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1、临床病毒学检测标本采集、保存、运送制度临床检测标本涉及：体液、血液、分泌物、排泄物及组织等。能否发现一未知病原，在很大限度上取决于是否能对的、及时收集标本。标本采集、运送和保存的各环节都至关重要，对于检测结果的准确性及有效性影响极大。在常规检测中这些样本也许产生病毒颗粒气溶胶而导致交叉感染，为了防止检查人员的交叉感染，医学实验室安全管理及标本的采集、运送、检测和解决的安全性是十分重要的环节。一、标本的容器运送容器、消毒标本容器、运送媒体、特殊测试的采集和运送的整套工具要严格规定。只有用合适的容器采集和运送的标本才干用于测试。标本容器必须认真加固以防泄漏。超过保质期的容器也不能用于采集和运送。必
2、须在洁净的环境中培养。放在适当倾斜的琼脂或运送媒体上。用旋紧的试管，不要侧旋。病毒分离接种标本必须冷藏。不能使用琼脂培养基和混合培养。把倾斜管或病毒放在能密封的塑料袋中。按规定来放置和运送以上物品。根据原始容器的尺寸来选择传染性标本运送容器。二、贴标签未经合适标明的传染性疾病标本不能用于检测。标本必须写上病人的名字和一个惟一的辨认号码。假如使用独立的分类标签，标签要贴紧以防在运送过程中遗失。在贴标签的过程中不能影响标本的染色。每个切片都要贴上标签（仅在放切片的容器上贴标签是不行的），并且必须贴在接种标本切片的同一侧面。三、检测申请单传染病标本必须具有一个测试申请单或电子申请单。必须注明标本的来
3、源。对于标本的解决来说患者的资料，采集的时间和地点，临床病史，症状和诊断，抗生素的疗程，和任何也许的微生物记录。假如一种微生物送去鉴定，也许具有的其他微生物也必须指出。四、运送运送的时候单纯追求速度是不对的。迅速解决使病原体的生活能力的损失降到最低，并保证菌丛有足够的数量用于精确鉴定。撰写人批准人生效日期邢姚黄志斌2023年1月28日五、检查报告一旦得到精确数据就可得到初步结果。最终结果一般在培养完毕的时候得到。假如需要的话，只要一出现任何阳性，显著的染色或培养（如：血液，CSF，无菌的体液）就可把初步结果告知医生或实验室。电话告知的请求必须写在检测申请单或写在电子申请单的注脚上。必须有患者或
4、实验室的名字以及电话号码。结果或关于结果的说明可以在工作时间从实验室获得。有报告价值的疾病、潜在的也许的疾病注明在最终报告上，判断报告的可信度及对的性则是具体操作的实验室和主治医生的责任。六、临床标本采集的基本原则供分离病毒、检出核酸及抗原的标本，规定做到：1早特别是对用于病毒分离、抗原或核酸检测的标本。2快病毒离活体后在室温下很易死亡，故采得标本应尽快送检。不能及时检测的标本应放放装有冰块或干冰的容器内送检。短时间可低温保存，冻存的标本忌反复冻融。3近用于病毒分离、抗原或核酸检测的标本应尽量取自病变部位或接近病变部位（如脑炎取脑脊液，腹泻取粪便，呼吸道感染取鼻咽分泌物或支气管灌洗液，有病毒血
