《白细胞分类计数》由会员分享，可在线阅读，更多相关《白细胞分类计数（6页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、东莞常平医院 临床检验实验室文件编号：DGCPH-CL-SOP-07-04白细胞分类计数（手工法）版序：2005-1页码：第1页，共5页测定原理把血液制成细胞分布均匀的薄膜涂片，用复合染料构成的染色液染色，血片中的细胞由于内容物不同，而被染成不同的颜色，根据各类白细胞形态特征予以分类 计数，得相对比值（百分率），以观察数量、形态和质量的变化，对疾病有辅助诊 断意义。试剂及仪器（一）染色液1瑞氏一姬姆萨复合染色液I液 取瑞氏染粉1G、姬姆萨染粉0.3g，置洁净研钵中，加2 ML丙三醇 和少量甲醇（分析纯），研磨片刻，吸出上层染液。再加少量甲醇，继 续研磨，再吸出上清液。如此连续几次，共用甲醇50
2、0mlo收集于棕 色玻璃瓶中，每天早、晚各振摇3min,共5天，以后存放一周即能 使用。II液 pH6.46.8磷酸盐缓冲液 磷酸二氢钾（无水）6.64g 磷酸氢二钠（无水）2.56g 加少量蒸憎水溶解，用磷酸盐调整pH,加水至1000ml。2. 快速染色液 I液： 磷酸二氢钾6.64g 磷酸氢二钠2.56g 水溶性伊红Y 4g（或伊红B2.5g） 蒸纟留水1000ml 石炭酸40ml 煮沸，待冷备用。II液 亚甲蓝4g 蒸纟留水1000ml 蒸纟留水1000ml 高镒酸钾2.4g 煮沸，待冷备用。东莞常平医院 临床检验实验室文件编号：DGCPH-CL-SOP-07-04白细胞分类计数(手工法
3、)版序：2005-1页码：第2页，共5页3. 30s快速单一染色液贮存液瑞氏染粉2.0g姬姆萨染粉0.6g天青E 0.6g甘油10.0ml聚乙烯D比咯烷酮(PVP) 20.0g(或曲拉通X-100 3ml)甲醇1000ml磷酸盐缓冲液(PH6.2-6.8) 磷酸二氢钾6.64g 磷酸氢二钠0.26g 石炭酸4.0ml 蒸馏水加至1000ml 应用液l液、2液按3：1比例混合放置14天后备用。(二) 显微镜。(三) 计数器。标本的采集取手指血或静脉血1.0ml，置于抗凝管中(2%EDTAK2 )摇匀待检。或直接未梢 取血涂成血片。操作步骤1. 采血后推制厚薄适宜的血膜片，血膜应呈舌状，头体尾清晰
4、可分。2. 推好的血膜在空气中晃动，以促使快干。天气寒冷或潮湿时，应于37 C温 箱中保温促干，以免细胞变形缩小。3. 染色：(1) 瑞氏一姬姆萨复合染色液染色置玻片于染色架上，滴加染液35滴，使其迅速盖满血膜，约1min后, 滴加缓冲液5 一 10滴，轻轻摇动玻片或对准血片吹气，与染液充分混和，5 一 10min后用水冲去染液，待干。东莞常平医院 临床检验实验室文件编号：DGCPH-CL-SOP-07-04白细胞分类计数(手工法)版序：2005-1页码：第3页，共5页(2).快速染色液染色把干燥血片浸入快速染色液的I液中30s，水洗，再浸入II液30s，水洗待干。注：本染色法除了能快速用于急
5、症外，对玻片质量要求也不高。随着染 液多次使用，可适当延长染色时间或更换新液。(3). 30s快速单一染色液染色 将染液铺满血膜或将血片浸入染色缸内，30s后用自来水冲洗。注:加表面活性剂PVP可增加染料的溶解度并起稳定作用，加入天青E 可缩短染色时间。4. 选择涂片的体尾交界处染色良好的区域，在油镜下计数100个白细胞，按其 形态特征进行分类计数，求出各类细胞所占比值(百分率)。参考范围中性杆状核粒细胞(N)： 1-5% 中性分叶核粒细胞(N)： 50-70% 嗜酸性粒细胞(E)： 0. 5-5% 嗜碱性粒细胞(B)： 0-1% 淋巴细胞(L)： 20-40% 单核细胞(M)： 3-8%临床
