《SYNAPTG2S仪器操作规程》由会员分享，可在线阅读，更多相关《SYNAPTG2S仪器操作规程（58页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、Waters UPLC I-Class SYNAPT G2-S 操作规程编写人：日期：审核人：日期：批准人：日期：术语说明UPLCUltra Performance Liquid Chromatography超高效液相色谱仪SourceIon Source离子源TOFTime of Flight飞行时间质谱QuadQuadrupole四级杆Full scanScan全扫描模式 目 录1.目的42.适用范围43.设备、化学试剂、实验室备件44.仪器操作步骤45.维护保养606.记录61Waters UPLC I-Class SYNAPT G2-S操作规程1. 目的规范Waters UPLC I-
2、Class SYNAPT G2-S联用仪操作管理工作，确保技术人员对该仪器进行安全、熟练、高效、有序的操作。2. 适用范围适用于Waters UPLC I-Class SYNAPT G2-S的操作管理工作。3. 设备、化学试剂、实验室备件3.1设备：序号设备名称型号1安捷伦气相色谱7890A2沃特世超高效液相色谱仪Waters UPLC I-Class3沃特世四级杆-飞行时间质谱Waters SYNAPT G2-S3.2化学试剂：亮脑啡肽(leucine enkephalin)：CAS: 58822-25-6 ；甲酸钠（NaFA）：CAS: 141-53-74. 仪器操作步骤4.1 UPLC
3、SYNAPT G2-S联用仪的开启 打开电脑，输入用户名：waters，密码：waters。 打开液相各个模块电源（没有顺序）。 打开氮气发生器的电源，确认压力指示100 psi；打开氩气减压阀确认压力指示在7 psi；高分辨质谱还需打开氦气减压阀确认压力指示在7 psi，此时关闭sample cone的isolation valve。 打开质谱电源开关，在质谱背面板右侧位置有四个黑色可以上下搬动的开关，按照从下到上的顺序依次将这四个开关搬到向上的位置。4.1.5 等待约5分钟，待仪器与电脑网络通讯连接好，双击桌面Masslynx V4.1图标，打开Masslynx软件，等待软件主窗口状态栏中
4、部偏右位置出现Not Scanning的信息。4.1.6 打开MS Console窗口，左边栏依次选中Synapt G2 QTOF/Intellistart，在右侧窗口中点击operate快捷图标。（点击operate图标后应该能听到外置真空泵发出很大噪音，随后声音逐渐变小）4.1.7 打开MS tune窗口，单击氩气的控制开关，关闭氩气。等待右下角红色方块变为绿色，表明仪器可以工作了（通常这个过程需要7-8个小时。可以从MS tune/view /vacuum中观察真空度的变化，当TOF的真空度小于1.2e10-6时，右下角红色方块会变成绿色），此时可打开isolation valve。4.
5、2 液相系统的灌注准备流动相，如用到缓冲盐流动相需用0.22 m的滤膜过滤，所有缓冲盐流动相和超纯水都要新配置，且使用不得超过两天；所有样品都要用初始流动相来溶解，并用0.22m的滤膜过滤。在MassLynx软件主界面点击Mass Console图标，打开液相控制台窗口。选择ACQUITY UPLC System界面下的Control/Prime A/B solvents，分别灌注A1、B1和A2、B2流路3 min；然后选择ACQUITY UPLC System界面下的Control/ Prime Seal Wash，灌注Seal Wash流路，观察Seal Wash管路没有气泡后，点击Pr
6、ime Seal Wash，停止灌注Seal Wash；选择ACQUITY UPLC System目录树的Sample Manager，点击右侧的Control/Prime syringes，灌注进样针和洗针系统。4.3 新项目的建立注：如在已有的项目下进行试验，此步骤可以不做。在MassLynx主窗口选择File/Project Wizard。当出现以下窗口时，点击Yes。 输入项目名称，点击Next。 选择Create using existing project as template，点击Browse，选择新建项目的模板，点击Next。4.4. 质谱质量数粗校在MassLynx主界面点
7、击Mass Tune图标进入Mass Tune界面，LockSpray Flow Control下的三个按钮功能从左至右依次为：按设定流速进样、停止进样、灌注管路。将实时校正液放在设置瓶号位置，点击灌注管路，排除气泡。点击Sprayer Position设定挡板位置在LockSpray；设定Reservoir为实时校正液瓶号位置（B）；设定Flow State为Infusion模式；设定Infusion Flow Rate，通常为5 L/min；点击按钮，进样，如图4.4.1 实时校正液（LE）进样，信号稳定后观察主峰的质量数，ES+时，（LE+H）+的准确质量数为556.2771，ES-时，
