WS琼脂化学性质

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1、WS琼脂 的化学性质,质量标准及用途化学性质原 理:胨、牛肉膏粉提供碳源、氮源、维生素和矿物质;氯化钠维持均衡的渗透压;乳糖、蔗糖为可发酵的糖类;十二烷基硫酸钠、溴麝香草酚兰和酸性复红抑制革兰氏阳性菌;硫代硫酸钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢的产生,使菌落中心呈黑色;琼脂是培养基的凝固剂;溴麝香草酚兰和酸性复红为pH指示剂,发酵糖产酸的菌落呈红色,不发酵糖的菌落为蓝绿色。配方(每升):胨12g牛肉膏粉3g氯化钠5g乳糖12g蔗糖12g十二烷基硫酸钠2g琼脂15g酸性复红 0.1g溴麝香草酚兰0.064g硫代硫酸钠6.8g柠檬酸铁铵0.8g最终pH 7.50.2溴麝香草酚兰Bromothymol b

2、lue.0.064g硫代硫酸钠Sodium thiosulfate.6.8g柠檬酸铁铵Ferric ammonium citrate.0.8g最终pH Final pH.7.50.2胨Peptone.12g牛肉膏粉Beef extract.3g氯化钠Sodium chloride.5g乳糖Lactose.12g蔗糖Sucrose.12g十二烷基硫酸钠Sodium lauryl sulfate.2g琼脂Agar.15g酸性复红Acid fuchsin.0.1g 质量标准本培养基倾注平皿待冷却后呈草绿色,质控菌株接种后。361培养18-24h,观察结果如下表:菌名菌号生长状况菌落特征鼠伤寒沙门氏菌

3、CMCC(B)50115良好绿蓝,可有黑心宋内氏志贺氏菌CMCC(B)51592良好绿蓝大肠埃希氏菌ATCC25922部分抑制桃红色可有胆酸沉淀金黄色葡萄球菌ATCC6538被抑制用途用于沙门氏菌的选择性分离(GB/T4789.282003 中4.23,GB/T4789.42003)。使用方法:1、 称取本品68.8g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,待冷至50左右,在无菌环境中,倾注灭菌平皿,待凝固后,备用。2、 用接种环取增菌液一环,划线接种于平板上。3、 将平板放入恒温培养箱中,361培养18-24h。4、 观察结果。DHL琼脂的化学性质,质量标准及用途化学性质原 理

4、: 蛋白胨、牛肉膏粉提供碳源、氮源、维生素和矿物质;乳糖、蔗糖为可发酵的糖类;去氧胆酸钠和柠檬酸钠抑制革兰氏阳性菌及大多数的大肠菌群和变形杆菌,但不影响沙门氏菌的生长;硫代硫酸钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢的产生,使菌落中心呈黑色;中性红为pH指示剂,发酵糖产酸的菌落呈红色,不发酵糖的菌落为无色;琼脂是培养基的凝固剂。配方(每升):蛋白胨20g牛肉膏粉 3g乳糖 10g蔗糖10g去氧胆酸钠1g硫代硫酸钠 2.3g柠檬酸钠1g柠檬酸铁铵1g中性红0.03g琼脂15g最终pH 7.30.2质量标准本培养基倾注平皿待冷却后呈红色,质控菌株接种后。361培养1824h,观察结果如下表:菌名菌号生长状况菌

5、落特征鼠伤寒沙门氏菌CMCC(B)50115良好无色半透明可有黑心福氏志贺氏菌CMCC(B)51572良好无色至淡红色半透明大肠埃希氏菌ATCC25922部分抑制桃红色或粉红色金黄色葡萄球菌ATCC6538被抑制用途用于肠道致病菌特别是沙门氏菌和志贺氏菌的选择性分离培养(GB/T4789.282003 中4.20,GB/T4789.42003和GB13091-91和SN0170-92)。使用方法: 1、 称取本品63.3g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,待冷至50左右,在无菌环境中,倾注灭菌平皿,待凝固后,备用。2、 用接种环取增菌液一环,划线接种于平板上。3、 将平板放

6、入恒温培养箱中,361培养1824h。4、 观察结果。HE琼脂的化学性质,质量标准及用途化学性质原 理: 胨、牛肉膏粉提供碳源、氮源、维生素和矿物质;乳糖、蔗糖和水杨素为可发酵的糖类;胆盐、去氧胆酸钠、溴麝香草酚兰和酸性复红抑制革兰氏阳性菌;氯化钠维持均衡的渗透压;硫代硫酸钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢的产生,使菌落中心呈黑色;琼脂是培养基的凝固剂;溴麝香草酚兰和酸性复红为pH指示剂,发酵糖产酸的菌落呈红色,不发酵糖的菌落为蓝绿色。配方(每升):胨12g牛肉膏粉 3g乳糖12g蔗糖12g水杨素2g胆盐20g氯化钠 5g琼脂15g溴麝香草酚兰0.064g酸性复红0. 1g硫代硫酸钠6.8g柠檬酸铁

