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1、一、兔的抓取及保定1.准备的物品、器械：固定器2.简要：（1）徒手抓取 （2）保定3.解说操作：3.1徒手抓取用一只手将颈部的被毛和皮肤一起抓住提起，另一只手托住臀部。（如图1）。也可一手抓住兔肩胛部的皮肤，另一手托住其臀部并将兔的头部放置于臂弯中，再用前臂支撑兔体。3.2 保定3.2.1将兔放在操作台上，用一只手抓住颈背部皮肤（包括兔耳），另一只手压住腰部（或后肢）加以保定，可用于肌肉注射、灌胃等操作。3.2.2 将兔放在操作台上，用左手抓住颈背部皮肤，使兔下半身固定在操作者左臂下方，用右手环抱兔前肢，适用于孕兔灌胃等操作。如图2。3.2.3盒式保定法：将兔放入兔保定盒内，盖上盖，使兔头露在
2、盒外，便可进行采血或注射给药等操作。3.2.4保定板保定：将兔仰卧或俯卧在保定板上，用布带保定，四肢和头部也用布带保定，即可进行心电图检查、注射给药、采血等操作。4.注意事项4.1 盖兔盒时必须要轻，不能用力压，否则兔脊椎骨很容易骨折，造成下肢瘫痪。4.2 将家兔放回兔笼时，先将臀部及后肢放入笼内。4.3 抓取时禁止抓提兔耳。4.4 抓取要稳、准、柔、快，不可过分用力抓捏腰腹部。二、兔的采血方法1.准备的物品、器械：注射器、采血管、止血带、酒精棉球、干棉球、保定架等2.简要：耳静脉采血、耳动脉采血、后肢静脉采血、心脏采血3.解说操作3.1耳缘静脉或耳动脉采血3.1.1 将兔保定于保定器内，用酒
3、精棉球擦拭消毒。3.1.2助手固定兔耳，并压迫耳缘静脉根部，使血管充盈；操作者手持注射器，针头沿耳缘静脉平行刺入血管，慢慢抽取血液。3.1.3 助手固定兔耳，操作者手持注射器，在耳中央动脉末端，使针头沿血管平行方向刺入动脉，血液即可流入注射器内。3.1.4 采血完毕后立即用消毒干棉球压迫止血。3.2后肢静脉采血3.2.1 兔固定于兔保定架上，剪去胫部被毛，股部扎上止血带，使胫外侧皮下静脉充盈。3.2.2 固定静脉，用左手两指固定好静脉，右手取带有针头的注射器内皮下静脉平行方向刺入血管，抽一下针栓，如血进入注射器，表示针头已刺入血管，即可取血。取血后要长时间压迫止血，一般取血量为25mL。3.2
4、.3 取完后必须用棉球压迫取血部位止血，时间要略长些，因此处不易止血。如止血不妥，可造成皮下血肿，影响连续多次取血。3.3心脏采血3.3.1 将兔仰卧保定在保定台上，胸左侧心脏部位剪毛、酒精棉球或碘伏消毒。3.3.2 在第3、4 肋间胸骨左缘3 mm 处穿刺，针头刺入心脏后，持针手可感觉到兔心脏有节律的跳动，血液会自然进入注射器。3.3.3 此时如果抽不到血，可以前后进退调节针头位置，切不可使针头在胸腔内乱探，以防刺伤兔的心、肺，可以拔出重新穿刺。3.3.4 采血完毕后立即用干棉球按压止血。4.注意事项4.1采血前应充分扩张血管，可使用酒精棉球反复擦拭或使用温水扩张或用手指轻弹扩张血管。4.2
5、采血时应先从远心端开始进针，然后逐渐朝近心端推进，进针角度一般045。4.3采血时应注意血液流出是否顺畅，若不顺畅可用棉球沿血管轻擦，以扩张血管。4.4 采血结束后应用干棉球按压进针部位进行止血。三、兔给药方法1.准备的物品、器械：剃毛器、玻璃纸、纱布、胶布或弹性绷带、酒精棉球、干棉球、生理盐水、注射器等2.简要：皮肤给药、皮下给药、肌肉给药、灌胃、静脉给药等3.解说操作3.1皮肤给药3.1.1给药前准备相关物品，包括剃毛器、玻璃纸、纱布、胶布或弹性绷带、注射器等。3.1.2 核对动物编号及组别，抓取和保定动物。3.1.3 给药部位：一般选择脊柱两侧背部皮肤，试验有特别要求除外。给药前去除背部
6、约3cm3cm 大小的被毛，注意不要损伤皮肤。3.1.4 取相应剂量的受试物均匀涂抹在去毛处约2.5cm2.5cm 大小的皮肤上，先用一层玻璃纸覆盖给药部位，再用纱布覆盖，然后用无刺激性胶布或弹性绷带固定。给药时胶布的固定的松紧程度应合理，应确保能将药物固定于兔皮肤而又不导致动物窒息。3.1.5 固定数小时后，除去受试物，并用温水或无刺激性溶剂清洁给药部位皮肤。4.6 如果实验需要破损皮肤，则在给药前，用消毒针在敷药部位皮肤划一“井”字，或用砂纸在敷药部位皮肤摩擦，以皮肤表层损伤为限。4.7 记录操作时间。若是长期毒性试验，可记录每组动物给药开始时间和结束时间。4.8 如果受试物为固体/粉剂，
