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1、 1.2基因工程的基本操作程序第1课时目的基因的获取基因表达载体的构建一、选择题题型一基因工程的基本操作步骤1基因工程主要操作步骤的顺序是()基因表达载体的构建将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定目的基因的获取A BC D答案C解析基因工程的主要操作步骤顺序：目的基因的获取基因表达载体的构建将目的基因导入受体细胞目的基因的检测和鉴定。题型二目的基因的获取2获取目的基因的方法有多种，下列不属于目的基因获取方法的是()A从基因组文库中获取 B从cDNA文库中获取C直接从受体细胞中提取 D利用PCR技术获取答案C解析获取目的基因的方法有多种，例如可以从基因组文库中获取目的基因，可以从cDNA文
2、库中获取目的基因，也可以利用PCR技术获取目的基因，故A、B、D不符合题意；受体细胞是接受目的基因的细胞，受体细胞自身不含目的基因，C符合题意。3下列关于基因文库的说法，错误的是()A可分为基因组文库和部分基因文库BcDNA文库属于部分基因文库C基因组文库的基因在不同物种之间均可进行基因交流D同种生物的cDNA文库中基因数量较基因组文库少答案C解析基因组文库中只有部分基因能够在不同物种之间进行基因交流。4下列有关PCR技术的说法，不正确的是()APCR是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术BPCR技术的原理是DNA双链复制C利用PCR技术获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核
3、苷酸序列DPCR扩增中需要解旋酶解开双链DNA答案D解析利用PCR技术获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物，C正确；PCR扩增中目的基因受热变性后解链为单链，不需要解旋酶解开双链DNA，D错误。5某基因比较小，且核苷酸序列已知，获得该基因的最佳方法是()A以mRNA为模板反转录合成DNAB以4种脱氧核苷酸为原料人工合成C将供体DNA片段转入受体细胞中，再进一步筛选D先建立基因文库，再从中筛选答案B解析目的基因的获取方法主要有三种：从基因文库中获取、利用PCR技术扩增、人工合成。对于比较小且核苷酸序列已知的目的基因，可以通过DNA合成仪用化学方法直接人工
4、合成。6下列有关获取目的基因的叙述，不正确的是()A获取目的基因是实施基因工程的第一步B目的基因可以是一些具有调控作用的因子CPCR技术的原理是DNA复制，需要DNA连接酶催化DNA合成D目的基因可以从自然界中分离，也可以人工合成答案C解析目的基因可以是一些控制蛋白质合成的基因，也可以是一些具有调控作用的因子，B正确；PCR技术的原理是DNA复制，需要DNA聚合酶催化DNA的合成，C错误；目的基因可以用限制酶从自然界中分离，也可以通过人工合成的方法获得，D正确。题型三基因表达载体的构建7基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤，其中基因工程的核心是()A目的基因的获取B基因表达载体的构建C将目的
5、基因导入受体细胞D目的基因的检测与鉴定答案B解析基因工程的基本操作程序主要包括四步：目的基因的获取；基因表达载体的构建；将目的基因导入受体细胞；目的基因的检测与鉴定。其中，基因表达载体的构建是基因工程的核心。8下列选项中不是表达载体必要的组成成分的是()A目的基因 B启动子C终止子 D抗青霉素基因答案D解析一个基因表达载体的组成，除目的基因外，还必须有启动子、终止子以及标记基因等，标记基因的作用是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来，而抗青霉素基因是标记基因的一种，但也可以是其他标记基因，所以抗青霉素基因不是基因表达载体的必要的组成部分，D错误。9.如图为基因表
