7500荧光定量PCR仪使用说明

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1、7500荧光定量PCR仪使用说明注意事项:依次打开电脑显示屏、主机,输入开机密码“ 7500”。实验过程必须戴干净的一次性乳胶手套进行操作。 PCR反应所用的96孔板、8联管或单管必须为ABI7500专用,凸盖PCR管禁止使用使用8联管两侧需用空管支撑,使用单管四角需用空管支撑,以防止板槽受力不均。实验数据用光盘刻录,禁止U盘拷取,数据可暂存于本机电脑硬盘中,各实验室D盘中有 指定文件夹,中心外部人员数据存于FUWU文件夹下的子文件夹中。操作步骤开机待电脑启动稳定后,按压7500仪器电源按扭,等待仪器启动(约30 s)。 专篆当仪器只显示Power状态指 示灯时,方可按压托盘以打 开它。放入反

2、应板按压此处注:关闭仪器托盘时,应按一个角度推压托盘的右侧。(以下过程按字母顺序a-q进行操作)创建反应板文件双击电脑桌面上SDS软件图标医J打开SDS软件;在对话框中选择Create New Document,或选择菜单栏File Newa.从Assay下拉列表中选择反应板类型反应板文件类型有以下几种:1.2.3-4.Relative Quantification (ddCt) Plate (相对定 量)Absolute Quantification (Standard Curve)(绝对定量,标准曲线)Allelic Discrimination (等位基因鉴别)Plus/Minus (阳

3、性/阴性实验)* b.为反应板文件命名c.单击Nextd.选择要添加到反应板 文件的探针(引物), 单击Add添加选中探 针e.如果在列表中未列出所需探针,请单击NewDetector创建新探针 f.单击 Next为每个反应孔指定探针和任务jA Jg. 选取探针相同的反应孔h. 点击反应孔对应的探针。i. 单击Task栏的下边指定探 针任务。j. 选择Use (使用)。通|k. 单击Finish (完成)。为反应孔设置样品名dBm m就混iNU剧 7500 Etern EDS DjhTaif& - atei (SEandard Cue)世 File ylev Tools nFtium&at A

4、nalysis Window Help讫9片Et|圆口围* ISTstttutVl.选取反应孔,直接输入相应样品名(也可右键,调出反 Well Inspector 对话框,在 Sample Name中进行修改)Tsaain设定PCR循环参数、运行程序厘 7500 Systems saftwara - Plate! (Standard cue)Q File yiej/工口口1$ Infirurnent Anlyis Windo-w HelpesuHsStatusEx七血d.EslinTSdsd Tine Km君ixung:TenperatTireS&njiLm:Covar:C/clfl51 a

5、踌:L Line:StM】:腿p:1-tsp.Thermal Cycler Pr tocnlThonnfil Pro fil*Aato ZncremeiLtAll Holii 砒 lon b1|SPnom.选择富Instrument选项卡,默认条件下显示标 篆准PCR条件,可跟据实 |验具体情况修改;缪n.单击 Add Dissociation j|*tage添加溶解曲线循环;o.修改PCR反应体积;p.将反应板文件保存至,指定路径。参苴*q.E点击Start运行程序结束实验1. 实验结束后关闭软件。(确认反应板文件数据已保存)2. 打开拖盘,将反应板取出,关闭拖盘。3. 按下7500仪器电源开关关闭机器。4. 关闭电脑及显示屏。5. 登记仪器使用情况。请严格按照仪器使用说明进行操作,如有不明之处或遇其他情况请及时联系仪器负责人.谢谢配合!

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