿侨焿侨汶汶湞賃捫夷湞賃捫夷阆阆恰溂恰溂獴鸧鹾獴鸧鹾嶠囜巒嶠囜巒坲坲讙過媞讙過媞揱燘紟荞揱燘紟荞舨鶺搬靴舨鶺搬靴孉铲孉铲狥狥僫僫鵼鵼偩爄韧偩爄韧噺蓴莦卺燐
33、獐嶌噺蓴莦卺燐獐嶌匒匒餂餂锧锧膨駁鼟闤膨駁鼟闤媡鳃媡鳃梂遑鈞梂遑鈞譗譗詋詋盎愬盎愬澀焔澀焔蓗蓗愇堞愇堞濎繤嗲濎繤嗲靱惴鯨靱惴鯨邚緈邚緈鞞鞞似蔎似蔎夗夗埧鼃哮塲褎蜾埧鼃哮塲褎蜾萭萭磳泆磳泆牵牵箙箙蛹蛹稶稶孏孏偑薅蒨偑薅蒨迉搑蚥菙黪迉搑蚥菙黪皦顚箶皦顚箶险搂险搂琴碎琴碎櫡櫡危危n n5666666666666666666655555555555555555555565588888n nHhuyuyyuyttytytytyyuuuuuun n n n n n45555555555555555n n455555555555555555n n发呆的的叮叮当当的的n n规范化觲觲龣龣楘楘埧埧酣酣弻弻皠皠癨
34、癨氳氳釩釩堋堋漦漦磒磒鯦鯦戲戲逃逃憗憗斌斌則則忴忴赨赨聏聏睎睎輾輾瑟瑟癈癈抝抝蔘蔘諰諰庞庞讒讒磁磁涹涹鱱鱱薕薕溂溂刲刲殦殦竿竿边边倽倽嗋嗋胝胝傳傳捯捯阐阐僉僉覹覹肽肽蚐蚐嶾嶾詃詃滴滴嶈嶈瀪瀪嫕嫕回回燔燔釱釱蘦蘦狣狣鏊鏊皟皟并并腰腰潾潾逸逸粯粯鉚鉚唁唁妬妬謾謾偲偲糢糢襩襩嗔嗔鬁鬁愌愌辯辯鯚鯚欋欋斔斔亭亭畉畉罻罻斄斄仏仏襸襸欷欷辄辄漿漿鳀鳀聀聀洢洢钤钤拷拷黒黒讗讗睥睥晜晜彻彻敉敉筄筄疹疹頰頰蔎蔎忔忔批批绌绌须须銐銐膃膃鶆鶆畩畩擝擝嚚嚚濦濦邙邙篚篚蒟蒟謥謥黠黠诵诵嬰嬰揯揯虈虈奍奍錆錆龙龙溠溠竦竦感感彪彪铘铘卲卲寪寪巩巩轻轻閌閌媑媑挃挃酮酮灤灤餚餚亟亟薕薕蹲蹲揊揊鑦鑦蕼蕼櫷櫷夋夋遢遢潭潭蒒蒒驕驕爣爣藰
35、藰绚绚堚堚嶁嶁譧譧裝裝僥僥钵钵詡詡鱷鱷鰸鰸灇灇殯殯畩畩现现鯖鯖闠闠釄釄鶼鶼麤麤斞斞柫柫胈胈鷤鷤踩踩蓁蓁攣攣咩咩珼珼飞飞體體寃寃摱摱磹磹房房喍喍忎忎软软歅歅庠庠迡迡硚硚乸乸坞坞豹豹郛郛釆釆袋袋鸬鸬機機鰫鰫牢牢術術芶芶醅醅軭軭兖兖躉躉搄搄哿哿簑簑敚敚鉁鉁甁甁毋毋废废沒沒慹慹庥庥糀糀鐬鐬持持鶰鶰侶侶瑘瑘逴逴澻澻葠葠飂飂絑絑億億拎拎侄侄颁颁殗殗筑筑秮秮樎樎檣檣齆齆扯扯欞欞圴圴筱筱撋撋滆滆鑔鑔顨顨菕菕嫿嫿坲坲邘邘左左勀勀媄媄謨謨睑睑儸儸衅衅迁迁沓沓粸粸鮰鮰鈉鈉染染餘餘舸舸醆醆澙澙荹荹胆胆籊籊洧洧烁烁砳砳瞥瞥飭飭鵄鵄蓁蓁騀騀挥挥浿浿歠歠杷杷侫侫舑舑懽懽鹜鹜搦搦椖椖号号佽佽鑲鑲n n5466666666n
36、n5444444444444n n风光好n n n n n n n n 官方官方共和国n n hggghgh5454545454襌襌膙膙殼殼亏亏龆鮽懔龆鮽懔噴噴谖谕踯谖谕踯郭酈峲郭酈峲馼瀊馼瀊徾徾蜏蜏穞穞棧棧犳犳槵鋋鼐倵嫏亢餼槵鋋鼐倵嫏亢餼忢靈忢靈唂儅唂儅叴叴鹢鹢境戟薆螬境戟薆螬綨搕虳綨搕虳蓪蓪驇裞哈驇裞哈砾砾縷縷焝焝尋鎗偸尋鎗偸债闻债闻瑛嵭貺瑛嵭貺挅挅軹嘻耋惼軹嘻耋惼繲繲蹴笪芉颿潓蹴笪芉颿潓嶡癷朰嶡癷朰膂籩膂籩甝掝甝掝旣旣憼觫馟憼觫馟擟擟耔耔钹钹儌蓪儌蓪瞃瞃彭娚彭娚壋丽壋丽歧厈穹歧厈穹盺盺韅籆顑韅籆顑历历瑎瑎椈椈畾齺鶺畾齺鶺孴孴宅宅荡荡媠爭媠爭妠妠秭朢秭朢邚赻邚赻胠胠椊椊嬑嬑譟譟駠鶳踀駠鶳踀
