《骨状态的指标.doc》由会员分享，可在线阅读，更多相关《骨状态的指标.doc（4页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、观察指标光镜下的骨组织形态结构;骨密度( BM D) ;骨钙和骨磷含量。观察指标的时间和方法:各实验组在第10周和第20周随机取5只大鼠用lOg/L戊巴比妥钠溶液腹腔麻醉( 3. 0 mg/kg)后再处死。取左侧股骨经固定、脱钙、脱水、石蜡包理，再切片HE染色200倍光镜观察骨组织形态结构;取右侧股骨分离软组织后烘干用XR一600双能X光骨密度测量仪测量骨密度，扫描宽度为1. 5 cm，长度为4. 3 cm，扫描速度为4. 0 s / m。测量骨密度后的右侧股骨再置于 105烤48 h至恒重，称重后再把干骨移人柑祸内，加热炭化至无烟，降温至600恒温60 min，加20%的盐酸溶解，用去离子水
2、至容量刻度，用W FX一IE2型原子吸收分光光度计测定骨钙含量。骨磷测量采用测定骨钙同样方法烘干至恒重称重后再加人20%的盐酸，置于110烤箱中24 h使之完全溶解，最后开瓶加去离子水至容量刻度，应用南京建成生物工程公司生产的磷试剂盒，722型可见分光光度计测定骨磷的含量，按说明书操作。观察指标 (1)体重和饲料摄入量：每周称量1次体重，记录2次食物摄入量。(2)股骨重量测定：实验结束动物处死后剥离右侧股骨。于1052烤箱中烤至恒重称量骨干重。(3)股骨骨密度测定：用双能x光骨密度仪测最左侧股骨中点及远心端的骨密度。(4)骨钙含量测定：实验结束后处死动物剥离钉侧股骨，于105烤箱中烤至恒重，称
3、世骨干霞，移入坩埚内，置电炉上炭化至无烟为止。移入马弗炉，升温至500，恒温30 rain，再升温至700。恒温60 min。样品灰化后，加入20的盐酸完全溶解，移入50 m1容量瓶中，用去离子水定容至刻度采用原子吸收法测定。仪器为SPECTRAA220Z原子吸收光谱仪(澳大利亚VARIAN公司)。(5)生化指标：谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总蛋白、白蛋白、白蛋白球蛋白、总胆固醇、甘油三酯、肌酐和尿素氮。上述指标均用日立7600全自动生化仪检测。参数测量采用德国OPTON公司生产的AIRS型训-算机半自动图象分析系统，每只鼠观察荧光切片和甲苯胺蓝染色切片各2张。测量参数如下:相对骨小梁体积=骨小梁
4、面积/总面积X100% 平均骨小梁厚度=200 X骨小梁面积/1. 199X骨小梁周长。 平均骨小梁间隔=200x(总面积一骨小梁面积)/1. 199X骨小梁周长。矿化沉积率=荧光双标记间距/双标记间隔时间。1 . 静 态 参 数: 用 来 评 价 药 物防 治 效 果 ， 描 述 骨量 的 多 少 和 骨小 梁 的 形 态结 构。， 骨 小 梁 面 积 百 分 数 ( % T b . A r ) : 指 骨 小 梁 面 积占 骨 组 织 面 积 的 百 分 率，反 映 骨量的 多 少，由 宽 度 和 数 量二 者 共同 决 定。. 骨小 梁 宽 度 ( T h . T h ) : 用 于 描
5、 述 骨 小 梁结 构 形 态， 解 释 骨 量 变 化。 其变 化 可 影 响 骨 量， 在 数量 一 定 的 条 件 下， 宽 度 越 宽 ， 骨 量 越 多. 骨 小 梁 数 量 ( T b . N ) : 用 于 描 述 骨 小 梁 结 构 形 态 ， 解 释 骨 量 变 化。 其 变化可影响 骨量， 在宽 度一定的 条 件下， 数量 越多， 骨量 越多。， 骨 小 梁 分 离 度 ( T h . S p ) : 指 骨 小 梁 之 间 的 平 均 距 离 ， 用 来 描 述 骨 小 梁结 构 形 态。 分 离 度 越大， 骨小 梁 之间 的 距 离 就 越 大， 骨就 越 疏 松。2
