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肿瘤组织消化方案1. 将保存在-80。的肿瘤组织取出后立即放在37。水浴锅内快速解冻，在超净台内 将组织块吸出放入新的1.5ml EP管中，离心去上清，加入lml红细胞裂解液， 混匀，室温裂解3min （如无血细胞污染可省略）；2. 离心（500g, 5min）去上清，将组织置于60mm培养皿中，用刀片、眼科剪去 除掉脂肪，然后切碎组织（2mm3）,加入lmlHBSS并转移至2ml离心管离心（500g, 5mi n）去上清。2.1乳腺癌加入适量HBSS/细胞培养基配制的胶原酶III工作液（250U/ml）, 37水浴消 化3-4小时（消化过程中每15分钟轻弹混匀）。2.2膀胱癌加入适量HBSS/细胞培养基配置的消化液（每1.5ml含有30ul 50mg/ml的胶原 酶I和15ul 50mg/ml的胶原酶IV），37消化23小时（消化过程中每15分钟 轻弹混匀）注：不同组织类型采用的消化酶和消化时间也不同，可查阅相关文献并摸索出最适的消化条件。3. 消化完成后将细胞悬液用70um细胞筛网过滤，用1mlRPMI+20% FBS冲洗 收集滤过液；4. 500g离心5min，小心去除上清液，保留管底沉淀；5. 用1mlHBSS重悬细胞（如碎片较多可用PBS/HBSS/无血清培养基重复离心清 洗，清洗时用300g离心）附：建议尽量的去除脂肪组织，仅保留实体部分；减少HBSS的洗涤次数。
