《F-7000荧光分光光度计操作规程和注意事项含原理图》由会员分享，可在线阅读，更多相关《F-7000荧光分光光度计操作规程和注意事项含原理图（3页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、F-7000荧光分光光度计使用操作步骤1、开机：(1)开启计算机。(2)开启仪器主机电源。按下仪器主机左侧面板下方的黑色按钮( POWER)。同时，观察主机 正面面板右侧的 Xe LAMP和RUN指示灯依次亮起来，都显示绿色。2、计算机进入 Windows XP视窗后，打开运行软件。(1)双击桌面图标(FL Solution 2.1 for F-7000 )。主机自行初始化，扫描界面自动进入。(2)初始化结束后，须预热 15-20分钟，按界面提示选择操作方式。3、测试模式的选择：波长扫描( wavelength scan)(1)点击扫描界面右侧“ Method”。(2)在“General”选项
2、中的Measurement选择wavelength scan”测量模式。(3)在“Instrument”选项中设置仪器参数和扫描参数。主要参数选项包括：选择扫描模式Scan Mode”: Emission/Excitation/Synchronous (发射光谱、激发光谱和 同步荧光)。 选择数据模式“ Data Mode： Fluorescence/Phosphprescence/Luminescence(荧光测量、磷 光测量、化学发光)。设定波长扫描范围。A、B、C、/终止波长(EX Start/End WL )/终止波长(EM Start/End WL )扫描荧光激发光谱(Excitat
3、ion)：需设定激发光的起始 和荧光发射波长(EM WL );扫描荧光发射光谱(Emission)：需设定发射光的起始 和荧光激发波长(EX WL );扫描同步荧光(Synchronous):需设定激发光的起始 /终止波长(EX Start/End WL ) 和荧光发射波长(EM WL )。选择扫描速度Scan Speed(通常选240nm/min)。选择?t发/发射狭缝(EX/EM Slit )。 选择光电倍增管负高压“ PMT Voltage”(一般选700V)。 选择仪器响应时间“Response(一般选Auto )。0.2nm)及输出数据 选择“ Report”设定输出数据信息、仪器采
4、集数据的步长(通常选 的起始和终止波长(Data Start/End)。(4)参数设置好后，点击“确定” 4、设置文件存储路径(1)点击扫描界面右侧“Sample”。(2)样品命名Sample name”。(3)选中“口 Auto File，打可以自动保存原始文件和TXT格式文本文档数据。(4)参数设置好后，点击“OK”。5、扫描测试(1)打开盖子，放入待测样品后，盖上盖子。(请勿用力)。(2)点击扫描界面右侧“Measure(或快捷键F4),窗口在线出现扫描谱图。6、数据处理(1)选中自动弹出的数据窗口。(2)选择“ Trace”，进行读数并寻峰等操作。(3)上传数据。7、关机顺序(逆开机顺
5、序实施操作)：(1)关闭运行软件 FL Solution 2.1 for F-7000 ,弹出窗口，如图 6。(2) 选中 “O Close the lamp, then close the monitor windows ?，打。(3)点击“ Yes”。窗口自动关闭。同时，观察主机正面面板右侧的Xe LAMP指示灯暗下来,而RUN指示灯仍显示绿色。(4)约十分钟后，关闭仪器主机电源，即按下仪器主机左侧面板下方的黑色按钮(POWER)。(目的是仅让风扇工作，使 Xe灯室散热)。(5)关闭计算机。注意事项(1) 注意开机顺序。步骤 1-(2)若是未先开主机，则程序会抓取不到主机讯号。(2) 注意
6、关机顺序。(3) 为延长仪器使用寿命，扫描速度、负高压、狭缝的设置一般不宜选在高档。(4) 关机后必须半小时(等氤灯温度降下)方可重新开机。仪器原理荧光产生原理：荧光物质分子吸收了特定频率辐射后， 由基态跃迁至第一电子激发态（或更高激 发态）的任一振动能级，在溶液中这种激 发态分子与溶剂分子发生碰撞，以热的形 式损失部分能量后，而回到第一电子激发 态的最低振动能级（无辐射跃迁）。然后 再以辐射形式去活化跃迁到电子基态的任 一振动能级，便产生荧光。由于无辐射跃 迁的几率大，因此分子荧光波长常常比激 发光长。激发光源的波长通常是在紫外区， 荧光也可能在紫外区，但更多是在可见区。 相对于基态和激发态
7、两个最低振动能级之 间的跃迁所产生的荧光称为共振荧光，此 时吸收光谱与荧光光谱重叠。轴是 看为黄光秀先4蠢崇城-累间” I扑一林，一 一内就尊分子单重态、三重态能级结构及分子荧光、磷光产生示意图荧光分光光度计示意图（1）荧光光谱的形状和激发光波长无 关，这是因为荧光的产生是由第一电子激 发态的最低振动能级开始的而和荧光物质 分子原来被激发至哪一个能级无关；（2） 荧光光谱的形状和吸收光谱的形状十分相 似，且互为镜像。因为吸收光谱反映的是 第一电子激发态的能级分布情况；而荧光 光谱反映的是基态能级的分布情况，而基 态中能级的分布和第一电子激发态中的能 级分布是相类似的，所以荧光光谱的形状 与吸收光谱十分相似。又因为在相当于由 基态中最低振动能能及跃迁到第一电子激 发态各振动能级而显示的荧光峰中，基态 的振动能级越高，则两个能级的差距越小， 即荧光波长越长。所以前后两者不但形状 相似而且互为镜像。
