(完整word版)浙大医学分子生物学真题2005-2011.doc

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1、2011年一、 名词解释(每题3分):1、 Okazaki fragments2、 Trans-acting factor3、 Multiple-cloning site4、 Micro RNA5、 Chaperone二、 简答题(每题5分)1、 简述蛋白质的四级结构;2、 真核细胞基因转录的主要调控点有哪些?3、 表观遗传学机制如何调控染色体4、 简述真核细胞中RNA聚合酶的类型及功能;5、 真核生物RNA的类型;6、 什么是基因突变?真核细胞基因突变的主要类型?7、 什么是组学?常有的组学技术有哪些?8、 简述兔源多克隆抗体的制备过程;9、 研究蛋白质-蛋白质相互作用的方法有哪些?三、 问

2、答题(每题10分):1、 什么是蛋白质修饰?细胞内蛋白质修饰主要类型有哪些?其主要功能是什么?2、 大规模临床证据显示非受体酪氨酸磷酸酶在乳腺肿瘤转移灶组织中高表达。请设计一个实验研究方案在细胞水平探讨该蛋白在肿瘤发生、转移过程中的可能作用。3、 什么是模式生物?为什么医学研究中需要模式生物?4、 结合你的实际经历和知识背景,谈谈分子生物学在医学中的作用。 2010年一、 名词解释(每题3分):1、基因与基因组:2、基因诊断:3、半保留复制:4、疾病模型与模式:5、ncRNA:二、简答题:1、为什么个体基因型可以用于健康风险预测?2、蛋白质哪些理化性质可以用于检测和鉴定?3、蛋白质非共价键作用

3、包括?蛋白质相互作用机制?4、细胞死亡的方式?5、肝细胞对医学的作用?6、基因转录、翻译和基因表达的区别?7、DNA损伤类型、检测方式?8、蛋白质为什么能够细胞定位?怎样检测蛋白质定位?9、为什么同一个体的细胞基因组相同,蛋白质组不同?怎样检测蛋白质组差异?三、问答题:1、谈谈转化医学的定义? 你对转化医学研究有何建议?2、表观遗传机制?如何研究?有何意义?3、设计一个实验说明信号传导的过程?(研究信号通路,信号从细胞外传至细胞内,往往是形成一个复合物,从而引起效应,请你设计一个方法,了解整个信号通路的传递过程)4、端粒和端粒酶为何能获诺贝尔医学奖?2009年一、名词解释1、种系分析法(系谱分

4、析):2、癌基因和抑癌基因:3、顺式作用元件和反式作用因子:4、表观遗传学(遗传表观学性状):5、基因表达:二、简答试述基因、基因组,蛋白质和蛋白质组。举例说明蛋白质之间相互作用的研究方法有哪些?什么是基因表达及其调控机制?(基因表达的主要过程及调控的主要位点?)设计一个实验以证明DNA是遗传物质。基因操作中的常用工具有哪些?举例说明蛋白质结构与功能的关系。蛋白质翻译后加工的内容?单核苷酸多态性?基因突变及生物学意义?10、蛋白质结构与疾病的关系?三、问答题:有一个蛋白X,发现其在血管内皮细胞中与信号转导通路A有密切联系,如何证明在此细胞中与蛋白X相互作用的蛋白。HGP已完成,谈谈你对其后续计

5、划的认识。根据国内外进展,说明分子生物学与医学的关系.结合环境污染,举例说明环境污染与基因的关系说明疾病的发生机制?5、某信号A与血管内皮细胞经蛋白B可发生信号转导,设计一个实验说明细胞内蛋白B发生相互作用的蛋白?2008年(1)一、名词解释1、核糖开关:2、反式作用因子:3、质粒:4、锌指结构:5、分子杂交基因组:6、hnRNA :7、cDNA :8、密码的简并性:9、信号肽:二、简答题(30分):1、什么是乳糖操纵子,简述乳糖操纵子的正负调节机制?2、简述原核和真核细胞在核酸翻译成蛋白质的过程中的异同点?3、质粒的不相容性和相容性指的是什么?其分子基础机制是什么?4、核酸凝胶电泳的基本原理

