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1、离体肠段平滑肌的生理特性报告题目离体肠段平滑肌的生理特性作者姓名景书婷班级学号0802 班/指导教师支立峰完成时间2011年3月生物学实验教学中心目录引言41 实验材料 42 实验方法 52.1安装实验装置 52.2标本制备 62.3开启计算机采集系统 62.4实验观察 63 结果与分析 73.1 38 C台氏液中的肠段节律性收缩曲线73.2 25 C台氏液中的肠段节律性收缩曲线73.3 45 C台氏液中的肠段节律性收缩曲线83.4 38 C加肾上腺素后的肠段节律性收缩曲线83.5 38 C加乙酰胆碱后的肠段节律性收缩曲线93.6 38 C加阿脱品后的肠段节律性收缩曲线9总结11参考文献102
2、离体肠段平滑肌的生理特性景书婷（指导老师：支立峰）湖北师范学院生命科学学院 生物科学 0802 班 湖北 黄石 435002）摘 要：将离体组织器官置于模拟体内环境的溶液中，可在一定时间内 保持其功能。用静脉注射空气法使兔子昏迷，打开胸腔，找到胃幽门与十二指肠交界 处，在十二指肠起始端扎一线，剪取十二指肠、空肠，放入4C左右的冷台 氏液内。剪取约 23cm 长的小肠段，用注射器冲洗肠。在其两端结扎，将 一端结扎线连于浴槽，另一端扎线与张力传感器相连。将肠段完全浸浴在调 好温度的麦氏浴槽中。适当调节传感器的高度，使其与标本之间松紧度合适。 接通与张力传感器相连的通道。调节增益与扫描速度，使肠段的
3、运动曲线清 晰地显示在显示器上并记录肠段活动曲线。观察、记录38 C、25C、45C台氏液中的肠段节律性收缩曲线。再加 入1:10 000肾上腺素12滴于麦氏浴漕中，观察肠段收缩曲线的改变。同 法加入 12 滴乙酰胆碱（1：10000），观察并记录曲线变化。然后加入 3 滴 阿脱品后立即加入与同样剂量的乙酰胆碱，记录并观察曲线变化。最后分析 离体肠段平滑肌的生理特性。关键词：离体肠断；平滑肌；生理特性；38 C、25C、45C台氏液;肾上腺素；乙酰胆碱；阿脱品离体肠段平滑肌的生理特性景书婷（指导老师：支立峰）（湖北师范学院生命科学学院 生物科学 0802 班 湖北 黄石 435002）引言哺乳
4、动物消化管平滑肌生理特性：1.具有肌组织共有的特性，如兴奋性、传导性和收缩性等。2. 但消化管平滑肌又有其特点，即兴奋性较低，收缩缓慢，富有伸展性，具有紧张性、自动节律性， 对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等。3.这些特性可维持消化管内一定压力，保持胃肠等一定的 形态和位置，适合于消化管内容物的理化变化，在体内受中枢神经系统和体液因素的调节【1】。平滑肌收缩机制及各种因素对平滑肌运动的影响，是生理学的重要研究内容，在临床上对于药 物作用研究、防治疾病等具有重要意义【2】。消化道疾病的发病原因主要是由于胃肠平滑肌极易受温度、理化及药物等因素影响的缘故【3】。 所以本实验以离体兔小肠平滑肌为标本，
5、观察平滑肌的一般生理特性及探索不同处理因 素引起的各种效应。同时试验所获得的大量数据，可为生理和药理学研究及临床应用提 供参考。、1 实验材料动物：兔；仪器：麦氏浴槽、支架、烧瓶夹、酒精灯（电炉）或恒温水浴锅，烧杯（500ml 3个、100ml 1个），20ml注射器、张力传感器、计算机采集系统、二联球、温度计（2 支） 药品：台氏液、肾上腺素（1：10 000）、乙酰胆碱（1：10 000） 阿托品针剂（1 支）。附表：台氏液成分：成分台氏液（哺乳类用）NaCl8.0KCl0.2CaCl20.2NaHCO31.0NaH2PO40.05MgCl20.1葡萄糖1.0蒸馏水加至 1000ml2 实
