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1、(JiAbbkin&*htt p:/小分子蛋白（小于lOkDa）的分离解决方案对于大多数蛋白而言，标准的 SDS-PAGE 在下游应用，如 western-blot 之前能很好地分离 蛋白分子。但是如果目的蛋白为小分子量蛋白，如小于10kDa呢？这些小分子量蛋白，不结合 SDS （蛋白质分离中的关键组分），随着缓冲液迁移，并且不容易彼此分离。当分离小分子量蛋白时，你需要重新考虑凝胶的种类。如下建议，也许能够派的上用场！Tris-tricine 凝胶Tris-tricine 凝胶系统由 Shaggar 和 Von Jagow 发明，旨在分离小至 1kDa 的蛋白。Tris-tricine凝胶系统
2、使用2种不同的缓冲液:阳极缓冲液和阴极缓冲液,其含三甲基甘氨酸， 代替含有甘氨酸的单一电泳缓冲液。根据在凝胶中使用的丙烯酰胺的百分比，它们可以用于精 细地分辨ITOOkDa之间的蛋白。Tris-tricine 凝胶系统优势:Tris-tricine gels.使用含10T6.5%丙烯酰胺的凝胶，完美分辨ITOOkDa之间的蛋白;. 不需要添加尿素（尿素可以干扰下游反应，但添加尿素可以获得更高的分辨率）；. 不必担心凝胶过载；同样适用溶解在高离子强度溶液中的蛋白；. 在免疫印迹期间，蛋白能有效地转移出凝胶。详细的 Tris-tricine 凝胶制作、染色及转印过程见梯度凝胶顾名思义，梯度凝胶在整个凝胶中含有连续的线性梯度的丙烯酰胺。丙烯酰胺的浓度范围 可以在 3-30之间，但是你可以调整浓度以优化蛋白的分辨率。当蛋白通过增加的丙烯酰胺浓 度凝胶移动时，逐渐减小的孔径会阻止蛋白的移动。梯度凝胶被认为能：. 增强分辨率得到清晰的蛋白质条带. 在单一凝胶上分离不同分子量的复杂蛋白混合物制作梯度凝胶可能是棘手的，需要一个梯度凝胶装置浇注。然而，许多公司出售具有不同 范围的预倾倒梯度凝胶。Gai巧 kin htt p:/
