《B细胞淋巴瘤SHP1基因甲基化状态及其意义.doc》由会员分享，可在线阅读，更多相关《B细胞淋巴瘤SHP1基因甲基化状态及其意义.doc（3页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、B 细胞淋巴瘤 SHP-1 基因甲基化状态及其意 义作者：汪清铭， 吴祥元， 王东宁， 林曲， 董敏， 温景芸 【摘要】 【目的】 探讨 JAK/STAT 信号转导途径负调控子 SHP-1 基因启动子区域 CpG 岛异常甲基化在 B 细胞淋巴瘤中的意义。 【方法】 收集存档石蜡包埋组织标本 61 例（52 例 B 细胞非霍奇金淋巴瘤标本， 9 例良性增生淋巴结标本） 健康人外周血单个核细胞 DNA 标本 15 例， ，用甲基化特异性 PCR（methylation-specific PCR,MSP）和非甲基化 特异性 PCR（unmethylation-specific PCR,un-MSP）
2、检测 SHP-1 启动 子区域 CpG 岛甲基化状态，MSP、un-MSP 和 RT-PCR 方法分别检测接受 或未接受去甲基化处理的 Burkitt 淋巴瘤细胞系 Raji 的甲基化状态及 mRNA 的表达，MTT 法检测接受去甲基化干预后细胞生长受抑情况。结 【果】 SHP-1 基因启动子区域在弥漫性大 B 细胞淋巴瘤和滤泡性淋巴瘤 甲基化频率分别为 94及 97，对照组 9 例淋巴结良性增生标本和 15 例正常人外周血单个核细胞标本中 SHP-1 基因启动子区域甲基化频 率为 0。经去甲基化干预后，Raji 细胞 SHP-1 基因启动子区域呈去甲 基化状态，基因恢复表达，细胞生长受到抑制
3、。 论】 SHP-1 基因 【结 启动子区域启动子区域 CpG 岛在 B 细胞淋巴瘤中存在高度甲基化，由 其所致的 SHP-1 基因沉默可能是 B 细胞淋巴瘤发生的一个重要因素， SHP-1 基因的甲基化可作为一个良好的分子诊断标记及可能的治疗靶 点。 1【关键词】 淋巴瘤； SHP-1； 甲基化 Abstract: 【Objective】 To investigate the methylation state of CpG island in the SHP-1 gene promoter which is one of the negative regulators of JAK/STA
4、T signaling pathway and to evaluate its significance in B-cell lymphoma. 【 Methods 】 Sixty-one paraffin specimens including 52 specimens of B-cell non-Hodgkin lymphoma and 9 specimens of benign lymphnodes proliferation and 15 specimens of blood mononuclear cells from health individuals were studied,
5、 methylation state of CpG island in SHP-1 gene in the specimens and Raji cell line were detected by methylation specific PCR(MSP) and unmethylation-specific PCR(un-MSP). The expression level of SHP-1 in Raji cells with or without 5-aza-2-deoxyoytidine treatment were detected by reverse transcriptase
6、 PCR(RT-PCR).The inhibitory ratio of Raji cells were measured by MTT assay. 【Results】 The frequency of methylation in SHP-1 gene promoter in large B-cell lymphoma(DLBCL) and follicular lymphoma(FL) were 94% and 97%,respectively.In control group, however,9 specimens of benign lymphnodes proliferation
7、 and 15 specimens of blood mononuclear cells from health individuals showed no methylation 2in CpG island of SHP-1 gene promotor （ P< 0.0001 ） . The expression of SHP-1 was recovered and the cell growth was inhibited when the cell exposed to the demethylating reagent. 【 Conclusion 】 SHP-1 gene si
8、lencling with aberrant CpG methylation is probably one of the critical events to the onset of B-cell lymphoma as well as important implications for the diagnostic markers and the target of gene therapy. Key words: lymphoma; SHP-1; methylation J SUN Yat-sen Univ(Med Sci), 2007, 28(1): 92-96 SHP-1 是一种
9、天然存在于胞浆内的酪氨酸磷酸酶，其通过催化受体相关酪氨 酸 激 酶 （ Janus Kinase, JAKs ） 去 磷 酸 化 导 致 JAK/STAT(Janus kinase/signal transducer and activator of transcription)信号 转导途径活性下调，是 JAK/STAT 途径主要负调控子之一，可对抗蛋白 酪氨酸激酶的潜在促生长和致癌活性，因此，近年来有学者认为其可 能是候选的抑癌基因1。研究表明，基因启动子区域异常甲基化可导 致基因沉默，抑癌基因的甲基化及由其所导致的抑癌基因失表达促进 肿瘤的发生发展。本研究检测 B 细胞恶性淋巴瘤中 SHP-1 基因的甲基 化状态，并对 Raji 细胞系进行去甲基化干预，观察肿瘤细胞 SHP-1 基因表达情况及其生长状态的改变，探讨 SHP-1 基因甲基化在 B 细胞 淋巴瘤发生发展中的意义，为 B 细胞淋巴瘤的诊断和治疗提供新的方 3
