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1、用血球计数板计数酵母菌个数的计算方法血球计数板,通常是一块特制的载玻片,其上由四条槽构成三个平台。中间的平台又被一短横槽隔成两半,每一边的平台上各刻有一个方格网,每个方格网共分九个大方格,中间的大方格即为计数室,微生物的计数就在计数室中进行。计数室的刻度一般有两种规格,一种是一个大方格分成16个中方格,而每个中方格又分成25个小方格;另一种是一个大方格分成25个中方格,而每个中方格又分成16个小方格。但无论是哪种规格的计数板,每一个大方格中的小方格数都是相同的,即16X25=400小方格。每一个大方格边长为1mm,则每一大方格的面积为1mm2,盖上盖玻片后,载玻片与盖玻片之间的高度为0.1mm
2、,所以计数室的容积为0.1mm3。在计数时,通常数五个中方格的总菌数,然后求得每个中方格的平均值,再乘上16或25,就得出一个大方格中的总菌数,然后再换算成1ml菌液中的总菌数。记数中方格的方法下面以一个大方格有25个中方格的计数板为例进行计算:设五个中方格中总菌数为A,菌液稀释倍数为B,那么,一个大方格中的总菌数因1ml=1cm3=1000mm3,(即0.1立方毫米的总数二A/5X25XB)1ml菌液中的总数=A/5X25XBX10X1000=50000AXB(个)同理,如果是16个中方格的计数板,设五个中方格的总菌数为A,则(即0.1立方毫米的总数二A/5X16XB)1ml菌液中的总数=A
3、/5X16XBX10X1000=50000AXB(个)记数小方格的方法计数时,如果使用16格X25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数如果规格为25格X16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数.对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数.计算公式(1) 16格X25格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100X400X104X稀释倍数(2) 25格x16格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80X400X104X稀释倍数汪意事项取出酵母菌的原液时一定要混匀!!不同的移液管吸取不同浓度的菌液,不要混用注意细节操作!!