《牛结核病提纯结核菌素变态反应试验》由会员分享，可在线阅读，更多相关《牛结核病提纯结核菌素变态反应试验（5页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、牛结核病提纯结核菌素变态反应试验1. 原理 机体受到结核杆菌刺激时，导致 T 淋巴细胞转变为 淋巴母细胞，并进而增殖分化为致敏淋巴细胞，使机体致敏； 以后如再次接触结核菌时（结核菌素），致敏淋巴细胞即释 放出各种淋巴因子，一方面使机体表现特异性的细胞免疫， 而另一方面则发生迟发型变态反应，出现以单核细胞浸润， 以及由于巨噬细胞释出溶酶体酶（水解酶）和淋巴细胞释出 淋巴毒素所引起的组织环死为特征的病理现象。皮内注射提纯结核菌素（PPD）于正常动物，不出现显著的 局部炎症反应。相反，如果将其注入曾感染结核病而致敏的 动物，便发生迟发型超敏感性应答，在几小时之内注射局部 不出现肉眼的或组织学的变化，
2、但以后血管扩张，通透性增 加，因而出现红斑和水肿，肿胀硬固。组织检查，这种病变 和典型的急性炎症反应不同的是，浸润细胞主要是单核细 胞，即巨噬细胞和淋巴细胞，虽然反应初期也出现短暂的嗜 中性白细胞的积聚。注射后 24-72 小时反应程度最强，以后 逐渐消退。非常严重的反应，在注射局部可发生坏死。2器材与试剂 酒精棉、卡尺、1-25ml注射器、针头、牛型 提纯结核菌素。3 操作方法3.1注射部位及术前处理：在颈侧中部上 1/3处剪毛（或提 前一天剃毛），三个月以内的犊牛，也可在肩胛部进行，直 径约10cm，用卡尺测量术部中央皮皱厚度，作好记录。如术 部有变化时，应另选部位或在对侧进行。3.2 注
3、射剂量：不论大小牛只，一律皮内注射 1 万国际单位。 即将牛型提纯结核菌素稀释成每毫升含10万国际单位后， 皮内注射01ml。如用2.5ml注射器，应再加等量注射用水 皮内注射0. 2ml。冻干菌素稀释后应当天用完。3.3注射方法：先以75%酒精消毒术部，然后皮内注入定量 的牛型提纯结核菌素，注射后局部应出现小泡，如注射有疑 问时，应另选15cm以外的部位或对侧重作。3.4注射次数和观察反应：皮内注射后经72小时判定，仔细 观察局部有无热痛、肿胀等炎性反应，并以卡尺测量皮皱厚 度，作好记录。对疑似反应牛应即在另一侧以同一批菌素同 一剂量进行第二回皮内注射，再经72小时后观察反应。如 有可能，对
4、阴性和疑似反应牛，于注射后 96和120小时再 分别观察一次，以防个别牛出现较晚的迟发型变态反应。3.5 结果判定：3.5.1 阳性反应：局部有明显的炎性反应。皮厚差等于或大 于 4mm 以上者，其记录符号为（+）。对进出口牛的检疫， 凡皮厚差大于2mm者，均判为阳性。3.5.2疑似反应：局部炎性反应不明显，皮厚差在2.1-3. 9mm 间，其记录符号为（）。3.5.3 阴性反应：无炎性反应。皮厚差在 2mm 以下，其记录 符号为（-）。3.6凡判为疑似反应的牛只，于第一次检疫30天后进行复检， 其结果仍为可疑反应时，经 30-45 天后再复检，如仍为疑似， 应判为阳性。附：感染禽型结核菌或副
5、结核菌牛群的诊断方法 如果牛群有感染禽型结核、副结核菌病可疑、或免疫过副结 核苗时，可以应用牛、禽两型提纯结核菌素的比较试验进行 诊断（副结核分枝杆菌与禽结核分枝杆菌有共同抗原）。其 方法和判定如下：1.注射部位及术前处理：将牛只编号后在同一颈侧的中部选 两个注射点，一点在上 1/3 处，一点在下 1/3 处。剪毛（或 提前一天剃毛）直径约10cm,用卡尺测量术部中央皮皱厚度, 作好记录。两个注射点之间的距离不得少于10cm,注射点距 离颈项顶端和颈静脉沟也不得少于10cm。如术部皮肤有变化 时,选对侧颈部进行。2. 注射剂量：在上1/3处皮内注射禽提纯结核菌素01ml（每 毫升含25000国
6、际单位）,在下1/3处皮内注射牛型提纯结 核菌素0. 1ml （每毫升含10万国际单位）。不论大小牛只， 注射剂量相同。如用2. 5ml注射器注射剂量（01ml）不易 掌握，应加等量生理盐水或注射用水稀释后皮内注射02ml， 冻干菌素稀释后应当天用完。3. 注射方法：以 75%酒精消毒术部，然后皮内注射定量的牛、 禽两种提纯结核菌素，注射后局部应出现小包，如注射有疑 问时，可另选15cm以外的部位或对侧颈部重作。4. 观察反应：注射后经72小时判定（可于 48和96小时各 进行一次判定）。详细观察和比较两种菌素炎性反应的程度。 并用卡尺测量其皮厚，分别计算出牛、禽两种菌素皮内变态 反应的皮厚差
7、，然后比较二者之间的皮差（如果增加了 48 和 96 小时的判定时间，即可比较出两种菌素反应消失的快 慢）。5. 判定结果：5.1 牛型提纯结核菌素反应大于禽型提纯结核菌素反应，两 者皮差在 2mm 以上，判为牛型提纯结核菌素皮内变态反应阳 性牛。记录符号为（M+）。对已经定性的结核牛群。少数牛 即使牛、禽两型之间的皮差在2mm以下，或牛型提纯结核菌 素反应略小于禽型提纯菌素的反应（不超过2mm），也应判 定牛结核菌素反应牛（但牛型提纯结核菌素本身反应的皮厚 差应在 2mm 以上）。5.2 禽型提纯结核菌素反应大于牛型提纯结核菌素的反应， 两者的皮差在2mm以上，判为禽型提纯结核菌素皮内变态反 应阳性牛。其记录符号为（A+）。对已经定性的副结核菌或 禽结核菌感染的牛群，即使禽、牛两型提纯结核菌素之间的 反应皮差小于 2mm 或禽型提纯结核菌素反应略小于牛型提纯 结核菌的反应（不超过2mm），也应判为禽结核菌素反应牛（但禽型提纯结核菌素本身反应的皮差应在2mm以上）。6. 对进出口牛的检疫，任何一种菌素（牛、禽、副）皮差超过2mm以上（或局部有一定炎性反应），均认为是不合格。