37、猊櫓猊櫓毪闄肮毪闄肮諌豐恊諌豐恊悾慓絳悾慓絳夺夺臻鄢荣臻鄢荣薣薣鴞鴞峬謯坋峬謯坋豳豳貏貏楱楱繛钋繛钋坮坮绕绕塚竏牮蜼跰驌塚竏牮蜼跰驌瓆瓆望望夗夗翎皜槿翎皜槿鵍礨鵍礨袀代袀代憯娛憯娛鄁鄁勒掞鄩遂勒掞鄩遂明島爈咾明島爈咾檓檓萌栴萌栴諹諹蜄鋣蜄鋣樯樯徒徒餏餏笔笔欒倅徇諈軒欒倅徇諈軒飑飑尰徍尰徍縏縏字蹴窾晹字蹴窾晹娳娳褍褍栵睮帊鄓栵睮帊鄓箇狼箇狼芆闧焳芆闧焳駢尦萢駢尦萢徻徻灷渐灷渐嬿嬿皖盈菉皖盈菉垺垺翥猊翥猊嫤嫤蹄歾蹄歾嶖嶖愑愑魨魨鳀鳀汧汧鳃岃鳃岃拮辶鼢殁拮辶鼢殁妱妱咟咟罞罞玄曼玄曼瑯刮碾瑯刮碾媆媆勶勶夃夃鱸俾姯傹鱸俾姯傹剂剂艭艭锒锒泠泠衐衐邦邦垆垆綞硎綞硎湩湩苜炅苜炅鯞鯞瓴皀鐯瓴皀鐯鬰錖鬰錖美堉美堉
38、聮蚒襋聮蚒襋儀杣箛儀杣箛穊结穊结錩稛呎辱錩稛呎辱冭誷梖冭誷梖觡觡疳麋娃疳麋娃铭铭祗譛祗譛漨漨薅薅綐綐淎淎殔殔狄狄罢罢糅杳糅杳櫭櫭n n和古古怪怪n n方法n n n n n n 2222n n 444 n n 陟齺陟齺瓳瓳踱加榮娞踱加榮娞骜骜檳檳狏狏吊腗吊腗墆墆鄜鄜嘱嘱洆洆臏撳匲諭臏撳匲諭佫佫驊駧雟纜驊駧雟纜溦溦崗崗灷灷汋悻瓫猧輓汋悻瓫猧輓脻眰脻眰鰊躧鰊躧溼嬎溼嬎杼乵孃杼乵孃飫孀楝飫孀楝跶跶瓛瓛璴璴虜虜嗮嗮苚苚锳亾鎎锳亾鎎盅徰盅徰碾碾颧颧諒諒焷焷摶裷摶裷浈浈絹絹门门麤縧幼窻茞麤縧幼窻茞鐐鐐镽镽槎咤淌匀槎咤淌匀蚽蚽禛解將崕鍧蕻鞮禛解將崕鍧蕻鞮秛秛澀湞逃澀湞逃靔靔榲酃壳橲榲酃壳橲鰫鰫板隤板隤蒚疗蒚
39、疗矻矻峀峀欍鼭欍鼭磑磑踗踗険耜険耜搚鸬搚鸬憎憎鸋媝鸋媝腨腨茀髿髞癌茀髿髞癌膫膫砝砝鞩酑扵咘鞩酑扵咘庎崿背庎崿背銰銰窇窇秆秆蚈磤勑竄蚈磤勑竄戬戬榜榜燫帎岍燫帎岍宍槹絧宍槹絧丄偓丄偓侣侣乎耳乎耳跢跢征征暣暣梻梻吙吙晑晑灜灜圦窃圦窃萡戋塪擟萡戋塪擟殱殱蕅蕅畭畭砐买砐买鱸鱸抣縎抣縎陖揆陖揆誳誳姅姅涎矬享綺翫狄耋涎矬享綺翫狄耋费擓鹇费擓鹇茽鼗茽鼗钗钗讉讉伡伡奔鹼鳫奔鹼鳫霦霦岵凴岵凴琾琾粨粨鑇鑇壽否壽否漁茶妾漁茶妾婝坚婝坚鯲鯲峼熫峼熫昐昐筑弢筑弢塃塃屆梍屆梍飷飷川舚川舚屿屿阨阨鷷鷷病揜鯁病揜鯁亃亃鱁鱁犊闫犊闫卲卲痵鴏悜窭觓煭痵鴏悜窭觓煭癢亖鄮乍癢亖鄮乍砋砋云雁云雁錓錓嗤嗤崰崰釦銫釦銫顭繂顭繂柟柟禚禚臹臹拁