6、验方法2.1 安装实验装置装好实验装置，向麦氏浴漕内加入台氏液至浴槽高度的 2/3 处。外部容器为水浴锅加自来水。启开电源，恒温工作点定在38C。准备好25C和45C的台氏液。2.2 标本制备用静脉注射空气，致家兔昏迷，腹部剪毛后，沿正中线切开皮肤和腹壁，找到胃幽门与十二指肠交界处，快速沿肠缘剪去肠系膜，在十二指肠起始端扎一线，剪取十二指肠、空肠，放入4C左 右的冷台氏液内。用20ml注射器冲洗肠内容物，冲洗干净后剪成若干约3cm长的小肠段（每一实验 小组一段）。在其两端结扎，将一端结扎线连于浴槽，另一端扎线与张力传感器相连。将肠段完全浸 浴在调好温度的麦氏浴槽中。适当调节传感器的高度，使其与
7、标本之间松紧度合适。此相连的线必 需垂直，并且不能与浴槽壁接触，避免摩擦。2.3 开启计算机采集系统开启计算机采集系统，接通与张力传感器相连的通道。调节增益与扫描速度，使肠段的运动 曲线清晰地显示在显示器上并记录肠段活动曲线。2.4 实验观察（1）开启计算机采集系统，接通与张力传感器相连的通道。调节增益与扫描速度，使肠 段的运动曲线清晰地显示在显示器上并记录肠段活动曲线。（4）实验观察 观察、记录38 C台氏液中的肠段节律性收缩曲线。 观察、记录25C台氏液中的肠段节律性收缩曲线。当出现明显变化后，立即用新鲜37C台氏液冲洗，待恢复正常。 同法加入45C台氏液并记录曲线变化，同时观察肠段紧张度
8、变化。当出现明显变化后，立即用新鲜37C台氏液冲洗并待恢复。 待麦氏浴槽内的台氏液的温度稳定在38C后，加1:10 000肾上腺素12滴于麦氏浴漕中，观察肠段收缩曲线的改变。在观察到明显的作用后，用预先准备好的新鲜38C台氏液冲洗 三次。 同法加入12滴乙酰胆碱（1： 10000），观察并记录曲线变化。 加入3滴阿脱品后立即加入与同样剂量的乙酰胆碱，记录并观察曲线变化。 比较曲线有何不同。3实验图谱及结果与分析3.137C台氏液中的肠段节律性收缩曲线最古值：1 3吃 璟小值：-丄.Kg 平均值lEe分析：正常情况下，可以观察到离体小肠段在台式液中可以缓慢地节律性收缩，收缩频率为9次/分，最大张
9、力为1.39g,最小张力为-1.74g，平均张力为-0.15g3.225C台氏液中的肠段节律性收缩曲线颇 车:吓注尸好:- o.宗小 fiS :34C平均O :O1=分析：当温度降到25C时可以观察到离体小肠段节律性收缩频率变为7次/分，最大张力为0.23g, 最小张力为-0.34g,平均张力为-O.Olg。节律性收缩的频率变小，收缩幅度也变小，其原因是小肠段 处于低于生理温度下，代谢水平下降，兴奋性减弱。3.345 C台氏液中的肠段节律性收缩曲线最大值 1. 56 c -0.32 -平均值 1. 09g分析：当温度升到45C时可以观察到小肠段节律性收缩频率变为17次/分，最大张力为1.56g
10、,最小 张力为-0.32g，平均张力为1.09 g。节律收缩频率变大，收缩幅度也变大，其原因是温度适当升高酶 活性提高，各离子通道活性增加，收缩频率增加，幅度增加。3.438 C加肾上腺素后的肠段节律性收缩曲线O. &O. T虽土恒：TBg 绘小值:. sag 平均 1口 : . S2eL10. O a分析：生理温度下加肾上腺素后，小肠段节律收缩频率变为13次/分，最大张力为0.78g，最小张力 为0.34g，平均张力为0.62 g.。节律性收缩频率比原来的变大，幅度也变大。其原因是肾上腺素对离 体小肠平滑肌的收缩运动起抑制的作用。肾上腺素是肾上腺髓质的主要激素，外源性肾上腺素能和 肠道平滑肌