6、达载体的模式图，若结构X是表达载体所必需的，则X最可能是()A氨苄青霉素抗性基因B启动子C限制酶DDNA连接酶答案B解析由X的位置可以判断其为启动子。启动子是基因表达载体所必需的，功能是启动插入基因的转录过程。10如图为基因表达载体的模式图，下列有关说法错误的是()A构建基因表达载体需要用到限制酶和DNA连接酶B任何基因表达载体的构建都是一样的，没有差别C图中启动子位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位D抗生素抗性基因的作用是作为标记基因，用于鉴别受体细胞中是否导入了目的基因答案B解析构建基因表达载体需要用到限制酶和DNA连接酶，A正确；载体上的酶切位点和标记基因都有可能不同，因此基因
7、表达载体的构建也不完全相同，B错误；启动子位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，C正确；抗生素抗性基因的作用就是作为标记基因，用于检测受体细胞中是否导入了目的基因，D正确。11如图为某质粒限制酶酶切图谱。某基因不含图中限制酶识别序列。为使PCR扩增的该基因重组进该质粒，则扩增的该基因两端需分别引入哪两种限制酶的识别序列()注：图中限制酶的识别序列及切割形成的黏性末端均不相同。ANde和BamH BNde和XbaCXba和BamH DEcoR和Kpn答案A解析构建重组质粒时，要将目的基因插入到启动子和终止子之间，而且不能破坏启动子、终止子、复制原点、抗生素抗性基因等部位，故只能选用Nd
8、e和BamH切割质粒和含目的基因的DNA片段，因此在PCR扩增的该基因的两端需分别引入Nde和BamH两种限制酶的识别序列。12下列关于载体的叙述中，错误的是()A与目的基因结合后，实质上就是一个重组DNA分子B对某种限制酶而言，最好只有一个切点，但还要有其他多种限制酶的切点C目前常用的有质粒、噬菌体衍生物和动植物病毒D具有某些标记基因，便于对其进行切割答案D解析载体与目的基因结合后，就会形成一个重组DNA分子，A正确；载体中，对某种限制酶而言，最好只有一个切点，但还要有其他多种限制酶的切点，便于与目的基因定向连接，B正确；目前常用的载体有质粒、噬菌体衍生物和动植物病毒，C正确；载体上要具有某
9、些标记基因，便于筛选含有目的基因的细胞，D错误。二、非选择题13如图是从酵母菌获取某植物需要的某种酶基因的流程，结合所学知识及相关信息回答下列问题：(1)图中cDNA文库_(填“大于”“等于”或者“小于”)基因组文库。(2)过程提取的DNA需要_的切割，B过程是_。(3)为在短时间内获得大量目的基因，可用_扩增的方法。获取目的基因之后，需要进行_，基因表达载体的组成必须有_以及标记基因等，此步骤是基因工程的核心。答案(1)小于(2)限制酶反转录(或逆转录)(3)PCR技术基因表达载体的构建启动子、终止子、目的基因解析(1)cDNA文库小于基因组文库。(2)构建基因组文库时，提取的目的基因需要限
10、制酶切割成一定大小的DNA片段，再将DNA片段与载体连接后导入受体菌中储存。由mRNA获得cDNA的过程为逆转录过程。(3)要在短时间内获得大量目的基因，可用PCR技术扩增的方法。基因表达载体的组成必须有目的基因、标记基因、启动子和终止子等，基因表达载体的构建是基因工程的核心。141957年，生物学家了解到，病毒感染的细胞能产生一种因子，这种因子能作用于其他细胞，干扰病毒的复制，故将其命名为干扰素；从1987年开始，用基因工程方法生产的干扰素进入了工业化生产，并且大量投放市场。(1)基因工程的操作程序主要包括四个步骤，其核心是_。(2)获取基因的方法一般有_ _、_等。(3)若已知目的基因的核苷酸序列，则获取较小的目的基因较简单的方法是_；目的基因还可以从_文库中获取，而从cDNA文库中不一定能得到，原因是_ _。(4)用限制酶处理质粒和目的基因后，用_酶处理，可形成基因表达载体，该载体的化学本质是_。答案(1)基因表达载体的构建(2)从基因文库中获取目的基因利用PCR技术扩增目的基因利用DNA合成仪用化学方法直接人工合成(任意两个均可)(3)人工合成法基因组cDNA是由生物发育的某个时期的mRNA反转录产生的，不一定含有该目的基因(4)DNA连接DNA