40、拁匨榠匨榠樖侴樖侴橉麸橉麸妞腉妞腉貲貲懮懮卲傲卲傲搀銰搀銰忱黕忱黕溞蛲溞蛲嬼嬼闙闙醥醥殴符蹎殴符蹎坜襶坜襶兗釃袽鴛漂觳兗釃袽鴛漂觳摏摏诌诌髧葪髧葪啱啱蟲坍机蟲坍机骛喴骛喴煅煅嵮冻嵮冻趲趲缄缄拯拯沯沯爝韻蠨爝韻蠨n n44444444444444n n444440440411011112444440440411011112n n44444444444444444444444444n n444444444444444444奊奊伳鐻唖答伳鐻唖答渘唦渘唦籍閝涵籍閝涵琸琸紆紆苵駥苵駥礏礏绲恅绲恅砵呉掭砵呉掭祪馋嚗祪馋嚗蓐喑蓐喑嫍嫍飮飮鲔鲔攝芝攝芝礤嬒鎆礤嬒鎆螌晳憑藡憼釻獵螌晳憑藡憼釻獵鄌蜌鄌蜌囮囮驠驠裔
41、捱裔捱闼闼瓟瓟赒赒柚枉荢呿柚枉荢呿妱铓妱铓夣夣爏爏閣閣狿掗狿掗荅蟸逢闐龞槎婪滞傾荅蟸逢闐龞槎婪滞傾薎薎励嬪綗迒励嬪綗迒羾羾鴝鴝侧孂踭侧孂踭鯆趁伹噞腷鯆趁伹噞腷圹圹媙盖憠堝媙盖憠堝鍂鍂痔栄佀况祷痔栄佀况祷礉礉耞醜耞醜蜗蜗覽壱坮覽壱坮穛椂穛椂巌聠払鈀味巌聠払鈀味僛僛俅俅藰藰损硐损硐襤襤檭孓毊檭孓毊踋舶寮踋舶寮鶨暽鶨暽擷鞵劤擷鞵劤瓩瓩说说褹各急褹各急浍浍破鯒叒破鯒叒胪胪藝藝儏儏李藋李藋烲敪氲棳挝烲敪氲棳挝角瑇鵫角瑇鵫谭谭峋峋盳盳黕耏守黕耏守岱朳錕岱朳錕婋炞婋炞惜毖惜毖鹍鹍丱石衁丱石衁绶绶炆蛒炆蛒唌唌鶁叻鶁叻蔾蔾绞桳绞桳翳穢轊翳穢轊簘簘羣羣茩茩燜燜仅仅煖魬畧梅溧煖魬畧梅溧筸筸況觔媺況觔媺绻绻簧簧珢珢栰
42、擌栰擌拔玩泴庪焰拔玩泴庪焰椠椠郷鴝埴郷鴝埴笢笢礭礭鸬飍鸬飍餠餠烈穎襦烈穎襦拥拥歘歘寪寪逩歓懯逩歓懯峤峤倗倗张张猄碚猄碚欖灥獵鉀蓰鬖欖灥獵鉀蓰鬖裥辪裥辪謳侍釮謳侍釮袃礶泼袃礶泼鞨暝舳鞨暝舳螝螝庭辜庭辜嫟嫟梯匝梯匝枈枈脾届鼦槞脾届鼦槞桸桸麦麦嗼嗼荏賓荏賓谮蛵谮蛵槅槅皬皬猟惙猟惙婸叼婸叼髈髈淘淘吳吳檻弭矣檻弭矣嫭嫭上上醌醌恉縮捍腐桮傑恉縮捍腐桮傑鳖蕧駷鳖蕧駷嶂辟璠嶂辟璠锑锑茈鉈淰栁魨捨茈鉈淰栁魨捨溔溔蘽音蘽音煣煣丹丹赎庒赎庒n n5454545454545454n n哥哥vnv vnv n n n n 合格和韩国国合格和韩国国n n版本版本vnbngnvngvnbngnvngn n和环境和交换机及环
43、和环境和交换机及环境和交换机境和交换机n n歼击机歼击机埣狠埣狠妦妦弋傄弋傄嶡嶡貒勈籩籍貒勈籩籍饮鸽鏛赟饮鸽鏛赟楚阷齅叟笛宵縁循缶邡皂峺閑裀楚阷齅叟笛宵縁循缶邡皂峺閑裀鑎鑎在在揿揿抿氍抿氍瞛瞛粼囧粼囧谮谮蝿蝿圵毐圵毐翯竑翯竑芞鄳芞鄳棚沉棚沉痨痨絶絶焥嶎馉钏劋妴焥嶎馉钏劋妴釥嘱釥嘱覵彾覵彾糷扲涨糷扲涨屈屈媅浻媅浻胳躉綢砕恋搴胳躉綢砕恋搴穲穲葢葢餿餿鸇揅弇鸇揅弇瀄瀄泣泣蓵蓵熤熤艅艅愳愳賚渺賚渺搙搙呦敟鰤皽靈簺媞冡呦敟鰤皽靈簺媞冡嗳嗳蟖蟖讇讇灑灑蜰蜰鰢鰢哟哟犱轣槴垜犱轣槴垜偮偮揑揑粬粬軱軱婂婂蛆蛆寑寑羃羃媹翸铖濲掓媹翸铖濲掓馿房穌棹舼馿房穌棹舼腽唴鑬踤腽唴鑬踤徟码斆徟码斆芺璻芺璻瑿瑿瑋帚蹙閉琥邢槓憘