6、意义(1) 中性粒细胞(N)中性粒细胞具有游走性和吞噬作用。增高见于：a.急性感染和化脓性感染：肺炎、败血症、脓肿等。b. 组织损伤：大手术后、心肌梗塞、肺梗塞等。c. 恶性肿瘤：急、慢性白血病、淋巴瘤等。d. 各种中毒：尿毒症、糖尿病酸中毒等。 减少见于：a.某些传染病：流感、伤寒、付伤寒、麻疹。b. 某些血液病：再障、粒细胞缺乏症、白细胞减少症。c. 化疗或放疗后，抗癌药物，X线及镭照射。d. 其它：脾功能亢进，自身免疫性疾病，高度恶病质。(2) 嗜酸粒细胞(E)：嗜酸粒细胞与变态反应有关，并有吞噬抗原抗体复合物的作用。增多见于：a.变态反应性疾病：支气管哮喘、药物过敏、荨麻疹、血管神 经
7、性水肿、过敏紫瘢。b.寄生虫病：蛔虫病、钩虫病、血吸虫病。东莞常平医院 临床检验实验室文件编号：DGCPH-CL-SOP-07-04白细胞分类计数(手工法)版序：2005-1页码：第4页，共5页C某些皮肤病：湿疹、牛皮癣、剥脱性皮炎等。d.某些血液病：慢粒、恶性淋巴瘤、嗜酸性粒细胞性白血症、 多发性骨髓瘤、何杰金氏病等。减少见于：a.应用糖皮质激素、促肾上腺皮质激素。b伤寒、副伤寒等病患者。(3) 嗜碱性粒细胞(B) 嗜碱性粒细胞主要参与特殊的免疫反应。 增多见于：a.慢性粒细胞白血病、嗜碱性粒细胞白血病。b某些转移癌及骨髓纤维化。嗜碱粒细胞减少无临床意义。(4) 淋巴细胞(L)：淋巴细胞能产
8、生和运载抗体，在防御病毒感染方面有重要作用。增多见于：a.某些病毒或细菌所致的传染病：传染性淋巴细胞增多症、传 染性单核细胞增多症、传染病恢复期、结核病、百日咳。b.淋巴细胞性白血病、白血性淋巴肉瘤。减少见于：a.应用肾上腺皮质激素、接触放射线。b.细胞免疫缺陷病、某些传染病的急性期。(5) 单核细胞(M)：单核细胞具有游走性和吞噬作用，除吞噬细胞和异物外，又能吞噬原虫及具有类脂质包膜的结核杆菌及麻风杆菌。增多见于：a.某些感染：伤寒、结核、疟疾、黑热病、亚急性细菌性心内 膜炎。b.某些血液病：单核细胞性白血病、淋巴瘤、骨髓异常增殖综 合症、恶性组织细胞病。减少一般无临床意义。常见的异常白细胞
9、形态的变化在外周血象中，除了各类白血病幼稚细胞外，通常能见到一些细胞形态上的 异常变化。(一)中性粒细胞1.核象变化：反映中性粒细胞的成熟程度。正常血象中有少量杆状核细胞出 现，它与分叶核细胞之间的比值约占1：13。(1)核左移：是指杆状核细胞增多，常见于感染。如晚幼粒、中幼粒等细胞 增多为核象极度左移，多见于类白血病反应或白血病。 伴白细胞总数增高的核左移：称再生性左移，常见于急性化脓性感染，如大叶性肺炎等。 白细胞总数不增加或减低的核左移：称退行性左移，常见于严重感染、机体抵抗力低下时，如伤寒、伴感染中毒性休克的败血症等。东莞常平医院 临床检验实验室文件编号：DGCPH-CL-SOP-07
10、-04白细胞分类计数(手工法)版序：2005-1页码：第5页，共5页(2)核右移：是指不仅分叶核粒细胞增多，且分叶过多，常见4叶、5叶(正 常时多分3叶)，这是造血功能衰退或造血物质缺乏的表现。常见于营 养性巨幼细胞性贫血和使用抗代谢药物后。此外，在疾病进行期突然出 现核象右移，表示预后不良。2毒性变化：严重感染、恶性肿瘤、各种重金属或药物中毒、大面积烧伤等 症时，中性粒细胞可出现形态变异。(1) 细胞大小不均：为骨髓内幼稚粒细胞发生不规则的分裂增殖所致。(2) 毒性颗粒：胞浆中部分或全部颗粒变粗，着色深，颗粒的分布及大小不 等。可能为中性颗粒成熟过程中发生变性所致。(3) 空泡：可在胞浆或核
11、中出现，常为多个，被认为是细胞脂肪变性后未能 着色所致。(4) Dohle体：脑浆内出现嗜碱性点、线、梨形或云雾状物质，可能为核浆 发育不平衡所致，为细胞严重毒性变的表现。(5)核棘突：胞核有各种形态的芽状突出，临床意义尚不明确，可能与中毒、 癌转移、严重放射损伤等有关。3.退行性变：表现为胞体肿大，结构模糊，边缘不清。胞核可呈固缩、肿胀、 破碎、溶解等变化，退行变可以是细胞衰老死亡的表现。(二)淋巴细胞淋巴细胞形态变异在多种疾病如各种病毒感染、传染性单核细胞增多 症最为常见。此外，疟疾、过敏性疾病、淋巴结炎等亦可见，统称为异型淋巴 细胞。传染性单核细胞增多症患者血液中常可出现3种异型淋巴细胞，即空泡 型、不规则型和幼稚型。
