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1、NH+N、N03-N 的测定：称取相当于10g干样的新鲜堆肥样品。用去离子水按肥水比1： 10在室温条件下以200r/ min下水平振荡1h,纱布过滤并经离心机以l000r / min离心30min。上清液用慢速定量滤纸 过滤.收集滤液。NH4+N用2 mol L-1KCl浸提-靛酚蓝比色法，NO3- N用紫外分光光 度法测定。NH4+N2 mol L-1KCl浸提-靛酚蓝比色法：一、原理2 mol L-1 KCl溶液浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的NH4+及水溶性NH4+浸提出来。土壤 浸提液中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性燃料靛酚蓝，溶液的 颜色很稳定。在含氮0.05
2、0.5 mol L-1的范围内，吸光度与铵态氮含量成正比，可用比色法 测定。二、仪器1、振荡机2、分光光度计三、试剂（1）2 mol L-1 KCl溶液：称取149.1 g氯化钾（分析纯）溶于水中，稀释至1L。（2）苯酚溶液：称取苯酚（分析纯）10g和硝基铁氰化钠（硝普钠，有剧毒）100mg，稀释 至1L。此试剂不稳定，须贮于棕色瓶中，在4。冰箱中保存。（3）次氯酸钠碱性溶液：称取氢氧化钠（分析纯）10g、磷酸氢二钠（Na2HPO4 . 7H2O） 7.06g、 磷酸钠（Na3PO4 12H2O） 31.8g和52.5 g L-1次氯酸钠（即含5%有效率的漂白粉溶液）10 mL 溶于水中，稀释
3、至1L，贮于棕色瓶中，在4。冰箱中保存。（4）掩蔽剂：将400g L-1的酒石酸钾钠（KNaC4H4O6.4H2O,化学纯）溶液与100 g L-1的EDTA 二钠盐溶液等体积混合。每100mL混合液中加入10 mOl L-1氢氧化钠0.5mL。（5）2呻ml-1铵态氮（NH4+-N）标准溶液：称取干燥的硫酸铵】（NH4） 2SO4,分析纯0.4717g 溶于水中，定容至1L。即配制成含铵态氮（N） 100gg.mL-1的贮存溶液；使用前将其加入水 稀释40倍，即配制成含铵态氮（N） 2.5gg.mL-1的标准溶液备用。四、试验步骤（1）浸提 称取相当于10.00g干土的新鲜土样（若是风干土，
4、过10号筛）准确到0.01g， 置于250mL三角瓶中，加入氯化钾溶液50mL，塞紧塞子，在振荡机上振荡1h。取出 静置，放置澄清后，将悬液的上部清液用干滤纸过滤，澄清的滤液收集于干燥洁净 的三角瓶中。如果不能在24h内进行，用滤纸过滤悬浊液，将滤液储存在冰箱中备 用。（2）比色 吸取土壤浸出液2ml10ml（NH4+-N，2gg-25gg）放入50mL容量瓶中，将氯化 钾溶液补充至10mL，然后加入苯酚溶液5mL和氯化钠碱性溶液5mL，摇匀。在20C 左右的室温下放置1h后，加掩蔽剂1mL以溶解可能产生的沉淀物，然后用水定容至 刻度。用1cm比色槽625nm波长处（或红色滤光片）进行比色，读
5、取吸光度。（3）工作曲线 分别吸取0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00mL NH+-N标准液于50mL容4 量瓶中，各加10mL氯化钾溶液，同（2）步骤进行比色测定。五、结果计算土壤中 NH4+-N 含量（mg.kg-1） =cxVxts/m式中：c显色液铵态氮的质量浓度（gg.ml-1）； V显色液体积（mL）；ts分取倍数；m土样质量（g）。注意：显色后在20C左右放置1h，再加入掩蔽剂。过早加入会使显色反应很慢，蓝色偏弱;加入过晚则生成的氢氧化物沉淀可能老化而不易溶解。NO3-一 N紫外分光光度法：一、实验原理用氯化钠溶液提取土壤硝态氮，于紫外分光光度计上分别测量
6、其210和275纳米的吸光度， 前者是硝酸根和以有机质为主的杂质的吸收值，后者是以有机质为主的杂质的吸收。因为 275纳米处硝酸根已无吸收，而有机质在275纳米处的吸收值是210纳米处的f倍，故可将 A275校正为有机质在220纳米处的干扰吸收，从A220中减去，即得硝酸根在220纳米处得 真实吸收值，再利用标准曲线法求得土壤中硝态氮得含量。二、仪器和试剂1. 紫外、可见分光光度计和石英比色皿。2. 50毫升容量瓶10个，100和250毫升锥形瓶各4个，漏斗4个，普通试管4支，50毫 升胖肚吸管1支，5、10毫升和2毫升刻度吸管各一只，滴管2支。3. 氯化钠溶液1mol/L:称取氯化钠58.4
7、4克溶于400毫升水中，转入1升容量瓶中，稀释 至刻度。4. 硝态氮标准溶液100gg/ml:称取于105C烘制2小时得硝酸钾0.3609克溶于水，转移 至500毫升容量瓶中，用水定容。临用时再稀释至20gg/ml。5. 硫酸溶液，10%(V/V)四、操作步骤1. 待测液制备称取10.00克风干土样于250毫升锥形瓶中，加入50毫升1 mol/L的氯化钠溶液，加塞振 荡30分钟，过滤于干净干燥的100毫升锥形瓶中，初液弃去。同时做试剂空白。2. 标准曲线绘制与测定吸取20gg/ml硝态氮标准溶液0.00、0.50、1.00、2.00、5.00、10.00毫升分别置入50毫 升容量瓶中，用水定容
8、至刻度后，再加入2毫升10%硫酸溶液，摇匀。浓度分别为0.00、 0.20、0.40、0.80、2.00和4.00gg/ml。以试剂空白作参比，分别于220纳米和275纳米 处测定吸光度，不要每测一个样品改变一次波长，以避免逐次改变波长而引入波长重现性误 差。若土壤浸体液吸光度太大，可用氯化钠溶液稀释，但应按比例加入硫酸溶液。测定时，向比色皿中加入待测液不要超过3/4容积。3. 待测液测定：吸取滤液520mL (视NO3-N浓度)置于50ml容量瓶中，用蒸馏水稀 释至刻度，用1cm石英比色皿分别在220nm、275nm进行比色测定吸光度。3. 结果计算根据测得A220和A275，按下式计算硝态氮的吸光度AA A=A220-2A275硝态氮(mg/kg) =C*V*D/mC标准曲线查得的NO3- N含量V比色测定液总体积，mlD分取倍数m样品质量，g由入从工作曲线上查得相应浓度，乘以液土比和稀释倍数，即为土壤硝态氮含量。
