基因工程解答.doc

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1、36（8分）基因工程的基本过程包括：获取目的基因、目的基因与载体重组、DNA分子导入受体细胞、筛选含目的基因的受体细胞。下图示培育基因工程细菌制造人生长激素的基本流程。据图分析回答：（1）本例中的“目的基因”是 ，受体细胞是 。（2）“目的基因”的获取既可以从生物活细胞内直接获取，也可以人工合成。在从生物体内获取“目的基因”时，首先应在生物体DNA上准确定位到“目的基因”，然后再利用 酶进行切取；如果人工合成“目的基因”时，通常是以目的基因转录的 为模板 成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成双链DNA。（3）基因工程中，常选用 作为目的基因的运载体，把目的基因连接到运载体的酶称 酶。 （4

2、）一般来说，获取的目的基因，其每端的两条脱氧核苷酸链都不等长，推测其中的原因或作用 。36（8分）（1）人生长激素基因 ， 细菌细胞（2）DNA内切酶 mRNA 逆转录（3）细菌的质粒 DNA连接（4）能通过碱基配对与运载体（质粒）重组连接39（11分）下图（一）为某基因工程中利用的质粒筒图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，ampR为青霉素（抗生素）抗性基因，tctR为四环素（抗生素）抗性基因，P为启动因子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。下图（二）为几种酶作用于基因的位置。请回答下列问题：

3、（1）在基因工程中常用的工具有三种：一是用作切取目的基因的 酶；二是将目的基因与运载体拼接的 酶；三是作为运载体的质粒。 （2）将含有目的基因的DNA与经特定的酶切后的动载体（质粒）进行拼接形成重组DNA，理论上讲，重组DNA可能有“ ”、“ ”、“ ”三种，其中有效的（所需要的）重组DNA是 ，因此需要对这些拼接产物进行分离提纯。 （3）利用图（一）所示的质粒拼接形成的3种拼接产物（重组DNA）与无任何抗药性的原核宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的拼接产物（重组DNA）是 。 （4）有效的重组DNA成功导入受体细胞进行表达时，首先需要进行转录，RNA聚合酶识别和结

4、合的位点是图（一）中的 。在动物基因工程中，将重组DNA导入受体细胞的常用方法是 。 （5）在基因工程中，作用于图（二）所示a位置的酶是 ；作用于b位置的酶是 。39（1）限制酶（限制性内切酶） DNA连接酶 （2）目的目的基因 目的基因运载体 运载体运载体 目的基因动载体 （3）运载体运载体目的基因运载体 （4）P（启动子） 显微注射法 （5）限制酶（限制性内切酶） DNA解旋酶。 (普陀区）40（6分）下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答。（1）能否利用人的皮肤细胞来完成过程？ 。（2）过程必需的酶是 酶。（3）在利用A和B获得C的过程中，必须用 切割A和B，使它

5、们产生 ，再加入 ，才可形成C。（4）上述生产人胰岛素的基因工程技术中常选择大肠杆菌等微生物作为受体细胞的原因是 。 40（6分） （1）不能 （2）逆转录（3）同一种限制性内切酶 相同的黏性末端 DNA连接酶 （4）微生物繁殖迅速、结构简单、遗传操作较容易。 （浦东）38、（11分）某科研单位在调查湖水中细菌的污染情况时进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。（1）培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了_。对培养基进行灭菌，应该采用的方法是_。接种时通常采用 方法，把聚集的菌种逐步分散到培养基的表面。如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐盐细菌，这种培养

6、基被称为_。小麦细胞导入含耐盐基因的小麦细胞（2）该细菌所含的耐盐基因可通过 途径获取，作为基因工程中的目的基因导入小麦中，其过程如左图所示。其中A为 ，含耐盐基因的小麦细胞还应经 ，在此过程中还将使用 两种植物激素，从而最终可获取含耐盐基因的小麦植株，当然这些小麦植株并不一定具有耐盐的特性，这是因为 。若在遗传过程中小麦植株丢失1条染色体，则不能产生正常配子而高度不育，则可用 处理幼芽，以便获得可育植株。（3）图中C还可用于其他工程细菌中，若成功导入大肠杆菌内，则可能使大肠杆菌获得哪些特性？（多选） A. 耐盐 B. 抗四环素 C. 抗氨苄青霉素 D. 固氮 38、（11分）（1）氮源和碳源

