722S型分光光度计操作规程

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1、722S 型分光光度计操作规程检测中心作业指导书文件代号HNCDC/ QTD-第 4 版第 0 次修订第 1 页共 2 页722S 型分光光度计操作规程实施日期年月日1 目的为保证 722S 型分光光度计的正常运转，确保其出具的数据准确、牢靠，特制定本规程。2 适用范围本试验室现有 722S 型分分光光度计的使用和维护。3 职责仪器操作人员需严格依据此规程进展。4. 技术特性4.1 使用环境：4.1.1 仪器应放在枯燥的房间内，室温535 ，室内相对湿度小于 85%。4.1.2 使用时放置在结实平稳的工作台上，避开震惊，并避开阳光直射及猛烈电磁场干扰， 避开灰尘及腐蚀性气体。4.1.3电源电压

2、：22022V频率501Hz。4.1.4仪器外表宜用温水擦试，请勿使用酒精、丙酮等溶剂清洁。4.2 主要技术参数4.2.1 光学系统：衍射光栅 C-T 单色器。4.2.2波长范围： 340-1000 nm。4.2.3 光源：卤素灯 20 W/12 V。4.2.4 波长准确度：2 nm。4.2.5 波长重复性：1 nm。4.2.6透射比准确度：0.5% SRM930D4.2.7 透射比重复性：0.3% 4.2.8 光谱带宽：6 nm。4.2.9杂散光：0.5%360 nm，NaNO24.2.10显示标尺：T：0.0%199.9%A：-0.32.999F：19999C：099995 操作方法5.1

3、.1 预热：仪器开机后灯及电子部门需热平衡，故开机预热30 分钟才能进展工作，如紧急应用时请留意随时调整 0%T，调 100%T。5.1.2 调零：目的：校正根本读数标尺两端协作100%T 调整，进入正确测试状态；调整：开机预热后，转变测试波长时或测试一段时间，以及作高精度测试前；操作：翻开试样盖关闭光门或用不透光材料在样品室中遮断光路，然后按0%键，即能自动调整零位。5.1.3调整 100%T目的：校正根本读数标尺两端协作调零，进入正确测试状态；调整：开机预热后，更换测试波长或测试一段时间后，以及作高精度测试前。一般在调零前应加一次 100%T 调整以使仪器内部自动增益到位；操作：将用作背景

4、的空白样品置入样品室光路中，盖上试样盖同时翻开光门按下100% 键即能自动调整 100%T一次有误差时可加按一次；注：调整 100%T 时整机自动增益系统重调可能影响 0%T，调整后请检查 0%T，如有变化可重调 0%键一次。5.1.4 调整波长使用仪器上唯一的旋钮，即可便利地调整仪器当前测试波长，具体波长由旋钮左侧的显示窗显示，读出波长时目光垂直观看。注：本仪器因承受机械联动切换滤光片装置，故当旋钮转动经过 480 nm 时会有金属接触声， 如在 480-1 000 nm 间存在稍微金属摩擦声，属正常现象。5.1.5 转变试样槽位置让不同样品进入光路试样槽架是四位置的，用仪器前面的试样槽拉杆

5、来转变，翻开样品室盖以便观看样品槽中的 样品位置最靠近测试者的为“0”位置，依次为“1”、“2”、“3”位置。对应拉杆推向最内为 “0”位置，依次向外拉出相应为“1”、“2”、“3”位置，当拉杆到位时有定位感，到位时请前后轻轻推动一下以确保定位准确。5.1.6 确定滤光片位置本仪器备有削减杂光，提高 340-380 nm 波段光度准确性的滤光片，位于样品室内部左侧， 用一拨杆来转变位置。当测试波长在 340-380 nm 波段内如作高精度测试可将拨杆推向前见机内印字指示，通常可不使用此滤光片，可将拨杆置在400-1000nm 位置。注：如在380-1000nm 波段测试时，误将拨杆置在340-

6、380nm 波段，则仪器将消灭不正常现象。如噪声增加，不能调整 100%T 等5.1.7 转变标尺本仪器有四种标尺：透射比：用于对透亮液体和透亮固体测量透射特点；吸光度：用于承受标准曲线法或确定吸取法定量分析，在动力学测试时亦能利用本系统； 浓度因子：用于在浓度因子法浓度直读时设定浓度因子；浓度直读：用于浓度直读时，作设定和读出，亦用于设定浓度因子后的浓度直读；各标尺间的转换用模式键操作并由“透射比”、“吸光度”、“浓度因子”、“浓度直读”指示灯分别指示，开机初始状态为“透射比”，每按一次挨次循环。5.2 应用操作5.2.1 测定透亮材料的透射比预热-设定波长-置入空白-置标尺为“透射比”-确

7、定滤光片位置-粗调 100%T-调零-调 100%T-置入样品-读出数据-关机5.2.2 测定透亮材料的透射比曲线在要求测量的波段内按要求的间隔逐点按5.2.1 的步骤重复执行，并将各波长点对应透射比值标记在方格纸上即呈现该材料的透射比曲线。5.2.3 测定透亮溶液的吸光度预热-设定波长-置入空白-调 100%T、0%T-置标尺为“吸光度”-样品置入光路-读出数据-关机5.2.4 用标准曲线法对物质定量取含量的标准样品-按样品各自的分析规程制备样品溶液及背景溶液-设波长、置空白、调零、置“吸光度”、读出样品吸光度-重复上步读出各标准溶液吸光度-以各样品中含 量及读得吸光度绘制标准曲线-读未知样

