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1、2023食品微生物实验报告食品微生物试验报告食品微生物试验篇一：霉菌的培育与形态学视察：试验一真菌培育基的配制与灭菌试验目的：（1）了解培育基的配置原理和方法，驾驭分别培育微生物的有关打算工作。（2）驾驭高压灭菌方法及原理试验原理：（1）培育基的制备原理：培育基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。从养分角度分析：养分：碳源、氮源、能源、生长素、水分和无机盐等；相宜的酸碱度(pH值)和肯定缓冲实力；肯定的氧化复原电位；适宜的渗透压。琼脂是从石花菜等海藻中提取的胶体物质，是应用最广的凝固剂。加琼脂制成的培育基在98100下溶化，于45以下凝固，不简单被微生物污染。但屡次反复溶化，其凝固性降低。（
2、2）湿热灭菌原理高压蒸汽灭菌在密闭的蒸锅内，其中的蒸汽不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温度也随之增加。在0.1MPa的压力下，锅内温度达121。在此蒸汽温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。试验材料与方法配制培育基所需器材试验设备：高压蒸汽灭菌器。试验器材：500ml三角烧瓶、蓝盖瓶、5ml刻度吸管、培育基、天平、砝码、称量纸、药勺、500ml、100ml量筒、牛皮纸、硫酸纸、橡皮筋、铁丝筐、平皿、剪刀等。培育基等集中放讲台前高压桶内，送到洗刷室统一高压灭菌条件及留意事项高压灭菌条件：121.3，15min。含糖培育基113，15min。倒平板电炉加热灭菌好的培育
3、基翻开平皿包装倒平板（10块）留意事项：空气环境无菌（应在酒精灯火焰四周无菌区）。a.在酒精灯火焰处，倾斜翻开瓶口。b.瓶口要过火焰。c.左手掀开平皿小口。d.倾注满皿底再多一点，约10ml（7cm直径平皿）。e.推放一边要轻缓，不能晃起琼脂挂壁，易在培育过程中污染杂菌。f.完全凝固再翻转平板放塑料筐内，4备用。分析与探讨（1）如何证明培育基灭菌是否彻底把灭菌后的培育基按灭菌锅内的不同位置，每处抽取数管(瓶)，标上记号，置2530培育一周左右进行检查。假设培育基没有什么改变，说明灭菌效果良好；假设某一位置的培育基出现了杂菌菌落，可能是摆放的太紧，导致蒸汽不畅，或锅的结构不合理等缘由所致，应依据
4、上述状况进行改进；假设大局部或全部菌种瓶都出现杂菌，说明灭菌温度或灭菌时间不够，应提高压力或延长灭菌时间。经过几次检验都证明能彻底灭菌后，以后按同样条件灭菌的那么不必进行检查。经过几次检验都证明能彻底灭菌后,以后按同样条件灭菌的那么不必进行检查。（2）为什么说消毒与灭菌是微生物学和临床医学必不行少的根本学问由于病原生物广泛存在于自然界，可通过不同途径和媒介进入人体，引起感染或造成疾病流行。因此，杀灭或去除存在于体外传播媒介上的病原生物，对于切断传播途径、预防和限制其感染具有重要意义。自古以来，人们就利用煮沸、火烧、日晒等方法杀灭或去除微生物，到达预防疾病的目的。事实上，除了在临床医疗实践中须要
5、防止微生物的污染或感染外，在微生物学试验室、食物保存、饮水净化、药品与生物制品生产等过程中都须要避开微生物的污染。试验二霉菌的接种与培育试验目的与要求：驾驭霉菌与酵母菌的接种与培育方法。试验原理：接种是微生物试验及科学探讨中一项根本操作技术。依据试验目的和要求，选择适宜的接种工具与接种方法，接种工具有接种环、接种针、接种铲、接种钩、吸管、滴管、棉签等。常用接种方法有：斜面接种，液体接种，穿刺接种，平板接种和固体接种。接种的关键是无菌操作。无菌操作的原那么：在酒精灯火焰旁进行，全部器皿均须严格消毒，培育基应事先做无菌试验，接种工具运用前后须经火焰烧灼灭菌，棉塞不能乱放，始终夹在手指中。在培育四大
