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1、实验室常用染色液配方1、吕氏（Loeffler）美蓝染色液A液：美蓝（Methyleneblue）0.3克95%酒精毫升B液：氢氧化钾（KOH）0.01克蒸馏水100毫升分别配制A液和B液，然后混合即成。2、齐氏（Ziehl）石炭酸复红染色液A液：碱性复红（Basicfuchsin）0.3克95%酒精10.O毫升B液：石炭酸（苯酚）5.0克蒸馏水95毫升将碱性复红溶于95%酒精中，配成A液。将石炭酸溶于蒸馏水中，配成B液。将两者混合即成。3、结晶紫染色液（Huclker改订）A液：结晶紫（Crystaiviolet）2.5克95%酒精25.0毫升B液：草酸铵（NH4）2C2O4H2O1.0克蒸
2、馏水100毫升将结晶紫研细后，加入95%酒精，使之溶解，配成A液。将草酸铵溶于蒸馏水，配成B液。两液混合即成。4、路戈氏（Lugol）碘液（革氏鉴别染色用）碘1.0克碘化钾2.0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，再将碘溶于碘化钾溶液中，溶时可稍加热，最后加足蒸馏水量。5、番红染色液（革氏鉴别染色用）番红O（SafraninO）2.0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液（芽孢染色用）孔雀绿（Malachitegreen）5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细，加少许95%酒精溶解，再加蒸馏水。7、Dorner黑素液（英膜染色用）黑素（Nigrosin）10.0克蒸馏水100毫升福尔马林
3、（40%甲醛）0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟，加入福尔马林作为防腐剂，用玻璃棉过滤。8、刚果红染色液刚果红（Congored）2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液（放线菌染色用）结晶紫染色液（同3）5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液（真菌制片，短期保存）石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸（比重l.21）10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化，加入乳酸和甘油，最后加入棉蓝，溶解即成。1. 11动物组织石蜡切片染色方法苏木精-伊红（HE）染色：二甲苯I,n各10min,依次进入无水乙醇、950mL/L,900mL/L,800mL/L及7
4、00mL/L的酒精各5min，蒸馏水洗；入苏木精染液10min，盐酸酒精分色4s,自来水洗10min;依次入700mL/L,800mL/L及900mL/L酒精各5min，入伊红染液染色10min;入950mL/L及无水乙醇I,n各5min,以二甲苯透明，中性树脂封片一、常用染色液的配制碘-碘化钾（I2-KI）溶液能将淀粉染成蓝紫色，蛋白质染成黄色，也是植物组织化学测定的重要试剂。配方：碘化钾2g；蒸馏水300ml；碘1g先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，待全溶解后再加碘，振荡溶解后稀释至300mL,保存在棕色玻璃瓶内。用时可将其稀释2-10倍，这样染色不致过深，效果更佳。2. 苏丹川（sudan川或
5、W）能使木栓化、角质化的细胞壁及脂肪、挥发油、树脂等染成红色或淡红色，是著名的脂肪染色剂。配方：（1）苏丹Ill或苏丹W干粉0.1g;95%酒精10ml;过滤后再加入10ml甘油（2）先将0.1g苏丹III或IV溶解在50ml丙酮中，再加入70%酒精50ml。（3）苏丹III70%乙醇的饱和溶液。3. 1%醋酸洋红（acetocarmine）酸性染料，适用于压碎涂抹制片，能使染色体染成深红色，细胞质成浅红色。配方：洋红1g；45醋酸100ml煮沸2h左右，并随时注意补充加入蒸馏水到原含量，然后冷却过滤，加入4%铁明矶溶液12滴(不能多加，否则会发生沉淀)，放入棕色瓶中备用。4. 改良苯芬品红染