8、品得吸光度，在曲线表上找出对应浓度，然后关机。5.2.5 直接使用浓度直读功能当对象分析规程比较稳定，在标准曲线根本过原点状况下，用户可不必承受手续较简单得标准曲线法，而直接承受浓度直读法定量，本方法仅需配置一种浓度在用户要求定量浓度范围2/3 左右的标准样品，操作如下：测出标准样品吸光度-置标尺为浓度直读-按或键使读数达含量值或含量值的 10n倍-置入未知样品溶液-读出显示值即含量值或含量值的10n 倍-关机5.2.6 直接使用浓度因子功能在上节执行第三步后如置标尺至“浓度因子”，在显示窗中消灭的数字即这一标准样品的浓度因子，记录这一因子，则在下次开机，测试时不必重测标准样品只需要输入这一因

9、子即可直读浓度，具体步骤如下：开机、预热、置波长、置背景溶液、调 0%、调 100%T-置标尺为“浓度因子”-按或键使显示值为输入因子数-置标尺为“浓度直读”-置入未知样品溶液-读出显示值即浓度值-关机6 期间核查程序6.1 概述722s 型分光光度计的根本原理是溶液中的物质在光的照耀下，产生了对光吸取的效应，物质对光的吸取是具有选择性的。各种不同的物质都具有其各自的吸取光谱，因此当某单色光 通过溶液时，其能量就会被吸取而减弱。因此，仪器的波长准确度对测定结果有直接影响。当仪器工作数日或搬动后，必需进展校验，以确保仪器的使用和测定的准确。6.2 期间核查方法6.2.1 使用标准物质进展核查选一

10、有证标准物质，依据标准方法用该仪器测定该标准物质中某参数。测得数据(应是平均值，与标准物质的数据相比较。判定公式：式中： y1核查时，用该仪器测得的标准物质中某参数的平均值；U1标准物质中该参数的值； yref试验室核查时供给的扩展不确定度，k=2; Uref标准物质证书中供给的该参数的扩展不确定度，k=2。当时为合格。6.2.2 承受仪器比对法进展核查当试验室有两台同类型测量设备时，可用被测对象(或核查标准进展测量，得到测量值分 别为 y1 、y2，其测量不确定度分别为 U1、U2。这两台设备应溯源到同一计量标准，它们之间具有肯定相关性，但在评定不确定度时可不予考虑。判定公式：式中： y1第

11、一台测量设备的测量值； y1其次台测量设备的测量值； U1第一台测量设备测量结果的扩展不确定度，k=2； U2第一台测量设备测量结果的扩展不确定度，k=2.当时为合格。6.2.3 核查仪器波长的准确性镨钕玻璃是一种含有稀有金属镨与钕的玻璃制品，它的光谱吸取特性是固定不变的。因此， 可以用镨钕玻璃核查仪器波长的准确性，作调整仪器波长时的依据。镨钕滤光片的特征吸取峰为 529nm。6.2.3.1 检查方法：1 先将波长盘指示在 580 nm，观看出射单色光为黄色，如不是，要调整波长螺杆使出射光为黄色。2 将波长指示转到 520.0 nm，光路空白时调整 1OO%，然后拉动拉杆将镨钕玻璃推入光路，测

12、定其吸取率，登记读数，再将波长盘转到 522、524、526、527、528、529、530、531、532、534、536 nm,这样依次逐点测定吸取率，登记读数。6.2.3.2 检验结果的判定：查出上述各点吸取率的最小值，观看波长读数是否为529.O3.O1nm，假设在这区间之内，说明波长根本正确，不用校正。如在这区间之外，需调整波长校正调整螺杆(只需略微转一点，再重复上述检定，直到符合允许误差范围为止。6.3核查周期六个月。7 维护程序及周期7.1 光源灯7.1.1 拿灯时不要碰窗口，以免手上的油污经紫外照耀后，形成结痕难以去掉,每当因不留神而碰触时，均应准时用无水乙醇抹擦干净。7.1.

13、2 每次均需待灯冷却后，再重启动。启动后预热15-30 min 才能读数。7.2 单色器7.2.1 寻常要放入变色硅胶，保持内部枯燥，觉察硅胶变红，应准时更换。每次测定挥发样 品必需使用密封吸取池，以免样品蒸气进入单色器，腐蚀反射镜、透镜及色散元件的镜面。7.2.2 每半年左右或搬动后应检查波长准确度等，以确保仪器性能正常。检查方法按运行检查程序。7.3 样品室7.3.1 样品室是存放吸取池的地方，为防止样品的穿插污染，决不行将样品留在样品室中过夜。7.3.2 每次用完的吸取池要放在中性肥皂水中(将十二烷基硫酸钠用蒸馏水配制成透亮的稀溶液，或放在 8 mol/L 盐酸加 45%V/V乙醇的等量混合液中浸泡，然后用自来水冲洗，再用蒸馏水洗净，放在无灰尘的地方凉干备用。假设急于使用，可在真空中抽干，但不要用热吹风吹干。7.3.3 每次盛过蛋白质和核酸的样品池最好使用非离子型清洗剂(如 triton浸泡。假设吸取池实在太脏，质量好的吸取池可放在洗液中稍加处理，但要随即取出冲洗，不宜浸泡过长的时间。洗液必需冲洗干净，由于它也有类似蛋白质和核酸的吸取光谱。7.4 比色皿比色皿每次用完后应马上用蒸馏水洗净，用软布或擦镜纸擦干，放于比色皿盒内。8 留意事项在测量过程中，因停电、停水、停气或仪器突然损坏，应即停机，待查明缘由后再重复测量， 标样和样品应重采集，以确保检验质量。