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1、专题二 细胞工程 2.1.1植物细胞工程的基本技术1.理论基础（原理）：_ ，即具有某种生物全部_的任何一个细胞都具有发育成_的潜能。全能性表达的难易程度：受精卵 _ 生殖细胞 _ 体细胞；植物细胞 _ 动物细胞2.植物组织培养技术过程离体的植物器官、组织或细胞，可以_形成_，之后诱导其_生成_或_，进而发育成完整的小植株。3.植物细胞表现全能性，需要的条件是_、_。4.脱分化就是让_的细胞，经过诱导后，失去其特有的_而转变成_细胞的过程。植物组织培养选取_，这些组织最容易诱导脱分化。5.愈伤组织是指一种高度_的呈_状态的薄壁细胞。培养愈伤组织最初应该_培养。6. 再分化过程中细胞分裂素和生长
2、素比例不同结果也不同：细胞分裂素比例低侧重_，细胞分裂素比例高侧重于_，一样多就只生长不分化。7. 植物体细胞杂交就是将_的植物细胞，在一定条件下融合成_，并将其培育成新的植物体的技术。8. 植物细胞融合首先要去除细胞壁，常采用的方式是_，需要_酶。植物体细胞融合实质上是不同植物体细胞的_融合的过程。一般用物理法和化学法来促使其融合，物理方法有_、振动、_等，化学方法用_作为诱导剂。9. 植物细胞融合成功的标志为_。10. 植物体细胞杂交的意义：克服不同种生物_的障碍。2.1.2 植物细胞工程的实际应用1.微型繁殖技术的优点：保持优良品种的_，高效快速实现种苗的大量繁殖。2.作物脱毒应该选取植
3、物_进行组织培养。3.人工种子就是以_得到的_、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经人工薄膜包装得到的种子。4. 单倍体育种过程：对植物花粉进行_，对其幼苗时期进行_，得到了正常的纯合二倍体植株。5.在植物组织培养中，培养细胞容易受到_和_的影响而产生突变体，可以从有用的突变体中选育出新品种。6.细胞产物的工厂化生产，对植物细胞进行培养，只培育到_阶段，生产对人们有利的产物。2.2.1 动物细胞培养和核移植技术1. 动物细胞培养（1）动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的_，将它分散成_，然后放在适宜的_中，让这些细胞_。（2）动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）剪碎用
4、_处理分散成_制成_转入培养瓶中进行_培养悬液中分散的细胞很快就_当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为_重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分瓶继续_培养。（3）传代培养的细胞一般传至_代后就不易传下去了，_代至_代细胞核型可能会发生变化。当继续传代培养时，少部分细胞获得_性，朝着等同于_方向发展。所以目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为_代以内。（4）动物细胞培养需要满足以下条件:_：培养液应进行无菌处理，通常还要，添加一定量的_，以防培养过程中的污染。应定期更换培养液，防止_对细胞自身造成危害。营养：培养基成分有糖、氨基酸、促生长因子、_、微量元素等。通常需加入
5、_等天然成分。温度：_和pH：_ 。气体环境：95%空气5%CO2 。O2是_所必需的，CO2的主要作用_。（5）动物组织培养可以用在有重要价值的蛋白质生物制品的生产，如烧伤病人的_、有毒物质的检测等。2.动物体细胞核移植技术和克隆动物（1）哺乳动物核移植可以分为_核移植（比较容易）和_核移植（比较难）。应用的原理为_。（2）体细胞核移植的大致过程是： 卵巢卵母细胞体外培养至_吸出_和第一极体将供体细胞注入去核的卵母细胞通过_使两细胞融合激活重组细胞使其发育为_用_技术将胚胎移入代孕母牛体内生出与供体奶牛遗传物质_的犊牛。（3）以上过程属于生殖性克隆，若取病人的体细胞核进行核移植，从重组的早期
6、胚胎中获得_，体外诱导分化形成_，用于自体移植，则称为_。（4）选用去核卵(母)细胞的原因：卵(母)细胞比较_，容易操作；卵(母)细胞_多，营养丰富。卵母细胞必须选用_细胞，原因是该时期_ _。2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体1.动物细胞融合（1）动物细胞融合也称_，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的_细胞，称为杂交细胞。（2）动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同，诱导方法类似，常用的诱导因素有_ 、_、_等。（3）动物细胞融合突破了_的局限，使_成为可能。2.单克隆抗体（1）制备过程：将_注入小鼠体内，分离_细胞，与小鼠_细
7、胞融合，在选择培养基上筛选出_，进行克隆化培养和_，筛选出能分泌所需_的细胞，将其在体外培养或注射到_内增值，就可以提取出大量单克隆抗体。（2）杂交瘤细胞的特点：既能_，又能产生专一的抗体。（3）单克隆抗体的优点：_、_，并可能大量制备。（5）应用： 作为_：准确识别各种抗原物质的细微差异，并跟一定抗原发生特异性结合。 用于治疗疾病和运载药物：主要用于癌症治疗，可制成“_”，借助_的导向作用，将药物_癌细胞所在位置。答案：2.1.11.细胞的全能性 遗传信息 完整生物体 2.脱分化 愈伤组织 再分化 胚状体 从芽 3.植物体的器官或组织处于离体状态 有一定的营养物质、激素和其他外界条件4.已经
8、分化 结构和功能 未分化 根尖、茎尖、形成层部位等分生组织5.液泡化无定形 避光6.生根 生芽7. 不同种 杂种细胞8. 酶解法纤维素酶和果胶 原生质体 离心 电激 聚乙二醇9.产生新的细胞壁10. 远缘杂交不亲和2.1.21.遗传特性 2.分生区附近如茎尖3.植物组织培养 胚状体4. 花药离体培养 秋水仙素处理5.培养条件 外界压力6.愈伤组织2.2.11.（1）组织 单个细胞 培养基 生长和增殖 （2）胰蛋白酶或胶原蛋白酶 单个细胞 细胞悬液 原代 贴壁生长 接触抑制 传代（3）10 10 50 不死 癌细胞 10（4）无菌、无毒的环境 抗生素 细胞代谢产物积累 无机盐 血清、血浆 36.50.5 7.2-7.4 细胞代谢 维持培养液的pH （5）皮肤移植2.（1）胚胎细胞 体细胞 动物细胞核的全能性（2）大 细胞质（2）减数第二次分裂中期 显微操作 细胞核 电刺激 重组胚胎 胚胎移植 基本相同（3）胚胎干细胞 相应的组织、器官 治疗性克隆（4）大，易操作 细胞质 减数第二次分裂中期 含有促使细胞核全能性表达的物质最多2.2.2 1.细胞杂交 单核 聚乙二醇、灭活的病毒、电激 有性杂交方法 远缘杂交2.（1）