6、色液(Carbolfuchsine)核染色剂。配制步骤：先配成三种原液，再配成染色液。原液A:3g碱性品红溶于100ml70%酒精中。原液B:取原液A10ml加入到90ml5%石炭酸水溶液中。原液C:取原液B55ml，加入6ml冰醋酸和6ml福尔马林(38%的甲醛)。(原液A和原液C可长期保存，原液B限两周内使用)染色液：取C液1020ml,力口45%冰醋酸8090ml,再加山梨醇11.8g,配成10%20%浓度的石炭酸品红液，放置两周后使用，效果显著(若立即用，则着色能力差)。5. 适用范围:适用于植物组织压片法和涂片法，染色体着色深，保存性好，使用23年不变质。山梨醇为助渗剂，兼有稳定染色
7、液的作用，假如没有山梨醇也能染色，但效果较差。/sell中性红(neutralred)溶液用于染细胞中的液泡，可鉴定细胞死活。配方:中性红0.1g；蒸馏水100ml使用时再稀释10倍左右。6. 曙红Y(伊红，eosinY)酒精溶液常与苏木精对染，能使细胞质染成浅红色，起衬染作用。配方:曙红0.25g；95%酒清100ml也常用于95%酒精脱水时，加入少量曙红溶液，其目的是在包埋、切片、展片、镜检时便于识别材料。7. 钉红(rutheniumred)染液钉红是细胞胞间层专性染料，其配后不易保存，应现用现配。配方:钌红510mg；蒸馏水25-50ml龙胆紫(gentianviolet)为酸性染料，
8、适用于细菌涂抹制片。8. 配方:龙胆紫0.21g；蒸馏水100ml苯胺兰(anilineblue)溶液为酸性染料，对纤维素细胞壁、非染色质的结构、鞭毛等，尤其是染丝状藻类效果好。还多用于与真曙红作双重染色，对于高等植物多用于与番红作双重染色。9. 配方:苯胺兰1g；35%或95%酒精100ml间苯三酚(phloroglucin)溶液用于测定木质素。配方:间苯三酚5g；95%酒精100ml注:此溶液呈黄褐色即失效。橘红G(orangeG)酒精溶液为酸性染料，染细胞质，常作二重或三重染色用。配方:橘红G1g；95%酒精100ml番红(safraninO)为碱性染料，适用于染木化、角化、栓化的细胞壁
9、，对细胞核中染色质、染色体和花粉外壁等都可染成鲜艳的红色。并能与固绿、苯胺兰等作双重染色，与橘红G、结晶紫作三重染色。配方:(1)番红水溶液番红0.1或1g；蒸馏水100ml(2)番红酒精溶液番红0.5或1g；50%(或95%)酒精100ml(3)苯胺番红酒精染色液甲液番红5g+95%酒精50ml乙液苯胺油20ml+蒸馏水450ml将甲、乙二溶液混合后充分摇均匀，过滤后使用。10. 固绿(fastgreen)又称快绿溶液。为酸性染料，能将细胞质，纤维素细胞壁染成鲜艳绿色，着色很快，故要很好的掌握着色时间。配方：（1）固绿酒精液固绿0.1g；95酒精100ml（2）苯胺固绿酒精液固绿1g；无水酒
10、精100ml；苯胺油4ml配后充分摇匀，过滤后使用。现配现用效果好。U苏木精（hematoxylin）染液苏木精是植物组织制片中应用最广的染料，是苏木科植物苏木的心材提取出来的。它是很强的细胞核染料，而且可以分化出不同颜色。配方很多，现举海登汉氏（Heidenhains）苏木精染色液，又称铁矾苏木精染色液。配方：甲液（媒染剂）：硫酸铁铵（铁明矾）2-4g；蒸馏水100ml（必须保持新鲜，最好临用之前配制）乙液（染色剂）：苏木精0.5-1g；95酒精10ml；蒸馏水90ml配制步骤：（1）将苏木精溶于酒精中，瓶口用双层纱布包扎，使其充分氧化（通常在室内放置两个月后方可使用）。（2）加入蒸馏水，塞