6、和方法是什么?5谈谈你的硕士论文的基本内容,研究方法和结果,有什么收获,打算你的博士生涯如何度过?三、问答题(40分):1、简述3种由PCR技术衍生出来的技术及其应用?2、试述一条反向遗传克隆功能基因的途径。(同下)3、近年来有些什么分子生物学研究的成果应用到实际应用当中?4、阐述一种细胞信号转导的途径(从接受信号到调控基因表达)。5、给你一个cDNA序列,你如何表达,纯化得到所需要的目的蛋白质? 2008年(2)一、名词解释1、蛋白质的超二级结构:2、核酸分子杂交:3、基因组:4、操纵子:5、反式作用元件:6、小卫星DNA:7、基因表达:8、逆转录:9、管家基因:10、信号肽:11、基因打靶

7、:12、基因治疗:二、论述题1、DNA的复制过程的基本特点和要点。2、G-蛋白信号介导的信号转导途径。3、DNA损伤可以分为哪几类?相应的修复机制是什么? 4、蛋白质组的概念及其研究意义。2007年一、名词解释 1、质粒:2、密码的简并性:3、信号肽:4、反式作用子:5、基因组:6、hnRNA:7、cDNA:8、结构域:9、EMSA:10、转座子:二、简答题:1、何谓乳糖操纵子,以乳酸操纵子为例说明基因表达与阻遏?2、核酸凝胶电泳的基本原理和方法是什么? (同前)3、简述原核和真核细胞在核酸翻译成蛋白质的过程中的异同点?(同前)4、DNA克隆的筛选方法及原理。5、何谓质粒的不相容性和相容性?其

8、分子基础机制是什么?(同前)三、问答题:1、试述一条反向遗传克隆功能基因的途径。(同前)2、假定事先给你一个cDNA序列,你如何表达、纯化得到目的蛋白质?3、阐述一种细胞信号转导的途径(从接受信号到调控基因表达)(同前)4、ELISA方法的基本原理,方法,及其种类?5、原核生物和真核生物基因结构的差别有哪些?怎样去用实验证明呢?2006年一、名词解释:(25%) 1、RFLP:限制性片段长度多态性,是由DNA变异(产生新的酶切位点或消除原有的酶切位点)导致在限制性核酸内切酶酶切时产生不同的长度片段。可借助Southern Blotting或PCR的方法进行检测。 2、SSR:简章序列重复多态性

9、,引物是根据微卫星DNA重复序列两翼的特定短序列设计,用来扩增重复序列本身。由于重复的长度变化极大,所以是检测多态性的一种有效方法。其特点包括:一般检测到的是一个单一的多等位基因位点,共显性遗传,故可鉴别杂合子与纯合子;得到的结果重复性很高。 3、EST:表达序列标签,是指从不同的组织构建的cDNA文库中,随机挑选不同的克隆,进行克隆的部分测序所产生的cDNA序列。随着高通量测序技术的进步,使人们越来越相信,大规模地产生EST,结合生物信息学的手段,将为人们提供一种快速有效的发现新基因的方法。 4、STS:序列标签位点,是由特定引物序列所界定的一类标记的统称,短的在基因组上是可以被唯一操作的序

10、列,因而可以确定在物理图谱上的特定位置。 5、CAP:CAP即分解代谢物基因活化蛋白,是一种激活蛋白,因为细菌的许多启动子为弱启动子,本身与RNA聚合酶的作用较弱,在有CAP蛋白这类激活蛋白存在下,可使RNA聚合酶与启动子的亲和力增强,CAP蛋白的活性强烈依赖cAMP。6、AFLP:扩增片段长度多态性,其特点是把RFLP和PCR结合了起来。其基本步骤是:把DNA进行限制性内切酶酶切,然后选择特定的片段进行PCR扩增(在所有的限制性片段两端加上带有特定序列的“接头”,用与接头互补的3端有几个随机选择的核苷酸的引物进行特异PCR扩增,只有那些与3端严格配对的片段才能得到扩增),再在有高分辨力的测序