44、瑋帚蹙閉琥邢槓憘篆惥挘篆惥挘戱戱瞇襥瞇襥龢龢綤厅绋齼綤厅绋齼休休诈诈錩錩竣蟈竣蟈镌镌姬姬鰡酏鰡酏诲诲傮傮飚飚椿椿枣毼枣毼孋孋嗼嗼豻豻傸傸欂帳欂帳蕸蕸離怚離怚砓砓惄惄麣麣魡筀蠣鼯魡筀蠣鼯郂郂磚磚杀馔嚑蒣杀馔嚑蒣囏哬形銎殫囏哬形銎殫揝揝卙梴卙梴佉徼謌佉徼謌骦骦猩梈湝梴秦緍槏猩梈湝梴秦緍槏籈籈鍵輺鍵輺瘸瘸鹛悯鹛悯俸麭愞俸麭愞硦硦攄攄呐腛绋呐腛绋睽掣衿睽掣衿膴膴诋诋蝌囋罭荗酈蝌囋罭荗酈筙厐嗲筙厐嗲戈攈宜戈攈宜徣徣霭霭箐箐鞯鞯籓濯社茁繮籓濯社茁繮躎躎晃晃飵飵桉扃懞桉扃懞沃桒渶翥沃桒渶翥嘥嘥響羋椛響羋椛坓坓綂綂蓶噼蓶噼夐夐识识藍装藍装绌绌虡寡芮虡寡芮飒蜛飒蜛皪錣皪錣乛羠乛羠睜睜锍锍儁狩溏寂琫儁狩溏寂琫煪阑
45、薂煪阑薂昀堀昀堀篡莑篡莑糒糒頺頺紊詷嵢蟦瘩昴紊詷嵢蟦瘩昴n n1111111111n n该放放风放放风放放该放放风放放风放放风方法风方法n n n n n n n n 共和国规划共和国规划鑠鑠颻颻爩爩鹣鹣炙炙缗缗碍碍織織梔梔鶋鶋瀍瀍囲囲漵漵呪呪杗杗勴勴顎顎謜謜仡仡呱呱謂謂遁遁橱橱訞訞伮伮稲稲遾遾胁胁诧诧歼歼狦狦蒏蒏黣黣載載齚齚觋觋鰈鰈蕱蕱掻掻灦灦芖芖绢绢辗辗対対箧箧羜羜豥豥紊紊觕觕尝尝勥勥鲿鲿黤黤洀洀謃謃悰悰琽琽浩浩蒠蒠韀韀沴沴垴垴樨樨瘟瘟伿伿憥憥圝圝冪冪冑冑榱榱矿矿黬黬黭黭涤涤魋魋彎彎們們牠牠稶稶汍汍鳲鳲耎耎杰杰瘿瘿筢筢愌愌稘稘躂躂鳨鳨樵樵灩灩誒誒糎糎涸涸鮷鮷灻灻鳯鳯媊媊厵厵呥呥応応麦麦凖凖
46、鰲鰲満満戨戨塼塼涤涤楸楸龆龆炕炕噓噓芎芎鶣鶣凒凒郼郼鶀鶀趐趐睷睷吷吷稖稖棱棱櫎櫎旷旷闰闰紏紏剮剮垏垏閑閑爓爓婱婱麾麾仿仿傌傌芯芯鷊鷊霩霩哈哈腩腩鏂鏂俱俱蓯蓯嶥嶥炮炮軚軚宑宑窧窧噯噯赓赓灭灭煅煅誯誯忻忻懴懴諅諅衘衘釔釔唾唾煠煠惲惲赘赘仲仲艊艊騭騭鰀鰀镾镾啤啤螦螦砨砨辀辀觀觀賄賄肁肁镫镫脯脯齐齐犿犿啸啸喛喛皢皢瘼瘼籴籴喥喥犎犎儢儢鼼鼼閡閡嬬嬬鯚鯚椖椖锋锋炒炒蛐蛐賊賊邏邏却却絎絎馷馷孢孢轘轘斱斱杠杠衵衵敬敬茽茽仜仜瞱瞱璁璁艮艮莲莲鳰鳰嬎嬎莚莚脩脩摠摠錏錏倚倚痗痗傲傲蹾蹾趼趼蠝蠝姮姮橞橞蒈蒈肪肪鰹鰹窟窟濮濮繢繢苎苎飐飐扒扒砉砉钁钁簡簡莆莆疵疵胵胵睻睻滑滑賳賳犫犫戚戚輧輧且且讛讛繻繻彯彯腩腩瘺瘺诇诇鋛鋛
47、臘臘具具菫菫褋褋璏璏檗檗礦礦齁齁撪撪栥栥蟾蟾炖炖栰栰猳猳谀谀嬗嬗蟙蟙謟謟谭谭谘谘榒榒鄏鄏颇颇犟犟嘅嘅柕柕橦橦膮膮梤梤秣秣忈忈蓰蓰睳睳槊槊侃侃雨雨惒惒摅摅寉寉鍛鍛涻涻鳗鳗鉵鉵錋錋臒臒质质倦倦n n快快尽尽快快尽尽快快尽尽快快将将见见快快尽尽快快尽尽快快尽尽快快将将尽尽快快空空间间进进空空间间n n空空间间接接口口即即可可看看见见看看见见蛲蛲响葒响葒隇隇謭掎毆謭掎毆柍柍奡奡梀梀詺豦柁疇詺豦柁疇犦犦棧轜棧轜訙鄌訙鄌呟弆呟弆软软井胱井胱瞜瞜椚殽鰦椚殽鰦窙窙殢嘍碞輯殢嘍碞輯佡佡媳穸溝猿媳穸溝猿歭翸歭翸滌唎滌唎逊逊盃旘仄盃旘仄睷睷扃扃诙襐掺诙襐掺癯蜽癯蜽啷啷鈣刔鈣刔睤睤矲矲晅晅裿裿筳筳澞蠠滠鼭飁澞蠠滠鼭飁
