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1、生物饵料培养学习题绪论：1.比较生物饵料、饵料生物的区别。饵料生物：指在海洋、江河和湖泊等水域中自然生活的各种可供水产动物食用的水生动、植物。生物饵料： 指经过筛选的优质饵料生物，进行人工培养后投喂给养殖对象食用的活饵料，它们和养殖对象共同生活在一起，在水中正常生长、繁殖，是活的生物。2.生物饵料培养学的含义和内容是什么？生物饵料培养学：主要是研究生物饵料的筛选、培养及其营养价值评价的一门应用性学科。1）、生物饵料的筛选；2）、生物饵料的规模化或大量培养技术研究（基础生物学研究形态、生理生态、生殖性能、抗逆性能、分类和自然分布等，获取大量培养的技术性指标）；3）、生物饵料的营养价值评价（营养价
2、值常随培养条件的变化而变化，常规培养存在营养缺陷，需要进行定向培养和营养强化，以获得符合需要的、营养全面和饵料效果好的生物饵料。应逐步建立生物饵料的营养价值评价体系，研究提高生物饵料营养价值的培养方法和技术。）3.生物饵料必须具备哪些条件？大小适口（微藻5-25m，轮虫100-340m，卤虫初孵幼体400-500m，小型枝角类和桡足类600-1800m，桡足类无节幼体100-400m，大多海鱼和虾蟹类幼体口径为280-360m）。B、便于被摄食（运动能力和分布水层）。C、营养价值高（高含量优质蛋白质、游离氨基酸、维生素和矿物质等），易被消化吸收；D、无毒或毒性小，养殖动物成活率高。E、生命周期
3、短，易爆发性增殖；F、对环境的适应性和抗逆性强，易于大量培养，产量高。G、营养级低（食物链短，培养成本低）。第一章：1.名词解释：光合细菌是地球上最早出现的具有原始光能合成体系的原核生物，是一大类在厌氧条件下进行不放氧光合作用的细菌的总称。2.光合细菌的特点。1、含有光合色素（菌绿素a、b、c、d、e及类胡萝卜素）；2、大多在有光厌氧和无光有氧条件下都能生长，以有光厌氧生长好。3、大多红螺菌科主要以有机物作为供氢体和碳源，在培养过程中不产生氧气。而着色菌科只能利用硫化氢及其他的硫化物为供氢体，以CO2为碳源。4、能够利用水体中的硫化氢，不产生硫沉淀，形成硫酸盐；因固氮酶的存在具有固氮能力。氮源
4、主要是铵盐、氨基氮和氮气，少数利用硝酸盐和尿素。5、营养丰富；维生素B特别多，特别是维生素B12，且含丰富的类胡萝卜素、Co Q和蛋白质；缺陷是几乎不含DHA、EPA。6、繁殖快；7、无毒。3.影响光合细菌大量培养的因子有哪些？如何管理？因子：温度、盐度、淡水或海水、光照、 pH。管理：、搅拌或充气； 、调节光照； 、调节温度； 、测定菌液的光密度值 (O.D.)。 、测定和调整pH；2）、生长情况的观察检查。3）、出现问题的分析和处理。4.光合细菌在水产养殖上的作用有哪些？应注意哪些问题？应用：1）、净化水质；（降低氨氮含量）2）、作为水产动物幼体的饵料；3）、作为饲料添加剂；4）、防治疾病
5、。注意问题：1）、菌种的特异性问题；2）、培养方法和生产工艺不同影响菌的质量。3）、具体使用时的问题：使用环境和使用对象要符合其生理生态特性。（A、用“早潜伏期法”； B、选择指数生长期C、考虑水交换量； D、尽可能避免与抗生素同时使用； E、用固定化方式培养的菌则可换水。）第二章：1.什么是纯培养？什么是单种培养？它们有什么区别？纯培养：即无菌培养，是指排除了包括细菌在内的一切生物的条件下进行的培养。单种培养：在培养过程中不排除细菌存在的一种培养方式。2.一次性培养、半连续培养与连续培养三者之间有何异同？一次性培养：在各种容器中，配制培养液，把少量的藻种接种进去，在适宜的环境下培养，经过一段