7、敷药前先用适量水或其它赋形剂调成糊状，以保证药物与皮肤充分接触。4.9经皮给药前须将动物给药部位的毛发去除干净，根据实验的要求可使用剃毛器或脱毛药品进行除毛。3.2皮下给药3.2.1注射前准备相关物品，包括剃毛器、注射器、注射针头、酒精棉球、干棉球等。3.2.2 核对动物编号及组别，抓取和保定动物。3.2.3 根据实验要求，可选择肩胛间的颈背部或腹部等部位皮肤注射。注射前除去被毛，再用酒精棉球消毒注射部位皮肤。3.2.4 抽取相应量的药液，排尽针管内的空气；操作者一手提起家兔的注射部位皮肤，使其皱折成三角体，另一手持注射器自皱折下方刺入皮下，平行进针一段距离，刺入后针头可左右摆动，表示已进入皮
8、下，便可缓慢推注，根据试验需要进行下一只动物的给药操作。3.2.5 注射给药完毕，及时记录给药时间。若是长期毒性试验，可记录每组动物给药开始时间和结束时间。3.2.6 当针头刺入皮下时应回抽注射器，避免注射入皮下血管内。注射完毕后为避免药物流出，可用干棉球按压注射部位数秒。3.2.7 给药量：每个注射点常用给药体积为1.0 mL/kg，每个注射点最大给药体积为2.0mL/kg。3.3肌肉给药3.3.1注射前准备相关物品，包括剃毛器、注射器、注射针头、酒精棉球、干棉球等。3.3.2 核对动物编号及组别，抓取和保定动物。由助手一手固定兔两前肢，另一手固定两后肢。或用固定器固定。3.3.3 剪去注射
9、部位被毛，用酒精棉球消毒皮肤。3.3.4 抽取相应量的药液，排尽针管内的空气，一次一侧注入量1 mL/只。3.3.5股四头肌注射给药：操作者一手固定给药部位，另一手持注射器垂直刺入肌肉内，回抽无血，即可进行注射，如果有回血，应拔出针头，更换部位后重新进针，避免误将药物注射入血液中。3.3.6臀部肌肉注射给药：操作者一手绷紧注射部位附近皮肤，另一手持注射器与皮肤表面成约60o 角刺入肌肉，针头刺入深度约1cm，如果回抽无血，即可缓慢进行注射；如果有回血，应拔出针头，更换部位后重新进针。3.3.7 注射完毕，迅速拔出针头，用干棉球按住注射部位片刻，以防止药液漏出。3.3.8 记录注射时间。若是长期
10、毒性试验，可记录每组动物给药开始时间和结束时间。3.3.9 多次肌肉注射给药时，除试验特殊要求外，应在左右两侧后肢肌肉轮流注射。应注意避免伤及坐骨神经。3.3.10 如果进行局部刺激性试验，注射部位应相对固定3.4灌胃3.4.1灌胃前准备相关物品，包括注射器、导管、药液、开口器及装有清水的烧杯等。3.4.2 核对动物编号及组别，按SOP-T-Ad-02 抓取和保定动物，使食道伸直。3.4.3 抽取相应量的药液，排尽针管内的空气。3.4.4操作者将开口器由兔嘴角插入，由前向后旋转，横放在兔子上下颌之间，固定在舌面上；将导管经开口器中央的小孔插入，慢慢沿上腭壁插入食道约15 cm18 cm达胃内；
11、插入过程要随时观察兔的反应，防止导管插入气管或盘旋于咽部；导管通过咽部时，兔会有轻微吞咽动作，但不会剧烈挣扎。3.4.5将导管外口端放入清水中片刻，如水中无气泡逸出，即可套上注射器，开始缓慢注入药液，观察兔若无挣扎，可以迅速注入余下药液；如清水中有气泡逸出，表明可能插入气管内，应拔出重新插入。3.4.6 注完药液后，捏住导管外口，拔下注射器，抽3 mL5 mL 纯净水，然后重新套入导管，注入纯净水，将导管内残留的药液全部冲入胃内。3.4.7 药液注完后，先迅速拔出导管，然后取出开口器。3.4.8记录给药相关内容，根据试验需要进行下一只动物的给药。3.4.9 一次给药量：最大给药体积15 mL/
12、 kg。3.4.10 给药先从溶媒对照组开始，再从低剂量至高剂量，最后再进行市售品/阳性对照组。3.5静脉给药3.5.1注射前准备相关物品，包括保定器、注射器、注射针头或头皮针、酒精棉球、干棉球等。3.5.2 核对动物编号及组别，抓取和保定动物。3.5.3 抽取相应量的药液，排尽针管内的空气。3.5.4 后肢小隐静脉给药：用酒精棉球消毒注射部位皮肤，左手压迫后肢注射部位上方近心端血管，使血管充盈；右手持注射器，将针头插入静脉，回抽若有回血，左手即放松，缓慢推注药液。3.5.5耳缘静脉给药：用酒精棉球轻轻擦拭耳缘静脉注射部位，使静脉清晰可见；一手固定耳廓边缘部位，另一手持头皮针或注射器，针头斜面朝上，将针头由耳尖部刺入静脉，见回血后缓慢注入药液。3.5.6注射进针应尽可能从耳缘静脉远心端开始，如果推注困难、滴注不畅或注射部位发白或局部组织肿胀时，表明注射失败，应停止注射并拔出针头，向近心端移动重新注射。3.5.7 如果静脉不充盈或不清晰，先剃除注射部位皮肤被毛，可使用温水扩张兔耳局部血管，或使用酒精棉球反复擦拭等方法使血管充盈。3.5.8静脉注射给药量：1 mL/kg 5 mL/kg。3.5.9 注射完毕后，迅速拔出针头，用干棉球/棉签压迫止血，填写相关记录。3.5.10记录注射时间。若是长期毒性试验，可记录每组动物给药开始时间和结束时间。
