《甘蔗生理生化测定指标》由会员分享，可在线阅读，更多相关《甘蔗生理生化测定指标（45页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、土壤含水量的测定1土壤速效氮、磷、钾的测定2一. 土壤速效N的测定（碱解扩散法）2二. 土壤速效P的测定4三. 土壤速效K的测定（NH4OAc浸提，火焰光度计测定法）5土壤有机质测定（稀释热法）6光合作用强度测定81.LI-6400测定系统测定植物光合82.TPS-1光合作用测定系统操作方法10叶绿素含量的测定11植物组织中自由水和束缚水含量、相对含水量的测定13植物根系活力的测定（TTC法）16植物伤流液中糖和氨基酸的鉴定18膜透性的测定20植物组织中丙二醛含量的测定20脯氨酸含量的测定22过氧化物酶活性的测定25过氧化氢酶活性的测定26硝酸还原酶的测定29酸性、中性转化酶30植物组织中可溶
2、性蛋白质含量的测定33（考马斯亮蓝G250染色法）33植物组织中可溶性糖含量的测定（蒽酮比色法）34叶片全N、P、K的测定36一、样品的消化36二、叶片N、P、K的测定37叶片全N的测定37叶片全P的测定38叶片全K的测定39土壤含水量的测定一、基本原理：用取土钻从田间取来土样，在100105恒温条件下，烘烤到干燥状态，并用烘干前后的重量求出土样的含水量占烘烤土样多采用电热恒温干燥箱，它能控制适宜的烘烤温度，因此测定结果比较准确，使用较广，但缺点是测定时间长。有的使用红外干燥箱，虽然缩短了烘土时间，但因温度较高，容易影响测定精度。采用简易加热设备的，则因烘烤温度不易控制，精度较差。称重烘干法是
3、人工取土，劳动强度较大，又不能定点观测土壤湿度的连续变化，往往某些有机质在此温度时能逐渐分解而失重或氧化而增重。因此，用此法只能测得近似的水分含量。由于该法的准确度和精密度通常已达到土壤分析的要求，故测定土壤水分仍以烘箱法为准。二、仪器设备铝盒，土钻，天平，坩埚钳，干燥器，电子天平，分析天平，电热式恒温箱。三、测定步骤：1.在野外土壤水分观测点用土钻取样装入铝盒，取湿土重量一般以30-50g为宜，太少容易产生太大误差。每个观测点应作三次重复。2.称铝盒重：取有编号的铝盒一个，洗净，放入恒温箱中，敞开盖子，在105-110烘干30分钟，用坩埚钳取出放在干燥器中盖好盖子，冷却到室温（大约20分钟）
4、，在分析天平上称重，然后再烘20分钟称重，直到恒重为止，此为铝盒重（W1）3. 取代表性样品约1520克装入铝盒，在室内将装有土样的铝盒称重，在电子天平上用一张小纸称风干土壤样品，并将土壤平铺上述已知重铝盒中，盖上盖子，在分析天平上称量出铝盒加湿土的质量（W2）。每个样品至少重复三次。4.揭开铝盒盖，放入烘箱中，在105下烘至恒重（6-8h），用坩埚钳从烘箱中取出铝盒，盖好盒盖后放入底部有CaCl2的干燥器中约30分钟，如无干燥器则可放入磁盘或木盘中待至不太烫手时称质量。然后，再将样品放入烘箱中烘烤23小时，马上在分析天平上称重称量，即铝盒加烘干土的重量（W3）。一直到前后两次称量相差不超过0
5、.05克时为止。三、结果计算：以烘干土壤为基础水分的百分数以风干土壤为基础水分的百分数式中： W2湿土铝盒重g W3烘干士铝盒重gW1铝盒重g 土壤速效氮、磷、钾的测定一. 土壤速效N的测定（碱解扩散法）1、原理：用1.0N氢氧化钠水解土壤样品，使土壤潜在有效氮，转化为氨气状态，不断逸出，由硼酸吸收，用标准酸滴定，然后计算出水解性氮的含量。2、仪器及试剂配制主要仪器：扩散皿、半微量滴定管、恒温箱试剂配制：（1）1.0N氢氧化钠 称取化学纯氢氧化钠40克，用水解溶解后冷却定容1升。（2）硼酸指示剂液 称取硼酸（H3BO3）20克加水900毫升稍稍加热溶解，冷却，加混合指示剂（0.099克溴甲酚绿