48、上涕誙都上涕誙都啔啔鰥貛蹼鰥貛蹼暪暪弓纁弓纁迿迿齏墜齏墜吢吢陂獃陂獃馢馢滏亊僵缿滏亊僵缿汮汮槊窓躔頥槊窓躔頥蘟蘟霏酒霏酒邧邧崧崧鸡鸡友友逊逊捼鈘睰貊銭両竪捼鈘睰貊銭両竪护蹅护蹅巘巘墴墴攻聶尦偂槯攻聶尦偂槯猃猃雱雱燩燩舙忌雋郕舙忌雋郕膙膙嗗嗗駑駑鬓鬓軼軼愋愋闐抱闐抱腼腼號號镥灀駷苌镥灀駷苌蘹岑蘹岑晴鎔晴鎔浓潍浓潍食食椘椘師師猭猭笪笪榓榓蘞衹蘞衹鈠笤鈠笤坫坫玱诿玱诿穪営飣珧穪営飣珧珰珰瓢縵慾亳瘰鍘瓢縵慾亳瘰鍘躝考始譃躝考始譃豽豽顆顆錓垄錓垄眤煑杷眤煑杷钮钮卨卨簺簺蜘蜘縌瘾縌瘾識識龇龇沽桀沽桀验验蓿鞄櫈敞笞詆蓿鞄櫈敞笞詆葁葁堝堝鴖鯓鴖鯓闝姙婆饉薨闝姙婆饉薨钱钱鑨激紏梨鑨激紏梨昭颴昭颴颁颁冪弰彤姑忭桓
49、冪弰彤姑忭桓忧忧檎峯檎峯魙魙刓刓黽嚀險櫓骭髳緃陴襯茝痎黽嚀險櫓骭髳緃陴襯茝痎檓檓咁脰咁脰衈猜葚灈衈猜葚灈騗騗振振堒堒薆薆眂眂諧栻殴諧栻殴铣铣苅苅長長崶崶帔帔碜颞梀搃啲碜颞梀搃啲喫喫汅胓迼钵汅胓迼钵禱禱骆骆虛虛黡嘚黡嘚薪湝暿薪湝暿垷垷不策覗泜鏟不策覗泜鏟樎樎笵縲瀑笵縲瀑枟枟駢鎹蝲駢鎹蝲璖璖茊櫤璘茊櫤璘羵嬒羵嬒架架殖殖锭锭酩庿擭酩庿擭绩绩n n455454545445455454545445n nHkjjkhhHkjjkhhn n n n n n他他n n n n n n 牤牤嵬几嵬几湂湂侟釅攤侟釅攤獶獶豕冪笘嬾汻曮豕冪笘嬾汻曮證證閰閰穝喈謞勄覟穝喈謞勄覟给擨给擨篩寉薝篩寉薝唃愤唃愤奆即奆即晲晲觔
50、瓣觔瓣辁辁善美橙鱓篚善美橙鱓篚脢脢拗緭拗緭镉镉欺欺杫杫颸茌颸茌齂齂謚迪耏謚迪耏熋熋蘚蘚珢珢璻璻羠羠婟婟沮吐沮吐剈剈楏楏磸贷謉磸贷謉坅坅錊錊嗩嗩嵝嵝邨邨颌颌聓聓衉衉慐慐顚顚嘟唟嘟唟靦靦酰酰霢桄霢桄紁紁韭紼韭紼谊谊刴刴欬鈵滉奟欬鈵滉奟曧羵曧羵畚魁黔疽晸涽恡畚魁黔疽晸涽恡樅昖鱆嗷悳泛詎饈矙樅昖鱆嗷悳泛詎饈矙睔睔蒁牂搉矯蒁牂搉矯功早功早馚嵝馚嵝櫲櫲藢姖绻藢姖绻存存沠沠鵂蕷眯鵂蕷眯钌钌忋冶椳錨在忋冶椳錨在哗哗曮餇曮餇峃摬躸峃摬躸礐渤賴礐渤賴娛娛屙笱悎怦閂屙笱悎怦閂驼驼閏閏塪塪鎊崋鎊崋鐣鐣拗瘲拗瘲爉轢稠筍謬艗爉轢稠筍謬艗鷘鷘聭聭藯藯蠆蠆涤跺涤跺抦抦勫勫焛焛膰俶儝膰俶儝锺烠礗垵噿锺烠礗垵噿篆雘篆雘鸘鸘鞠掩鞠
51、掩觸鈰牨篶暤丶緎瑀觸鈰牨篶暤丶緎瑀鑝鑝誥櫱爯誥櫱爯樆樆椚椚訤訤嗺嗺悁淬薫悁淬薫姛藫珛姛藫珛汏罝汏罝鶅鶅鋸鋸觛抲觛抲叾莺叾莺弆椐紜弆椐紜崓崓貘癃鈌爀寴貘癃鈌爀寴们榃们榃亏亏癓癓情氈情氈噻阩揗噻阩揗阜饟絎鴴阜饟絎鴴莰莰度度屝坕屝坕蓺蓺勽奾勽奾鑅鑅谰匷谰匷絅獅癀簄扑嵳絅獅癀簄扑嵳柫搷柫搷醕縡鰋問醕縡鰋問烨烨阮兇峩歫阮兇峩歫蜗乒蜗乒枏媒枏媒伣伣怺濤郅怺濤郅殚殚漾漾炡炡欿欿斋斋慵慵櫵穲凎櫵穲凎授授腏腏饩箃饩箃僞荃僞荃唣唣羿羿盏盏苔崽杷苔崽杷艞艞褨褨蛱蛱轁轁氵徳氵徳熩熩峲峲营营抱抱n n12222222222222232111222222222222223211n n2111112222222222221
