《WATERS_2695操作流程.doc》由会员分享,可在线阅读,更多相关《WATERS_2695操作流程.doc(3页珍藏版)》请在金锄头文库上搜索。
1、WATERS 2695仪器操作简明流程2695分离单元使用操作:1)开机自检打开电源开关,仪器开始自检(4-5min),待屏幕上方出现“Idle”字样表示自检成功。2)脱气(Degas)按面板右下方“Menu/Status”键进入“Status(1)”界面,移动光标至“Degasser Mode”,按Enter选择“On”,打开在线脱气。3)设定柱温(可选项)在“Status(1)”界面,移动光标至“Col Htr Set”,输入目标温按Enter即可。(可在工作站方法中设置)4)Prime Seal Wash(清洗柱塞杆)按“Menu/Status”键回到“Menu”界面,按下排功能键“Di
2、ag”,然后再按下排功能键“Prime Seal Wsh”,“Start”,冲洗12min后,“HALT”,“CLOSE”。5)Wet Prime在“Status(1)”界面中“Composition”下,选择将用到的溶剂通道为“100%”,按液晶屏幕右下角“Direct Function”键,移动光标选择“2 Wet Prime”,“OK”,流速及时间可使用默认值,也可自行设定(如:5ml/min,3min),“OK”即可。将每一个会用到的溶剂通道按照上述操作一次。6)Purge Injector(注射器排气泡及清洗)进入“Direct Function”界面后,选择“3 Purge Inj
3、ector”,“OK”,默认数值为6,“OK”。7)Prime Needle Wash(清洗注射针)进入“Diagnostics”界面,按下排功能键之“Prime Ndl Wsh”,“Start”,默认30秒钟,“Close”,即可返回“Diagnostics”界面。注:以上4)-7)为溶剂系统前处理过程,建议每天开机后依次进行。若发现注射器中有气泡,则可重复6)直至排除。如果流动相中含有盐类,则实验结束后必须用水清洗柱塞杆(即操作4)。8)平衡柱子在“Status(1)”界面上,按流动相比例设定各通道溶剂比例后,再Wet Prime操作一次,然后设置流速,平衡色谱柱30-60min。9)放置
4、样品拉开样品转盘舱门,将盛有待测样品溶液的样品瓶放入转盘中,记下样品瓶号,关上舱门。10)检测样品打开工作站,设置仪器方法、方法组、自动进样序列等,监视基线、检测样品。11)分析处理数据、打印报告12)清洗注射器、针、柱塞杆参见上述4)、7)。13)清洗色谱柱用水冲洗柱子40-60min(视柱子规格不同,流速通常1ml/min);然后用甲醇或乙腈冲洗柱子40min(流速1ml/min)。14)关机关掉电源开关。1、检测器波长范围:190-700nm2、可以进行紫外扫描(scan),参考媒体播放3、清洗柱塞杆的溶剂可以用水,或5%-10%甲醇(抑菌)4、清洗针的溶剂可以根据样品溶解性选择,如甲醇
5、,或异丙醇-水(1:1)5、清洗柱塞杆操作“prime seal wash”“start”后,看有溶液流出,持续一段时间后,按下“HALT”,“CLOSE” 冲洗1-2min即可,1次。可以每天开机后进行,或结束实验时进行。流动相中有盐,结束实验时一定要清洗。仪器不自动进行。6、每次仪器打开后,会自动进行的操作有:start up diagnostics; waters alliance seperations module, rev2.03,initializing;initializing needle syringe; initializing carousels; initializi
6、ng solvent system; idle(在屏幕上有显示)7、实验结束后要purge injector”,1次即可,包括了“purge sample loop”。8、在线脱气机打开后,开始时运行加速,使压力很快降到1.0psi以下,然后维持在0.5psi左右。9、怀疑管路堵塞可卸下单向阀、在线过滤器进行清洗。单向阀安装注意方向。10、本仪器配置注射器体积250ul,样品环100ul。可在“CONFIG”中查看。11、样品环体积可换;但同时注射器体积也应匹配。注射器体积有25、100、250、2500等。12、在检测器中“DIAG”中可以查看“sample energy”、“referen
7、ce energy”等参数,了解紫外灯的使用情况。13、检测器要经常用“SHIFT m滤膜过滤过的甲醇冲洗15min-30min即可达到清洗目的。m+3”来校正波长,保证其准确性。每1-2周检查1次。先清洗检测池。清洗检测池可以在线进行,不用卸下;具体操作是,用双向接头替代色谱柱,流速设置为1ml/min,用0.4514、2台仪器可以共用一个工作站(工作站升级为多系统);但2台仪器不能同时用一个项目采集样品。15、基线平衡后纵坐标可达到小数点后第4位(很平稳)。16、可单针自动进样,也可以成组进样;成组进样需要编辑样品组方法(包括瓶号、样品名、进样体积、进样次数、功能、方法组/报告方法、下一针
8、延迟等)。样品组方法可保存、调用。(ctrl +D可以用于列复制是“下同”之意。)17、样品组方法里的“功能”一项,有“平衡”及“平衡色谱柱”两个选项,其功能不同;若仪器方法选用梯度,用“平衡色谱柱”可以在进样前运行梯度来平衡柱子;而如果选用“平衡”则只是按照初始梯度条件等度平衡柱子。(当然,如果是用等度的流动相条件,则两者没有区别)18、编辑仪器方法时注意:1)2695“通用”标签下,“单次输送体积”数值根据流动相流速不同有别:流速0.3时,选25;流速在0.3-1.0时,选50;流速1.0时,选100。“针头深度”除样品瓶选用内插管时设为2,其余均用默认值0。2)“脱气”标签下,“脱气模式
9、”选择“开”即可。19、注射器中的气泡快速有效排除方法:可以小心的卸下注射器抽吸甲醇排除气泡后,注射器中保留少量溶剂,做“purge injector”小心安装上,再做几次“purge injector”观察没有气泡即可。其他方法,如WATERS 工程师讲可以在“purge injector”开始后、注射器杆向上时,拧掉下边螺丝,上下抽推排除气泡。溶剂用甲醇较好;不用同时拧掉上方注射器。20、检测器开机自检结束时有时会提示“calibration differs.521nm”,这是仪器自检后提示与上一次自检结果有出入,原因很多,可能是检测池中有小气泡,检测池污染,也可能是流路中溶剂有变动。分析原因,清洗检测池,排气泡,或者请工程师帮助。21、要注意样品瓶中死体积大小,防止供试液体积不足,针头吸不到。