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1、 影响家兔血液凝固的因素摘要 目的 通过测定某些条件下的血液凝固时间，探究各种因素对血液凝固的影响，加深理解影响血液凝固的因素。 方法 将家兔颈动脉采血放血，用不同因素处理各试管血液，通过测定凝血时间，对比分析各个因素对血液凝固的影响。 结果 血液凝固的顺序分别为加了肺组织浸液的试管，棉花的试管，室温的试管，生理盐水的试管，涂了了石蜡的试管；放在冰块里，加了肝素和草酸钾的血液在一个小时内未见凝血现象；被竹签搅动并弃去纤维蛋白的血液没有凝固。 结论 肺组织浸液，少量棉花能促进凝血；生理盐水，肝素，草酸钾，低温能抑制凝血；并且外源性凝血比内源性凝血时间短；不含纤维蛋白的血液不会凝固。 关键词 血液
2、凝固;棉花;液体石蜡;肝素;草酸钾;肺组织浸液Abstract Objective. Under certain conditions by measuring blood clotting time, explore the various factors on blood coagulation and deepen our understanding of the factors that affect blood coagulation Methods Bleding the rabbit carotid blood ,using different factor manage in
3、each test tube of blood，by measuring the clotting time, analysis of the impact of various factors on blood coagulation. Results The potassium oxalate, coated paraffin oil in the wall, heparin, low-temperature processing of blood clotting time longer than the room temperature, put a little cotton, th
4、e lung tissue after infusion of blood clotting time shorter than room temperature, stirred with a bamboo stick through the blood does not and then solidified. Conclusion Potassium oxalate, heparin, low temperature can inhibit blood coagulation; increase the rough surface, tissue factor can promote b
5、lood coagulation; And extrinsic coagulation time coagulation time shorter than the endogenous; fiber protein is produced by the process of blood coagulation in the essential material.血液凝固过程是有许多凝血因子参加的酶促反应。根据血液凝固过程中凝血酶原激活途径不同，可将血液凝固分为内源性激活途径和外源性激活途径。内源性凝血是指参与血液凝固的凝血因子全部存在于血浆中；外源性凝血因子是指在组织因子参与下的血凝过程。本
6、实验采用动物颈动脉放血取血，血液几乎未与组织因子接触。因此，凝血过程主要是内源性凝血系统的作用。肺组织浸液中含丰富的组织因子，加入试管观察外源性凝血系统的作用。1.材料和方法1.1实验动物家兔，浙江中医药大学动物实验中心提供。1.2实验仪器兔手术台，常规手术器械，动脉夹，动脉插管，注射器，试管8支，小烧杯2个，试管架,竹签1束(或细试管刷),秒表。1.3实验药品和试剂生理盐水（NS），肝素（8U/ml），2%草酸钾溶液，液体石蜡，肺组织浸液，少量棉花，冰水，200g/L氨基甲酸乙酯1.4 实验步骤1.4.1 用200g/L 的氨基甲酸乙酯按 5ml/kg 体重剂量给家兔耳缘静脉注射麻醉，将家兔
7、仰卧位固定于固定架上1.4.2 切开颈部皮肤，分离出一侧颈外动脉，头端用线结扎，向心端夹上动脉夹。用眼科剪在近结扎线处的血管壁剪一“V”形小口，向心方向插入动脉插管，用线结扎固定。以备取血之用。1.4.3 取8支试管，编号，1号试管作为正常对照组不做任何处理，2号试管置于冰水中，3号试管内表面均匀涂液体石蜡，4号试管底置少量棉花，5号试管滴加生理盐水0.1ml，6号试管滴加肺组织浸液0.1ml，7号试管滴加肝素0.1ml，8号试管滴加草酸钾溶液0.1ml。1.4.4 实验观察18试管每管加入血液2ml，立即用秒表计时，每隔15s将试管倾斜一次，观察血液是否凝固，至血液成为凝胶状，记下所经历时间