8、（LE-H）-的准确质量数为554.2615，观察实测质量数与理论准确质量数的差别，如果其差值在0.1则可省去粗校步骤；如果差值较大，进行粗校。4.4.2 点击MS Tune主界面上部菜单的Setup，弹出下拉菜单，点击System View，在弹出的窗口输入密码：access，点击OK，进入system view模式。4.4.3 在system view模式下点击上部菜单的System，弹出下拉菜单，点击Acquisition Settings，弹出质量数粗校窗口，如图4.4.4 在质量数粗校窗口右侧，勾选Calculate and set Veff，设定计算并设置Veff值；Referen
9、ce Mass：输入LE（实时校正液）在该模式下的准确质量数，Measured Mass：输入刚观察到的实际检测质量数，点击Calculate，然后点击Update，质量数粗校完成。点击Close退出粗校窗口。4.4.5 在System View窗口点击上部菜单的Setup，弹出下拉菜单，点击System View，弹出系统参数保存窗口，点击保存Both Tuning Parameters and System Setting，点击OK退出System View模式。4.5. 质谱质量轴校正4.5.1在MassLynx主界面点击Mass Tune图标，进入Mass Tune界面。设置挡板位置S
10、prayer Position为Sample，设置Sample Flow Control参数，先将质量轴校正液NaFA放在对应位置，点击灌注图标排除管路气泡。设定Infusion Flow Rate，通常为5-10 L/min，Flow State为Infusion，Reservoir为校正液所放位置，灌注完成后点击进样按钮。在MassLynx主界面点击Mass Console图标，进入Mass Console界面，点击左边的目录树SYNAPT G2-S展开其目录，选中IntelliStart，点击右部菜单栏的Configure下拉菜单，单击Configure Mode，选中Create Ca
11、libration，单击界面右部的Start按钮，如图4.5.3弹出校正文件编辑向导。点击左下角Calibration Profile Editor按钮，进入Calibration Profile Editor界面，点击FileNew，建立新的校正文件，输入校正文件名称，如图。4.5.4 编辑校正文件。在Mass Range右侧点击Edit按钮，编辑质量数范围，通常设定质量数范围50-1200Da，如图4.5.5 设定校正类型，通常选择自动校正，如图。4.5.6点击正离子模式或负离子模式右下角的Edit键，编辑用于校正正离子模式或负离子模式校准物质，如图。通常选择甲酸钠为质谱质量轴校正物质，编
12、辑完成后如图，点击OK退出校正文件编辑界面。4.5.7点击FileExit，又出现校正文件编辑向导首页，此时选中的校正文件就是刚编辑好的校正文件，点击Next。4.5.8 校正设置。此时选中的校正是正离子模式下灵敏度（Sensitivity）、分辨率（Resolution）、高分辨率（High Resolution）三种模式的质量轴校正，选择要做的模式，通过右边的勾去掉不需要模式下的校正；当需要做不止一种模式的质量轴较正时最好分开做。点击Next。4.5.9 校正数据采集参数设置，该界面可选择单级质谱模式或串联质谱模式；如果选择了串联质谱模式（MSMS），需打开碰撞压并设置其能量，点击Next
13、，如图4.5.10 校正液流路设置，选择Tune Page，按照MS Tune界面的参数设置进样。 设置校正文件可接受标准，选择ppm，在Threshold（ppm）输入1，表示各个质量数的允许残差为1ppm。点击Next，出现准备校正窗口，点击Start开始校正，如图 校正完成后自动弹出校正报告，显示Pass，表明校正通过。4.5.13 校正完成后，到MS Tune点击NaFA停止进样图标停止进样。4.6. 实时校正离子源优化4.6.1 在MassLynx主界面点击Mass Tune图标，进入Mass Tune界面，设置LockSpray Flow Control参数。先将实时校正液LE放在
14、对应位置，点击灌注图标排除管路气泡。设定Sprayer Position为LockSpray，设定Infusion Flow Rate，通常为5 L/min，Flow State为Infusion，Reservoir为实时校正液所放位置，灌注完成后点击进样按钮。4.6.2 与质谱质量轴校正相同，在Mass Console界面的Configure Mode模式下，点击LockSpray Source setup，点击右部的Start按钮，进入到LockSpray Source setup编辑向导，点击Next进入LockSpray Source setup编辑窗口，点击Next。4.6.3在此页
15、面点击左下部的LockSpray Profile Editor，编辑实时校正文件，弹出Lock Mass Editor窗口，点击File/New，建立新的实时校正文件。4.6.4实时校正文件编辑窗口，如图。在此页面编辑实时校正文件的名称，设定实时校正的参考物质（通常实时校正参考物质为LE），设定质谱模式（单质谱或串联质谱），设定正离子模式或负离子模式，选择相应的质量数。例如做单级质谱正离子模式的实时校正文件，见下图。参数设置完成后，点击OK，退出编辑窗口。注：如果设定为单质谱模式（Mode：MS），正离子模式选择质量数556.2771，负离子模式选择质量数554.2615；如果设定为串联质谱模式（Mode：MSMS），则需开启碰撞能量，正负离子模式除了单质谱模式
