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1、沙门氏菌鉴定检验原始记录第 1 页 共 1页记录编号：WJ-受理编号受检单位样品名称检验依据GB4789.4-2010食品国家安全标准 食品中卫生微生物学 检验沙门氏菌检验收样日期20年 月 日检测仪器HHB11-420型电热恒温培养箱编号0253J0484型奥林巴斯 显微镜编号：032）、TN-100B型托盘式扭力天平（编号：001）检验日期20年 月 日检测项目沙门氏菌1.前增菌：（20年 月 日）取检样加入含BPW225mL的均质杯中，以r/min均质 min,转入锥形瓶C培养 h；2增菌：（20 年 月 日）轻轻摇动培养过的样品混合物，移取1 mL,转种于10 mL TTB内，于C培养
2、h。同时，另取1 mL,转种于10 mL SC内，于C培养h；3分离：（20 年 月 日）分别用接种环取增菌液1环，划线接种于一个BS琼脂平板和一个XLD琼脂平板。于C分别培养_h （XLD琼脂平板）h （BS琼脂平板），观察各个平板上生长的菌落，BS上可疑菌落形态：菌落颜色：黑色有金属光泽棕褐色灰色灰绿色周围培养基：呈黑色或棕色不变口其它：XLD上可疑菌落形态：粉红色黄色黑色中心全部黑色的菌落其它：4生化试验：（20 年 月 日）自选择性琼脂平板上分别挑取个典型或可疑菌落，接种三糖铁琼脂，先在斜面划线，再于底层穿刺； 接种针不要灭菌,直接接种赖氨酸脱羧酶试验培养基、蛋白胨水（供做靛基质试验）
3、尿素琼脂（pH7.2）、氰化 钾（KCN）培养基和营养琼脂平板，于C培养 h,将已挑菌落的平板储存于室温保留24 h,以备必要时 复查。反应结果见表1、表2,表3为补做试验。表1在三糖铁琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基内的反应结果三糖铁琼脂赖氨酸脱羧酶试验 咖氓甘培养基初步判断斜面底层产气硫化氢注：K：产碱，A：产酸；+：阳性，一：阴性；初步判断：可疑沙门氏菌属或非沙门氏菌。表2生化反应初步鉴别表硫化氢（H2S）靛基质pH7.2尿素氰化钾（KCN）赖氨酸脱羧酶反应序号（判断）注：+阳性；一阴性；+/ 阳性或阴性；反应序号（判断）：A1、A2、A3或非沙门氏菌。表3补做试验（选做）甘露醇山梨醇0NP
4、G结果判断注：+：阳性，一：阴性；结果判断：沙门氏菌或非沙门氏菌。5血清学鉴定：（20 年 月 日）玻片上划出2个约lcmX2cm的区域，挑取1环待测菌，各放1/2环于玻片上的每一区域上部，在其中一个 区域下部加1滴多价菌体（0）抗血清，在另一区域下部加入1滴生理盐水，作为对照。再用无菌的接种环或 针分别将两个区域内的菌落研成乳状液。将玻片倾斜摇动混合1min，并对着黑暗背景进行观察。血清凝集结果： （+或-）7结果：（20 年 月 日）沙门氏菌。沙门氏菌1. 前增菌：（20 年 月 日）取检样加入含BPW225mL的均质杯中，以r/min均质min,转入锥形瓶_C培养_h；2. 增菌：（20
5、 年 月 日）轻轻摇动培养过的样品混合物，移取1 mL,转种于10 mL TTB内，于C培养h。同时，另取1 mL,转种于10 mL SC内，于C培养h；3. 分离：（20 年 月 日）分别用接种环取增菌液1环，划线接种于一个BS琼脂平板和一个XLD琼脂 平板。于_C分别培养_h （XLD琼脂平板）_h （BS琼脂平板），观察各个 平板上生长的菌落，BS上可疑菌落形态：菌落颜色：黑色有金属光泽棕褐色灰色灰绿色周围培养基：呈黑色或棕色不变口其它：XLD上可疑菌落形态：粉红色黄色黑色中心全部黑色的菌落其它：4. 生化试验：（20 年 月 日）自选择性琼脂平板上分别挑取_个典型或可疑菌落，接种三糖铁
6、琼脂，先在 斜面划线，再于底层穿刺；接种针不要灭菌直接接种赖氨酸脱竣酶试验培养基、蛋 白月东水（供做靛基质试验）、尿素琼脂（pH7.2）、氧化钾（KCN）培养基和营养琼 脂平板，于_C培养 _h，将已挑菌落的平板储存于室温保留24 h，以备必要时 复查。反应结果见表1、表2，表3为补做试验。表1在三糖铁琼脂和赖氨酸脱竣酶试验培养基内的反应结果三糖铁琼脂斜面底层产气硫化氢赖氨酸脱竣酶试验培养基初步判断注：K产碱，A：产酸；+：阳性，一：阴性；初步判断：可疑沙门氏菌属 或非沙门氏菌。表2生化反应初步鉴别表硫化氢（H2S）靛基质pH7.2 尿素氰化钾（KCN）赖氨酸脱羧酶反应序号（判断）注：+阳性；一阴性；+/ 阳性或阴性；反应序号（判断）：Al、A2、A3 或非沙门氏菌。表3补做试验（选做）甘露醇山梨醇ONPG结果判断注:+：阳性，一：阴性；结果判断：沙门氏菌或非沙门氏菌。标准规定结果判断沙门菌不得检出检验人：复核人：