7、高压蒸汽灭菌平板划线选择培养基 （2）酶切质粒 组织培养 生长素和细胞分裂素 基因选择型表达 秋水仙素（3）A 、C （嘉定）（2009高考上海生物）人体细胞内含有抑制癌症发生的p53基因，生物技术可对此类基因的变化进行检测。（1）目的基因的获取方法通常包括_和_。（2）上图表示从正常人和患者体内获取的p53基因的部分区域。与正常人相比，患者在该区域的碱基会发生改变，在上图中用方框圈出发生改变的碱基对；这种变异被称为_。（3）已知限制酶B识别序列为CCGG，若用限制酶E分别完全切割正常人和患者的p53基因部分区域（见上图），那么正常人的会被切成_个片段；而患者的则被切割成长度为_对碱基和_对碱

8、基的两种片段。（4）如果某人的p53基因区域经限制酶E完全切割后，共出现170、220、290和4答案：（1）从细胞中分离 通过化学方法人工合成（2）见下图 基因碱基对的替换（基因突变）（3）3 460 220（4）P+P 60碱基对的四种片段，那么该人的基因型_（以P表示正常基因，P异常基因）。37（12分）真核细胞的基因由编码区和非编码区两部分组成（如下图一示），其中编码区包括能够编码蛋白质的序列（外显子）和一般不能够编码蛋白质的序列（内含子）。在真核细胞基因表达时，首先由DNA转录出前驱RNA，然后经过裁接（将内含子的转录部分切除并将外显子的转录部分连接起来）才能形成成熟的RNA。但在裁

9、接时有可能会发生选择性裁接（在裁接时可能会同时切除某一个或几个外显子的转录部分，即形成不同的裁接形式）和RNA编辑（将前驱RNA上的核苷酸序列加以修改，包括碱基置换或碱基增减）。选择性裁接和RNA编辑的存在，进一步增加了蛋白质结构和功能的多样性。请分析回答了蛋白质结构和功能的多样性。请分析回答（1）写出遗传信息的传递和表达过程图式： 。（2）由于DNA分子的双链靠碱基之间的的氢键相结合，因而增强了DNA分子结构的稳定性。下列双链DNA结构在复制时，最不容易解旋的是（）A、 B、 C、 （3）选择性裁接和RNA编辑作用发生在细胞中的（部位）。（4）人的apoB基因在肝细胞中表达出apoB100蛋

10、白质（数字表示该蛋白质含有的氨基酸数），但是在小肠细胞中， apoBRNA上靠近中间位置的某一个“CAA”密码子上的“C”被编辑为“U”，因此只能表达出apoB50蛋白质。则下列有关分析中正确的是（ ）（多选）A、apoB基因含有606个脱氧核苷酸；B、apoB基因在肝细胞中转录的RNA长度约是小肠细胞中转录的RNA长度的2倍；C、apoB100蛋白质和apoB50蛋白质有50个氨基酸完全一样；D、apoB100蛋白质和apoB50蛋白质都是apoB基因的表达产物；E、apoB50蛋白质的产生是因为apoB基因在转录时发生选择性裁接的结果。（5）科学家将人的生长激素基因导入大肠杆菌以获取人生长

11、激素（如图二）。已知限制酶I的识别序列和切点是GGATCC ，限制酶II的识别序列和切点是GATC。目的基因可以通过 方法获取。重组质粒构建过程中需要用到的酶包括限制性内切酶和 酶。在DNA双链上，被限制性内切酶特异性识别（酶切位点处）的碱基序列特点是 。据图分析，在构建基因表达载体过程中，应选用 （限制酶I / 限制酶II）切割质粒，选择理由是。成功导入该重组质粒的细菌能否生长在含四环素的培养基上？；能否生长在含抗氨苄青霉素素的培养基上？；根据此原理可完成转基因工程的筛选（工程菌）环节。 （6）如果某基因中的一个碱基发生突变，则突变基因控制合成的蛋白质与正常蛋白（正常基因控制合成）相比是否一定不同，并说明理由？ 。37.(12分)（1）略 （2）A （3）细胞核 （4）CD （5）人工合成、细胞中分离 DNA连接酶 两条链反向平行相同（回文序列） 限制酶I 用限制酶I把质粒切出一个切口，且能保留一个标记基因；如果用限制酶II切割，质粒将被切出两个切口，且标记基因将被破坏，不利于后面的筛选。不能 能 （6）不一定，因为密码子有兼并性/也有可能突变发生在内含子部位，不影响外显子的表达。