6、和0.066克甲基红溶于100毫升乙醇中）20毫升，然后以0.1N 氢氧化钠调节溶液至红紫色（PH约5.0）最后加入水稀疏至1000毫升，使溶液混合均匀，贮存于塑料瓶中。 （3）0.005mol/L（1/2H2SO4）标准溶液 量取H2SO4（化学纯）2.83mL，加蒸馏水稀释至5000mL，然后用标准碱或硼酸标定之，此为0.020mol/L（1/2H2SO4）标准溶液，再将此标准液准确地稀释4倍，即得0.005mol/L（1/2H2SO4）标准液。（4）碱性胶液 取阿拉伯胶40.0g和水50mL在烧杯中热温至7080。搅拌促溶，约1h后放冷。加入甘油20mL和饱和K2CO3水溶液20mL，搅
7、拌、放冷。离心除去泡沫和不溶物，清液贮于具塞玻瓶中备用。3、操作步骤：取通过60号筛的风干样品2.00克于扩散皿外室，水平的轻轻旋转扩散皿，使样品铺平。在扩散皿内室加入2%硼酸指示剂液2毫升，然后在扩散皿外室边缘涂上碱性甘油，盖上毛玻璃，并旋转数次，以使毛玻璃与皿边完全粘住，再慢慢转开毛玻璃的一边，使扩散皿漏出一条缝，迅速加入1.0N氢氧化钠5毫升于扩散皿外室，立即用毛玻璃盖好。水平轻轻旋转扩散皿，使溶液与土壤充分混匀，用橡皮筋固定，随后小心的放入40度的恒温箱中24小时取出，以0.01N硫酸标准溶液滴定扩散皿内室硼酸溶液吸收的氨量，终点是由蓝绿色转变红紫色，记下所用的标准酸量（V）4、计算结
8、果：式中；c0.005mol/L（1/2H2SO4）标准溶液的浓度； V样品滴定时用去0.005mol/L（1/2H2SO4）标准溶液体积（mL） ； V0空白试验滴定时用去标准液体积（mL） 14.0氮原子的摩尔质量（gmol-1） W样品质量（g）； 103换算系数二. 土壤速效P的测定 鲍士旦主编.土壤农化分析.第三版.北京：中国农业出版社,2000.12:74-83中性和石灰性土壤速效磷的测定（0.5M碳酸氢钠法）1、原理: 石灰性土壤由于大量游离碳酸钙存在,不能用酸溶液提取有效磷.一般用碳酸盐的碱溶液.由于碳酸根的同离子效应, 碳酸盐的碱溶液降低碳酸钙的溶解度，也就降低了溶液中钙的浓
9、度就有利于磷酸钙盐的提取，同时碳酸盐的碱溶液，也降低了铝和铁的活性，有利于磷酸铝和磷酸铁的提取。2、仪器及试剂配制主要仪器：往复振荡机、分光光度计试剂配制：（1）0.5M碳酸氢钠浸提液 溶解42.0克碳酸氢钠于800毫升水中，以0.5N氢氧化钠调节浸提液pH至8.5。此溶液暴于空气可因失去CO2而使pH增高，可于液面加一层矿物油保存。贮存超过一个月，应检查pH是否改变。（2）无磷活性炭 活性炭常常含有磷，应做空白试验，检查有无磷存在。含磷较多，须用2N HCl浸泡过夜，用蒸馏水多次后，再用0.5M碳酸氢钠浸泡过夜，在平瓷漏斗上抽气过滤，每次用少量蒸馏水冲洗多次，并检查到无磷为止。含磷较少可直接
10、用碳酸氢钠处理即可。（3）磷标准溶液 准确称取105烘干过48小时的分析纯KH2PO4 0.2197克于小烧杯中，以少量水溶解，将溶液全部洗入1000毫升的容量瓶中，然后加 H2SO4 5毫升，用水定容至刻度摇匀，此溶液为磷标准溶液(50g/mL P)，吸取50毫升此溶液稀释至500毫升，即溶液为磷标准溶液(5g/mL P)（4）7.5N硫酸钼锑贮存液 A. 5gL-1酒石酸氧锑钾溶液：取酒石酸氧锑钾0.5g，溶解于100mL水中。 B. 钼酸铵硫酸溶液：称取钼酸铵10g，溶解于450mL水中，缓慢地加入153mL浓H2SO4，边加边搅。再将上述A溶液加入到B溶液中，最后加水至1L。充分摇匀贮