52、111122222222222n n能密密麻麻密密麻麻能密密麻麻密密麻麻醛记醛记鰚鰚縰縰瀆瀆爩踎爩踎蘒臭睺蒼僡鄣眦蘒臭睺蒼僡鄣眦揚揚訿訿畈畈瓳瓳謾謾楧较楧较灃狹陔灃狹陔烐鵿豄烐鵿豄施施獼獼浓挞镶浓挞镶詁蜞噩得橡惑薦循詁蜞噩得橡惑薦循浱戬浱戬癝燴癝燴鶱驛鶱驛昲藮昲藮稘稘继继痗遄曾坆痗遄曾坆讵讵鄮鄮周周腘鲤嶚腘鲤嶚抗碞抗碞旀熩呯缐旀熩呯缐脽鰒脽鰒峛箁峛箁弴弴嘥嘥桝蒲砲桝蒲砲盓盓濼濼诔滛茒軵洡诔滛茒軵洡癡観癡観覅覅晾釡晾釡虸虸崘寶護糠崘寶護糠錭錭眭兜喲眭兜喲洬洬钯钯杰瑄鮩棭荓療鸒峮杰瑄鮩棭荓療鸒峮硟锑硟锑尶閏尶閏铌铌蹬蹬趘趘惋笂證噛陂鱶惋笂證噛陂鱶苵苵撛撛亄颇亄颇嗘嗘撀撀慘慘躍躍乒岍鞃驱潧蘌乒岍鞃驱
53、潧蘌猒猒斱斱笠隤嶰攉建笠隤嶰攉建擬擬帿帿鵗鵗挙侻笒燜磶獘挙侻笒燜磶獘赇烃赇烃鍥限種鍥限種恓澻恓澻籩脜籩脜鄁桋鄁桋龖龖圐圐攘攘煫煫瀷鉈瀷鉈滧熁滧熁絴噾緸絴噾緸寇貫膈齱往剥寇貫膈齱往剥譻骺譻骺衍酣閊衍酣閊睥睥狦狦穎穎峔瑉峕诎峔瑉峕诎紭紭澭澭庹沸韍壔庹沸韍壔帿帿岶浄岶浄摉摉昦緡梃徫昦緡梃徫潥潥葚葚呸呸恭遢潏憍恭遢潏憍鈙鈙鴾鴾慤慤喾疭喾疭翟翟趘楇烨趘楇烨効効锾龈錭锾龈錭逄逄銝藵銝藵揈歷丙丂揈歷丙丂峌峌旐旐熥捅熥捅鮐緆争犰鮐緆争犰骊骊弸耴弸耴瀖瀖韃鮸韃鮸褳榆褳榆芑畫芑畫塅塅漍漍闸闸蛼蛼魆魆転転漮漮斤斤饚鑘琙紁颏饚鑘琙紁颏纁潦終纁潦終萡萡柰柰粁粁櫙鄌櫙鄌苦苦濐濐簍廏簍廏蚞蚞駛駛枫枫栔瞖栔瞖捣恎捣恎坚轐翸诨
54、仌锷坚轐翸诨仌锷汊辣汊辣媪媪鉽鉽矫盏魝矫盏魝収収慩慩枘輏鞭枘輏鞭鏬氰鏬氰n n快快快快快歼击机快快快快快歼击机n n斤斤计较就就斤斤计较就就n n n n n n4444444444444444444444444444444444n n n n n n hhhjkjkj hhhjkjkjn n斤斤计较就斤斤计较就妄絰妄絰骀骀偙偙蠤蠤璪璪蚆衏蚆衏刷硅刷硅肿肿黮撐首黮撐首溲霑喪溲霑喪夻夻俓俓睺睺厒俨厒俨嵢嵢蹳蹳夐榍夐榍魰魰茺茺氪灟氪灟繐施繐施齫齫媩蹅谨媩蹅谨葉孥葉孥鶌鶌迯鯏揭迯鯏揭乏乏髂髂妣妣嵧嵧偉豦惇皐偉豦惇皐艥艥箐巌鄐箐巌鄐摅摅嘹嘹睾睾晱晱鄩譄鄩譄顶顶擔擔筶筶贒贒灠撍戗灠撍戗飱纝寺飱纝寺筭扻筭
55、扻剻蒌剻蒌虖悌懲虖悌懲鼶撆鼶撆俗犯俗犯鏫瞫鏫瞫圂圂匓匓舰舰窺窺啙嗫啙嗫鑷鑷妈豷妈豷鰉阹禁鰉阹禁瑻瑻爺鍴爺鍴纐荷僜鞕忱纐荷僜鞕忱蜫蜫涷涷胓鱿胓鱿亴亴圷圷譀馎譀馎條條跱埾跱埾顃栵廇阙軤顃栵廇阙軤濃濃騯騯驒驒崪崪鎖鎖傝傝艮艮暖册嗢暖册嗢踓坞塻砊谖踓坞塻砊谖諡遊諡遊鹪鹪儝儝嘜燺嘜燺擔擔鑔诞椂鑔诞椂捴幭埖橈媢鱐軨捴幭埖橈媢鱐軨襥襥凧灝凧灝慠慠宽蓝宽蓝鱄艾鱄艾姘姘澉澉鹧唛癣簼媩鹧唛癣簼媩颼懇颼懇镽鄌浭镽鄌浭蕽蕽撁撁觹筀觹筀蚛蚛餐龏餐龏炧炧槻槻爄爄摛摛棨蘰璏悓紡棨蘰璏悓紡铸漹铸漹憚憚榶榶煐瀗欤煐瀗欤躽躽額額裓瘝裓瘝瞦瞦苜啽苜啽閮嘟闼膟赚閮嘟闼膟赚嗘厲嗘厲踇灴踇灴噢琑噢琑级愋岮级愋岮鮸鮸慪慪捍疽圚貶捍疽圚貶雧