6、 . 动 态 参 数: 动 态 参 数 包 括 骨 吸 收 参 数 和 骨 形 成 参 数 ， 通 过 动 态 参 数，可以 了 解 骨 表 面 矿 化的 量 和 速率， 并 解 释 静 态 参 数 变 化的 原因。骨 形 成 参数: 荧 光 周 长百 分 率 ( % L . P m ) : 反 映 进 行 矿 化的 骨周 长占 骨表 面总 周 长的百 分 率， 也 反 映 成 骨 细 胞 的 数 量.矿 化 沉 积 率 ( M A R ) : 指 每 天 矿 化 的 速 度。 反 映 骨 矿 化 的 快 慢， 代 表成 骨 细 胞的 活 性。 骨 形 成 率 ( B F R / T V )
7、: 每 年新 形 成的 骨小 梁 面 积占 骨 组 织面 积的 百 分比 ， 代 表 每 年 骨 小 梁 表 面 新 形 成 的 骨 的 总 量. 它 受 两 个 因 素 影 响 ， 一 是骨 量 的 多 少 ， 骨 量 越 多 就 提 供 更 多 的 新 骨 形 成 所 需 的 骨 小 梁 表 面 ; 二 是骨 形 成 活 跃 程 度， 骨 形 成 越活 跃， 在 单 位 长 度 上 形 成的 新 骨 就 越多。骨 吸 收 参 数: 破 骨 细 胞 数 f 量( N . O c ) : 单 位 骨 小 梁 面 积 上 的 破 骨 细 胞 数， 反 映 骨 表 面破 骨 细 胞 出 现 的 数
8、 量 多 少 ， 反 映 与 破 骨 细 胞 有 关 的 骨 吸 收 情 况.， 测量左 侧股骨远 端与胫骨 近端骨骺 和干骺 端松 质骨 的 3 个参数 ： T A r ( 总组织 面积 ) ， T b Ar ( 骨 小 梁 面 积 ) ， Tb P m( 骨 小 梁 周 长 )。骨组织形态计量学参数上述测量仅测出了特征物的二维长度和面积（点计数除外），根据体视学原理，尚需转换为三维参数。这样，二维的长度与面积应理解为三维的面积与体积。现在有专门的骨科软件可供使用，若无，则需代入相应公式计算。骨组织形态计量学参数共60多个，具体可分为静态参数和动态参数，常用于研究骨折愈合的参数57有：2.4
9、.1 静态参数类骨质均宽（Osteoid width，O.Wi）：将类骨质测n次宽度后，取平均值。公式：O.Wi=类骨质宽度之和/n （m）类骨质表面（Osteoid surface，OS）：指类骨质表面长度占骨小梁表面长度的比例。公式：OS=类骨质表面长度/骨小梁表面长度 （%）类骨质体积（Osteoid volume，OV）：类骨质面积占骨组织面积的比例。也叫类骨质体积密度、体积分数、面积分数。公式：OV=类骨质面积/骨组织面积 （%）成骨细胞指数：指每1 mm骨小梁表面长度平均成骨细胞个数 （个/mm）。矿化骨痂均宽（Mineralization width，MLW）：将矿化骨痂测n次宽
10、度后，取平均值 （m）。矿化骨痂体积（Mineralization volume ，MLV）：为矿化骨痂面积占骨组织面积的比例。其含义及公式同类骨质体积 （%）。破骨细胞吸收表面（Osteoclastic resorption surfaces，ORS）： 指Houseship陷窝的表面长度与骨小梁表面长度的比值（%）。破骨细胞指数：指每1 mm骨小梁表面长度平均破骨细胞个数（个/mm）。上述为骨的形成参数，为骨的结构参数，为骨的吸收参数。2.4.2 动态参数矿化率（Mineralizition rate，MAR）：指每日在活性成骨表面新沉积的矿化骨厚度。MAR=双标记带平均宽度/双标记间隔天
11、数（m/d）纠正矿化率（Adjusted Mineralization rate，jMAR）：jMAR=MAR双标长度/类骨质表面长度（m/d）矿化延迟时间（Mineralization lagtime）：类骨质宽度除以纠正矿化率即为矿化延迟时间。骨形成率（Bone formation rate，BFR）：BFR=矿化率单标长度（骨小梁表面长度/骨小梁面积）100（m2/md）。骨吸收率（Bone erosion rate，BER）：BER=吸收陷窝深度/吸收陷窝表面长度（平均骨壁厚度/MAR）（m2/md）平均骨壁厚度是粘和线到骨小梁表面的距离，甲苯胺蓝染色不易观察，需用特定的染色方法。其他尚有骨重建周期、双标记表面和单标记表面等参数。