11、于棕色瓶中此为钼锑抗混合液。（5）钼锑抗混合显色剂 于100毫升钼锑贮存液中，加入1.5克左旋抗坏血酸，此试剂有效期24小时，宜用前配制。3、操作步骤：称取通过20目筛的风干样品5.00克于200毫升三角瓶中，加入0.5M碳酸氢钠溶液100毫升，再加一角勺无磷活性炭，塞紧瓶塞，在振荡机上振荡30分钟，立即用无磷滤纸过滤，滤液承接于100毫升三角瓶中，立即用无磷滤纸过滤，滤液承接于 100mL三角瓶中，吸取滤液10mL（含磷量高时吸取 2.55.0mL，同时应补加0.5M碳酸氢钠浸提液至10mL）于150mL三角瓶中，再用滴定管准确加入蒸馏水 35mL，然后移液管加入钼锑抗试5mL，摇匀，放置3
12、0min后，用880nm或700nm波长进行比色。以空白液的吸收值为0，读出待测液的吸收值（A）。磷标准曲线绘制： 分别取5 Pg/mL磷标准溶液0、1、2、3、4、5mL于150mL三角瓶中，再加入0.5M碳酸氢钠10mL，准确加水使各瓶的总体积达到45mL，摇匀；最后加入钼锑抗试剂5mL，混匀显色。同待测液一样进行比色，绘成标准曲线。最后溶液中磷的浓度分别为0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5g/mL。4、计算结果：式中式中：p由标准曲线计算出P的质量浓度（g/mL） V显色时定容体积 ts为分取倍数（即浸提液总体积与显色对吸取浸提液体积之比）； m风干土质量（g） k将风干土换算成
13、烘干土质量的系数； 103将g换算成mg；三. 土壤速效K的测定（NH4OAc浸提，火焰光度计测定法）1、原理：以NH4OAc作为浸提剂与土壤胶体阳离子起交换作用。NH4OAc浸提剂常用火焰光度计直接测出。为了抵消NH4OAc的干扰影响，标准钾溶液也需要用1N NH4OAc配制。2、仪器及试剂配制： 主要仪器：火焰光度计、往返式振荡机。试剂配制：（1）1N 中性醋酸铵溶液 称取化学纯醋酸铵77.09克加水稀释，定容至近1L，用HOAc或NaOH调至PH7.0，然后稀释至1升。（2）钾的标准溶液的配制及标准曲线的绘制 准确称取烘干（105 4-6小时）的分析纯KCl 0.1907克溶于水中，定溶
14、至1升，即含K100g/mL。然后分别准确吸取此100g/mL K标准液 0、 2.5、5.0、10.0、15.0、20.0、40.0mL放入100mL容量瓶中，用1N 中性醋酸铵溶液定容，即得 0、2.5、5、10、15、20、40g/mL K标准系列溶液。3、操作步骤：称取通过1毫米筛孔的风干土5.00克于100毫升三角瓶中，加入50毫升1N中性NH4OAc溶液，塞紧橡皮塞，振荡30min，用干的普通定性滤纸过滤。滤液盛于小三角瓶中，同钾标准系列溶液一起在火焰光度计上测定，记录其检流计上的读数，然后从标准曲线上求得其浓度。4、结果计算：式中：V加入浸提液毫升数 W样品烘干重（克）土壤有机质
15、测定（稀释热法）一、原理稀释热法（水合热法）是利用浓硫酸和重铬酸钾迅速混和时所产生的热来氧化有机质，以代替外加热法中的油浴加热，操作更加方便。由于产生的热，温度较低，对有机质氧化程度较低，只有77%。二、仪器及试剂配制仪器：试剂：（1）1mol/L（1/6K2Cr2O7）溶液。准确称取K2Cr2O7（分析纯，105烘干）49.04g溶于水中，稀释至1L。 （2）0.4mol/L（1/6 K2Cr2O7）的基准溶液。准确称取K2Cr2O7（分析纯）（在130烘3h）19.613g于 250mL烧杯中，以少量水溶解，将全部洗入1000mL容量瓶中，加入浓H2SO4约70mL，冷却后用水定容至刻度，充分摇匀备用其中含硫酸浓度约为2.5mol/L（1/2 H2SO4）（3） 0.5mol/LFeSO4溶液。称取FeSO47H2O140溶于水中，加入浓H2SO415mL，