6、类微生物时应留意选择相宜的培育条件。多数细菌为专性需氧菌与兼性需氧菌，少数为厌氧菌。多数食品腐败菌和工业用菌种，以及人和动物病原菌的最适生长温度为37，并且在近中性（PH6.57.5）条件下生长良好。多数放线菌为好氧菌，少数为厌氧菌，最适生长温度为2830，多数相宜在偏碱性环境中生长（PH7.58.5）。试验材料与方法（1）试验材料：试验设备：温箱。试验器材：毛霉、曲霉、青霉、根霉、啤酒酵母、白假丝酵母、新生隐球酵母菌、细黄链霉菌、PDA平板、高盐察氏平板、高氏合成I号平板、塑料筐、20%甘油水溶液、镊子、接种铲、无菌盖玻片、无菌滤纸、无菌载玻片、石棉网、牛皮纸、硫酸纸、橡皮筋、铁丝筐等。（2
7、）试验方法：平板接种：毛霉PDA平板（点植法）啤酒酵母PDA平板（五区分别划线法）青霉、曲霉PDA平板（连续划线法）小室载玻片培育法：1、取灭菌后小室平皿。2、取无菌PDA琼脂薄层平板，用镊子夹住盖玻片切割成0.51.0cm2的琼脂块，并将其移至培育小室中的载玻片上，制作过程留意无菌。3、用接种环取少量霉菌的孢子接种于培育基四周，用无菌镊子将盖玻片覆盖在琼脂块上，并(转载于:l灭菌的20%甘油（用于保持湿度），盖上皿盖，标记，置2830培育35d粮食产品的平板接种：1.取粮食样品20g,放入无菌烧杯，加无菌水洗涤，反复10次，弃去水后，将粮粒倒于平皿内备用2.镊子取粮食种入PDA琼脂内，每皿可
8、接种5-10粒。放线菌的接种：取细黄链霉菌划线法接种，在接种的划线处，无菌操作斜插入盖玻片数张。留意事项：1.空气环境无菌（应在酒精灯火焰四周无菌区）2.在酒精灯火焰处，倾斜翻开瓶口。3.接种环运用前，干脆在酒精灯上烧灼灭菌，把环和金属丝烧红即可。4.接种环运用后，先在火焰四周把环上标本烤干，再烧灼灭菌，以免标本汽化，爆烈四溅，污染环境。5.金属杆快速通过火焰23次，杀灭外表微生物分析与探讨1、粮食中产毒真菌的种类及产生毒素？青霉、毛霉、曲霉、根霉、酵母、白念、细黄链霉菌（放线菌）青霉素、丝生毛霉素、黄曲霉素、根霉素、白念菌素。细黄链菌素2、常用霉菌培育基有哪些？马铃薯蔗糖培育基豆芽汁葡萄糖（
9、或蔗糖）琼脂培育基察氏培育基3、霉菌的接种方法有何不同？为什么？（1）连续划线法（青霉、曲霉）青霉与曲霉为局限性生长的霉菌。应采纳连续划线接种法接种。（2）点植法（根霉、毛霉）根霉与毛霉生长区域比较大，应采纳点植法。（3）小室载玻片培育法（青霉、毛霉、根霉、曲霉）试验三霉菌的制片与形态视察试验目的：学习并驾驭视察霉菌形态的根本方法；了解四类常见霉菌的根本形态特征。了解放线菌的根本形态特征。试验原理：霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多（约为3-10m）,常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍显微镜即可视察。霉菌菌丝较粗大，细胞易收缩变形，且孢子简单飞散，所以制标本时常用乳酸石炭酸
10、棉蓝染色液，用此染液做霉菌制片的特点是细胞不变形，具有杀菌、防腐作用，不易枯燥，能保持较长时间，能防止孢子四处飞散，棉兰具有肯定的染色作用，染液的蓝色能增大反差。试验材料：（一）菌种：在马铃薯琼脂平板上培育34天的青霉(Penicilliumsp.)、曲霉(Aspergillussp.)、毛霉（Mucorsp.）、根霉；（二）器材及用具：镊子、载玻片、盖玻片、显微镜。试验方法：（一）干脆制片视察于干净载玻片上，用镊子取霉菌菌落的边缘处取小量带有孢子的菌丝，然后留神地盖上盖玻片。置显微镜下先用低倍镜视察，必要时再换高倍镜（二）小室培育视察将载玻片干脆放低倍镜下视察，再换高倍镜视察。视察原那么：毛
