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1、 TamoxifenTamoxifen作用后人乳腺癌作用后人乳腺癌 核基质雌激素受体的变化特性核基质雌激素受体的变化特性 TamoxifenTamoxifen（三苯氧胺）（三苯氧胺）: :乳腺癌内分泌治疗常用首选药物，通过乳腺癌内分泌治疗常用首选药物，通过靶细胞的雌激素受体靶细胞的雌激素受体（estrogen receptorestrogen receptor，ERER）起作用。肿瘤组织雌激素受体阳性起作用。肿瘤组织雌激素受体阳性的患者有效率为的患者有效率为65%65%左右。左右。核基质雌激素受体（核基质雌激素受体（nuclear matrix ERnuclear matrix ER， EmR
2、 EmR ）：核基质中与雌激素受体特异结合，）：核基质中与雌激素受体特异结合，调控靶细胞生物功能的接纳体。调控靶细胞生物功能的接纳体。 EmREmR含量尤其是相对含量（含量尤其是相对含量（ EmR/EnREmR/EnR）对反）对反映机体激素状态有重要参考价值。映机体激素状态有重要参考价值。研究目的研究目的：通过体外实验，观察通过体外实验，观察TamoxifenTamoxifen对乳腺癌细胞对乳腺癌细胞EmREmR的影响，探讨的影响，探讨EmREmR在内分泌治疗中的作用在内分泌治疗中的作用材料与方法材料与方法标本：新鲜手术切除标本均取自中山大学标本：新鲜手术切除标本均取自中山大学肿瘤医院，离体后
3、置液氮保存，病理证实。肿瘤医院，离体后置液氮保存，病理证实。主要试剂：主要试剂：3 3H-H-雌二醇雌二醇(2,4,6,7-(2,4,6,7-3 3H-estradiolH-estradiol，3 3H-EH-E2 2) )，NENNEN产品产品, ,放化纯度放化纯度98%98%，SASA为为2.96 2.96 TBq/mmol)TBq/mmol)。tamoxifentamoxifen,Sigma,Sigma产品产品。 细胞培养细胞培养：将组织剪碎至：将组织剪碎至1mm1mm3 3，0.05%0.05%胶原酶胶原酶 3737消化消化30min, 75030min, 750g g离心离心5min
4、5min，细胞尼龙网过，细胞尼龙网过滤，滤，RPMI-1640(RPMI-1640(含含10%10%小牛血清小牛血清) )培养，细胞浓度培养，细胞浓度为为1 12 210105 5cell/ml. cell/ml. TamoxifenTamoxifen体外作用体外作用：TamoxifenTamoxifen作用的终浓度分别设作用的终浓度分别设0.2.0.2.、0.4.0.4.、1.0 1.0 ug/mlug/ml，培养，培养2424小时小时. . 胞核悬液制备及核基质分离：胞核悬液制备及核基质分离： 匀浆匀浆 离心离心 消化消化 提取提取受体分析受体分析: :采用放射配体结合分析法（单点饱和结合
5、反应）。采用放射配体结合分析法（单点饱和结合反应）。 3 3H-EH-E2 2终浓度为终浓度为5.0nmol/L5.0nmol/L，滤膜法分离结合与游离，滤膜法分离结合与游离部分。部分。PackardTri-carb2900TRPackardTri-carb2900TR测量放射性计数测量放射性计数. . 数据处理数据处理：受体含量以受体含量以fmol/100ugDNAfmol/100ugDNA表示，统计学处理采用表示，统计学处理采用t t检验。检验。 结结果：果：乳腺癌组织与癌周组织乳腺癌组织与癌周组织EnR、EmR含量含量fmol/100ugDNAn=27EnREmREmR/EnR癌周组织癌
6、周组织11.935.125.203.140.430.21癌组织癌组织52.7432.4038.8921.550.640.231.1.乳腺癌组织与癌周组织乳腺癌组织与癌周组织EnREnR、EmREmR含量含量Tamoxifen不同剂量对不同剂量对EnR、EmR的影响的影响TAM不同剂量对不同剂量对EmR的影响的影响TAM浓度浓度ug/ml0.20.41.0EnR66.2340.1768.7051.2940.7133.14EmR42.9331.5545.2630.2031.7320.38EmR/EnR0.710.280.690.250.680.30小小 结结TamoxifenTamoxifen能影响核雌激素受体的表达，能影响核雌激素受体的表达，在低剂量时，在低剂量时，EnREnR、EmREmR均有明显升高，均有明显升高，可能是和可能是和TamoxifenTamoxifen促进胞浆促进胞浆ERER（EcREcR）的核内移有关的核内移有关. .高剂量时则可阻断高剂量时则可阻断ERER，使肿瘤细胞的生，使肿瘤细胞的生长抑制。长抑制。