8、。1.4.5 准备10ml的烧杯2个,编号。分别放血5ml ,1号烧杯作为对照不做任何处理。2号烧杯用竹签朝一方向搅动血液, 待竹签上出现凝血块时,并观察去纤维蛋白的血液是否凝固。2.结果1.加入生理盐水、草酸钾、涂石蜡油于管壁、肝素、低温处理的血液凝固时间较室温长，放少许棉花、肺组织浸液处理后的血液凝固时间较室温短，详见表1。表1. 因素对家兔血液凝固的影响实验的原始数据记录 单位：小时：分：秒影响因素试管编号开始凝血的时间凝血块出现的时间凝血时间温度变化室温2510:00:000:27:430:27:43试管置于冰块中20:00:000:00:0050m内未出现凝固光滑面试管内表面涂石蜡油
9、30:00:000:46:340:46:34试管底置少许棉花40:00:000:18:510:18:51加入不同试剂生理盐水0.1ml50:00:000:34:340:34:34肺组织浸液（含组织因子）0.1ml60:00:000:10:120:10:128单位/ml的肝素0.1ml70:00:000:00:0050m内未出现凝固2%的草酸钾0.1ml80:00:000:00:0050m内未出现凝固2.烧杯1中血液不加任何处理，正常凝血。烧杯2中不断用竹签搅动血液，1h后竹签上缠绕有白色丝状物，血液不再凝固，详见表2。 表2. 观察纤维蛋白在家兔血液凝固中的作用烧杯编号观察将10ml血液放入小
10、烧杯中静置1血液会凝固将10ml血液放入小烧杯中，并用竹签朝一个方向搅动，将缠于竹签上的全部纤维蛋白弃之2血液不会再凝固3.讨论3.1 血液凝固机理 血液凝固的化学本质是溶胶状态的纤维蛋白原转变成凝胶状态的纤维蛋白，催化此反应的主要是凝血酶。而正常血液中以无活性的凝血酶原形式存在，在一定条件下被激活而成为凝血酶。凝血酶原激活物是由活化的凝血因子和磷脂胶粒和钙的形式复合物，因此凝血因子的活化是导致血液凝固的触发机制，据触发凝血过程的形式不同，又有内源性和外源性凝血之分。内源性凝血是指因心血管内膜受损或血液抽出机体外接触异物表面而触发的，仅有血管内凝血因子参与的凝血过程；外源性凝血则指有损组织释放
11、的组织凝血活素所参与的凝血过程13.2 低温对凝血的影响 将血液置于冰块中，凝血时间较室温长。因此，本次实验证明低温可抑制凝血作用。其机制为凝血酶发挥作用需要适宜的温度，温度适宜时，凝血酶活性高，血凝速度快。温度较低时凝血酶活性低，血凝速度慢。3.3 涂石蜡油于管壁对血液凝固的影响 胶原、内毒素等均为表面带负电荷的物质，当无活性的凝血因子与这些物质表面发生接触后，其精氨酸残基上的胍基在负电荷影响下分子构型发生改变，它的活性部分丝氨酸残基暴露，所以因子被激活（此种激活方式称接触激活或固相激活）2。而石蜡油为绝缘体，可把试管表面所带的负电荷覆盖，延长凝血时间。3.4 棉花对血液凝固的影响 实验中在
12、血液中放入少许棉花后血液凝固时间较室温缩短。棉花给血液凝固提供了一个粗糙的表面。粗糙表面可引发血小板集聚,而相对光滑的表面可阻止纤维蛋白和血小板聚集的粘附。3.5 加入生理盐水稀释了血液，使单位体积内凝血酶的浓度降低，因此血液凝固时间延长。3.6 肺组织浸液对凝血的影响 肺组织浸液含组织因子，而组织因子在凝血过程中起促进作用。组织因子是一种脂蛋白复合物，含有大量磷脂。当它进入血浆后。血浆中的钙离子将因子连接于组织因子的磷脂上，形成复合物，后者可使凝血因子X活化为Xa，并与Ca2+、因子V和血小板磷脂相互作用而形成凝血酶原激活物，然后通过与内源性凝血系统后阶段相同的途径，完成凝血的化学反应3。因
13、此，肺组织浸液可促进血液凝固，本次实验中加入肺组织浸液0.1ml后血液凝固时间明显缩短。3.7 肝素对血液凝固的影响 在试管内放入肝素，由于肝素是机体内重要的抗凝物质，它主要通过与血浆中的一些抗凝蛋白，如抗凝血酶结合，加强后者的抗凝作用；此外肝素还能使血管内壁细胞释放凝血抑制物和纤溶酶原激活物，增强纤溶作用。因此血液不会发生凝固。3.8 草酸钾对凝血的影响 在试管中加入草酸钾，它可与Ca2发生反应生成草酸钙沉淀而使血液中无Ca2。由于凝血过程中Ca2是重要的凝血因子，其参与了血液凝固的许多环节，当血液中没有Ca2时血液就不会发生凝固。因此血液不会发生凝固。3.9 竹签搅动对血液凝固的影响 实验
14、中用竹签不断搅拌血液1 h后，即使停止搅拌，血液也不再凝固。而在竹签上可见白色丝状物，该物质即为不溶性的纤维蛋白。血液凝固的实质就是血浆中的可溶性纤维蛋白原转变成不溶性的纤维蛋白的过程2。纤维蛋白交织成网，把血细胞和血液的其他成分网罗在内，从而形成血凝块。用竹签搅动后不容性的纤维蛋白被粘附在竹签上，血液中可溶性纤维蛋白原被完全消耗后，不再产生不溶性的纤维蛋白，血液自然无法凝固。4.结论肺组织浸液，少量棉花能促进凝血；生理盐水，肝素，草酸钾，低温能抑制凝血；并且外源性凝血比内源性凝血时间短；不含纤维蛋白的血液不会凝固。5.参考文献1 汪学荣，周成兰血液凝固机理的研究J肉类研究，2005（11）：45-472 眭建病理生理学M第1版江苏：江苏大学出版社，20083 张志雄生理学M第2版上海：上海科学技术出版社，2011
