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1、黄芩含量测定方法（黄芩苷）黄芩为唇形科植物黄芩Scutellaria baicalensis Georgi 的干燥根。2005版中国药典一部采用高效液相色谱法测定其黄芩苷的含量，文献报道的含量测定方法较多，主要有高效液相色谱法、薄层扫描法和紫外分光光度法等。2d,?8V2c0p/0w-_7G 一、高效液相色谱法/j42X(,L3+b_3v 2005版中国药典黄芩含量测定项下：63|3Q4J,Ex5y$R!中国植物提取物论坛 色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-磷酸（47：53：0.2）为流动相；检测波长为280nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不得低于2500。1
2、W t7n,M#p4m8(Y$ 供试品溶液的制备：取本品中粉约0.3g，精密称定，加70%乙醇40ml，加热回流3小时，放冷，滤过，滤液置100ml量瓶中，用少量70%乙醇分次洗涤容器和残渣，洗液滤入同一量瓶中，加70%乙醇至刻度，摇匀。精密量取1ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。*m0X;b9u:c植提之家,植提空间,中国植提论坛,植提论坛,植提网 文献报道的采用HPLC法测定黄芩苷的含量，所用的色谱条件较多，按照常用的流动相系统介绍。中国植提论坛|植提网%I-H2R7u!1K#o A：甲醇-水-磷酸系统：+tf2rRF Waters 600 高效液相色谱仪；Shim-pac
3、k ODS C18柱（150mm6.0mm）；流动相为甲醇-0.4% 磷酸水溶液（45：55）；流速1.0ml/min；检测波长280nm。5L R.V8F)f 日本岛津LC-4A高效液相色谱仪；色谱柱: ZORBAX sb-C18 ( 4.6mm25cm )；流动相：甲醇-0.4% 磷酸( 11)；流速1.0mL/min；室温252；检测波长280nm。:w$R1Y*S8g:R中国植提论坛|植提网 waters-600 高效液相色谱仪；色谱柱: ODS C18 柱(610nm 150nm)；流动相：磷酸(1146)-乙腈(18：7)；流速1ml/min；检测波长277nm；柱温: 25。/e
4、!m0K+k2E4n4f:+植提之家,植提空间,中国植提论坛,植提论坛,植提网 Waters 515 高效液相色谱仪；色谱柱：HangBang C18 (200mm4.6mm, 5m)；流动相：甲醇-水-磷酸(47530.2)；检测波长280nm；流速为1.0mL/ min。中国植提论坛|植提网&e)J7w!k5P,s N.P 岛津LC-2010 高效液相色谱仪；色谱柱C18反相柱(150mm4.6mm)；柱温40；流动相：甲醇-水-磷酸(47530.2)；流速1.0ml/min；检测波长280nm。C+e)V2Y6S0H1中国植物提取物论坛 样品一般用甲醇、流动相、70%乙醇超声或回流提取，
5、也有蒸馏水为提取溶剂的。中国植提论坛|植提网5X6N#p8d-s)Z2H8?9V9t植提之家,植提空间,中国植提论坛,植提论坛,植提网6Q*S+X;i)f4t&a%m,|%eM B：甲醇-水-冰醋酸系统：&u5L$2l-O+d&V 液相色谱仪(美国光谱物理公司)；色谱柱: DiamonsilTM (钻石) C18反相柱( 4.6mm 250 mm,5m)；流动相：甲醇-乙腈-水-冰醋酸(25：22：75：1)；柱温室温；流速1.0 ml/min；检测波长为277nm。供试品溶液的制备：咳喘静糖浆用正丁醇5分3次萃取(以PbAC试液检查母液中黄芩苷为负反应) ,取上层液合并, 80水浴蒸干。残渣
6、加4ml甲醇溶解后通过柱层析(中性氧化铝, 100200目, 1cm) ,用15mL甲醇洗脱,收集全部滤液,蒸干,残渣用5mL甲醇溶解后,用甲醇定容至25mL。精密量取上述溶液3mL,用流动相稀释定容至10 mL,作为供试品溶液。（金虹，“高效液相色谱法测定咳喘静糖浆中黄芩苷含量的研究”，西南科技大学学报，2005，20（3）-H C.y7v d/y7z0Z5? a/g%e中国植物提取物论坛 HP-1100高效液相色谱仪(美国惠普公司)；色谱柱:ODS C18 柱(Zobax),粒径5m ,柱径4.5mm,柱长250mm；) 流动相:甲醇-水-醋酸= 45551；流速2.0ml/min；柱温4