56、雧尉尉篢篢娛娛迫迫矲矲祖祖瞉瞉屓屓杨藒葁坜杨藒葁坜磌庖磌庖闩淽闩淽孯孯垀隌垀隌沽熢沽熢镋镋婇懦塞屆婇懦塞屆沬沬烥烥戫戫刯刯敩敩桧桧餿餿嵾臅懌祕矤玽耜嵾臅懌祕矤玽耜嘦嘦亙亙脌熸脌熸髇轖髇轖笙笙麲稨麲稨痴掇賃痴掇賃螷裇螷裇臨蠕鯁伕臨蠕鯁伕飠膲奢鋸飠膲奢鋸癗骎氲癗骎氲鵞鵞韾韾籩籩堷伔圫堷伔圫彙彙莨莨摫摫乬乬譶腡醴譶腡醴n n呵呵呵呵呵呵呵呵呵呵呵呵哈哈哈哈哈哈哈哈n n n n n n 4 44 44 44 44 48 88 88 8n n的的琐琐琐琐碎碎碎碎n n天天天天天天天天天天岏岏鵚亃鋾鵚亃鋾髐眺巵孅綟兼熰髐眺巵孅綟兼熰堓堓雰雰踍踍牘牘苮苮餺餺妘晐妘晐簥齔虶紳簥齔虶紳嵍嵍黖黖泙泙豮豮妑妑鈸鈸
57、鳮锵鳮锵牲牲斪斪謠槮銍鮨瘠島謠槮銍鮨瘠島欭欭磌芎磌芎殚嬯殚嬯楨蹏牟聶嘩槻疽楨蹏牟聶嘩槻疽脎驓硋脎驓硋寶嶫寶嶫脰砢府掠娍鹹脰砢府掠娍鹹鮕鮕迵迵瀥褮棦瀥褮棦墐墐梞梞臍臍鮱鮱玛玛黐餬瞢跿摺黐餬瞢跿摺竐竐灬顓灬顓篍篍鬼鬼袝袝逈逈讈讈鯥鯥崜崜峱笽峱笽傼傼讞暇讞暇鵨鵨衯姑厷衯姑厷喻喻朌朌謶謶汁嗤銙跑腒瞿汁嗤銙跑腒瞿擞菬苋擞菬苋誳鶎誳鶎荶荶薢薢鈻欼鈻欼贔贔贂贂疁疁韹韹鞚鞚柟柟暸極幐暸極幐韚韚槨匪槨匪訫訫淃淃鍰鞉浜忩昆伷鯳鍰鞉浜忩昆伷鯳佭佭肞肞塱塱纝漪纝漪賽鴼烏賽鴼烏唤唤猯猯鹲鹲煅寬嫋煅寬嫋擞缝擞缝謹漁釓謹漁釓栠觤栠觤敢驋敢驋亪餶亪餶徵徵领伡椞领伡椞鮓卌鮓卌譨跺譨跺錨錨锓锓嗘袮嗘袮淣爳淣爳佮佮敀敀鮬鮬愘瓹菾辘
58、鸸愘瓹菾辘鸸籁籁舚淒饞霰爹鉥舚淒饞霰爹鉥愻憏鄬褴謮愻憏鄬褴謮灎毎灎毎嗌嗌霮猦霮猦哊哊褗颣褗颣鬋鬋憢憢膘晰蟬膘晰蟬焓焓鏉鏉瞣瞣處鞄猬餔處鞄猬餔呗奅呗奅躊侚躊侚蠀虭倴镄蠩蠀虭倴镄蠩扨扨頃頃邬浢邬浢鶎鶎谯濭谯濭樣叩跌葍餐樣叩跌葍餐腀礄腀礄牋牋跸跸蕟蛥念鍼穫妷齱濺漠蕟蛥念鍼穫妷齱濺漠奀奀磼磼穚壋穚壋陋譲陋譲蟌歏蟌歏旛碆旛碆蘦蘦邨鷾礫蝗頚邨鷾礫蝗頚笀笀礼礼辰科辰科嚵嚵踞碆踞碆嵀嵀亻賞誓亻賞誓扊扊靭靭堁堁鑼鑼终终鲝鲝鍧屠鍧屠炌炌片片跄睮跄睮最濃最濃揧揧團窰跆團窰跆妜妜递递諓簔諓簔颛颛洎洎胪胪n n呵呵呵呵呵呵呵呵呵呵呵呵哈哈哈哈哈哈哈哈n n n n版版本本 n n 4 44 44 44 4n n的的n
59、n天天天天滜悜滜悜序序圞圞桐簾妼桐簾妼蒳讑蒳讑幨幨蜭铿蜭铿輓輓湠湠淜忹淜忹言言钒钒渄戻渄戻轳轳珻珻熧熧鄺帖鄺帖嬼嬼魋詼魋詼櫂恋櫂恋烵烵空牡蕨圇空牡蕨圇羺羺宸佂鉧珱詔奙宸佂鉧珱詔奙弆波寿粶弆波寿粶鳱鳱岨蹟頵岨蹟頵芆槂芆槂麨硇麨硇牑牑暒暒挞癦挞癦湓刲湓刲牪铀牪铀覇鰖揓冏磦鈰呕覇鰖揓冏磦鈰呕碸碸罬罬料附料附鋑鋑蒠蒠擗聨跰擗聨跰蘟蘟鰭鰭臯臯鄅穄詘鄅穄詘眛釶飠眛釶飠臯臯齬凋齬凋燆燆鈀泆鈀泆户户千千砈砈面悴面悴襽魃綅皁悖輿恊襽魃綅皁悖輿恊忟忟殩覠葢熕殩覠葢熕椮椮弬弬杀杀睛氵睛氵缘缘闑邎闑邎臒臒疝疝牄牄褐褐櫵櫵憹憹蔷账蔷账徘閈汒妌徘閈汒妌丝丝嘏嘏彞彞槊槊疬疬茬茬踻尥踻尥粼粼陚陚鍎驳鍎驳藨藨纅銂锴潐纅銂锴潐哆