5、症时采用血液）。4多标本的量不能太少，如有也许一次取多种标本，在病程急性期和恢复期都取标本。5净避免污染标本，特别是用于病毒分离或PCR检测的标本。七、传染病标本采集的具体方法采集合适的标本进行培养是探索传染病的致病微生物的关键环节。一次失败的标本采集也许会导致致病微生物分离的失败，并会增长一系列对受污染的微生物的解决。标本采集的基本概念：1在合适的位置进行采集，避免受附近的组织或分泌物的污染。2在最佳时间采集，血液标本应采集急性期和恢复期双份血清测定抗体滴度。3采集的量要充足。4使用合适的采集工具。消毒的、防漏的标本容器。使用合适的运送媒体（M4用于病毒和Chlamydia培养）。5只要有也
6、许就要在使用抗生素和抗病毒药物之前采集标本。6恰当标记标本并填写检测申请单。写明标本来源。7尽量缩短运送时间。在采集标本到送到实验室这段时间内要维持一个合适的环境。8用7095的乙醇和12的碘酒清洁皮肤表面。消毒作用能维持的最大时间为2min。以下是标本采集的具体说明：撰写人批准人生效日期邢姚黄志斌2023年1月28日【血液】 （病毒或分子测试）1清洁皮肤表面用于血液培养。2在5ml的EDTA真空采血管（lavender top）中采集血液。只有在必须的时候才使用儿科型号的试管（大约3ml）。不要用儿科试管采集成人和大于2岁的儿童的标本。3采集后把试管翻转几次。4采集后除去皮肤表面的碘酒。5此
7、时进行血沉的准备。6直接运送全血标本。不要冷藏或试图从全血标本中提取血沉棕黄层。【体液】无菌（除尿液，脑脊液）。1皮肤表面解决。2使用消毒的针头和注射器采集液体。3取10ml用于分析。剩余标本在封口的注射器中运送。假如有氧菌和无氧菌并存，则使用无氧运送的瓶子，保证厌氧微生物的存活。10ml腹膜液可放在血液培养瓶中。腹膜液是惟一可以放在血液培养瓶中的体液。需病毒分离则把3ml或更少的体液放在病毒运送媒体或无菌瓶中。病毒标本在28下直接送检。【骨髓】1医生在采集的时候必须穿手术衣，戴面罩，戴手套。2皮肤表面解决。3用无菌纱布皱起周边的皮肤。4用无菌针头和注射器经皮抽取骨髓。5在具有SPS的无菌管中
8、放35ml标本。病毒培养和分子测试需要EDTA。6在一般环境下运送标本。【水疱，疱疹】1清洁皮肤表面用于血液培养。2用无菌的针头和注射器吸取液体和（或）脓液。3取样后，置于合适的病毒或细菌运送媒介中。4假如没有液体，则打开水疱或疱疹，用棉球擦伤口来采集细胞。撰写人批准人生效日期邢姚黄志斌2023年1月28日【脑脊液】1采集标本时医生必须穿手术衣，戴面罩、手套。由于要使用一个开口的试管，其别人必须戴面罩或远离，避免呼吸污染。2在皮肤上自中间向周边擦12碘酒，然后擦7090乙醇溶液。3在穿刺的部位用无菌的纱布使皮肤皱起来。4插入针头。把标本注入3支无菌的防漏的试管中。按以下规定采集适当体积：细菌培
9、养1ml。真菌培养810ml。分子测试1ml。分枝杆菌培养810ml。病毒培养2ml。5将试管严密封口。为了减少培养皮肤表面菌丛的也许，使用了第3支试管。将标本冷冻用于分子测试。病毒培养时，假如体积大于3ml则立即冷藏和运送。假如体积小于3ml，则用M4病毒运送媒介在28下运送。【宫颈】（宫颈内）细胞的培养。1患者按截石术的位置放好。2准备内镜的时候尽量用温水不用润滑剂。3插入内镜并显示宫颈口。4用棉球除去多余的黏液。5将一个达可纶棉球伸入宫颈口，轻轻地旋转，保持1030s。6拿出棉球放在运送媒介中。7在室温下运送，病毒培养则在28下运送。【宫颈】（宫颈内）细胞的HPV检测。1使用一个ARUP