7、0；检测波长:274nm。中国植提论坛|植提网!b*P&M*o#3u%X7 大连依利特P 200 液相色谱仪；色谱柱:十二烷基硅烷健合硅胶柱(25mm4.6mm)；流动相：乙腈-0.3%磷酸水溶液( 100：400)；检测波长203nm；流速1.0 ml/min ；柱温室温。7T$k2_*w&!Y.D*d7c+J6yW+U14G0 C：甲醇-磷酸二氢钠系统：中国植提论坛|植提网#R:P/v;X8y/l3-#A 岛津LC-10ATvp高效液相色谱仪；Shim-pack ODS C18柱（150mm6.0mm），流动相为甲醇-磷酸二氢钠（36：64），柱温50，检测波长为280nm。9l,X2o4
8、A.H(T1U$L Agillent1100 高效液相色谱系统；色谱柱：C18柱(4.6mm260mm)；流动相:甲醇-0.2mol/L 磷酸二氢钠(6040) ,用磷酸调pH至2.7；流速1.0mL/min；检测波长275nm；柱温室温。;v(H.H _9x&g/Ix/Q 另外，不常使用的HPLC条件，如：植提之家,植提空间,中国植提论坛,植提论坛,植提网R6g!W4F8p:w1C HP1100高效液相色谱系统；色谱柱: LUNA C18 (2)，4.6mm150mm，5m；检测波长为318 nm；柱温35；流速0.9mlmin。流动相梯度洗脱：09分钟，0.4%磷酸溶液：87%，乙腈：13
9、%；910分钟，0.4%磷酸溶液：8775%，乙腈：1325%；1020分钟，0.4%磷酸溶液：77%，乙腈：25%；2021分钟，0.4%磷酸溶液：7587%，乙腈：2513%。（陈长水，“梯度洗脱HPLC法同时测定双黄连口服液中绿原酸和黄芩苷含量”，安徽医药，2005，9(10)）中国植物提取物论坛 A9f*|&B;X()b Waters-515 型高效液相色谱仪；色谱柱: Lichrospher C18 ( 4.6200mm，5m)；流动相:甲醇-0.05%三氟乙酸(4753)；流速1.0mL/ min；柱温30；检测波长280nm。样品以75%乙醇为提取溶剂。（包贝华，“反相高效液相色
10、谱法测定清热消炎冲剂中黄芩苷的含量”，中国实验方剂学杂志，2005，11（4）6K-rY:Q*$Z(k#M中国植提论坛|植提网,(:E*b%f4v*a0a*V9植提之家,植提空间,中国植提论坛,植提论坛,植提网 二、薄层扫描法中国植物提取物论坛2f4U:O(L3f0T5U2q/r 谢玲等用双波长薄层扫描法测定芩柏烧伤液中黄芩苷的含量。采用CS-900双波长薄层扫描仪，硅胶GF254板，以氯仿-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（7：3：1：1）为展开剂，双波长反射线性扫描：S=297nm，R=365nm。样品用石油醚脱脂后，经过D101型大孔吸附树脂处理，收集40%乙醇洗脱液。1n:n $A/G&j!?0)
11、|4L 张武标等用薄层扫描法测定复方逍遥合剂中黄芩苷含量。采用Scanner 3 型薄层扫描仪，固定相为聚酰胺薄膜，以乙酸为展开剂，于275nm波长处测定吸收度。0b6j#T3z#p!t&e7R7P中国植提论坛|植提网:I.V9_%T4x&,J中国植提论坛|植提网 三、薄层-比色法+h.s/W8+|8s 王淑珍等用薄层-比色法测定中成药清喉咽合剂中黄芩苷的含量，采用CS120-02 紫外分光光度计(日本岛津公司)。固定相为聚酰胺薄膜上,以36%乙酸为展开剂,展开吹干后于紫外分析仪365nm下剪下黄芩苷,用二甲基甲酰胺洗脱至薄膜上无黄芩苷为止(荧光灯下检查) ,挥去二甲基甲酰胺,用50%乙醇溶解
12、至10ml,测定吸收度。样品采用单渗滤法用57%乙醇浸渍。实验操作中,注意点样要集中,剪取谱带要完全。中国植物提取物论坛,B%5o9W4a-A2h%dD*N6|B3/J 四、紫外分光光度法87P80q1kS中国植提论坛|植提网 张涛等采用络合物萃取-紫外分光光度法测定平痤散中黄芩苷的含量。采用751-GW型分光光度计，测定方法与条件为：精密量取对照品溶液适量(含黄芩苷180g以内)，置分液漏斗中并加水稀释至15ml,依次精密加入0.05%硫酸铜溶液4ml,氨水溶液3ml,2.4%溴化十六烷基三甲铵溶液3ml混匀以形成络合物,精密加入正丁醇10ml振摇萃取3min,加4ml饱和氯化钠水溶液破乳；放置分层后取正丁醇层离心,用干燥滤纸过滤,以取对照品溶液0.0ml的正丁醇萃取液为空白,在2035左右于(2621)nm 处测定吸收度。