11、霉：用低倍镜视察孢子囊梗、囊轴等。用高倍镜视察孢子囊孢子的形状、大小。根霉：菌丝、孢子同毛霉，留意视察有无假根。曲霉：在高倍镜下视察菌丝有无隔膜，分生孢子着生位置，分辨分生孢子梗、顶囊、小梗和分生孢子。青霉：在高倍镜下视察菌丝有无隔膜，分生孢子梗、副枝、小梗和分生孢子的形态等。试验结果：分析与探讨：青霉和曲霉的形态有哪些异同？青霉常分布在霉腐变质的水果、蔬菜、粮食和皮革等物体上，菌体直立菌丝的顶端长有扫帚状的结构，结构的每一个分枝上，生有成串的孢子，成熟的孢子呈青绿色，进行孢子生殖。曲霉广泛分布在谷物、空气和土壤中，曲霉直立菌丝的顶端膨大成球状，球状结构的外表放射状地生有成串的孢子，孢子随曲霉
12、种类的不同而呈黄色、橙色或黑色。从皮肤取材查真菌如何检查？食品微生物试验篇二：食品微生物综合试验报告项目一：食品中细菌总数的测定1.目的本方法规定了食品中菌落总数的测定方法。本方法适合于各类食品中菌落总数的测定。2.设备和材料温箱：361。恒温水浴：461。电炉吸管。广口瓶或三角瓶：容量为500ml玻璃珠：直径约5mm。平皿：直径为90mm。试管。酒精灯。试管架。灭菌刀或剪子。灭菌镊子。3.测定步骤检样稀释及培育（1）以无菌操作，将检样25g(或mL)剪碎放于含有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内，经充分振摇或研磨做成110的匀称稀释液。（
13、2）用1mL灭菌吸管吸取110稀释液1mL，沿管壁缓缓注入含有9mL灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内(留意吸管尖端不要触及管内稀释液)，振摇试管，混合匀称，做成1100的稀释液。（3）另取1mL灭菌吸管，按上条操作依次，做10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次，即换用1支1mL火菌吸管。（4）依据食品卫生标准要求或对标本污染状况的估计，选择23个相宜稀释度，分别在做10倍递增稀释的同时，即以吸取该稀释度的吸管移1mL稀释液于灭菌平皿内，每个稀释度做两个平皿。（5）稀释液移入平皿后，应刚好将凉至46养分琼脂培育基(可放置于461水浴保温)注入平皿约15mL，并转动平皿使混合匀称。同时将养分琼脂培育
14、基倾入加有1mL稀释液的灭菌平皿内作空白比照（6）待琼脂凝固后，翻转平板，置361温箱内培育482h。菌落计数方法做平板菌落计数时，可用肉眼观查，必要时用放大镜检查，以防遗漏。在登记各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落总数。菌落计数的报告（1）平板菌落数的选择选取菌落数在30300之间的平板作为菌落总数测定标准。一个稀释度运用两个平板，应采纳两个平板平均数，其中一个平板有较大片状菌落生长时，那么不宜采纳，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数，假设片状菌落不到平板的.一半，而其余一半中菌落分布又很匀称，即可计算半个平板后乘2以代表全皿菌落数。平皿内如有链状菌落生长时(菌落之间无明显界线)，假设仅有一条链，可视为一个菌落；假设有不同来源的几条链，那么应将每条链作为一个菌落计。（2）稀释度的选择应选择平均菌落数在30300之间的稀释度，乘以稀释倍数报告之。假设有两个稀释度，其生长的菌落数均在30300之间，那么视两者之比方何来确定。假设其比值小于或等于2，应报告其平均数；假设大于2那么报告其中较小的数字。假设全部稀释度的平均菌落数均大于300，那么应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。假设全部稀释度的平均菌落数均小于30，那么应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。假设全部稀释度均无菌
