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1、广东省临床基因扩增查验实验室技术人员理论培训班理论考试卷一，填空（每题2分，共20分）1. DNA双螺旋中两条链走向是反向平行的，即一股链是53走向，另一股链为35走向；生物合成方向是53。2. 在极端的PH值或受热条件下，核酸分子中的氢键断裂，双螺旋构造解开，即为核酸变性。3. 核酸分子的杂交其实就是DNA变性、复性原理的应用。4. PCR扩增的三个基本阶段是变性、退火、延长，引物与模板的联合发生在退火阶段5. 反转录酶催化的DNA合成反响按53方向进行，在DNA合成时也需要引物，引物为病毒颗粒中的mRNA。6. PCR测定中的“假阳性”的最主要的根源是PCR产物的污染。7. 请填出以下各样
2、微量移液器可取溶液的体积范围P100.5-10ulP202-20ulP10020-100ulP20050-200ul如需汲取100ul液体，则最好使用P100加样器。8. 在基因扩增查验中，使用的带滤塞吸头吸加液体，只假如为了防备标本间交错污染。9. TapMan荧光PCR测定原理中的重点点在于利用了Tap酶的53的外切酶活性，Ct值指的是每个反响管内的荧光信号抵达设定阈值时所经历的循环数。10. 个体化医学的全面定义：分为疾病风险展望（基因检测）和个体化治疗（基因检测）两个方面，基因展望疾病风险是指依据每一个人的疾病基因组信息展望疾病的发生风险。个体化治疗是指依据每一个人的疾病基因组信息对已
3、发生的疾病进行治疗。二，是非题（正确的后边打，错误的后边打，并将错误处划线并更正，每题两分，未更正得1分，共20分）1. DNA双链中，碱基对老是A-T,C-G配伍，此间以两个氢键相连。（）G-C间以三个氢键相连2. 使用有防“污染”作用的UNG的PCR试剂盒，PCR实验室就不用严格分区。（）UNG酶只对低浓度的产物污染有效3. 在全血、骨髓标本的采集时，可使用EDTA、枸缘酸钠或肝素抗凝。（）不可以使用肝素抗凝4. 血清HBeAg的存在是HBV感染及感染程度确实证标记。（）HBeAg是病毒复制的标记5. 在PCR试剂盒中所使用的UTP与天然RNA分子中的U没什么差别。（）6. 基因扩增查验实
4、验室“可挪动紫外灯”的作用主假如便于实验室台面的消毒杀菌。（）7.定量PCR与定性PCR测定原理的最主要差别点在于前者的测定点在PCR的指数扩增期，尔后者多为扩增平台期。（）8. 加样器只需在其量程范围内，其吸液正确度均同样。（）不一样规格的加样器之间正确度不一样9. 室内质量控制（IQC）监测和控制的是实验室测定的精细度（重复性），而室间质量评论则经过不一样的实验室测定结果的比对而评论实验室测定的正确度。（）10. 临床查验中的系统偏差往常表现为质控物测定SD的增大。（）三，选择题（每题2分，共20分）1. 在核酸提取时，常需使用氯化钠、醋酸钠等盐溶液，其目的是：（A）A中和核酸的负离子，使
5、其易于积淀B调理PH值C保证核酸的完好性D无特定目的2. 临床上使用核酸扩增方法诊疗沙眼衣原体感染，在标本采集上最为重点的是：（B）A标本的采纳方式B标本的保留方式C标本的运送方式D标本采纳的时间3. 之因此要将基因扩增查验实验室的产物剖析区设置为负压状态，目的是：（B）A防备生物传染危险物的逸出B防备扩增产物从该区进入上游地区C防备该区尘埃的逸出D无特别目的4. 核酸探针的标记性特点是：（D）A一小段已知序列的单链核酸B一小段未知序列的单链核酸C一小段已知序列的双链核酸D有同位素或非同位素标记物5. 核酸提取纯化中，RNase最主要的潜伏污染源是：（D）A实验室环境B实验用品如吸头、离心管等
6、C实验人员的手D以上A和B6. PCR方法检测病原微生物所扩增的区段，一般为：（B）A整个病原体基因组B病原体基因组内的守旧地区C病原体基因组内的任一地区D以上都不是7. 无创产前基因诊疗为胎儿做出基因检测，需从孕妇外周血中分别获得及少许的：（B）A孕妇有核红细胞B胎儿有核红细胞C白细胞D以上均可8. 临床PCR测定的重复性不好的原由以下，但除外：（B）A试剂盒核酸提取方法对扩增克制物去除不洁净B标准品浓度禁止C核酸扩增仪空间温度不均D加样重复性差9. 有对于动力学定量PCR方法中对扩增效率的测定，下述哪一条是错误的：（B）A一定在扩增的指数期内测定B可在扩增的任何阶段进行C与扩增产物的测定相
7、关D尽可能多项选择几个测定点10. 临床基因扩增查验的室内质量控制与往常的临床定性免疫测定IQC的最大不一样在于：（D）A弱阳性质控血清的设置B强阳性质控血清的设置C阴性质控血清的设置D以上均是四，问答题（40分）1.有一基因扩增查验实验室在检测临床血清标本HCVRNA时，以HCV扩增片段的 cDNA为标准品，检测结果除了试剂盒所带的cDNA标准品为阳性外，全部临床标本及弱阳性质控原血清样本、阳性质控样本均为阳性，而且阳性强度都较为靠近。明显该次RT-PCR扩增检测存在问题。那么，你能帮助该实验室剖析一下可能的检测失败的原由吗？并设计一个相应的考证试考证明。（20分）2. 今有一传得病医院为监
8、测肝炎病人抗病毒治疗成效，现有一间面积为50平方米的房间，想成立一个临床基因扩增查验实验室展开HBVDNA和HCVRNA检测项目，经向相关专家咨询，专家建议其按卫生部要求将实验室分为三个区(图示以下)，采用荧光PCR方法，仪器设施按要求装备，可采用有SDA同意的荧光PCR试剂盒，你以为该专家的实验室设置有无原则性问题，对临床实质检测工作能否方便？如否，则请指出可能会有那些不方便？假如向你咨询，你会怎样建议？（请将你设计的实验时设置画出）（20分）不方面，此设计进入样本制备区必定要经过试剂准备区，简单增添污染的风险，且缓冲间的设计也不合理，违反了PCR实验室设计中“各区独立，方便工作”等原则。我的设计以下：