11、紧瓶口，置冰箱中可长期保存。切片需先经甲液媒染，并充分水洗后才能以乙液染色，染色后经水稍洗再用另一瓶甲液分色至适度。铁矾苏木精染液为细胞学上染细胞核内染色质最好的染色剂，但要注意甲液与乙液在任何情况下决不能混合。15亚甲基蓝染液常用于细菌、活体细胞等的染色。取0.1g亚甲基蓝，溶于100ml蒸馏水中即成。詹纳斯绿B（JanusgreenB）染液将5.18gJanus绿溶于100ml蒸馏水，配成饱和水溶液。用时需稀释。稀释的倍数应视材料不同而异。硫堇染液取0.25克硫堇（也称劳氏青莲或劳氏紫）粉末，溶于100ml蒸馏水中，即可使用。使用此液时，需要用微碱性自来水封片或用1%NaHCO3水溶液封片
12、，能成多色反应。黑色素液水溶性黑素10g，蒸馏水100mL,甲醛（福尔马林）0.5mL。可用作荚膜的背景染色。19墨汁染色液国产绘图墨汁40mL,甘油2mL，液体石炭酸2mL。先将墨汁用多层纱布过滤，加甘油混匀后，水浴加热，再加石炭酸搅匀，冷却后备用。用作荚膜的背景染色。吕氏（Loeffier）美蓝染色液A液：美蓝（methyleneblue,又名甲烯蓝）0.3g,95%乙醇30mL;B液：0.01%K0H100mL。混合A液和B液即成，用于细菌单染色，可长期保存。根据需要可配制成稀释美蓝液，按1:10或1:100稀释均可。革兰氏染色液（1）结晶紫（cristalviolet）液：结晶紫乙醇饱
13、和液（结晶紫2g溶于20mL95%乙醇中）20mL,1%草酸铵水溶液80mL。将两液混匀置24h后过滤即成。此液不易保存，如有沉淀出现，需重新配制。芦戈（Lugol）氏碘液：碘1g,KI2g，蒸馏水300mL。先将KI溶于少量蒸馏水中，然后加入碘使之完全溶解，再加蒸馏水至300mL,即成。配成后贮于棕色瓶内备用，如变为浅黄色能使用。（3）95%乙醇：用于脱色，脱色后可选用以下（4）或（5）的其中一项复染即可。（4）稀释石炭酸复红溶液：碱性复红乙醇饱液（碱性复红1g，95%乙醇10mL，5%石炭酸90mL）10mL，加蒸馏水90mL。番红溶液：番红O（safranineO,又称沙黄O）2.5g,
14、95%乙醇100mL,溶解后可贮存于密闭的棕色瓶中，用时取20mL与80mL蒸馏水混匀即可。以上染色液配合使用，可区分出革兰氏染色阳性（G+）或阴性（G-）细菌，前者蓝紫色，后者淡红色。20. 齐氏（Ziehl）石炭酸复红液：碱性复红0.3g溶于95%乙醇10mL中为A液；0.01%KOH溶液100mL为B液。混合A、B液即成。姬姆萨（Giemsa）染液（1）贮存液：称取姬姆萨粉0.5g，甘油33mL，甲醇33mL。先将姬姆萨粉研细，再逐滴加入甘油，继续研磨，最后加入甲醇，在56C放置1-24h后即可使用。应用液（临用时配制）：取1mL贮存液加19mLpH7.4磷酸缓冲液即成。也可以贮存液：甲
15、醇=1:4的比例配制成染色液。1%瑞氏（Wrights）染色液称取瑞氏染色粉6g,放研钵内磨细，不断滴加甲醇（共600mL）并继续研磨使溶解。经过滤后染液须贮存一年以上才可使用，保存时间愈久，则染色色泽愈佳。二、常用试剂的配制（一）显微镜镜头清洁剂将乙醚和乙醇按7：3混合，装入滴瓶备用。用于擦拭显微镜镜头上油迹和污垢等（注意瓶口必须塞紧，以免挥发）。（二）固定液福尔马林-乙酸-酒精固定液（FAA，又称万能固定剂）福尔马林（38%甲醛）5ml+冰乙酸5ml+70%酒精90ml，可用于固定植物的一般组织，但不适用于单细胞及丝状藻类。幼嫩材料用50酒精代替70酒精，可防止材料收缩；还可加入5ml甘油
16、（丙三醇）以防蒸发和材料变硬。FAA可兼作保存剂。福尔马林-丙酸-酒精固定液（FPA）福尔马林5ml+丙酸5ml+70%酒精90ml，用于固定一般的植物材料，通常固定24h,效果比FAA好，并可长期保存。1. 福尔马林-丙酸-氯仿固定液（卡诺固定液）配方一：无水酒精3份冰乙酸1份。配方二：无水酒精6份冰乙酸1份氯仿3份。是研究植物细胞分裂和染色的优良固定液，材料固定后，用95%和85%的酒精浸洗，清洗2-3次，也可转入70%酒精中保存备用。甘油-酒精软化剂甘油1份50%或70%酒精1份，适用于木材的软化，将木质化根、茎等材料排除空气后浸入软化液中，时间至少一周或更长一些，也可将材料保存于其中备用。铬酸-乙酸固定液根据固定对象的不同，可分强、中、弱3种不同的配方：弱液配方：10%铬酸2.5m
