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1、生物作业3（动物细胞工程)1.（07海南）某研究小组进行药物试验时,以动物肝细胞为材料,测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。 请回答下列有关动物细胞培养的问题：（1）将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其它培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量_。（2）在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量血清，其原因是_。细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是_。（3）在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长_。药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可以传代的次
2、数更_。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用_消化处理。（4）为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的_。（5）已知癌基因X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关，要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响，可将甲细胞分为A、B两组，A组细胞培养液中加入_，B组细胞培养液中加入无菌生理盐水，经培养后，从A、B两组收集等量细胞，通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的_或_合成水平的差异，确定Y的药效。2.（08宁夏）回答下列有关动物细胞培养的问题：(1)在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面_时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的_。此时，瓶壁上形成的细胞层数是_。要使
3、贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是_。 (2)随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现_的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成_细胞，该种细胞的黏着性_，细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的量_。(3)现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是_。(4)检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到_期的细胞用显微镜进行观察。(5)在细胞培养过程中，通常在_条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中_的活性降低，细胞_的速率降低。(6)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，
4、这是因为机体把移植的皮肤组织当作_进行攻击。3下图为单克隆抗体制备流程示意图。(1)单克隆抗体制备技术的基础是 。(2)细胞融合是随机的过程，在HAT培养基中培养，目的是 。在细胞培养过程中，培养液中需要添加无机盐，但要注意无机盐的 ，以保证生命活动的正常进行。(3)为选育出能产生高特异性抗体的细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到710个细胞ml，每孔滴入0.1ml细胞稀释液，其目的是_。(4)若用15N标记的氨基酸培养能产生单克隆抗体的细胞，放射性物质在细胞结构中出现的先后顺序是_。4. (2006江苏)下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。 (1)_ _技术是单克隆抗体技术的基础。(
5、2)单克隆抗体与常规的血清抗体相比。最大的优越性是_。(3)动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用诱导剂外，还可以采用_。 (4)选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的_特点，又具备淋巴细胞的_特点。(5)淋巴细胞是由动物体_中的_细胞分化、发育而来。(6)杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是_。5下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解，请据图回答下列问题：（1）请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来。（2）在单克隆抗体制备过程中，之所以选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，是因为它们融合后的杂交瘤细胞具有 、 的特性。（3）由图示可看出,单克隆抗体的制备过程运
6、用了 和 等动物细胞工程技术手段。6如图表示用于预防和治疗禽流感的单克隆抗体生产过程，请回答下列问题：（1）若A细胞是小鼠的骨髓瘤细胞，则B细胞取自 体内的B淋巴细胞，促进d过程的诱导剂是 。（2）假设仅考虑两个细胞的融合，则可形成 种类型的C细胞，因此需用 筛选出具有 特点的D细胞用于培养。筛选出的D细胞还要经过 。（3）在细胞培养所用的培养基中除需要加入糖、氨基酸、促生长因子、无机盐和微量元素外，通常还需加入 等一些天然成分。（4）目前注射禽流感疫苗是预防禽流感的一种措施。决定禽流感病毒在人体细胞中增殖变化的物质是 ，而决定其抗原特异性的物质位于病毒的 上。7. 英国科学家米尔斯坦和柯勒在
7、前人工作的基础上成功制备出了单克隆抗体，他们获得了1984年的诺贝尔医学或生理学奖。下图是他们利用动物细胞工程技术生产单克隆抗体的部分过程示意图，请据图回答相关间题：（1）该图示方案能达到预期的目的吗？_，理由是：_。（2）图中1过程所用的技术手段称为 ，该技术依据的原理是 。（3）图中1过程如果只发生细胞间的两两融合，产生的杂交细胞可能有 种。（4）图中2过程需要用专一性（或特异性）的培养基 所需的杂交瘤细胞。（5）图中经选择性培养的杂交瘤细胞既能_，又能产生_。生物作业3（动物细胞工程练习) 答案1.（1）多（2）血清可以补充合成培养基中缺乏的物质 维持培养液pH（3）停止 多 胰蛋白酶
8、（4）抗生素（5）Y mRNA 蛋白质2.（1）相互接触 接触抑制 单层（或一层） 胰蛋白酶（2）衰老甚至死亡 不死性 降低 减少 （3）由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色（或由于死细胞的膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色） （4）中 （5）冷冻（或超低温、液氮） 酶 新陈代谢（6）抗原 3.（1）动物细胞培养 (2)筛选杂交瘤细胞 种类和数量（浓度）（3）使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的（或单一细胞培养以保证抗体的纯度） （4）核糖体、内质网、高尔基体、细胞膜（2分）4. (1)动物细胞培养(微生物培养) (2)特异性强，灵敏度高 (3)灭活的病毒(4)在体外大量增殖 分泌特异性抗体(5)骨髓 造血干 (6)主动运输(主动吸收) 5.（1）（2）既能无限增殖 又能产生特异性抗体（3）动物细胞融合 动物细胞培养6. (1)感染禽流感病毒的动物或人 聚乙二醇或灭活的病毒 (2)3 选择培养基 既能无限增殖又能产生特异性抗体 克隆化培养和抗体检测 (3)血清、血浆(4)禽流感病毒的RNA 衣壳 （5）特异性强、灵敏度高，并可大量制备7.(1)不能 小鼠没有进行特异性免疫 （2）动物细胞融合 细胞膜的流动性（3）3 （4）筛选 （5）大量繁殖 专一的抗体生物作业3（动物细胞工程） 第 3 页 共 4 页