11、上的肾上腺素能受体（a受体和B受体）结合使平滑肌松弛，抑制了小肠的活动。3.538 C加乙酰胆碱后的肠段节律性收缩曲线分析：生理温度下加乙酰胆碱后，小肠段节律收缩频率变为18次/分，最大张力为0.60g，最小张 力为-0.27g，平均张力为0.28 g.。节律性收缩频率比原来的变大，幅度也变大。其原因是目前认为与 消化道平滑肌细胞产生动作电位的离子基础是Ca2+的内流有关。乙酰胆碱可与肌膜上的M受体结 合，使得两类通道开放：一类为电位敏感性Ca2+专用通道，另一类为特异性受体活化Ca2+专用通 道。前一类通道对Ach敏感，小剂量Ach即引起开放；后一类通道对Ach相对不敏感，只有大剂量 Ach
12、才会引起开放。这两类通道开放都使得肌浆中Ca2+增高，进而激活肌纤蛋白一肌凝蛋白ATP 系统，使平滑肌收缩，肌张力增加。3.638C加阿脱品后的肠段节律性收缩曲线炯 率：13JJ7/53- 毘大值:o. zze= 0. or&平均恒；0. lZg分析：加入阿托品后立即加入乙酰胆碱，肠段节律性收缩频率为13次/分，最大张力为0.22g, 最小张力为-0.07g，平均张力为0.12 g。肠段收缩不再被促进，其原因是阿托品是乙酰胆碱的 抑制剂。其主要的作用机理是：阿托品与平滑肌细胞上的乙酰胆碱结合位点结合竞争性阻碍了乙酰胆碱与 平滑肌细胞的结合，从而抑制乙酰胆碱的作用。4实验问题解决4.1本实验是否
13、可用麻醉动物的肠段?为什么？解析：本试验不可以用麻醉的动物肠断，因为麻醉动物时所用的药品会影响到动物的小 肠的节律性收缩，导致实验时即使在37C不加任何试剂肠段的节律收缩也不同于正常 生理情况下。4.2进行哺乳类动物离体组织器官实验时，需控制哪些条件？解析：温度：本实验控制恒定温度37度 湿度：要时刻记住用相应的润湿液润湿，本次试验用哺乳动物的台氏液 PH：要与哺乳动物体液相似 避免不必要的刺激：不要用手或者是金属触碰 离子成分与浓度：要与相关的动物体液相似，本实验是台氏液 特殊要求:神经实验时要准备隔离盒4.3为什么加入各种药物会引起离体肠段活动的变化?其机理是什么？解析：生理温度下加肾上腺
14、素后会引起离体肠段活动的变化，其机理是肾上腺素对离体 小肠平滑肌的收缩运动起抑制的作用。肾上腺素是肾上腺髓质的主要激素，外源性肾上 腺素能和肠道平滑肌上的肾上腺素能受体（a受体和0受体）结合使平滑肌松弛,抑制了 小肠的活动。生理温度下加肾上腺素后会引起离体肠段活动的变化。其机理是目前认为与消化 道平滑肌细胞产生动作电位的离子基础是Ca2+的内流有关。乙酰胆碱可与肌膜上的M 受体结合，使得两类通道开放：一类为电位敏感性Ca2+专用通道，另一类为特异性受 体活化 Ca2+ 专用通道。前一类通道对 Ach 敏感，小剂量 Ach 即引起开放；后一类通 道对 Ach 相对不敏感，只有大剂量 Ach 才会
15、引起开放。这两类通道开放都使得肌浆中 Ca2+增高，进而激活肌纤蛋白一肌凝蛋白一ATP系统，使平滑肌收缩，肌张力增加。4.4 加入阿托品后再加入乙酰胆碱，肠段活动受到抑制，为什么? 解析：这两种药对肠道平滑肌的作用正好相反，乙酰胆碱能促进肠道平滑肌蠕动，阿托 品是胆碱能神经阻断剂，能抑制肠道平滑肌蠕动。两药同时使用，阿托品阻断了乙酰胆 碱的作用，所以表现出肠道活动受到抑制。4.5 根据实验结果说明平滑肌的生理特性。解析：哺乳动物消化管平滑肌生理特性：具有肌组织共有的特性，如兴奋性、传导性 和收缩性等。但消化管平滑肌又有其特点，即兴奋性较低，收缩缓慢，富有伸展性， 具。有紧张性、自动节律性，对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等。这些特性可维持消化管内一定压力，保持胃肠等一定的形态和位置，适合于消化 管内容物的理化变化，在体内受中枢神经系统和体液因素的调节。总结这次实验过程不是很顺利，首