6、时间（一般5-7d），藻细胞生长繁殖达到较高的密度，一次性全部收获。微藻培养最简单的方法。半连续培养：是在一次性培养的基础上，当培养的藻细胞达到或者接近收获的密度时，每天收获一部分藻液并补充等量的培养液，继续培养。生产上常用方法，每天收获量根据育苗的需要来决定。连续培养：分恒浊培养和恒化培养。恒浊培养：先确定收获中的藻细胞密度，由光电仪器自动监测，当培养容器中藻细胞密度超过规定数值时，藻液自动流出，新的培养液同时流入，自动化仪器不断地调整流出率，保持藻细胞密度相对稳定。恒化培养，以一种重要的营养盐（如硝酸盐）的浓度为指标，当这种营养物质的浓度降低到某一水平时，收获一定的藻液，同时加入等量的含有
7、一定数量的营养物质的培养液，保持培养容器中藻细胞生长率的稳定。连续培养能使藻细胞生长繁殖的环境条件稳定，藻细胞始终处于指数生长期，生长迅速，产量高。3.微藻培养的工艺流程包括哪些环节？试简述之。1、消毒：通过物理或化学方法对容器、工具、海水进行消毒；2、配制培养液：配方的选择、营养盐母液的配制；3、接种：选取无污染、生命力强、生长旺盛的藻种来接种，接种的藻液量与新配制的培养液量的比例，一级培养为1：21：4，二级培养和三级培养比例最少不低于1：50，一般以1：101：20为宜，接种的时间在上午8：0010：00为宜；4、培养管理：1）气体供应 2)、调节光照 3)、调节温度 4)、注意酸碱度的
8、变化5)、防虫、防雨 6）对藻生长情况的观察和检查7）问题的分析和处理；5、采收：一般用水泵直接抽取藻液。4.微藻在一次性培养中的生长具有哪些特征？试简述之。微藻在一次性培养中的生长呈现为五个时期：延缓期：细胞数目没有明显变化，呈暂时静止状态；指数生长期：细胞迅速生长繁殖，细胞数目以几何级数增加；相对生长下降期：细胞生长繁殖的速度与指数生长期相比逐步下降；静止期：细胞数目保持稳定；死亡期：藻细胞大量死亡，细胞数目迅速减少。5.光是如何影响微藻生长的？藻类在光合作用中吸收的光谱是不同的，不同的光质对藻细胞的生长繁殖和细胞物质的合成产生明显影响；不同的藻类各有其适宜的光照强度，超出适光范围，光照强
9、度增加，光合作用反应减弱甚至受到抑制；光在细胞液中的穿透也会影响微藻对光的吸收；不同的藻类有不同的光周期，过强和过长时间的光照会引起光抑制，不利于藻类的生长。6.从自然界中如何分离获得目的藻种（株）？1、采样；2、预培养：1）、营养盐浓度应低些；2）、藻的种类多，尝试多种不同的培养液；3）、培养浓度尽量高；4）、藻类不繁殖，则加入辅助生长有机物质如葡萄糖、蛋白胨等；5）、勤观察，勤检查，及时分离。3、分离 ：1）、初分离：据藻的生物学特性（集群、趋光等）进行分离。2）、微吸管分离法适于个体较大的种类；3）、水滴分离法：（1、制作、选择微吸管；2、消毒工作台、工具；3、稀释藻样；4、试管中加少量
10、培养液，镜检，分离；5、补充培养液至1/4，封口培养。）4）、平板分离法A、制备平板培养基；B、喷雾法或划线法分离。7.微藻藻种应如何保藏？单用固体培养基保藏的藻种，接种后首先放在适宜的光照条件下培养，待藻细胞生长繁殖达到较高的密度，在平板上可看到颜色明显的条状或好块状的藻细胞群，再移置低温、弱光的条件下保藏。双相培养基保藏的藻种，接种后可直接移置低温、弱光的条件下保藏。低温、弱光的条件，通常是指放在冰箱内，温度控制在45之间，冰箱内装一支8W的日光灯管，开光设在冰箱外，每天照明12小时，也可长期连续照明。8.在微藻培养中，二氧化碳是怎样补给的？1）、通过搅拌增加水与空气的接触面，使空气中的二
11、氧化碳溶入培养液中。2）、把普通空气从管道通入培养液中，通过微小气泡增加水与空气的接触面，使空气中的二氧化碳溶入培养液中。3）、把二氧化碳含量为1-5%的混合空气，从管道通入培养液中，可少量连续充气或较大量地间歇充气。4）、在培养液中加碳酸氢钠作为补充碳源。9.藻种水滴分离法的具体操作。1、制作、选择微吸管；2、消毒工作台、工具；3、稀释藻样；4、试管中加少量培养液，镜检，分离；5、补充培养液至1/4，封口培养。绪论与第二章总结:一、名词解释：海泥抽出液：取海滩上沙质较少，有机质较多而又不是过分淤黑的上层软泥，清除其中的小树枝和小石块等杂物，以容量计算一份泥加两份水，充分搅拌均匀，静置12mi