7、铵 0.8g去氧胆酸钠2g最终pH7.50.2质量标准本培养基倾注平皿待冷却后呈草绿色,质控菌株接种后。361培养1824h,观察结果如下表:菌名菌号生长状况菌落特征鼠伤寒沙门氏菌CMCC(B)50115良好浅绿蓝,可有黑心宋内氏志贺氏菌CMCC(B)51592良好绿蓝大肠埃希氏菌ATCC25922部分抑制橙红橙黄色,可有胆酸沉淀金黄色葡萄球菌ATCC6538被抑制用途用于肠道致病菌特别是沙门氏菌和志贺氏菌的选择性分离培养(GB/T4789.4-2008)。使用方法:1、 称取本品90.8g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,待冷至50左右,在无菌环境中,倾注灭菌平皿,待凝固

8、后,备用。2、 用接种环取增菌液一环,划线接种于平板上。3、 将平板放入恒温培养箱中,361培养1824h。麦康凯琼脂的化学性质,质量标准及用途化学性质原 理:蛋白胨、胨提供碳氮源、维生素和生长因子;牛胆盐和结晶紫可抑制革兰氏阳性菌的生长;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;乳糖为可发酵的糖类;中性红是pH指示剂,细菌发酵乳糖产酸时菌落呈粉红色并在菌落周围出现胆盐沉淀的浑浊圈。 配方(每升): 蛋白胨17.0g胨 3.0g牛胆盐5.0g氯化钠 5.0g琼脂 4.0g乳糖10.0g中性红0.03g最终pH 7.20.2 质量标准下列菌株经361培养1824h,生长情况如下表:菌 名菌

9、号 生长状况 菌落特征大肠埃希氏菌 ATCC25922良好粉红或红,周围有混浊胆盐沉淀圈鼠伤寒沙门氏菌CMCC(B)50115 良好无色半透明奇异变形杆菌CMCC(B)49005良好 无色半透明金黄色葡萄球菌ATCC6538 不长或差 胨Proteose peptone.20g (BR)琼脂Agar.14g乳糖Lactose.10g中性红Neutral red.0.03g最终pH Final p牛胆盐Bile salts.5g氯化钠Sodium chloride.5gH.7.20.2用途供分离发酵乳糖的革兰氏阴性肠道杆菌。(中华人民共和国药典2005年版)使用方法:1、 称取本品54g,加入蒸

10、馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121高压灭菌15min。2、 待培养基冷至5055倾注灭菌平皿,待凝固后,备用。3、 取待检样品划线接种于麦康凯平板。4、 将平板置培养箱于361培养1824h。5、 观察结果。在做致泻大肠埃希氏菌检验时,观察结果不但要注意乳糖发酵的菌落,同时也要注意不发酵和迟发酵的菌落。危险性质储存方式贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。马铃薯葡萄糖琼脂 (PDA)的化学性质,质量标准及用途化学性质原 理: 马铃薯浸出粉有助于各种霉菌的生长;葡萄糖提供能源;琼脂是培养基的凝固剂;氯霉素可抑制细菌的生长。马铃薯 300g(从中提取浸

11、出粉) 葡萄糖 20g 琼脂 15g 氯霉素 0.1g 最终pH 6.00.2质量标准本品倾注平皿,下列菌株接种后2528培养72h生长情况如下表。 (含抗生素)菌 名 菌 号生长状况 菌落特征黑曲霉ATCC16404良好菌丝白色孢子黑色白色念珠菌ATCC10231良好菌落表面呈奶油色大肠埃希氏菌 ATCC25922 被抑制 金黄色葡萄球菌ATCC6538被抑制用途供霉菌和酵母菌计数及分离培养(GB/T4789.282003,GB/T4789.152003中4.78)。 使用方法:1、 称取本品40.1g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121高压灭菌20min

12、,备用。2、 霉菌和酵母菌计数时,参照021030高盐察氏琼脂培养基使用方法。3、 用于霉菌分离鉴定,参照021020察氏琼脂。庆大霉素琼脂的化学性质,质量标准及用途化学性质原 理:蛋白胨、牛肉膏粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;蔗糖提供碳源;亚硫酸钠可刺激弧菌生长;柠檬酸钠、庆大霉素和亚碲酸钾及较高的 pH可抑制革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性杂菌;霍乱弧菌对酸性环境比较敏感,因此该pH值可增强其生长;琼脂是培养基的凝固剂。配方(每升): 蛋白胨 10g牛肉膏粉 3g氯化钠 5g蔗糖10g柠檬酸钠10g无水亚硫酸钠3g庆大霉素500U琼脂15g最终pH8.50.2质量标准下列菌株接种后于361培养2024h,结果如下:菌名菌号生长状况菌落特征霍乱弧菌V60好淡灰色大肠埃希氏菌ATCC25922

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