11、胶上分开这些扩增产物,用放射性法、荧光法或银染染色法均可检测之。 7、SNP:单核苷酸多态性,是一种较为新型的分子标记,其依据的是一位点的不同等位基因之间常常只有一个或几个核苷酸的差异,因此在分子水平上对单个核苷酸的差异进行检测是很有意义的。 8、FISH:荧光原位杂交技术,是一种利用非放射性的荧光信号对原位杂交样本进行检测的技术。它将荧光信号的高灵敏度、安全性,荧光信号的直观性和原位杂交的高准确性结合起来,通过荧光标记的DNA探针与待测样本的DNA进行原位杂交,在荧光显微镜下对荧光信号进行辨别和计数,从而对染色体或基因异常的细胞、组织样本进行检测和诊断,为各种基因相关疾病的分型、预前和预后提

12、供准确的依据。9、Genome:基因组,有机体或细胞中的所有DNA,包括核中的染色体和线粒体中的DNA。 10、RNA in situ hybridization:RNA原位杂交,是利用cDNA为探针来检测与其互补的mRNA链在细菌或其他真核细胞中的位置,是检测基因组织特性表达的常用方法。11、单克隆抗体:每个B淋巴细胞有合成一种抗体的遗传基因。动物脾脏有上百万种不同的B淋巴细胞系,含遗传基因不同的B淋巴细胞合成不同的抗体。当机体受抗原刺激时,抗原分子上的许多决定簇分别激活各个具有不同基因的B细胞。被激活的B细胞分裂增殖形成该细胞的子孙,即克隆由许多个被激活B细胞的分裂增殖形成多克隆,并合成多

13、种抗体。如果能选出一个制造一种专一抗体的细胞进行培养,就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群,即单克隆。单克隆细胞将合成一种决定簇的抗体,称为单克隆抗体。12、基因芯片:所谓基因芯片,是指将大量探针分子固定于支持物上,然后与标记的样品进行杂交,通过检测杂交信号的强弱进而判断样品中靶分子的数量。由于用该技术可以将极其大量的探针同时固定于支持物上,所以一次可以对大量的DNA分子或RNA分子进行检测分析,从而解决了传统核酸印迹杂交,技术复杂、自动化程度低、检测目的分子数量少、效率低等不足,而且,通过设计不同的探针阵列,用一定的分析方法,还可以用于序列分析,称作杂交测序。二、描述cDNA文库构建原理与

14、方法(25%):(1)cDNA获得方法,(2)克隆方法,(3)文库质量定义。答: cDNA:以mRNA为模板,利用反转录酶合成与mRNA互补的DNA(complementary DNA,cDNA),再复制成双链cDNA片段,与适当载体连接后转入受菌体,扩增为cDNA文库(cDNA library),然后再采用适当方法从cDNA文库中筛选出目的cDNA。与基因组DNA文库类似,由总mRNA制作的cDNA文库包括了细胞全部mRNA信息,自然也含有我们感兴趣的编码cDNA。当前发现的大多数蛋白质的编码基因几乎都是这样分离的。 (1) cDNA获得方法:Total RNA的提取;mRNA的分离;cDN

15、A双链合成:Superscript IIRT合成第一链,cDNA第二链的合成,双链cDNA末端补平,EcoR I adaptor 加接,双链cDNA末端的磷酸化及Xho I酶切,胶回收cDNA。 (2)克隆方法:载体制备:p Blue Script II的提取,p Blue Script II的双酶切消化,载体去磷酸化,载体效率检测;cDNA双链和载体的连接:连接,检测(PCR方法);电转化:电转化感受态细胞的制备,连接产物纯化,电转化;快速鉴定、菌落PCR p Blue Script cDNA文库扩增。 (3)文库质量定义:评价一个文库是否有实用价值主要在于文库的含量和插入片段的大小两个方面。所构建的文库中必须有足够多的克隆数,这样才能确保基因组cDNA 中的每一个序列至少有一个拷贝存在于重组文库中,为达到这一要求, 文库的容量应不小于1.7105 ,同时为保证cDNA片段的完整性,插入片段的平均大小应不小于1kb。三、阐述基因突变的概念及引起突变的可能途径(25%):(1)化学诱变,(2)物理诱变,(3)

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