12、n，待粗沙、小石下沉后，把上层泥浆倾入铝锅中，弃去底部粗沙、小石等杂物，按每1000ml泥浆加入1g的量加入NaOH，煮沸2030min，煮时需不断地搅拌。煮后静置24h，吸取上清液使用。这上清液即为海泥抽出液。人工选育：人工选育是在培养过程中，不经过特殊处理，利用自然变异，有目的地定向选择优良性状的藻种。诱变育种：诱变育种是指人为地利用物理的或化学的因素，诱发微藻产生遗传变异，通过对突变体的选择和鉴定，培育出有利用价值的新品种或新的种质资源。饱和光强（最适光强）：光合作用或细胞分裂速度达到最高值时的光强。光补偿点：光合作用产生的氧气量和呼吸作用消耗的氧气量相等时，细胞只能维持基础代谢而不能生
13、长，这时的光强称。二、简答：如何预防澡液守污染。1、防：1）、思想重视，严格防止污染，藻种要纯；2）、保持培养藻类的生长优势和数量优势；A、接种指数生长期藻种；B、培养条件较适宜于藻种；C、接种量大。3）、做好藻种的分离、培养和供应工作。2、治：1）、过滤；2）、使用药物抑制或杀灭敌害生物（0.03%的医用浓氨水有效杀死尖鼻虫）；3）、改变生态条件（扁藻-73.178.3；盐藻-70100g/L；酸化扁藻-pH3 0.51h）；4）、生物学方法 。三、叙述：1.单胞藻的一般培养方法。一、容器、工具的消毒：1、加热消毒法：1）灼烧 2）煮沸 3）烘箱 4）高压蒸汽灭菌锅；2、化学药品消毒法：1）
14、酒精；2）高锰酸钾；3）含氯消毒剂；二、培养液的配制：1、海水的处理：1）用超滤膜；2）煮水；3）含氯消毒剂处理； 4）超声波处理；2、培养液的配制（施肥）：3、接种：1）考虑藻种的质和量；2）考虑接种的时间。4、培养管理：1）日常管理：A、气体供应；B、调节光照；C、调节温度；D、注意酸碱度的变化；E、防虫、防雨。2）对藻生长情况的观察和检查；A、肉眼观察；B、显微镜检查。3）问题的分析和处理：A、内因；B、外因。2.比较各藻培养的生态条件及形态特征。3.影响微藻生长的因子有哪些？如何影响？影响微藻生长的主要因子有光、温度、营养盐、酸碱度、碳源、有机营养物质和生物因子。光：当营养和温度不限制
15、微藻的生长时，光就成为光能自养微藻的生长的限制因子；温度：微藻只有在适应的温度范围内进行正常生长，超出适应温度范围的底限和高限，微藻的生命活动就受到影响；盐度：盐度对微藻的影响主要表现在渗透压方面，微藻对生活环境的盐度变化有一定的适应范围和最适范围；矿物质营养：微藻需要从外界吸收无机矿物质元素来制造有机物；二氧化碳：二氧化碳是微藻培养中的主要碳源供应形式；有机营养物质：有些微藻在得到有机质后，生长更适宜，在黑暗中进行异养培养时，葡萄糖是常用的碳源；大多数情况下微藻培养中有细菌等其他生物的存在。第三章:1.简要叙述轮虫一次性培养、半连续培养和大面积土池培养方法。一次性培养：在轮虫培养中，先培养微
16、藻饵料，待浓度较大后，接种轮虫进去，补投酵母菌饵料培养，经4-7d，繁殖达到一定的密度，一次全部采收，采收后再清池重新培养。半连续培养：半连续培养又称间收法培养，在轮虫培养池中，先培养藻类饵料，后接种轮虫，培养中补投酵母菌饵料。待轮虫繁殖达一定密度后，每天将一部分轮虫用虹吸法采收。采收后，把藻类培养池的藻液抽入轮虫培养池，补回采收的部分，恢复原来水位。大面积土池培养法：大面积土池培养法也是半连续培养方法的一种。先选定几亩到十几亩。泥质或泥沙质，不渗漏，池底平整，堤坚固的培养池，进行清池处理，待清池药效消失后，即可灌水入池，紧接着即施肥培养微藻饵料，随后进行接种，一般以0.51个/ml较为适宜。维持藻类饵