10、公司产的Digene阴道取样管。这套工具涉及一个阴道刷和一个用于HPV检测的试管。2孕妇不要使用阴道刷。3在获得DNA测试标本以前先采集Pap点状标本。在阴道镜用乙酸和碘酒解决以前先采集DNA标本。4用棉球或达可纶球除去宫颈口内外多余的黏液。丢弃棉球。5把阴道刷插入宫颈内口11.5cm直至阴道刷庞大部分的刚毛接触到宫颈外口。沿顺时针方向旋转3周。不要把阴道刷所有插入宫颈。6取出刷子。不要使刚毛接触试管外壁或其他物体。7把刷子插入试管底部。在画线处折断，把试管旋紧。8在28下运送。9宫颈活检：新鲜的宫颈组织纵长大于5mm的话必须直接放在Digene标本运送媒介中并冷冻。10液基标本也可采集和运送
11、。【阴道分泌物】阴道分泌物培养经常不能产生故意义的结果。在所有阴道分泌物可用核酸检测实验进行检测。可参阅宫颈取样。【子宫内膜】1使患者位于截石术的位置。2插入内镜显示宫颈口。3把一个窄内径的导管放在子宫口。4通过导管插入一个棉签采集子宫内膜标本。这种方法避免了接触子宫黏膜，减少了感染的也许。5把棉签放在运送媒介中，用于病毒培养则在28下运送。【皮肤】1用7095乙醇溶液清洁皮肤。2在活动伤口的边沿用解剖刀采集表皮碎屑。3把标本放在一个干的无菌容器中。4在室温下送检。撰写人批准人生效日期邢姚黄志斌2023年1月28日【耳】1外耳的培养和解决轻微外伤的方法同样。2中耳液的采集和采集无菌体液同样。假
12、如诊断为中耳疾病，则从硬化鼓膜处取中耳液。【眼】1用温和的消毒剂清洁眼周皮肤。2化脓性结膜炎：用棉签采集脓液；把棉签放在运送媒介中在室温下送检或在28下进行病毒培养。3角膜感染用上述方法擦拭结膜；采集多样的角膜碎屑直接放在病毒运送媒介中；室温下运送或在28下用于病毒培养。4眼内液体：用外科针头吸取液体；用于细菌培养在室温下运送，病毒培养在28下，分子测试则需冷冻。【鼻咽吸出物和（或）冲洗液】1对吸出液来说，将黏液trap系在抽吸泵和导管上，将包装材料留在抽吸管上。打开抽吸管调整到指示的压力。2假如没有专用抽吸泵，将导管插入鼻腔中，向后上方延伸打开外耳道。注意：达成后咽所插入的深度等于从前鼻孔到
13、外耳道的距离。3应用抽吸泵。旋转式移动，慢慢地退出导管。4病毒培养在28转运或分子实验要冷冻。5对于冲洗液来说，抽吸35ml消毒生理盐水放到一个新的生理盐水中。6将球形管插入一侧鼻孔知道鼻孔被阻塞。7挤压球形管向一侧鼻孔慢慢地灌输生理盐水，迅速松开球茎收集可回收的鼻腔标本。8将球形瓶中的液体倒空到一个合适的干燥消过毒的标本容器中，或加3ml或加更少瓶中液体到病毒转运载体中（M4）。9在28转运。撰写人批准人生效日期邢姚黄志斌2023年1月28日【鼻咽擦拭】1患者取合适坐位，将头向后扬起。2插入扩鼻器。3从扩鼻器中插入一个棉签（用一根和伸缩的金属丝）到鼻咽部。4缓慢旋转棉签停留2030s。5移出棉签，放入一个不生长的转运基中（例如原始擦拭标本移出的培养基）。将擦拭标本放入M4载体中用来做病毒培养。6在室温下或28转运做病毒培养。（1）注意：由于棉签尖端很细并且容易干燥所以要用转运载体。也许出现的微生物有很复杂的营养规定。对于儿童来说，可以用特制的球形抽吸泵操作。（2）注释：用一个常规棉签收集前鼻孔的培养标本。对于儿童，用一个鼻咽棉签方便收集标本；室温下转运。
