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1、北京创新通恒科技有限公司LC6000型高效液相色谱仪使用SOP1. 目的与意义 规范LC6000型高效液相色谱仪的使用操作，保证高效液相色谱仪测量结果的准确性。2. 责任 质量分析人员全面负责本SOP的实施。3. 仪器的组成 本系统由P6000高压输液泵、UV6000紫外检测器(190700 nm)、Rheodyne 7725i手动进样阀、CXTH-3000色谱工作站等组成。4. 操作步骤4.1 准备4.1.1 准备所需的流动相，用合适的0.45m滤膜过滤，超声脱气15-30min。4.1.2 根据待检样品的需要更换合适的色谱柱（注意方向）。4.1.3 配制样品和标准溶液，用合适的0.45m或
2、0.22m滤膜过滤。4.1.4 用串口线将设备与计算机连接好。4.2 开机接通电源，依次开启泵、检测器开关，打开计算机进入winXP操作系统，双击桌面的CXTH-3000(中文版)图标进入色谱工作站。4.3 检查反控 在CXTH-3000工作站的仪器控制面板上更改最大压力和检测波长等，观察仪器上相关数据的变化，确保设备与计算机连接好，反控正常。4.4 创建分析方法可在CXTH-3000工作站的仪器控制面板上直接设置流动相比例、流速、最大压力限、最小压力限、检测波长、时间程序以及检测器开启与关闭等参数，亦可在泵和检测器上完成相应的设定。4.5 排气泡将入液管放入装有流动相的储液瓶中，打开排气阀；
3、用针管等在排气阀处吸出空气，之后打开泵，用大流速冲洗片刻；如管路中仍有气泡，则重复以上操作直至气泡排尽。4.6 平衡系统 用流动相（梯度系统选用初始梯度平衡柱子）冲洗柱子至基线平稳，一般需要大于20分钟至1小时，使用缓冲盐、离子对试剂的时候可能会更长。 4.7 进样 在控制面板上点击AutoZero键调零（在时间程序页面下可以设置进样后自动归零）；用进样针定量吸取样品溶液，在LOAD状态下推针进样，再顺时针转动进样阀手柄至INJECT状态即完成进样操作，谱图采集直接触发。4.8 保存谱图谱图采集结束后，可设置手动或自动保存数据，注意谱图参数中的采集时间一定要大于或等于实际采集时间，否则谱图采集
4、将提前结束。4.9 报告输出与打印 单击工具条上面的打印按钮，即可输出报告（推荐使用写字板格式），报告头和报告尾可以在分析报告标签下设置，也可以打印好后再进行设置。4.10 实验后注意冲洗色谱柱，妥善保存。5. 注意事项5.1 流动相及样品溶液必须用0.45um滤膜过滤，流动相还要进行脱气处理。5.2 进样量最好不要大于定量环体积，5.3 试验结束后，停泵，待泵的压力逐步降为0后，方可关闭泵的电源。5.4 仔细阅读色谱柱说明书，保证色谱柱系统的适应性（如流动相pH 2-8等）。5.5 如流动相中含有缓冲盐，实验前需要用含有5%甲醇或乙腈的水冲洗柱子约20-40min，再过渡到纯有机溶剂，冲洗20min以上，保存柱子。同时，在整个实验过程中，要使用泵头冲洗装置，保证水不能干涸。