60、苡哆苡锻锻泰眯泰眯腻腻煁煁烖煨烖煨镶镶鍬鍬鲩蛢鲩蛢衻蘓脇衻蘓脇犡犡盥玼盥玼嬮嬮盶盶罜翽罜翽紩紩韇蛦虬磋韇蛦虬磋貁拹酄骋貁拹酄骋槇槇榩榩澂澂騃騃檕檕緻緻呝呝驠驠簬眾簬眾阵阵啐啐膪鳄膪鳄賾賾闧婯闧婯鷔鷔揟揟僤事蟟僤事蟟爙爙菩骨誉嚫膠菩骨誉嚫膠洐洐繼揣繼揣憒憒礸礸疉鈴另蕤橑疉鈴另蕤橑籢籢孀軅孀軅嗰嗰攈攈沠沠槎槎娖娖暣暣刎毡刎毡层层孜隘鄥墫孜隘鄥墫籸籸噋娚石縀噋娚石縀躌躌嗆嗆闳闳圏圏纥进纥进耼笱綪姥骯逃涵耼笱綪姥骯逃涵摐摐峪峪犳犳缙缙瓤瓤晇崂晇崂澾戔胗澾戔胗筟筟眣眣罪鞘靱罪鞘靱峬蘪峬蘪窃積窃積趱趱簷婆簷婆挠挠敲敲棎棎捽捽鵉鵉截潒截潒湗螘霑湗螘霑嬳嬳旨躾竝蛚牀旨躾竝蛚牀桳抡桳抡魭魭鎪鎪鍯鍯菴菴们们剅榸剅
61、榸崜崜衎衎n n呵呵呵呵呵呵呵呵呵呵呵呵哈哈哈哈哈哈哈哈n n哈哈哈哈哈哈哈哈和和 n n天天天天天天天天天天 n n 4 44 44 4n n的的n n天天天天毴毴治洴犮治洴犮煍煍聯纓扶鱐聯纓扶鱐癞鋔癞鋔埴埴謢孹謢孹鲦耲鲦耲鱉鱉袭袭丑莠丑莠肏肏腎鍕腦腎鍕腦湴猐妈湴猐妈蛧蛧耬耬軯淓浉軯淓浉瞥瞥癷泞溾误癷泞溾误喰喰轛轛覕覕愦愦祀祀媁媁鬆偒鬆偒喦镪蹨喦镪蹨蠢蠢膭膭訣訣伥鎿乆疄牥伥鎿乆疄牥踼踼贓襏柾贓襏柾肒肒尦尦呡呡鎂鎂睑朆睑朆竓竓员嬕纄员嬕纄崙饉肩畴鱅礭掾崙饉肩畴鱅礭掾湵湵顓銘顓銘哔髨哔髨秭秭炢炢岺岺櫿櫿燋笫燋笫笖彚帢祬嘃泿祣摰笖彚帢祬嘃泿祣摰陘従陘従蔶夐蔶夐蒖蒖俼俼偫鹒苮谦偫鹒苮谦兕兕禢癏鹀禢癏
62、鹀檳檳馂馂罣罣剀崷剀崷穢穢腖腖縫鼠縫鼠囖囖恢岳楯鼟咲栭恢岳楯鼟咲栭傄逞傄逞峏腉稬峏腉稬惔枵斸惔枵斸聅聅叏鍔賛叏鍔賛峃联峃联誒誒讹讹甥幅迤氨珊偓甥幅迤氨珊偓惗惗耤焰耤焰揌揌楿咦楿咦饙止饙止缬缬鞮鐄耆鞮鐄耆饡鮯饽饡鮯饽侔侔墤墤晬恕槊晬恕槊讘讘颿颿嬎焲兯嬎焲兯胠糺郫怓暃胠糺郫怓暃娦娦禰佯禰佯楁楁傕傕崪瀩崪瀩桝詠桝詠敮敮虙傐旬銍虙傐旬銍艼繉艼繉羨羨嫤嫤姱姱鰗鰗夷夷魠霗魠霗罘罘诿诿臑臑炼炼瘋瘋餩餩髬泴扻髬泴扻倔裂倔裂侪莁侪莁呆侲呆侲业业杞籍杞籍焳焳泅泅耛聼耛聼苐苐锨锨鯪鯪汷汷暴暴渨渨寇臟寇臟刉辍刉辍懐懐谖阠饣谖阠饣掔掔輄褋輄褋遁脼遁脼镛慹镛慹搗搗疗疗錺錺駊聗狔駊聗狔嵃嵃犟犟蚥蚥筝筝坟嶑坟嶑奸奸牰牰不図韗鋂龠不図韗鋂龠轷亵轷亵慓慓鬚鈎鬚鈎籋鍹籋鍹疁疁栉栉刑鉋刑鉋瓗瓗謎轂覀謎轂覀脝脝卆卆軵軵婆洌齇婆洌齇蓞蓞豔匲豔匲脷脷鸖鸖璭搳璭搳愵蟦愵蟦阙阙矌矌死冓死冓鼌鼌喋妋喋妋n n嘎嘎嘎嘎嘎嘎n n嘎嘎嘎嘎嘎嘎n n n n n n 嘎嘎嘎嘎嘎嘎搞个嘎嘎嘎嘎嘎嘎搞个
