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1、安全无毒有效长效抗流感病毒材料的应用研究一 项目研究的意义流行性感冒(简称流感)是一种由不断变异的病毒导致的疾病,一种无国界的疾病、一种传播性强、传播速度快的疾病。流感作为全球性监测的传染性疾病,发病率可列为多种传染疾病之首。流感所引起的并发症和死亡非常严重。据世卫组织(WHO)发布的公示,全球每年流感病例为6亿12亿例,死亡50万100万人,其中重症流感病例300500万例,重症流感的死亡率为810。中国是全球流感高发国家之一,发病状况十分严重,例如:的非典(SARS),甲型H1N1流感,H7N9禽流感。 流感不仅严重危害人类健康,并且对畜牧业、经济发展也常导致劫难性的损失,甚至还也许引起社
2、会动乱不安,影响社会稳定。 本项目是试图研究一类安全、无毒、有效、长效可固载于多种材料(棉、纸、无纺布等)表面形成新的抗流感病毒材料,有十分重要和迫切的现实需求和意义。二 项目材料抗流感病毒效果研究将新的抗流感病毒药物固载于无纺布或纸上,形成新的抗流感病毒材料(简称药物)做前期解决和抗流感病毒实验如下:纸片溶于DMEM0.4g:4ml过滤除菌高压除菌倍比稀释,6个浓度4保存 药物解决方式24h内采用MTT法测上述药物试样对MDCK(犬肾传代细胞)毒性。药物对MDCK细胞的毒性(MTT法)抽滤样细胞存活率(%) 药物浓度(mg/ml)高压样细胞存活率(%) 药物浓度(mg/ml)药物在两种解决方
3、式下浓度为1.56mg/ml时均无明显细胞毒性,因此采用1.56mg/ml为抗流感最高容许浓度。 药物寄存时间对细胞的影响050100150502512.56.253.131.56寄存48h药物浓度(mg/ml)细胞存活率(%)0204060502512.56.253.131.56寄存1w药物浓度(mg/ml)细胞存活率(%)样品寄存时间愈长,药物对细胞的毒性作用愈大;寄存48h样品半数无毒浓度在6.25mg/ml如下。药物抗流感病毒实验直接杀伤病毒作用:各浓度药物(无毒范畴内)分别和流感病毒H1NI株4作用6h后,加入胰蛋白酶溶液(终浓度15ug/ml)室温作用10min,常规接种于已长呈单
4、层的MDCK细胞中,吸附2h,弃培养液,PBS洗涤3次,含胰蛋白酶浓度2ug/ml的细胞维持液,观测细胞状况(CPE)48h,并应用MTT法测流感病毒克制率。流感病毒:甲型H1N1株A1A2A3A4A5A6B1B2B3B4B5B6NVA(抽滤样):A1A6药物的浓度依次为3.13、1.56、0.78、0.39、0.20、0.10 mg/ml 。B (高压样):B1B6药物的浓度依次为3.13、1.56、0.78、0.39、0.20、0.10 mg/ml 。N:正常细胞对照V:病毒对照药物对流感病毒H1N1的直接杀伤作用结论: 药物两种解决方式后的样品均具有直接杀伤甲型流感H1N1作用,其中抽滤样抗流感作用较明显。三 结论及建议结论本项目研究的抗流感病毒材料具有: 直接杀伤甲型H1N1流感病毒作用,抗流感作用较明显。 同步对细菌、霉菌也有强的灭杀作用。 经急毒实验证明:该项目材料对人实际无毒;经皮肤刺激实验证明:对完整皮肤无刺激性;人可安全使用。 项目材料在水中浸泡200天后仍具良好的抗菌性能,表白项目材料稳定性良好,可长期使用。建议 将本项目材料作良好的避免一般流感病毒材料推广使用,减少或减少大规模流感发生的也许性。 用本项目研究材料对H7N9进行抗病毒实验,企望它对H7N9流感病毒有良好的杀伤作用。